来源: 凯斯图尔特, RVT, RLATG, CMAR;瓦莱丽. 施罗德, RVT, RLATG。圣母大学
生物医学研究的一个基本要求是研究动物的正确识别。必须将正确的动物用于程序和数据收集。实验室小鼠和大鼠可以用下列永久性方法识别: 耳标签、耳打码、微芯片植入、成年小鼠的尾部纹身和新生儿脚趾纹身。染料和标记笔的临时方法也可用于急性研究。这段视频涵盖了对小鼠和老鼠的耳贴标签和冲压的技术方面, 以及每种对动物进行的研究类型的好处。对每个动物的基本手工约束技术 (包括在一个单独的视频) 的知识是必要的, 这些识别方法是正确的完成。
耳标签是便宜和易于执行, 并因此通常用于识别个别小鼠和老鼠。标签可以用一系列的数字和/或字母 custom-made。将特定的代码分配给一只老鼠/大鼠, 或者给一个原则调查员 (PI), 在记录记录和数据库管理方面的助手, 特别是在有多重菌株和 pi 的大型育种群中。此外, 市面上还有各种各样的标签。金属标签上刻有字符。虽然这种蚀刻是明确的, 当使用鼠标时, 通常需要把它捡起来, 以便读取标签上的代码, 由于小的标签大小。其他选项是塑料标签, 无论是数字和/或字母鲜艳的背景, 或塑料标签的条形码在前面的表面。这两个选项都允许读取标签, 而不必处理这些动物。塑料标签的另一个优势是它们与 MRI 成像的兼容性。
标签在耳朵上的定位是至关重要的, 因为不正确的定位可能会产生一些不幸的后果。标签必须放置, 这样他们不会造成在耳廓的弯曲, 干扰动物的机动性, 或捕获的任何部分的锁定。如果标签放得太靠近耳朵的边缘, 它可以很容易地从耳廓组织撕裂。如果定位太靠近头部, 颈部的皮肤可以捕捉到标签, 这将造成刺激, 疼痛, 和限制运动。这可以导致 self-trauma 从动物抓痕的标签, 翻录它的耳朵, 或得到一只脚抓住了标签。适当的安置和技术培训是必不可少的。1
尽管标签为老鼠或老鼠提供了单独的标识符, 但它们并不是万无一失的。标签可以丢失, 由于战斗, over-grooming, 皮炎易感菌株, 感染, 或 self-trauma。2特别是成年大鼠对耳标签的耐受性较差, 通常会将其移除, 从而造成 self-trauma。在大鼠的更积极的繁殖行为也会导致耳朵标签被撕裂的耳廓。如果老鼠或老鼠是配对或集体安置的, 那么在不止一个动物身上丢失一个耳朵标签就会很麻烦。为了绕过这个问题, 应该使用第二种形式的识别--例如, 在耳对面的标签上使用的打孔代码, 或尾巴或脚趾纹身。一个设施应该规范的选择耳朵被标记和代码要使用的其他耳朵或脚趾。所有的代码应在笼卡上注明。
使用耳打码可以快速而简单的识别方法, 但该技术有局限性。常用的代码对可用的数字有上限, 通常最多可使用100到399。要阅读耳打码, 大多数动物必须掌握在颈背上。该方法可作为 PCR 基因分型的组织样本, 同时进行动物鉴定和基因组取样。这会减少对动物重复处理的压力。3
有三种风格的耳朵拳: 剪刀拳, 拇指拳, 和杠杆冲床。虽然都是同样有效的, 但都有各自的优缺点。例如, 当老鼠衰老时, 耳朵的皮肤会变厚。在幼鼠断奶时, 最好对它们进行耳部击打。对于需要鉴定的成年大鼠, 应考虑使用吸入麻醉。人体工程学, 比拇指拳更容易使用的水平冲床, 特别是对较厚的老老鼠的耳朵。然而, 这两种拳都需要手指的捏动。剪刀冲床具有人体工程学的优点, 不需要挤压运动, 从而避免腕管疲劳和损伤。相比之下, 拇指拳是有利于收集基因分型样本, 因为提示与组织材料将适合离心管。使用的拳打方式应由执行任务的个人和大鼠的年龄来决定。
对老鼠来说, 虽然最常用的是金属标签, 但研究表明, 使用它们是有后果的。炎症, 肿瘤的变化, 甚至慢性疼痛已被观察到的动物已经磨损金属耳标签几个月。34, 56如果有不良反应, 应立即将标签从耳中移除, 并在必要时由兽医人员检查和处理随后的损伤。
适当的保养和维护拳打将延长他们的使用。所有类型的冲床将沉闷, 如果蒸压, 所以建议用消毒剂清洗, 并用酒精冲洗。然后, 必须彻底干燥, 以防止生锈。如果是用于 PCR, 他们应该浸泡3分钟的解决方案, 去除残留的 DNA 或 RNA。使用前, 用酒精冲洗, 擦干。
1. 耳冲识别
耳打码已发展成为一种快速和廉价的方法来标记个别动物。有三种风格的耳朵拳: 剪刀拳, 拇指拳, 和杠杆冲床。动物的右耳用于单位数, 左耳为十, 耳朵中间为数百人。
图1。用剪刀冲压的小鼠耳朵。
2. 耳标签识别
定制的耳标签可以订购的制造商与字母和/或数字代码, 这允许分化的小鼠菌株或调查。耳标签可以用金属或塑料制成。
图2。在耳廓上正确定位的带有耳标签的鼠标。
在选择合适的识别方法时, 必须慎重考虑多种因素。每种技术都有优缺点, 必须考虑与实验需要。虽然成本必须与其他因素一起权衡, 但技术的简单性和对动物的不适程度应该是首要考虑。34
在小鼠和大鼠中常用的是耳冲孔/凹槽, 因为成本不高, 操作简单。可以使用的代码数量有限, 大多数代码的上限为100到399。要阅读耳打码, 大多数动物必须掌握在颈背上。然而, 这种拳打可以作为 PCR 基因分型的组织样本, 从而使鉴定和基因组取样能够同时完成, 从而减少对动物重复处理的压力。5
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