Wirkstoffverabreichung IV

Quelle: Kay Stewart, RVT, RLATG, Anus; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. University of Notre Dame, IN

Es gibt viele häufig verwendete Routen für zusammengesetzte Verwaltung bei Mäusen und Ratten. Protokolle können, jedoch erfordern den Einsatz von weniger häufig verwendeten Routen: intrakardiale, Straßenräuber und Retro-Orbital-Injektionen. Fachausbildung ist essentiell für diese Verfahren erfolgreich durchgeführt werden. Begründung für diese Strecken müssen bereitgestellt werden, um institutionelle Animal Care und Nutzung Committee (IACUC) Zustimmung zu gewinnen.

Intrakardiale Verwaltung wurde in einer Vielzahl von Anwendungen, einschließlich der Entwicklung von einem Tiermodell der Knochenmetastasen Krebs, sowie eine Untersuchung über die Auswirkungen der direkten intrakardialen Lieferung auf das Ergebnis eines Myokardinfarkts eingesetzt. Dieses Verfahren erfolgt häufig durch den Einsatz von Ultraschall, die Nadel in die richtige Lage im Herzen zu führen. ² jedoch kann bei richtig unter Verwendung der richtigen Wahrzeichen, dieses Verfahren ohne den Einsatz von Ultraschall Visualisierung durchgeführt werden.

Aufgrund des invasiven Charakters des Verfahrens ist die Verwendung von intrakardialen Injektion in einem IACUC Protokoll wissenschaftlich begründen. Nur ein Überleben Injektion sollte erlaubt sein. Dieses Verfahren erfordert die Verwendung von einer Vollnarkose, Inhalat oder injizierbare, gemäß der Richtlinien innerhalb einer Organisation. Nadelauswahl sollte die kleinste Größe möglich, die für die Viskosität des Materials injiziert zulässt; im Allgemeinen ist ein 27-30-Gauge-Nadel verwendet. Injektion Bände reichen von 100 µL bis maximal 300 µL.

Intravenöse Injektionen in das Heck von Mäusen sind anspruchsvoll und oft erfolglos. Eine Alternative Route für die intravenöse Gabe ist durch den Retro-Orbital-Plexus. Während diese Technik erfordert Training und Geschick, um durchzuführen, haben Studien gezeigt, dass gibt es eine höhere Erfolgsquote mit der Retro-Orbital-Injektion als mit seitlicher Schweif Vene Injektion. ^{3, 4, 5} Anästhesie ist erforderlich, um verhindern, dass die Maus bewegt während des Verfahrens. Inhalat Vollnarkose geliefert entweder über eine Glasglocke oder eine Induktion Kammer angebracht, ein Präzisions-Vaporizer ist wirksam. Jedoch wenn Inhalationsmittel verwendet wird, beachten Sie, dass das Tier beginnt sich schnell zu erholen, sobald es aus der Kammer entfernt wird, so dass man die Injektion einsatzbereit sein muss. Eine ophthalmologische Lokalanästhetikum (Tetracaine oder Proparacaine) wird empfohlen, wenn mehrere Injektionen müssen ausgeführt werden.

Die orbitale venöse Struktur von Maus und Ratte sind unterschiedlich. Die Maus hat einen Sinus oder Konvergenz mehrere Schiffe, einschließlich supraorbital Vene, dorsalen nasalen Vene, die minderwertigen palpebrale Vene und der oberflächlichen zeitliche Venen, die den Raum in der Umlaufbahn um das Auge zu füllen. Im Bereich Ratte orbital ist ein Netzwerk oder eine Plexus von Schiffen. Wie bei allen Injektionen, sollte die Nadel ausgewählt die kleinste Größe möglich sein; in der Regel gauge eine 27-30 Nadel. Zwar gab es Berichte über größere Mengen, ist das maximale Volumen 150 µL pro Auge. ^{3, 4, 5} Eine Injektion pro Auge, pro Tag, wird empfohlen, mit einer Gesamtmenge von zwei Injektionen pro Auge fürs Überleben Verfahren. Es sollte auch mindestens eine ein-Tages-Intervall zwischen den Injektionen. Ein Nonsurvival Verfahren können Mengen bis zu 500 µL verabreicht werden.

Trotz der Kontroverse ist die Verwendung von die Fußauflage als eine Injektionsstelle weiterhin für einige Studien erforderlich. Es wurde nachgewiesen, dass wenn Sie über die Fußauflage injiziert, die Antikörper-Reaktion in einigen Mausstämme deutlich stärker, als wenn das Sprunggelenk injiziert wurde. ⁶ Alle Tiere müssen genau beobachtet werden, Anzeichen von Schmerzen, der Verzehr von Lebensmitteln, und für normale Gehfähigkeit. Selbstverstümmelung des Fußes kann auftreten, in dem Umfang des Fußes zerstört wird. Dies ist ein Zeichen von chronischen Schmerzen. Alle Tiere zeigen Selbstverstümmelung sollte sofort die Aufmerksamkeit von den Tierärzten aufgerufen werden.

Straßenräuber Messungen sollte täglich durchgeführt werden, als offensichtliche Schwellung aufgetreten ist. Endpunkte muss nach IACUC Richtlinien. In der Regel muss das Tier eingeschläfert werden, wenn die Läsion oder Tumor das Tier Fähigkeit stört, ambulate oder Nahrung und Wasser zu erreichen. Die maximale Lautstärke, die in einem Straßenräuber injiziert werden kann ist 50 µL. Eine 29-30-Gauge-Nadel ist für die Injektion empfohlen.

(1) intrakardiale Injektion

1. Wahrzeichen und Positionierung: Positionieren Sie die Maus oder Ratte rechts seitlich liegen (mit der linken Seite nach oben) oder in dorsal liegen, und die Wahrzeichen zu identifizieren.
   1. Positionieren Sie das Herz ungefähr in Höhe des Ellenbogens und nur auf der linken Seite des Brustbeins.
   2. Stechen Sie die Nadel zwischen die Rippen an den Ellenbogen.
   3. Stechen Sie bei einem Tier im dorsalen liegen die Nadel in die Brust Parallel zum Tisch.
   4. Stechen Sie bei einem Tier im seitlichen liegen die Nadel in die Brust senkrecht auf den Tisch.
2. Injektion des Artikels
   1. Stellen Sie sicher, gibt es nur minimale Bewegungen der Nadel, sobald es in das Herz den Muskel gerissen und verursachen Blutungen in den Herzbeutel Sac zu verhindern, wie dies Herzfunktion beeinträchtigt eingefügt wird.
   2. Aspirieren Sie die Spritze um die richtige Platzierung zu bestimmen. Oft gibt es ein Blitz des Blutes in die Nabe der Spritze.
   3. Halten Sie die Spritze, so dass die Hand nicht auf die Spritze für die Injektion, sobald die Nadel im Herzen positioniert wurde verschoben.
   4. Injizieren Sie die Artikel in einer langsamen und stetigen Art und Weise.
   5. Ziehen Sie die Nadel langsam um die Blutung zu minimieren.
   6. Mäuse, die Atemnot, Beschlagnahme, Zyanose, verlängerte Ataxie oder andere Folgeschäden im Zusammenhang mit Einspritzung Trauma erleben müssen von der Tierarzt bewerteten und gemäß ihrer Empfehlung eingeschläfert.

Abbildung 1. Intrakardiale Injektion bei Mäusen.

(2) intravenöse Injektion, die unter Verwendung der Retro-Orbital-plexus

1. Injektion Wahrzeichen und Positionierung
   1. Legen Sie das Tier auf einer ebenen Fläche im seitlichen liegen.
   2. Stechen Sie die Nadel in der medialen Augenwinkel des Auges in einem 45°-Winkel zur Nase.
   3. Die Nadel Tiefe muss ausreichen, um die Bindehaut Gewebe eindringen und hinter das Okular Umlaufbahn und in der okulären Plexus. Beim Platzieren der Nadelöhrs sollte es nicht die Knochen an der Rückseite der Umlaufbahn auftreten.
   4. Legen Sie den Zeigefinger auf die Oberseite des Kopfes mit dem Daumen auf den Kiefer.
   5. Ziehen Sie vorsichtig nach unten und zurück zu straffen die Haut und den Augapfel ragen.
   6. Achten Sie darauf, nicht üben Druck auf die Luftröhre und Luftstrom zu beschränken.
2. Injektion
   1. Legen Sie die Nadel hinter dem Auge und nicht Intra vorgeben.
   2. Stellen Sie sicher, dass die Nadel nur minimale Bewegungen, die nach dem Einlegen in die Retro-Orbital-Plexus hat, oder die Gefäße platzen werden, was zu Blutungen und Verlust des Agenten in das Gewebe hinter dem Auge. Halten Sie die Spritze, so dass die Hand nicht auf die Spritze für die Injektion verschoben ist, sobald die Nadel in die Retro-Orbital-Plexus positioniert wurde.
   3. Nicht mit der Spritze aspirieren Sie, da Sie die Gefäße zusammenbrechen werden.
   4. Injizieren Sie die Artikel in einer langsamen und stetigen Art und Weise.
   5. Ziehen Sie die Nadel heraus und üben Sie leichten Druck auf das Auge zu Blutungen zu kontrollieren und zur Blutstillung.
   6. Mäuse, die erleben, Schwellungen, Konjunktivitis, oder andere Folgeschäden im Zusammenhang mit Einspritzung Trauma müssen von den Tierärzten bewertet und behandelt oder eingeschläfert nach ihrer Empfehlung

Abbildung 2. Retro-orbital Injektion bei Mäusen.

(3) Straßenräuber Injektion

1. Zur Zurückhaltung legen Sie das Tier in einem Zurückhaltung-Rohr mit einem Hinterfuß isoliert und erweitern Sie, indem Sie greifen die Haut über dem Knie.
2. Wischen Sie den Fuß mit Wasser oder Alkohol, Schutt vor der Injektion zu entfernen.
3. In der Mitte des hinteren Fußes bilden eine kleine Blase an der Injektionsstelle subkutan injizieren. Um das Blutgefäß zu vermeiden, das die Länge des Fußes verläuft, direkt an der Mittellinie parallel zum Schiff zu injizieren.

Abbildung 3. Straßenräuber Injektion bei Mäusen und Ratten.

Die Verwaltung der Verbindungen in Tiere kann eine erhebliche Wirkung auf sowohl das Wohlbefinden des Tieres und die Ergebnisse der experimentellen Daten und wissenschaftlichen Wert haben. Die richtige Methode der Lieferung ist entscheidend für den Erfolg des Experiments. Viele Faktoren müssen berücksichtigt werden, um die beste Route, einschließlich das wissenschaftliche Ziel der Studie, der pH-Wert des Stoffes, das gewünschte Dosiervolumen, die Viskosität des Stoffes und das Wohlergehen der Tiere zu bestimmen. Technische Expertise ist auch eine Voraussetzung für alle Injektionsmethoden.

1. Morton, D.A., Jennings, M., Buckwell, A., Ewbank, R., Godfrey, C., Holgate, B., Inglis, I., James, R., Page, C., Sharman, I., Verschoyle, R., Westall, L., and Wilson, A.B. 2001. Refining procedures for the administration of substances Report of the BVAAWF/FRAME/RSPCA/UFAW Joint Working Group on Refinement. Members of the Joint Working Group on Refinement. Laboratory Animals. 35. 1-41
2. Prendiville , T.W., Qing, M., Lin, Z., Zhou, P., He, A., and Pu, W.T. 2014. Ultrasound-guided Transthoracic Intramyocardial Injection in Mice. Journal of Visualized Experiments. 90 | e51566.
3. Yardeni, T., Eckhaus, M., Morris, H.D., Huizing, M., and Hoogstraten-Miller, S. 2001. Retro-orbital injection in mice. Lab Animal. 40:5. 155-171.
4. Steel, C., Stephens, A., Hahto, S., Singletary, S., Ciavarra, R. 2008. Comparison of the lateral tail vein and the retro-orbital sinus as routes of intravenous drug delivery in a transgenic mouse model. Lab Anim. 37. 26-31.
5. Timm, K.I. 1989. Orbital venous anatomy of the Mongolian gerbil, with comparison to the mouse, hamster, and rat. Laboratory Animal Science. 39:3. 262-265.
6. Kamala, T. 2007. Hock immunization: a humane alternative to mouse footpad injections. Journal of Immunological Methods. 328. 204-214.