Method Article
مطلوب في كثير من الأحيان قسطرة الأوعية الدموية المزمنة في الفئران لإدارة المواد ، والحصول على عينة من الدم على مدى فترة من الزمن أو لمباشرة اعية قياس ضغط الدم. سيظهر قسطرة الشرايين الفخذية القياسات الفئران وما يقابلها من ارتفاع ضغط الدم في الحيوانات واعية.
في مجالات متعددة من الدراسة ، والوصول إلى نظام الدورة الدموية في الدراسات المخبرية الضرورية. الدراسات الدوائية في الفئران باستخدام القسطرة المزروع مزمنة تصريح الباحث على نحو فعال وإدارة المواد إنسانية ، نفذ المتكررة اخذ عينات من الدم ويساعد في القياسات المباشرة واعية من ضغط الدم ومعدل ضربات القلب. مرة واحدة هو مزروع القسطرة على المدى الطويل من الممكن أخذ العينات. سالكية القسطرة والحياة يعتمد على عوامل متعددة بما في ذلك تأمين الحل المستخدمة ، ونظام التنظيف والمواد القسطرة. وهذا الفيديو لشرح منهجية شريان الفخذ وقسطرة وريدية من الفئران. بالإضافة إلى ذلك في شريط فيديو تثبت استعمال القسطرة الوريدية والشريانية الفخذ لأخذ عينات الدم ، وإدارة المخدرات واستخدام القسطرة الشريانية في أخذ قياسات ضغط الدم ومعدل ضربات القلب في الفئران واعية بحرية الحركة. وهناك حبل وتسخير تعلق على قطب النظام تسمح للحيوان أن يكون حووقد استخدمت وأخذ عينات من قبل الباحث بأقل قدر من الانقطاع للحيوان. للحفاظ على سالكية من القسطرة ، مطلوب الصيانة اليومية حذرا من استخدام القسطرة حل القفل (100 U / مل heparinized المالحة) ، وآلة الأرض حقنة غيض الإبر كليلة واستخدام الفلاتر حقنة للحد من التلوث المحتملة. مع تقنيات جراحية دقيقة العقيم ، ومواد القسطرة السليم والدقيق تقنيات الصيانة القسطرة ، فمن الممكن للحفاظ على براءات الاختراع والقسطرة الحيوانات السليمة لفترات طويلة من الوقت (عدة أسابيع).
1. قبل بدء العملية الجراحية
ملاحظة : قبل البدء في أي إجراءات الحيوان التأكد من الحصول على الإذن المناسب من خلال المؤسسة / المنظمة. كما هو الحال مع جميع العمليات الجراحية البقاء على قيد الحياة ، تأكد من أن يتم إجراء الجراحة تحت ظروف معقمة وتستخدم لعلاج الألم والمضادات الحيوية المناسبة اللازمة لتحقيق نتائج ناجحة.
2. التحضير للمناطق الجراحي لالتنسيب القسطرة
3. نفق القسطرة
4. ادخال قسطرة في الوريد الفخذي والشريان (الشكل 3)
5. الجراحية ختامية
-- على المدى الطويل حل محل صيانة القسطرة المالحة مع الهيبارين يو / 20 مل / المالحة.
6. صيانة القسطرة (يجب ارتداء القفازات المعقمة أثناء إجراء)
7. أخذ عينات الدم (يجب ارتداء القفازات المعقمة أثناء إجراء)
المشبك القسطرة مع ملقط مبطن.
8. تسريب المخدرات
10. ممثل النتائج
وجرى قياس ضغط الدم ممثل من حيوان واعية تتحرك بحرية ويرد في الشكل 4. كانت تدار فينيليفرين (3 ميكروغرام / كغ ، والرابع) ، ومستقبلات ألفا الأدرينالية 1 ناهض ، في خط الوريد الفخذي لزيادة ضغط الدم ، بينما في الوقت نفسه قياس ضغط الدم الشرياني من خط الفخذ. فينتولامين (4 ملغ / كلغ ، والرابع) ،a غير انتقائية ألفا الأدرينالية خصم ، ثم كانت تدار على خفض ضغط الدم.
الشكل 1. تشريح بلانت من الأنسجة. مع الفئران على ظهره ، وكنت قد قدمت ما يقرب من نصف بوصة (12 ملم) شق على زاوية من الساق الخلفية ، واستخدام مقص حادة أو غير حادة المرقأة سوف تشريح النسيج الضام لفضح شريان الفخذ والوريد.
الشكل 2. الفصل بين الشريان والوريد الفخذي من النسيج الضام.
الشكل 3. التنسيب القسطرة. فانا باستخدام مقص تشريح الدقيقة مكان تقريبا من خلال شق صغير السفينة من الطريق ¼ بزاوية 45 درجة (أعلى) ، ومكان جيد يميل إلى ملقط عشرشق ه واستخدام زوج آخر من ملقط تغذية قسطرة في الإناء (وسط). أخيرا ، عند الانتهاء من وضع القسطرة خياطة القسطرة في مكان (القاع).
الشكل 4. الممثل قياس ضغط الدم مأخوذة من حيوان واعية تتحرك بحرية.
تاريخيا قسطرة الشرايين والأوردة المستخدمة لسمية حادة ومزمنة رصد عينة الدم ضغط الدم ، وتسليم المواد في نموذج الفئران حيوانات التجارب 1-4. وهناك فائدة كبيرة من هذه العمليات الجراحية أدوات القياس هو أنه يسمح بإجراء إجراءات الرصد ، بما في ذلك ادارة الدم أخذ عينات المخدرات ، ومراقبة ضغط الدم ، مع الحد الأدنى من الاضطرابات و / أو الإجهاد على الحيوان 1. وقد كتب العديد من البروتوكولات والمحققين ومنهجيات محددة مختبرهم الذي ينفذ عملية جراحية 5-8. الفيديو والرسوم التوضيحية إظهار ما لدينا مختبر وجدت لتكون ناجحة فيما يتعلق الشرياني والوريدي الفخذ إجراء القسطرة.
ويشيع استخدام الفئران في المختبر لعدد وافر من الدراسات العلمية نظرا لصغر حجمها وسهولة في التعامل معها. هناك عدة مواقع حيث مزمنيمكن وضعها داخل القسطرة حيوان ، بما في ذلك حبل الوريد ، الشريان الأورطي في البطن ، والشريان السباتي وشريان الفخذ ، على سبيل المثال لا الحصر. وكان الموقع الفئران الفخذ لنتائج قسطرة المزمن في ازدياد طول سالكية القسطرة وأسرع الانتعاش من وزن الحيوان قبل العمليات الجراحية مقارنة مع المواقع الأخرى 9 القسطرة.
وقد استخدمت العديد من المحققين سكنى القسطرة لأخذ عينات الدم الحاد وكذلك 1-5،11-13 المزمنة. في توجه العديد من الدراسات مطلوبة الدم متعددة من الحيوانات وإقناء ؛ إدخال القنية الخارجية / قسطرة واحدة هي المنهجية التي من المفيد ، نظرا لطبيعة غير مؤلمة والخمسين ؛ وعلاوة على ذلك يمكن القيام به في حين أن الحيوانات واعية ، وبالتالي لا يقتصر من آثار التخدير وأيضا يمكن للحيوان أن تتحرك بحرية 1،10. كانت أفضل طريقة يمكن من خلالها الحصول على عينات من الدم وقياس هرمونات الاجهاد لدى القوارض 6،13 جدل لفترة طويلة. فيما يتعلق ستودي الدوائيةوفاق ، قسطرة للبحوث الحيوانية تصاريح المتكررة اخذ عينات من الدم مع الحد الأدنى من ضبط النفس عند استخدام نظام قسطرة مزروع مزمنة. بالإضافة إلى ذلك ، أظهرت الدراسات انخفاض تركيزات القاعدية الأدرينالين ، النورادرينالين والدوبامين في بلازما الفئران تتحرك بحرية (قسطرة الوريد) بالمقارنة مع الحيوانات التي تم التعامل معها (30 ثانية) وضبط النفس ، أو (5 دقائق) 14. طريقة إضافية يمكن من خلالها تمييز الزيادات في الإجهاد من خلال قياس مستويات البلازما الكورتيزون. واقترح في وقت سابق أنه حتى بعد ثلاثة أو أربعة أيام من أوقات الانتعاش الجراحية التي كانت مرتفعة في مستويات البلازما كورتيزون الفئران مقنى المزمنة 15. ومع ذلك ، فقد قرر التحسينات الأخيرة في المنهجية التي لا توجد اختلافات في مستويات خط الأساس كورتيزون البلازما في الفئران حبل الوريد مقنى مقارنة للفئران uncannulated 16. بالإضافة إلى ذلك ، HPLC منهجية لتحليل وكشف أيضا أن الكورتيزون corticosterone مستويات مرتفعة من الإجهاد ضبط النفس ، ولكن مستقرة بعد القسطرة الوداجي 16.
الاستخدام المزمن إضافية للقسطرة هو قياس ضغط الدم ومعدل ضربات القلب لدى القوارض. هناك العديد من المنهجيات التي تستخدم لقياس ضغط الدم ومعدل ضربات القلب في الفئران ، وهذه تشمل الكفة الذيل غير الغازية منهجيات وإجراءات القياسات اللاسلكية والمباشرة القسطرة سكنى. كل أسلوب له مزاياه وعيوبه ، والتي وصفها بالتفصيل في منشورات أخرى. يمكن زرعها سكنى مملوءة بسائل القسطرة في الشرايين متعددة داخل الفئران. الشريان الفخذي ما هو إلا أحد الشرايين التي يمكن استخدامها لهذا التدبير. تدابير لضغط الدم ومعدلات / قلب ، يتم توصيل نهاية البعيدة للقسطرة لمحول الضغط معايرة. يمكن أن يضم قسطرة في الربيع التي توفر الحماية متصلة قطب للسماح بحرية الحركة للحيوان ، أو تعلق على زر SURGIمزروع أتوماتيكيا للحيوان. القسطرة سكنى لها ميزة تقليل الإجهاد على المدى الطويل على الحيوان 17،18. بالإضافة إلى مواد غير مكلفة ، والمعايرة من السهل اتخاذ تدابير الضغط المستمر والتدابير طويلة الأجل ويمكن الحصول عليها تحت ظروف الضغط المنخفض نسبيا لعدة أسابيع 19. سنكون مقصرين إذا كنا لم يذكر أن هناك عيوب لهذه التقنية ، بما في ذلك ، بل هو أسلوب الغازية جراحيا ، مطلوب صيانة القسطرة للحفاظ على سالكية ، وتلف الشريان نتيجة لزرع القسطرة و المحتملة للعدوى على سبيل المثال لا الحصر.
لاتخاذ تدابير المزمنة التسجيلات ضغط الدم مباشرة من القسطرة الشريانية مزمن مزروع أكثر تحديا تقنيا ولكنها أكثر دقة ويمكن أن يتم من دون إزعاج مستمر الحيوان. الذيل الكفة القياسات أقل دقة ، إلا أنها لا تتطلب عملية جراحية ، ويمكن أيضا أن أكررأد. الذيل الكفة منهجيات لا تتطلب معالجة ، وكذلك التدفئة من الحيوان إلى تمدد في الأوعية الذيل لتسهيل الكشف عن نبض 20. يمكن التعامل مع الحرارة والضغط واضاف تؤثر قياسات ضغط الدم ، وبالتالي لا توفر مقاييس دقيقة حقا. وعلاوة على ذلك ، وعدم مباشرة الذيل الكفة الأسلوب لا تسمح سهلة اخذ عينات من الدم في وقت واحد أو إدارة المخدرات.
طريقة إضافية يمكن من خلالها قياس تحقيق المباشر باستخدام منهجية القياس عن بعد. القياس عن بعد يسمح عالية الجودة تسجيلات لضغط الدم (والتدابير الأخرى) بشكل مستمر لفترات طويلة من الزمن في الحيوانات واعية تتحرك بحرية دون قيد أو التخدير 18. ومع ذلك ، وأجهزة القياس عن بعد بينما المثالية هي مكلفة جدا. بالمقارنة مع القياس عن بعد ، واستحقاقات قسطرة ما يلي : انخفض "الإعداد" والتكاليف التشغيلية ، والقدرة على إدارة المخدرات بسهولة وسهولة أخذ عينات الدم في الحيوانات واعية تتحرك بحرية. وadministratويمكن القيام ايون المخدرات والمؤثرات ، والحصول على عينات دم من الحيوانات المزعجة البحوث بينما الحد الأدنى من الحيوان ، وبالتالي تقليل الإجهاد على الحيوان ، والسماح لقياس أكثر دقة.
وترعى الإنتاج وحرية الوصول من هذه المادة عن طريق الفيديو ADInstruments.
الكتاب نود أن ننوه الدكتور أندرو الملك ، والملك دكتوراه كاترينا للمساهمة في الرسوم التوضيحية. منحة المعاهد الوطنية للصحة : R00HL087927.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
اسم | نوع | شركة | كتالوج رقم |
قسطرة الشرايين | مستهلكات | الديوان تسريب | RFA - 01 |
القسطرة الوريدية | مستهلكات | السلع العلمية ، وشركة | BB518 - 20 - V & BB31785 2 / |
27G 1 / 2 "بلانت الإبرة | معدات | تركيب متكامل لحلول ، وشركة | 9991113 |
23g 1 / 2 "بلانت الإبرة | معدات | تركيب متكامل لحلول ، وشركة | 9991109 |
PowerLab/8SP | معدات | ADInstruments | w.adinstruments.com/products/hardware/research/product/PL3508 / "الهدف =" _blank "> ML765 |
رباعية جسر | معدات | ADInstruments | ML118 |
LabChart 7.2 | البرنامج | ADInstruments | |
بي بي محول مع محبس والكابلات | معدات | ADInstruments | MLT844 |
قناة واحدة دوارة | معدات | Instech | 375/22PS |
محور واحد مكافحة الرصيد جبل دوارة | معدات | Instech | CM375BP |
كوفانس تسريب وتسخير | معدات | Instech | CIH105 |
الجدول الأعلى وحدة التخدير Isoflurane | معدات | بروتك الدولية ، وشركة | 61020 |
القوارض قناع التخدير | معدات | بروتك الدولية ، وشركة | RAM - 02 |
القوارض التعريفي غرفة | معدات | بروتك الدولية ، وشركة | RIC - 01 |
اسطوانة غاز التخدير تصفية | معدات | بروتك الدوليةالقاعدة ، المؤتمر الوطني العراقي. | 80120 |
هود منضدية تدفق رقائقي | معدات | خفير إير سيستمز ، وشركة | SS - 200 - وسل |
اوستر الذهبي A5 | معدات | اوستر المنتجات الفنية | 78005-140 |
الألياف البصرية الخفيفة مع دليل معقوفة مزدوجة | معدات | LW العلمية ، وشركة | سوء 1502 - DGG1 |
Deltaphase الوسادة متحاور | معدات | برينتري العلمية | 39DP |
القطن ذات الرؤوس القضبان الرفيعة | مستهلكات | سولون شركة التصنيع | 36200 |
الشاش الإسفنج 2 "X2" | مستهلكات | كيندال أمني دولي | 2146 |
5-0 نايلون خياطة | مستهلكات | Ethicon | 661G |
4-0 خياطة الحرير | مستهلكات | دكnatel | 8 - S ، 136075-0208 |
نسيج لاصق | مستهلكات | 3M | 1469SB |
منشقة وملقط التثبيت | معدات | جورج تيمان وشركاه | 160-55 |
طالب الملقط الأنسجة | معدات | غرامة أدوات العلم ، وشركة | 91121-12 |
الملقط الصغير / الملقط السرخس | معدات | جورج تيمان وشركاه | 10-1942 |
الملقط اضافية غريف الجميلة | معدات | غرامة أدوات العلم ، وشركة | 11152-10 |
أولسن ، حامل الإبرة Hegar | معدات | غرامة أدوات العلم ، وشركة | 12002-12 |
طالب هالستيد البعوض المرقأة | معدات | غرامة أدوات العلم ، وشركة | 91308-12 |
روتشستر الأنشودة القوةع | معدات | البحوث الطبية الحيوية الآلات ، وشركة | 31-1640 |
طالب مقص جراحي | معدات | غرامة أدوات العلم ، وشركة | 91402-12 |
دومون الملقط | معدات | غرامة أدوات العلم ، وشركة | 11251-35 |
مقص تشريح الصغرى | معدات | جورج تيمان وشركاه | 160-210 |
الحول مقص | معدات | غرامة أدوات العلم ، وشركة | 14075-11 |
هارتمان المرقأة | معدات | غرامة أدوات العلم ، وشركة | 13003-10 |
نسيج مقص | معدات | جورج تيمان وشركاه | 160-150 |
ضام | معدات | صنع مخصص |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved