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쥐에서 혈관의 만성 catheterization는 종종 일정 기간 동안 또는 직접 의식 혈압 측정을위한 혈액 샘플을 얻을, 물질의 관리가 필요합니다. 의식이 동물에서 혈압의 쥐 및 해당 측정의 대퇴 동맥 catheterization을 증명합니다.
연구의 여러 분야에 필요한 실험실 연구에서 순환 시스템에 액세스할 수 있습니다. 만성 이식 카테터를 사용하는 쥐의 약리 연구 연구자들이 효과적으로하도록 허용하고 편안하게, 물질을 관리 반복 혈액 샘플링을 수행하고 혈압과 심장 박동을 의식 직접 측정에 도움이됩니다. 일단 카테 테르가 이식됩니다 장기 샘플링이 가능합니다. 명백하고 카테터 인생은 잠금 사용 솔루션, 홍조 처방 및 카테 테르 재료를 포함한 여러 요인에 따라 달라집니다. 이 비디오는 대퇴 동맥과 암흑의 정맥 catheterization의 방법론을 설명합니다. 또한 비디오 대퇴 정맥과 혈액 샘플링, 약물 관리와 의식에서 자유롭게 이동하는 쥐 혈압과 심장 박동수의 측정에 동맥 카테터의 사용을위한 동맥 카테터의 사용을 설명합니다. 스위블 시스템에 부착된 밧줄과 활용은 동물이 호 수 있도록합니다동물에게 최소한의 혼란과 연구자에 의해 사용하고 샘플을 촬영했습니다. 카테 테르의 명백을 유지하려면, 카테 테르주의 일상 유지 관리가 잠재적인 오염을 최소화하기 위해 잠금 솔루션 (100 U / ML heparinized 식염수), 기계 지상 뭉툭한 팁 주사기 바늘과 주사기 필터의 사용을 사용해야합니다. 주의 무균 수술 테크닉, 적절한 카테 테르 자료 및주의 카테 테르 유지 보수 기술로, 그것은 오랜 기간 (몇 주)에 대한 특허 카테터하고 건강한 동물을 유지할 수 있습니다.
1. 이전에 수술을 시작
참고 : 이전 어떤 동물 절차는 귀하의 기관 / 조직을 통해 적절한 권한을 획득했는지 확인 시작합니다. 모든 생존 수술과 마찬가지로 수술이 멸균 조건에서 수행하고 적절한 진통제와 항생제가 필요한 성공적인 결과를 위해 사용되고 있는지 확인하십시오.
2. 카테 테르 배치에 대한 외과 영역의 준비
3. 카테 테르를 터널링
4. 대퇴 정맥과 동맥에 카테터를 삽입하면 (그림 3)
5. 랩 - 업 수술
- 장기적인 유지 보수를 20 U / ML 헤파린 / 식염수에 카테터 생리 식염수를 교체하십시오.
6. 카테터의 유지 보수 (무균 장갑이 절차를 수행하는 동안 착용한다)
7. 혈액 샘플링 (무균 장갑이 절차를 수행하는 동안 착용한다)
패딩 포셉와 카테 테르를 클램프.
8. 약물 주입
10. 대표 결과
대표 혈압 측정은 의식 자유롭게 움직이는 동물에서 찍은 및 그림 4에 표시됩니다. 동시에 대퇴부 동맥 라인에서 혈압을 측정하면서 Phenylephrine (3 ug / kg, IV), 알파 1 아드레날린 수용체 작용제는, 혈압을 높일 수있는 대퇴 정맥 라인으로 투여되었다. Phentolamine (4 MG / kg, IV),nonselective 알파 아드레날린 길항제는 다음 혈압을 낮추 투여되었다.
그림 1. 조직의 무딘 절개. 그 뒷면에있는 쥐를 사용하면 뒷다리 다리의 각도에 약 ½ 인치 (12 ㎜) 절개를 만들었하고 대퇴 동맥과 정맥을 노출하는 결합 조직을 절개하다 무딘 것입니다 무딘 가위 또는 hemostats를 사용해야합니다.
그림 2. 대퇴 동맥과 결합 조직의 정맥의 분리.
그림 3. 카테 테르의 배치. 바나, 남은를 사용하여 마이크로 해부 가위는 각도는 45도 (위)에있는 선박을 통해 방법의 ¼ 정도의 작은 절개를 배치하고 일에 미세 밀고 포셉 배치전자 절개와 포셉 다른 쌍을 사용하여 선박 (중간)에 카테 테르를 피드. 마지막으로, 카테 테르의 배치 완료시 장소 (아래)에있는 카테 테르 치료.
그림 4. 의식적 자유롭게 움직이는 동물에서 가져온 대표적인 혈압 측정합니다.
동맥과 정맥 catheterization은 역사적으로 모두 심하게 및 만성 혈압, 샘플 혈액을 모니터링하는 데 사용하고 실험 쥐 동물 모델 1-4에서 물질을 제공하고 있습니다. 이러한 수술 instrumentations의 가장 큰 장점은 혈액 샘플링, 마약 관리 및 혈압 모니터링, 모니터링을 포함한 절차, 동물 1 최소한의 장애 및 / 또는 스트레스 실시되도록한다는 것입니다. 많은 수사관들이 프로토콜을 작성하고 자신의 실험실은 수술 5-8을 수행하는 구체적인 방법론을 가지고있다. 비디오와 일러스트는 우리 연구실은 대퇴 동맥과 정맥 catheterization 절차에 관해서와 성공적인 것으로 판명는지 보여줍니다.
쥐은 일반적으로 취급 자신의 작은 크기와 편의로 인해 과학 연구의 다수를위한 실험실에 사용됩니다. 만성 여러 위치가 있습니다카테 테르는 몇 가지 이름으로 경정맥 정맥, 복부 대동맥, 경동맥과 대퇴 동맥을 포함한 동물 이내에 설치할 수 있습니다. 쥐의 대퇴 카테 테르의 명백 증가 길이 만성 catheterization 결과에 대한 위치는 다른 카테 테르 위치 9에 비해 사전 수술 동물의 체중의 빠른 복구를했습니다.
많은 조사가 급성뿐만 아니라 만성 혈액 샘플링 1-5,11-13에 대한 카테터를 내재하는 데 사용했습니다. 많은 연구에서 여러 피는 동물의 필요와 외부 cannulation / catheterization 인해 자사의 비 외상성 자연에 유리 하나 방법론집니다 그립, 동물이 의식이있는 동안 또한 그것 때문에 anesthetics의 영향에 의해 제한받지 않는다, 할 수 있습니다 또한 동물은 자유롭게 1,10 이동하실 수 있습니다. 혈액 샘플을 얻기 위해 그리고 설치류 동물의 스트레스 호르몬을 측정하는 가장 좋은 방법은 긴 6,13을 논의했습니다. pharmacokinetic studi와 관련만성 이식 카테 테르 시스템을 사용할 때 말이지, 연구 동물의 catheterization을 최소화 자제심과 반복 혈액 샘플링을 허용합니다. 또한, 연구 아드레날린, noradrenaline과 자유롭게 처리 (30 초)과 또는 14 (5 분) 구속되었을 동물에 비해 쥐 (경정맥 카테터)를 이동 플라즈마에 도파민의 감소 기저 농도를 보이고있다. 스트레스의 증가를 분별하기 위해하는 추가 방법은 플라즈마 corticosterone 수준을 측정하는 것입니다. 이전에 그것은 심지어는 플라즈마 corticosterone 수준이 만성 cannulated 쥐 15 상승다고 수술 복구 시간의 3~4일를 따라 것을 제안했다. 그러나, 방법론 최근 개선 uncannulated 쥐 16 비교 경정맥 혈관 cannulated 쥐의 기준 플라즈마 corticosterone 수준에 차이가 없다는 것으로 나타났습니다. 또한, corticosterone 분석을위한 HPLC 방법론도 공개되는 corticoster한 수준은 구속 스트레스에 의해 고가되지만, 안정적인 경정맥 catheterization 16 이후.
만성 catheterization의 추가 사용은 설치류에서 혈압과 심장 박동수의 측정이다. 혈압과 쥐의 심장 박동을 측정하기 위해 활용 여러 방법이있다, 이들은 비침습 꼬리 커프스 방법론, radiotelemetry 절차 및 직접 내재하는 카테터를 포함합니다. 각 방법은 다른 출판물에 자세히 설명되어 있습니다 자사의 장점과 단점을 가지고 있습니다. 내재 유체 - 채워진 카테터는 쥐 내에서 여러 동맥에 이식 수 있습니다. 대퇴 동맥이 측정에 사용될 수있는 하나 동맥지만. 혈압 / 심장 속도 측정은 카테 테르의 말초 끝을 보정 압력 변환기에 연결됩니다. 카테 테르는 동물의 움직임을 자유롭게 허용하는 스위블에 연결된 보호 봄 안에 보관되어하거나, 버튼을 surgi에 첨부할 수 있습니다캘리 동물에 이식. 내재하는 카테터는 동물 17,18에 장기적인 스트레스를 최소화의 장점이 있습니다. 자료 저렴한 아르 또한, 보정 압력 대책과 지속적인 장기 대책을위한 쉬운 19 여러 주 동안 상대적으로 낮은 스트레스 조건에서 얻을 수 있습니다. 우리는 단점을 포함하여,이 기술에있다는 것을 언급하지 않았다면 우리가 놓칠 수는 있겠지만,이 수술 침입 기법이며, 카테 테르의 유지 관리가 명백, 카테 테르의 주입에 의한 동맥 손상을 유지하기 위해 필요합니다 몇 가지 이름을 감염의 가능성.
만성 - 이식 동맥 카테터의 혈압 직접 레코딩 만성 대책에 대한 자세한 기술적으로 도전하지만,보다 정확하고 동물을 방해하지 않고 지속적으로 할 수 있습니다. 테일 즉석 측정의 정확도가 다소 떨어질되지만 그들은 수술을 필요로하지 않고도 반복 수 있습니다에드. 테일 - 커프스 방법은 펄스 20 검출을 용이하게하기 위해 꼬리 혈관을 팽창하는 동물의 난방뿐만 아니라 처리가 필요하지. 취급 및 추가 열 스트레스 따라서 매우 정확한 측정을 제공하지, 혈압 측정에 영향을 줄 수 있습니다. 또한, 이외 직접 꼬리 즉석 방법은 쉽게 동시 혈액 샘플링이나 약물 관리를 허용하지 않습니다.
직접 측정을 얻을 수있는 추가적인 방법은 telemetric 방법론을 사용하고 있습니다. 데이터가 지속적으로 구속하지 않고 또는 anesthetics 18 의식 자유롭게 이동 동물에 오랜 기간 동안 혈압 (및 기타 조치)의 고품질 녹음이 가능합니다. 그러나, 원격 장치 이상 동안 매우 비용이 많이 드는 있습니다. 원격 비교할 때, catheterization 혜택은 다음과 같습니다 감소 "설정"과 운영 비용, 쉽게 마약을 관리하고 쉽게 의식 자유롭게 움직이는 동물의 혈액 샘플을 취할 수있는 능력을. administrat따라서 최소한 동물에 스트레스를 최소화하고보다 정확한 측정을 위해 수 있도록 동물을 방해하면서 마약과 물질, 그리고 연구 동물에서 얻기 혈액 샘플 이온을 할 수 있습니다.
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저자는 그림의 기여에 대한 박사 앤드류 킹 박사와 카트리 나 킹을 인정하고 싶습니다. NIH 부여 : R00HL087927.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
이름 | 유형 | 회사 | 카탈로그 번호 |
동맥 카테 테르 | 소모품 | SAI 주입 | RFA - 01 |
정맥 카테터 | 소모품 | 과학 상품, 주식 회사 | BB518 - 20 & BB31785 - V / 2 |
27g 1 / 2 "둔기 니들 | 장비 | 통합 분배 솔루션 주식 회사 | 9,991,113 |
23g 1 / 2 "둔기 니들 | 장비 | 통합 분배 솔루션 주식 회사 | 9,991,109 |
PowerLab/8SP | 장비 | ADInstruments | w.adinstruments.com/products/hardware/research/product/PL3508 / "대상 ="_blank "> ML765 |
쿼드 다리 | 장비 | ADInstruments | ML118 |
LabChart 7.2 | 소프트웨어 | ADInstruments | |
꼭지 및 케이블 BP 변환기 | 장비 | ADInstruments | MLT844 |
단일 채널 회전 | 장비 | Instech | 375/22PS |
단일 축 - 카운터 밸런스 회전 마운트 | 장비 | Instech | CM375BP |
Covance 주입의 활용 | 장비 | Instech | CIH105 |
테이블 톱 Isoflurane 아나스타샤 단위 | 장비 | Protech 인터내셔널 | 61,020 |
설치류 마취 마스크 | 장비 | Protech 인터내셔널 | RAM - 02 |
설치류 유도 회의소 | 장비 | Protech 인터내셔널 | RIC - 01 |
마취 가스 필터 용기 | 장비 | Protech 국제알 주식 회사 | 80,120 |
탁상 층류 흐름 두건 | 장비 | 센트리 에어 시스템 주식 회사 | SS - 200 WSL |
Oster 골든 A5 | 장비 | Oster 전문 제품 | 78005-140 |
듀얼 거위 목처럼 생긴 것 가이드와 함께 광섬유 조명 | 장비 | LW 과학 주식 회사 | 학대 1502 - DGG1 |
Deltaphase 등온 패드 | 장비 | BrainTree 과학 | 39DP |
면과 날붙이 Applicators | 소모품 | 솔론 제조 회사 | 36,200 |
거즈 스폰지 2 "X2" | 소모품 | 켄달의 Curity | 2146 |
5-0 나일론 봉합사 | 소모품 | Ethicon | 661G |
4-0 실크 봉합사 | 소모품 | Deknatel | 8 S, 136075-0208 |
조직 접착제 | 소모품 | 3M | 1469SB |
가시 및 고정 집게 | 장비 | 조지 Tiemann & 컴퍼니 | 160-55 |
학생 조직 집게 | 장비 | 좋은 과학 도구, 주식 회사 | 91121-12 |
마이크로 집게 / 고사리 집게 | 장비 | 조지 Tiemann & 컴퍼니 | 10-1942 |
엑스트라 파인 Graefe의 집게 | 장비 | 좋은 과학 도구, 주식 회사 | 11152-10 |
올슨 - Hegar 니들 홀더 | 장비 | 좋은 과학 도구, 주식 회사 | 12002-12 |
학생 Halsted - 모기 Hemostat | 장비 | 좋은 과학 도구, 주식 회사 | 91308-12 |
로체스터 Pean 힘피 | 장비 | 바이오 메디컬 리서치 인 스트 루먼트 주식 회사 | 31-1640 |
학생 외과 가위 | 장비 | 좋은 과학 도구, 주식 회사 | 91402-12 |
뒤몽 집게 | 장비 | 좋은 과학 도구, 주식 회사 | 11251-35 |
마이크로 분석 해 봅시다 가위 | 장비 | 조지 Tiemann & 컴퍼니 | 160-210 |
사시의 가위 | 장비 | 좋은 과학 도구, 주식 회사 | 14075-11 |
하트맨의 Hemostat | 장비 | 좋은 과학 도구, 주식 회사 | 13003-10 |
조직 가위 | 장비 | 조지 Tiemann & 컴퍼니 | 160-150 |
견인기 | 장비 | 사용자 지정 사항이 |
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