Identifizierung von Nagetieren I

Quelle: Kay Stewart, RVT, RLATG, Anus; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. University of Notre Dame, IN

Eine grundlegende Voraussetzung der biomedizinischen Forschung ist die ordnungsgemäße Kennzeichnung von Versuchstieren. Es ist wichtig, dass das richtige Tier für Verfahren und Datenerfassung genutzt wird. Labormäuse und Ratten mit den folgenden ständigen Methoden identifiziert werden können: Ohrmarken, Ohr Punch Codes Mikrochip Implantation, Heck-Tattoos für Erwachsene Mäuse und Fuß Tattoos für Neugeborene. Temporäre Methoden von Farbstoffen und Kennzeichnung Stifte können auch für akute Studien verwendet werden. Dieses Video behandelt die technischen Aspekte des Ohres tagging und Stanzen für Mäuse und Ratten sowie die Vorteile der einzelnen in Bezug auf die Art der Untersuchungen an den Tieren. Kenntnis der grundlegenden manuellen Zurückhaltung Techniken für jedes Tier (abgedeckt in einem anderen Video) ist erforderlich für diese Identifizierungsmethoden ordnungsgemäß durchgeführt werden.

Ohrmarken sind kostengünstig und einfach durchzuführen, und infolgedessen werden häufig verwendet, für die Identifizierung von einzelnen Mäusen und Ratten. Tags können mit einer Reihe von Ziffern und/oder Buchstaben nach Maß sein. Spezielle Codes zuweisen, um eine Maus/Ratte Belastung oder zu einem Prinzip Investigator (PI), Helfer in Dokumentation und Datenbank-Management, vor allem in großen Brutkolonien wo gibt es mehrere Stämme und PIs. Darüber hinaus gibt es eine Vielzahl von Tags im Handel erhältlich. Metall-Tags haben Zeichen auf sie geätzt. Obwohl diese Radierung klar, beim Arbeiten mit einer Maus es oft notwendig, um ihn abzuholen, um den Code auf die Tags aufgrund der geringen Größe der Tags zu lesen ist. Weitere Optionen sind Kunststoff-Tags mit entweder Zahlen und/oder Buchstaben auf bunten Hintergründen oder Kunststoff Stichwörter mit einem Barcode auf der Vorderseite. Beide Optionen können die Tags gelesen werden, ohne die Tiere zu behandeln. Ein weiterer Vorteil der Kunststoff-Tags ist ihre Kompatibilität mit MRT-Bildgebung.

Die Positionierung des Tags am Ohr ist kritisch, da unsachgemäße Positionierung mehrere unglückliche Folgen haben kann. Tags müssen platziert werden, so dass sie nicht dazu führen, eine Biegung in der Pinna dass, das Tier Mobilität stören oder an jeder beliebigen Stelle der Käfighaltung fangen. Wenn der Tag steht zu nahe an den Rand des Ohres, es leicht aus dem Gewebe der Ohrmuschel abgerissen werden kann. Wenn zu nah am Kopf positioniert, kann die Haut von der Hals-Bereich in den Tag, fangen die Reizung, Schmerzen und Bewegungseinschränkungen verursachen wird. Dies führt dann zu selbst-Trauma vom Tier kratzt an den Tag, zerreißt es aus dem Ohr, oder immer einen Fuß in das Tag gefangen. Training für die richtige Platzierung und Technik ist wichtig. ¹

Während Tags individuelle Bezeichner für Mäuse oder Ratten bieten, sind sie nicht unfehlbar. Tags können aufgrund von kämpfen, über Pflege, Dermatitis in anfälligen Sorten, Infektion oder selbst-Trauma verloren sein. ² Erwachsene Ratten sind vor allem weniger tolerant von Ohrmarken und oft entfernen, selbst-Trauma zuzufügen. Aggressivere Zucht-Verhalten bei Ratten führt auch zu einer Ohrmarke zerrissen von der Ohrmuschel. Wenn Mäuse oder Ratten gepaarte oder Gruppe untergebracht sind, kann der Verlust einer Ohrmarke auf mehr als ein Tier lästig sein. Zur Umgehung dieses Problems, eine sekundäre Form der Identifikation, wie z. B. ein Punsch-Code verwendet auf dem Ohr gegenüber den Tag oder ein Schweif oder Fuß Tattoo-sollten genutzt werden. Eine Anlage sollte die Wahl des Ohres, die markiert werden und der Code auf dem anderen Ohr oder an den Zehen verwendet werden zu standardisieren. Alle Codes sind auf den Käfig-Karte anzugeben.

Die Verwendung von Ohr Punch Codes ermöglicht eine schnelle und einfache Methode zur Identifizierung, aber die Technik hat Grenzen. Häufigsten verwendeten Codes haben eine Obergrenze für Nummern zur Verfügung, in der Regel ein Maximum von 100 bis 399. Um die Ohr-Punsch-Codes zu lesen, müssen die meisten Tiere auf das Genick begriffen werden. Der Stempel können als Gewebeproben für die PCR-Genotypisierung, verdoppeln die Tierkennzeichnung und Genotyp Probenahme ermöglicht gleichzeitig erreicht werden. Dies führt zu weniger Stress für die Tiere durch wiederholte Behandlung. ³

Es gibt drei Arten von Ohr Schläge: die Schere Punch, den Daumen-Stempel und den Hebel-Stempel. Obwohl alle gleich wirksam sind, gibt es vor- und Nachteile jeder. Zum Beispiel als Ratten Alter verdickt die Haut ihrer Ohren. Es empfiehlt sich, die Ohr-Schläge an jungen Ratten durchführen, wie sie entwöhnt sind. Bei erwachsenen Ratten, die Identifikation erfordern, ist die Verwendung von Schnüffelstoffen Anästhesie berücksichtigen. Ergonomisch, ist die Ebene Punch einfacher zu bedienen als ein Daumen-Schlag, vor allem für die dickeren Ohren von älteren Ratten. Beide diese Schläge erfordern jedoch eine kneifen Bewegung der Finger. Die Schere Punch hat den ergonomischen Vorteil, dass eine kneifen Bewegung, wodurch Karpal-Tunnel-Ermüdung und Verletzungen. Im Gegensatz dazu ist der Daumen Punch vorteilhaft für das Sammeln von Genotypisierung Proben, als die Spitzen mit dem Gewebematerial passt in ein Eppendorf-Röhrchen. Der Stil der Schlag zu verwenden sollte durch die Personen, die Aufgaben der Aufgabe und dem Alter der Ratten ermittelt werden.

Für Ratten Obwohl Metall Tags am häufigsten verwendet werden, haben Studien gezeigt, dass es Konsequenzen mit ihnen. Entzündungen, neoplastische Veränderungen und sogar chronische Schmerzen wurden bei Tieren beobachtet, die Metall Ohrmarken für mehrere Monate getragen haben. ^3,4,5,6 Tags sollte umgehend aus dem Ohr entfernt werden wenn es eine negative Reaktion, und die nachfolgende Verletzung sollte untersucht und behandelt wird, falls erforderlich, von den Tierärzten.

Richtige Pflege und Wartung von Schlägen werden ihren Verbrauch zu verlängern. Alle Arten von Schlägen werden wenn autoklaviert, stumpf, so ist es empfehlenswert, mit einem Desinfektionsmittel reinigen und spülen Sie sie mit Alkohol. Dann müssen sie gründlich getrocknet werden, um Rostbildung zu verhindern. Wenn die Schläge für die PCR verwendet werden, sollten sie getränkt für 3 Minuten in eine Lösung sein, die restliche DNA oder RNA entfernt. Sie sind vor der Verwendung in Alkohol gespült und trocken abgewischt.

1. Ohr Punch Identifikation

Ohr-Punsch-Codes entstanden als eine schnelle und kostengünstige Methode, um einzelne Tiere zu kennzeichnen. Es gibt drei Arten von Ohr Schläge: die Schere Punch, den Daumen-Stempel und den Hebel-Stempel. Rechtes Ohr des Tieres wird für einzelne Ziffern, das linke Ohr für die ten und die Mitte der Ohren für Hunderte verwendet.

1. Zurückzuhalten Sie das Tier, so dass die Ohren leicht zugänglich sind. Die meisten Mäuse sind Ohr für individuelle Kennzeichnung bei der Entwöhnung getaggt. Dies erfordert eine schonende Behandlung aufgrund ihrer kleineren, schwächeren Größe. Einige Mäuse sind weniger wahrscheinlich zu kämpfen, wenn die Hinterbeine auf einer Oberfläche wie ein Käfig-Spitze oder eine Gegenoberseite ausruhen kann.
2. Bestimmen Sie das Ohr Schläge benötigt experimentelle Zahl des Tieres zu entsprechen oder um es in einem Käfig zu identifizieren.
   1. Schläge werden Kerben oder Löcher je nach den verwendeten Code.
   2. Die letzte Nummer auf der Ohrmarke wird oft als Ohr Punch Bezeichner verwendet, wenn es die sekundäre Methode der Identifizierung ist.
   3. Wenn Tiere auf eine Kurzzeitstudie in stabilen Käfig Gruppen sind, können sie laufende Nummern aufgeführt. Dies geschieht häufig, wenn es keine Ohrmarken vorhanden gibt.
3. Machen Sie das Ohr lochen.
   1. Um eine Kerbe machen, wird der Stempel am Rande der Pinna Ohr platziert.
   2. Um ein Loch zu machen, legen Sie das Ohr im Stempel, so dass das Loch des Stempels entfernt am Rand der Ohrmuschel in der gewünschten Position befindet.
   3. Üben Sie Druck auf den Daumen Hebel Punsch oder schließen die Schere Stanzen schnell und fest, durch die Haut des Ohres zu schneiden.
   4. Heben Sie vorsichtig den Stempel vom Ohr, wenn der Daumen oder Hebel Schläge zu verwenden. Öffnen Sie die Schere Punch aus dem Ohr entfernen.
   5. Vermeiden Sie ziehen oder Verdrehen des Stempels um zu verhindern, dass das Ohr reißen.
   6. Schläge nach der Zeit langweilig. Ein Schlag nicht durch das Ohr geschnitten, lassen Sie den Stempel und wählen Sie einen neuen Ohr-Schlag. Positionieren Sie den neuen Schlag an der gleichen Stelle.
4. Die Schläge nach jedem Gebrauch zu reinigen.
   1. Punsch alle dull wenn autoklaviert. Es wird empfohlen, dass sie mit einem Desinfektionsmittel gereinigt und mit Alkohol gespült werden. Trocknen Sie sie gründlich, um Rostbildung zu verhindern.
   2. Ohr-Schläge für PCR verwendet werden sind routinemäßig getränkt für 3 Minuten in einer Lösung, restliche DNA oder RNA zu entfernen. Sie sind vor der Verwendung in Alkohol gespült und trocken abgewischt.

Abbildung 1. Ohr bei Mäusen mit Schere Stanzen.

(2) Ohr Tagerkennung

Individuelle Ohrmarken können von Herstellern mit alphabetischen oder numerischen Codes, bestellt werden, wodurch für die Differenzierung von Mausstämme oder Ermittler. Ohrmarken können aus Metall oder Kunststoff bestehen.

1. Wählen Sie die Ohrmarken für die Tiere identifiziert werden. Es gibt einige Arten der Anwender von Ohr-Tag-Herstellern angeboten. Achten Sie darauf, die Klammer zu bestellen, die für die spezifische Größe und Stil der Ohrmarken verwendet wird.
2. Vorsichtig entfernen Sie eine Markierung aus dem Karton Halter und in die Klammer zu orientieren Sie, so dass das Ende mit dem Loch gekerbten Treffzone aus der Klammer positioniert ist. Das Spitze Ende des Tags sollte gegenüber der Kerbe.
3. Zurückzuhalten Sie das Tier, so dass die Ohren leicht zugänglich sind. Tiere können werden seltener zu kämpfen, wenn die Hinterbeine auf einer Oberfläche, wie ein Käfig-Spitze oder eine Gegenoberseite ausruhen kann.
4. Die Ohrmarke für Platzierung richtig zu positionieren.
   1. Positionieren Sie den Punkt der Ohrmarke, wie tief in der Concha des Ohres wie möglich, also das Tag Gesicht den Rücken des Tieres zahlen.
   2. Um die Ohr-Tag-Nummern mit Blick auf die Nase des Tieres haben, platzieren Sie den Punkt des Tags an der Basis der Ohrmuschel auf der Rückseite des Ohres.
5. Der Tag anwenden.
   1. Drücken Sie fest die Klammer geschlossen. Die Ohrmarke wird das Ohr und Schloss zusammen durchbohren.
   2. Lassen Sie die Klammer, und tagged Ohr fällt aus der Klammer.

Abbildung 2. Eine Maus mit einer Ohrmarke, die richtig an der Ohrmuschel positioniert ist.

6. Entfernen Sie die Metall-Ohr-Tags.
   Hinweis: gelegentlich können Metall Ohrmarken Entzündung und Schwellung des Ohres führen. Die Schwellung und Reizung häufig führt zu Infektionen der Ohrmuschel. Behandlung sollte das Entfernen des Tags enthalten; in Fällen von schweren Reizungen oder Infektionen müssen das Tier jedoch betäubt werden.
   1. Entfernen Sie Fremdkörper aus rund um den Tag mit einem Baumwoll-gespitzten Applikator mit einer antiseptischen Lösung befeuchtet.
   2. Schneiden Sie am oberen Rand der Tag-Schleife von Kante zu Kante mit Drahtschneider. Schneiden Sie nicht auf der glatten Oberfläche, da dies das Tag zu komprimieren, das Ohr kneifen, und weiteren Schaden anrichten.
   3. Vermeiden Sie die Anwendung Drehmoment beim Schneiden, reißen das Ohr zu verhindern.
7. Verwenden Sie Hämostatika, um die abgeschnittenen Enden der Ohrmarke auseinander zu verbreiten.
   1. Sanft die Ohrmarke durch zu führen- und aus dem Ohr mit Arterienklemmen. Reduzieren Sie Trauma durch die Erweiterung der piercing Loch zu vermeiden und Rutschen Tag heraus, dass die gekräuselte Ende nicht durch das Ohr verläuft.
   2. Sobald der Tag vorbei ist, wischen Sie das Ohr mit einem Antiseptikum-getränkten Baumwoll-Applikator-Stick.
   3. Besteht eine eitrige Ausfluss aus dem Ohr, Follow-up-Behandlung kann erforderlich sein und Beratung mit den Tierärzten für Bewertung wird empfohlen.

Wenn Sie die entsprechende Kennzeichnung Methode wählen, müssen viele Faktoren beraten. Jede Technik hat vor- und Nachteile, die in Bezug auf die experimentelle Bedürfnisse berücksichtigt werden müssen. Während die Kosten zusammen mit anderen Faktoren abgewogen werden müssen, sollte die Einfachheit der Technik und das Niveau des Unbehagens zu den Tieren die wichtigsten Überlegungen. ^3,4

Ohr Lochen/ausklinken wird häufig bei Mäusen und Ratten verwendet, denn es wenig Kosten gibt, und das Verfahren ist leicht getan. Es gibt eine begrenzte Anzahl von Codes, die verwendet werden können, wobei die meisten Codes mit einer Obergrenze von 100 bis 399. Um die Ohr-Punsch-Codes zu lesen, müssen die meisten Tiere auf das Genick begriffen werden. Jedoch können die Schläge verdoppeln als Gewebeproben für die PCR-Genotypisierung, die Identifikation und Genotyp Probenahme ermöglicht gleichzeitig erreicht werden, wodurch sich weniger Stress für die Tiere aus einer wiederholten Handhabung. ⁵

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2. Cover, C.E., Keenan, C.M., and Bettinger, G.E. 1989. Ear tag-induced Staphylococcus infection in mice. Laboratory Animals. 23:229-233.
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