מקור: קיי סטיוארט, RVT, RLATG, CMAR; ואלרי א. שרודר, אר.די.ג'י, אר-אל-ג'י. אוניברסיטת נוטרדאם, IN
ישנם מסלולים נפוצים רבים לניהול מורכב בעכברים במעבדה וחולדות. פרוטוקולים עשויים, עם זאת, לדרוש את השימוש במסלולים פחות נפוצים: תוך לב, footpad, וזריקות רטרו-מסלולית. הכשרה מיוחדת חיונית להליכים אלה להתבצע בהצלחה. ייתכן שיהיה צורך בהצדקה למסלולים אלה כדי לקבל אישור של ועדת טיפול ושימוש בבעלי חיים מוסדיים (IACUC).
ניהול תוך-לב שימש במגוון יישומים, כולל פיתוח מודל בעלי חיים של גרורות סרטן העצם, כמו גם בדיקה של ההשפעות של לידה תוך-לבבית ישירה על התוצאה של אוטם שריר הלב. הליך זה נעשה לעתים קרובות באמצעות אולטרסאונד כדי להנחות את המחט למיקום הנכון בלב. 2 עם זאת, כאשר מבוצע כראוי ניצול נכון של ציוני דרך נכונה, הליך זה יכול להתבצע ללא שימוש ויזואליזציה אולטרסאונד.
בשל האופי החדיר של ההליך, השימוש בהזרקה תוך-לבבית חייב להיות מוצדק מדעית בפרוטוקול IACUC. רק זריקת הישרדות אחת צריכה להיות מותרת. הליך זה מחייב שימוש בהרדמה כללית, משאיפה או להזרקה, בהתאם להנחיות שנקבעו בתוך הארגון. בחירת מחט צריך להיות הגודל הקטן ביותר האפשרי שיאפשר את הצמיגות של החומר מוזרק; בדרך כלל, מחט 27-30 מד משמש. נפחי הזרקה נעים בין 100 μL למקסימום של 300 μL.
זריקות תוך ורידי בזנב של עכברים הן מאתגרות ולעתים קרובות לא מוצלחות. מסלול חלופי של ניהול תוך ורידי הוא דרך מקלעת רטרו-מסלולית. בעוד טכניקה זו מחייבת אימון ומיומנות לבצע, מחקרים הראו כי יש שיעור הצלחה גבוה יותר עם הזרקת רטרו-מסלולית מאשר עם הזרקת וריד זנב לרוחב. 3, 4, 5 הרדמה נדרשת כדי למנוע מהעכבר לזוז במהלך ההליך. הרדמה משאיפה כללית המועברת באמצעות צנצנת פעמון או תא אינדוקציה המחובר לאידוי מדויק יעילה. עם זאת, אם ייעשה שימוש במשאף, שימו לב כי החיה תתחיל להתאושש במהירות ברגע שהיא תוסר מהתא, ולכן יש להיות מוכנים לבצע את ההזרקה. הרדמה אופטלמית אקטואלית (טטרקאין או פרופראקאין) מומלצת כאשר יש לבצע זריקות מרובות.
המבנה ורידי מסלולית של העכבר והחולדה שונים. לעכבר יש סינוס או התכנסות של מספר כלי שיט, כולל הווריד העל-עורי, וריד האף הגבי, הווריד הפלפבריאלי הנחות, והוורידים הטמפורליים השטחיים הממלאים את החלל במסלול סביב העין. באזור מסלול החולדה, יש רשת או מקלעת של כלי שיט. כמו עם כל הזריקות, המחט שנבחרה צריכה להיות בגודל הקטן ביותר האפשרי; בדרך כלל מחט 27-30 מד. למרות שהיו דיווחים על אמצעי אחסון גדולים יותר, הנפח המרבי הוא 150 μL לעין. 3, 4, 5 זריקה אחת לכל עין, ליום, מומלץ, עם סך של שתי זריקות לכל עין עבור הליכי הישרדות. כמו כן, צריך להיות לפחות מרווח של יום אחד בין זריקות. עבור הליך לאurvivival, אמצעי אחסון עד 500 μL יכול להינתן.
למרות המחלוקת, השימוש כרית כף הרגל כאתר הזרקה עדיין נדרש עבור כמה מחקרים. הוכח כי כאשר מוזרק דרך כרית הרגל, תגובת הנוגדנים בזני עכבר מסוימים הייתה חזקה משמעותית מאשר כאשר מוזרק לתוך למשכן. 6 כל בעלי החיים חייבים להיות במעקב צמוד לסימני כאב, רמת צריכת מזון, ועל אמביציה נורמלית. השחתה עצמית של כף הרגל יכולה להתרחש במידה של כף הרגל נהרסת. זה סימן לכאב כרוני. כל בעל חיים המפגין השחתה עצמית צריך להיקרא מיד לידיעת הצוות הווטרינרי.
מדידות Footpad צריך להיעשות מדי יום ברגע נפיחות ברורה התרחשה. נקודות הקצה חייבות להיות במקומן בהתאם להנחיות IACUC. בדרך כלל, החיה חייבת להיות מורדמת כאשר הנגע או הגידול מפריע ליכולתו של בעל החיים לטבול או להגיע למזון ומים. אמצעי האחסון המרבי שניתן להזריק למשטח רגליים הוא 50 μL. מחט 29-30 מד מומלץ עבור הזרקה.
1. הזרקת תוך לב
איור 1. הזרקת תוך לב בעכברים.
2. הזרקה תוך ורידי תוך ורידי תוך שימוש מקלעת רטרו-מסלולית
איור 2. הזרקת מסלול רטרו בעכברים.
3. הזרקת משטח רגליים
איור 3. הזרקת משטח רגליים בעכברים וחולדות.
ניהול תרכובות לבעלי חיים יכול להיות בעל השפעה משמעותית הן על רווחת החיה והן על התוצאה של הנתונים הניסיוניים והערך המדעי. שיטת המסירה הנכונה חיונית להצלחת הניסוי. גורמים רבים חייבים להיחשב כדי לקבוע את המסלול הטוב ביותר, כולל המטרה המדעית של המחקר, ה- pH של החומר, נפח המינון הנדרש, צמיגות החומר, ואת הרווחה של בעלי החיים. מומחיות טכנית היא גם דרישה לכל שיטות ההזרקה.
Skip to...
Videos from this collection:
Now Playing
Lab Animal Research
52.1K Views
Lab Animal Research
176.0K Views
Lab Animal Research
28.1K Views
Lab Animal Research
35.9K Views
Lab Animal Research
55.1K Views
Lab Animal Research
25.7K Views
Lab Animal Research
101.4K Views
Lab Animal Research
35.2K Views
Lab Animal Research
31.7K Views
Lab Animal Research
172.8K Views
Lab Animal Research
74.0K Views
Lab Animal Research
51.1K Views
Lab Animal Research
22.6K Views
Lab Animal Research
58.5K Views
Lab Animal Research
35.0K Views
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved