Sign In

זיהוי מכרסמים I

Overview

מקור: קיי סטיוארט, RVT, RLATG, CMAR; ואלרי א. שרודר, אר.די.ג'י, אר-אל-ג'י. אוניברסיטת נוטרדאם, IN

דרישה בסיסית של מחקר ביו-רפואי היא זיהוי נכון של חיות מחקר. זה חיוני כי החיה הנכונה מנוצלת עבור נהלים ואיסוף נתונים. עכברי מעבדה וחולדות ניתן לזהות עם השיטות הקבועות הבאות: תגי אוזניים, קודי ניקוב האוזן, השתלת שבבים, קעקועי זנב לעכברים בוגרים, וקעקועי בוהן עבור יילודים. שיטות זמניות של צבעים ועטים סימון יכול לשמש גם עבור מחקרים חריפים. וידאו זה מכסה את ההיבטים הטכניים של תיוג אוזניים וחבטות לעכברים וחולדות, כמו גם את היתרונות של כל אחד ביחס לסוג המחקר שנערך על בעלי החיים. ידע בטכניקות הריסון הידניות הבסיסיות עבור כל בעל חיים (מכוסה בסרטון נפרד) נדרש כדי ששיטות זיהוי אלה יושגו כראוי.

Principles

תגי אוזניים הם זולים וקלים לביצוע, וכתוצאה מכך משמשים בדרך כלל לזיהוי של עכברים וחולדות בודדים. ניתן להתאים אישית תגים עם סידרה של מספרים ו/או אותיות. הקצאת קודים ספציפיים לזן עכבר / חולדה, או לחוקר עיקרון (PI), מסייעים בניהול רשומות ומסדי נתונים, במיוחד במושבות רבייה גדולות שבהן ישנם זנים מרובים ו- PIs. בנוסף, ישנם מגוון של תגים זמינים מסחרית. תגי מתכת יש תווים חקוקים עליהם. למרות תחריט זה ברור, בעת עבודה עם עכבר יש צורך לעתים קרובות להרים אותו כדי לקרוא את הקוד על התגים בשל הגודל הקטן של התגים. אפשרויות אחרות הן תגי פלסטיק עם מספרים ו/או אותיות על רקעים בצבעים בהירים, או תגי פלסטיק עם ברקוד על המשטח הקדמי. שתי האפשרויות הללו מאפשרות לקרוא את התגים מבלי לטפל בבעלי החיים. יתרון נוסף לתגי פלסטיק הוא התאימות שלהם להדמיית MRI.

המיקום של התג על האוזן הוא קריטי, כמו מיקום לא תקין יכול להיות כמה השלכות מצערות. תגיות חייבות להיות ממוקמות כך שהם לא גורמים עיקול בפינה, להפריע לניידות של החיה, או לתפוס על כל חלק של caging. אם התג ממוקם קרוב מדי לקצה האוזן זה יכול בקלות להיקרע מרקמת pinna. אם ממוקם קרוב מדי לראש, העור של אזור הצוואר יכול לתפוס את התג, אשר ייצור גירוי, כאב, ותנועה מוגבלת. זה יכול להוביל לטראומה עצמית מן החיה מגרדת את התג, קורע אותו מהאוזן, או מקבל רגל נתפסה בתג. הכשרה למיקום וטכניקה נכונה היא חיונית. 1

בעוד תגיות לספק מזהים בודדים עבור עכברים או חולדות, הם אינם טועים. תגיות יכול ללכת לאיבוד עקב לחימה, טיפוח יתר, דרמטיטיס בזנים רגישים, זיהום, או טראומה עצמית. 2 חולדות מבוגרות בפרט סובלניות פחות לתגי אוזניים ולעתים קרובות מסירות אותן, וגורמות לטראומה עצמית. התנהגות הרבייה האגרסיבית יותר בחולדות יכולה גם להוביל לתג אוזן שנקרע מהפינה. אם עכברים או חולדות משויכים או שוכנים בקבוצה, אובדן תג אוזן על יותר מחיה אחת יכול להיות בעייתי. כדי לעקוף בעיה זו, יש להשתמש בצורה משנית של זיהוי - כגון קוד ניקוב המשמש על האוזן שממול לתג, או קעקוע זנב או בוהן- יש להשתמש. מתקן צריך לתקנן הן את בחירת האוזן להיות מתויג ואת הקוד שישמש על האוזן השנייה או על בהונות. כל הקודים צריכים להיות מסומנים על כרטיס הכלוב.

השימוש בקודי ניקוב האוזן מאפשר שיטת זיהוי מהירה ופשוטה, אך לטכניקה יש מגבלות. קודים נפוצים יש גבול עליון עבור מספרים זמינים לשימוש, בדרך כלל לכל היותר של 100 עד 399. כדי לקרוא את קודי אגרוף האוזן, רוב החיות חייבות להיאחז בקשקוש. האגרופים יכולים להכפיל כמו דגימות רקמה עבור genotyping PCR, המאפשר זיהוי בעלי חיים ודגימת גנוטיפ להתבצע בו זמנית. התוצאה היא פחות מתח לבעלי החיים מטיפול חוזר. 3

ישנם שלושה סגנונות של אגרופים באוזן: אגרוף מספריים, אגרוף האגודל, ואת אגרוף הידית. למרות שכולם יעילים באותה מידה, יש יתרונות וחסרונות לכל אחד מהם. לדוגמה, ככל שחולדות מזדקנות, עור אוזניהן מתעבה. עדיף לבצע את אגרופי האוזן על חולדות צעירות כפי שהם נמות. עבור חולדות מבוגרות הדורשות זיהוי, יש לשקול את השימוש בהרדמה במשאף. מבחינה ארגונומית, האגרוף ברמה קל יותר לשימוש מאשר אגרוף אגודל, במיוחד עבור האוזניים העבות של חולדות מבוגרות. עם זאת, שני האגרופים האלה דורשים תנועת צביטה של האצבעות. לאגרוף המספריים יש את היתרון הארגונומי של לא דורש תנועת צביטה, ובכך למנוע עייפות מנהרה שורש כף היד ופציעה. לעומת זאת, אגרוף האגודל הוא יתרון לאיסוף דגימות genotyping, כמו טיפים עם חומר הרקמה יתאימו צינור אפנדורף. סגנון האגרוף לשימוש צריך להיקבע על ידי האנשים המבצעים את המשימה ואת גיל החולדות.

עבור חולדות, למרות תגי מתכת משמשים לרוב, מחקרים הראו כי יש השלכות לשימוש בהם. דלקת, שינויים ניאופפלסטיים, ואפילו כאב כרוני נצפו בבעלי חיים שלבשו תגי אוזני מתכת במשך מספר חודשים. 3,4,5,6 יש להסיר מיד את התגים מהאוזן אם יש תגובה שלילית, ויש לבדוק ולטפל בפציעה הבאה, במידת הצורך, על ידי הצוות הווטרינרי.

טיפול נאות ותחזוקה של אגרופים יאריכו את השימוש בהם. כל סוגי האגרופים ישעממו אם autoclaved, ולכן מומלץ לנקות אותם עם חומר חיטוי ולשטוף אותם עם אלכוהול. לאחר מכן, הם חייבים להיות מיובשים ביסודיות כדי למנוע חלודה. אם האגרופים משמשים PCR, הם צריכים להיות ספוגים במשך 3 דקות בפתרון שמסיר DNA שיורית או RNA. לפני השימוש הם שטופים באלכוהול וניגבים יבשים.

Procedure

1. זיהוי אגרוף באוזן

קודי ניקוב האוזן פותחו כשיטה מהירה וזולה לתיוג בעלי חיים בודדים. ישנם שלושה סגנונות של אגרופים באוזן: אגרוף מספריים, אגרוף האגודל, ואת אגרוף הידית. האוזן הימנית של החיה משמשת למספרים חד-ספרתיים, האוזן השמאלית לעשרות, ואמצע האוזניים למאות.

  1. רסן את החיה כך שהאוזניים נגשות בקלות. רוב העכברים מתויגים באוזן לזיהוי אישי בגיגה. זה דורש טיפול עדין בשל גודלם הקטן והשברירי יותר. עכברים מסוימים נוטים פחות להיאבק אם הגפיים האחוריות יכולות לנוח על משטח כגון ראש כלוב או ראש דלפק.
  2. קבעו את אגרופי האוזן הדרושים כדי להתאים למספר הניסיוני של החיה או לזהות אותו בתוך כלוב.
    1. ניקובים יהיו חריצים או חורים בהתאם לקוד שבו נעשה שימוש.
    2. המספר האחרון בתג האוזן משמש לעתים קרובות כמזהה ניקוב האוזן כאשר זוהי שיטת הזיהוי המשנית.
    3. אם בעלי חיים נמצאים במחקר לטווח קצר בקבוצות כלוב יציבות, הם יכולים להינתן מספרים רציפים. זה נעשה לעתים קרובות כאשר אין תגי אוזניים נוכחים.
  3. הפוך את אגרוף האוזן.
    1. כדי לעשות חריץ, האגרוף ממוקם על קצה הפינה האוזן.
    2. כדי ליצור חור, מניחים את האוזן באגרוף כך שחור האגרוף ממוקם הרחק משולי הפינה במצב הרצוי.
    3. יש להפעיל לחץ על האגרוף של האגודל או הידית, או לסגור את אגרוף המספריים במהירות ובתקיפות כדי לחתוך את עור האוזן.
    4. הרם בעדינות את האגרוף מהאוזן בעת שימוש באגודל או במנוף הידית. פתח את אגרוף המספריים כדי להסיר אותו מהאוזן.
    5. הימנע משיכה או סיבוב האגרוף כדי למנוע קריעת האוזן.
    6. אגרופים עושים משעמם אחרי פעם. אם אגרוף לא מצליח לחתוך דרך האוזן, לשחרר את האגרוף ולבחור אגרוף אוזן חדשה. מקם מחדש את האגרוף החדש באותה נקודה.
  4. נקו את האגרופים לאחר כל שימוש.
    1. כל סוגי האגרוף יהיו משעממים אם יעבדו אוטומטית. מומלץ לנקות אותם בחומר חיטוי ולשטוף אותם באלכוהול. ייבשו אותם ביסודיות כדי למנוע חלודה.
    2. אגרופים באוזן שישמשו ל- PCR ספוגים באופן שגרתי במשך 3 דקות בתמיסה להסרת שאריות DNA או RNA. לפני השימוש הם שטופים באלכוהול וניגבים יבשים.

Figure 1
איור 1. חבטות אוזניים בעכברים באמצעות אגרוף מספריים.

2. זיהוי תג האוזן

תגי אוזניים מותאמים אישית ניתן להזמין מיצרני עם קודים אלפביתיים ו / או מספריים, המאפשר הבחנה של זני עכבר או חוקרים. תגי אוזניים יכולים להיות עשויים מתכת או פלסטיק.

  1. בחר את תגי האוזן המתאימים לזיהוי בעלי החיים. ישנם מספר סגנונות של מיישמים זמינים מיצרני תגי אוזניים. הקפד להזמין את ההחלה המיועדת לגודל ולסגנון הספציפיים של תגי האוזן הנמצאים בשימוש.
  2. מוציאים בעדינות תג ממחזיק הקרטון, ומכוונים אותו לתוך המימר כך שהקצה עם החור ממוקם מעל האזור החרוך של המימר. הקצה המחודר של התג צריך להיות מול החרץ.
  3. רסן את החיה כך שהאוזניים נגשות בקלות. בעלי חיים עשויים להיות פחות סביר להיאבק אם הגפיים האחוריות יכולות לנוח על משטח, כגון ראש כלוב או דלפק העליון.
  4. מקם כראוי את תג האוזן למיקום.
    1. מקם את נקודת תג האוזן עמוק ככל האפשר בקונצ'ה של האוזן, כך שמספרי התגים פונים לחלק האחורי של החיה.
    2. כדי שהמספרים של תג האוזן יפונים לאפו של החיה, מקמו את נקודת התג בבסיס הפינה בחלק האחורי של האוזן.
  5. החל את התג.
    1. תלחצו בחוזקה את המימר סגור. תג האוזן ינקב את האוזן וינעל יחד.
    2. שחררו את ההגשה והאוזן המתויגת תיפול מהמתיש.

Figure 2
איור 2. עכבר עם תג אוזן הממוקם כראוי על הפינה.

  1. הסר את תגי האוזן המתכתית.
    הערה: לעתים, תגי אוזניים ממתכת עלולים לגרום לגירוי ונפיחות באוזן. הנפיחות והגירוי מובילים לעתים קרובות לזיהומים של הפינה. הטיפול צריך לכלול את הסרת התג; עם זאת, במקרים של גירוי חמור או זיהום, ייתכן שיהיה צורך להיות מרדים.
    1. הסר פסולת מסביב לתג עם אפליקטור עם קצה כותנה לח עם פתרון חיטוי.
    2. חתוך לרוחב החלק העליון של לולאת התג מקצה לקצה עם חותכי תיל. אין לחתוך על פני השטח השטוח, שכן זה יהיה לדחוס את התג, לצבוט את האוזן, ולגרום נזק נוסף.
    3. הימנע החלת המומנט בעת חיתוך כדי למנוע קריעת האוזן.
  2. השתמש hemostats כדי להפיץ את קצות לחתוך של תג האוזן בנפרד.
    1. הנחו בעדינות את תג האוזן דרך ומחוץ לאוזן באמצעות hemostats. להפחית את הטראומה על ידי הימנעות מהגדלת החור החודר והחלקת התג החוצה, כך הקצה מקומק לא עובר דרך האוזן.
    2. לאחר שהתג נעלם, לנגב את האוזן עם מקל אפליקטור כותנה ספוג חיטוי.
    3. אם יש פריקה מוגלתית מהאוזן, ייתכן שיהיה צורך בטיפול מעקב ומומלץ להתייעץ עם הצוות הווטרינרי להערכה.

Application and Summary

בעת בחירת שיטת הזיהוי המתאימה, יש לדון בגורמים רבים. לכל טכניקה יש יתרונות וחסרונות שיש לקחת בחשבון ביחס לצרכים הניסיוניים. בעוד העלויות חייבות להישקל יחד עם גורמים אחרים, הקלות של הטכניקה ואת רמת אי הנוחות לבעלי החיים צריך להיות השיקולים העיקריים. 3,4

חבטות אוזניים / חריץ משמש בדרך כלל בעכברים וחולדות כי יש עלות קטנה, ואת ההליך נעשה בקלות. ישנם מספר מוגבל של קודים שניתן להשתמש בהם, כאשר לרוב הקודים יש גבול עליון של 100 עד 399. כדי לקרוא את קודי אגרוף האוזן, רוב החיות חייבות להיאחז בקשקוש. עם זאת, האגרופים יכולים להכפיל כמו דגימות רקמה עבור genotyping PCR, אשר מאפשר זיהוי דגימת genotype להתבצע בו זמנית, ובכך לגרום פחות מתח לבעלי החיים מטיפול חוזר. 5

References

  1. Robinson, V., Morton, D.B., Anderson, D., Carver, J.F.A., Francis R.J., Hubrecht, R., Jenkins, E., Mathers, K.E., Raymond, R., Rosewell, I., Wallace, J., and Wells, D.J. 2003. Refinement and reduction in production of genetically modified mice. Laboratory Animals. 37:S1-S50.
  2. Cover, C.E., Keenan, C.M., and Bettinger, G.E. 1989. Ear tag-induced Staphylococcus infection in mice. Laboratory Animals. 23:229-233.
  3. Kitagaki, M., Suwa, T., Yanagi, K., and Shiratori, K. 2003. Auricle chondritis in young ear-tagged Crj:CD(SD)IGS rats. Laboratory Animals. 37:249-253.
  4. Kasanen, H.E., Voipio, H.M., Leskinen, H., Luodonpää, M., and Nevalainen, T.O. 2011. Comparison of ear tattoo, ear notch and microtattoo in rats undergoing cardiovascular telemetry. Laboratory Animals. 45:154-159.
  5. Dalhborn, K., Bugnon, P., Nevalainen, T., Raspa, M., Verbost, P., and Spangenberg, E. 2013. Report of the Federation of European Laboratory Animal Science Associations Working Group on animal identification. Laboratory Animals. 47:2-11.
  6. Waalkes, M.P., Rehm, S., Kasprzak, K.S., et al. 1987. Inflammatory, proliferative, and neoplastic lesions at the site of metallic identification ear tags in Wistar [Crl:(WI)BR] rats. Cancer Research. 47:2445-2450.

Tags

Rodent IdentificationLab AnimalsBiomedical ResearchAnimal Identification MethodsEar TaggingEar PunchingEar Punch CodeNotchHoleAnimal Labeling

Skip to...

0:00

Overview

0:48

Ear Punching: Code, Types, Benefits and Disadvantages

3:51

Method of Ear Punching

5:46

Ear Tagging: Types, Benefits and Disadvantages

7:20

Method of Applying and Removing an Ear Tag

10:46

Applications

12:06

Summary

Videos from this collection:

article

Now Playing

זיהוי מכרסמים I

Lab Animal Research

54.4K Views

article

טכניקות טיפול וריסון מכרסמים

Lab Animal Research

173.3K Views

article

נהלי טיפול בסיסיים

Lab Animal Research

27.6K Views

article

יסודות הרבייה והנגייה

Lab Animal Research

35.5K Views

article

זיהוי מכרסמים II

Lab Animal Research

25.5K Views

article

ניהול מורכב I

Lab Animal Research

100.0K Views

article

ניהול מתחם II

Lab Animal Research

34.6K Views

article

ניהול מתחם III

Lab Animal Research

31.2K Views

article

ניהול מורכב 4

Lab Animal Research

51.3K Views

article

נסיגת דם I

Lab Animal Research

170.8K Views

article

נסיגת דם II

Lab Animal Research

72.7K Views

article

אינדוקציה ותחזוקה של הרדמה

Lab Animal Research

50.0K Views

article

שיקולים לניתוח מכרסמים

Lab Animal Research

22.3K Views

article

אבחון נקרופסיה וקציר רקמות

Lab Animal Research

57.8K Views

article

קציר רקמות סטריליות

Lab Animal Research

34.7K Views

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved