ソース: ケイ ・ スチュワート、RVT、RLATG、CMAR;ヴァレリー A. シュレーダー、RVT、RLATG。ノートルダムのノートルダム大学

として多くの研究プロトコールでは、物質が動物に注入することを必要とする、ルートの配信と物質の量は、正確には確認する必要があります。マウスとラットで利用できる管理のいくつかのルートがあります。使用するルートは、注入する物質のいくつかの要因によって決まります: ソリューション、所望の投与量と溶液の粘性に必要なボリュームの pH。厳しい組織の損傷は、物質が適切に管理されている場合に発生します。このビデオを見て様々 な拘束方法とほとんどの技術的な詳細が一般的に使用される注入ルート

生物医学研究で使用されているテスト混合物の多くは、市販されていない新規の物質は、適切な物質の準備が重要です。不妊、粘度、および生理学的な互換性テスト混合物中の定式化の根本的な懸念-溶解中断している車両に対処必要がありますか。散剤または、非経口的に与えられたかどうか投与ソリューションは適切に吸収されると、組織の損傷を防ぐために化合物の適切な pH に生理学的バッファーする必要があります。溶液の粘度の注射経路の決定要因であるかもしれない。厚すぎてマウスでよく使われる注射部位に必要な小さなゲージの針を通過する物質は、経口投与の再定式化を必要があります。非経口的注入は、すべてのソリューションを防ぐために滅菌する必要があります動物に病原体を導入します。¹

注射用針選択投与経路は、溶液の粘性、動物のサイズに基づきます。一般に、ソリューションを管理する実行可能な最小のゲージを選択必要があります。これは通常マウスで 22 30 ゲージとラットのための 20-25 ゲージです。選択される注射器は再び正確な投薬に必要な正しい目盛りで可能な最小です。^2,3,4

静脈注射のためいくつかのルートがあります。このビデオの目的のため、最も一般的に使用されるルート (皮下 [SQ]、腹腔内の [ip アドレス]、[IV] 静脈内、筋肉内の [IM]) を説明します。皮 (ID) などの他の注入技術は、脳、心臓、足蹠注射、経鼻、レトロな軌道神経叢を介して静脈は別のビデオで覆われている

ルートにしたがって変化する化合物の吸収率。IV ルートは、吸収に必要な任意の時間を排除すること、血流に直接物質を配置します。注入された IM が筋肉組織中の血管の数が豊富なため急速に吸収される物質。IP 注射は静脈投与が吸収メカニズムは経口投与により実際に似ています。皮下投与は大量の液を管理する便利な方法です。吸収率、持続的な効果を提供する他のルートよりも遅くなります。ルートの選択は実験的プロトコルの重要なコンポーネントです。⁴

皮下投与皮膚層と筋に、皮膚を持ち上げることによって作成された仮想空間と材料の場所します。これは、液体はゆっくりと吸収され、余分な水分は腎臓を介して排泄されるすぐより大きなボリュームの安全な注入できます。これにより、流体のオーバー ロードと肺浮腫、静脈内に注入される大量に起因することができます。選択した針は注入される材料の粘度になります最小サイズ可能をする必要があります、一般的に 22 30 ゲージ針マウスと 22 25 ゲージの針のラット。注入量範囲 0.1 ml から 0.5 ml マウス、ラット、注射部位ごとの 1.0 ml に 0.1 ml

IV または IM ルートよりも大量の配信に使用できるため、IP ルート、齧歯動物で使用されます。しかし、物質の吸収管理 ip アドレス、IM または IV ルートはかなり低速です。この方法で投与される物質は、血流に入る前に肝代謝を受けると考えられています。⁵再び、選択した針は注入される材料の粘度になります最小サイズ可能をする必要があります、一般的に 22 30 ゲージ針マウスと 22-25 ゲージの針のラット。マウス、マウスのサイズに基づいて注入量 1.0 ml に 0.05 ml 注入ボリュームの範囲。ラット、範囲は 1.5 ml の注射部位ごとに 0.1 ml

、IM の注射が一般的な大きな動物で使用マウスおよびラットは彼らの小型のために最小限の用途があります筋肉します。不適切なまたは繰り返し筋肉内注射は、麻痺や筋肉の壊死をもたらす神経の損傷を引き起こす可能性が。選択されている針は、一般的に 27-30 ゲージを注入される材料の粘度は、最小のサイズ可能なはずです。マウス、殿部筋肉注射部位につき 0.05 ml の最大 0.01 ml 注入ボリュームの範囲。腓腹筋の注入量は、0.05 ml の最大を持ちます。対照的に、ラットを殿部筋肉注射部位あたり 0.3 ml の最大 0.01 ml から注入ボリューム範囲。腓腹筋の注入量が 0.1 ml の最大を持つ

静脈注射は、循環システムにすぐにそれを導入物質管理の最も効果的なルート。しかし、IV 投与マウスにおける利用の小柄な血管とその有用性は限られています。静脈内投与が必要なを繰り返した場合、動物の福祉のためバスキュラー アクセス ポートまたはその他の特殊な注入装置の使用を考えるべき。選択されている針は、一般的に 27-30 ゲージを注入される材料の粘度は、最小のサイズ可能なはずです。マウスの大きさに基づいて注入ボリューム範囲 0.05 ml から 0.5 ml 注入量, 最大

テーブル 1。マウスおよびラットのルートによっての適切な針ゲージ、注射ボリューム範囲

1。 皮下注射

1. 手動で抑制する片手の拘束を介してマウスを保持します。つかめば、テーブルまたはその他のセキュリティで保護された表面に残りの部分にマウスを許可します。マウスの体に圧力を置くことを避けるようにしてください
。
2. は、呼吸を妥協することができますマウスに過度な重量を避けるためにテーブルの上の手のかかとを置きます。マウスは、商業デバイスでも拘束することができます。、ラットの商業拘束デバイスを使用するをお勧めします。
3. 皮膚をつかんで引き上げて皮膚のテントを作成します。拘束デバイスを使用して、鉗子が一番上のスロットを通して肌を把握する必要があります
。
4. は、背骨には、テントの皮の折目の基部に頭から離れる方向に平行の針を挿入します。頭蓋骨とパンクの可能性を避けるために頭から針を直接マウスの頭蓋の骨は非常に薄い。ラットには首の筋肉注射を引き起こす可能性のある自分の頭をリアに傾向がある
。
5. は、肌に優しい滑空できるようにを針ベベルを挿入します。針が皮膚をつかむ指の下に挿入されている注意してください。鉗子、針棒の傷害の可能性を排除でバイオハザードの記事を注入するときは、安全性を向上させるため、皮膚を握った
。
6. は、適切な配置を確認するプランジャーを引き戻します。注射器に空気を描画すると、それは針の先端が皮膚の下の位置にないと取り下げし、再配置する必要がありますを示します。プランジャーは後ろで束ねて、針の適切な配置を示します、注射が進むことができるときに背圧がある場合
。
7. は、安定した動きでゆっくりと物質を注入します。注入資料の損失を防ぐためには、注入後に一時停止、少し皮膚の下の針を回転させるし、針を撤回しながら注射部位の皮膚をつまむ
。

図 1。マウス皮下注射

2。 腹腔内投与

1. マニュアル片手の束縛メソッドを使用します。それはマウスの回転を防ぐために首に十分に高く配置されるように手を調整します
。
2. 親指と人差し指の間に首のうなじにたるんだ皮膚を把握します
。
3. いずれかの 2 番目、3 番目、および 4 番目の背面に沿ってたるんだ皮膚を固定することによって後部四分の一を安定させるための指と親指の 3 番目と 4 番目の指の間尾を配置することによってベース
。 ラットの
4. IP インジェクション 2 人、ラットおよび他の注入を実行を抑制する 1 つが必要です。
   1. 肩首と背中に手のひらのそれぞれの側に人差し指と中指を使用してラットの把握。親指と薬指と前方または後方の動きを防ぐために胸を囲む必要があります。首の両側に指の位置はその頭を回すからネズミを防ぐことができます
   。
   2. ラットを持ち上げて腹側腹部を公開するを有効にします
   。
   3. 足と尾をしっかりと把握し、体から離れてそれらを拡張する後部四分の一を安定させる
   。
5. マウスまたはラット腹部、それが上向きに確保を公開するを配置します
。
6. 約 30 ° の角度で、前方に落ちる腸を許可する下向きの頭の動物を傾ける
。
7. 注入ランドマークは、次のとおり:
   1. 注入するエリアは頭側 (側腹部の側面に) から体の腰の上部に水平方向に横切って架空の線によって接される
   。
   2. 正中線は内側の縁は、反対方向に生えた毛が満たしていると認識です。毛のない動物の正中線は肛門に直線で、剣から拡張します
   。
   3. 外側縁は男性の包皮にヒップの上から、ヒップと次の女性の乳首の上からライン
   。
   4. これは安全に注射の三角形の領域を提供します
   。
8. ランドマーク内資料の注入
   1. 前述三角形で、正中線から背骨に垂直の針を挿入します。腹部の両側を活用した安全に注射体の平面に 90 ° の角度で針を配置することができます。注射部位の交替により組織の外傷を最小限に抑えるよう、これは複数の注射では特に重要です
   。
   2. 針は 90 ° の角度で置かれたとき、それは " ポップ " 深さの容易に定量を可能にする、腹部に。また、これは針が正しく配置されている視覚と触覚キュー
   。
   3. 腹腔内、膀胱や腸、血管構造ではなく配置を確保するため注射器を吸い出しなさい
   。
   4. 避けるため注入陰嚢の嚢に記事を管理するを防ぐために雄のマウスに尾の方。外傷を防ぐために女性の乳首には関わらないようにします
   。

図 2。マウスの腹腔内注射用ランドマーク

3. 筋肉内注射

1. 拘束この技はマウスおよびラットの 2 人または拘束チューブの使用が必要です。拘束デバイスを利用した単身メソッドではここで説明します。
   1. 拘束装置で動物を配置します
   。
   2. 動物は、チューブ、チューブから後ろ足で動物の位置に尻尾を把握します
   。
   3. 脚を拡張し、膝関節の曲げを防ぐ大腿骨の頭蓋の部分で側面の皮膚を把握します
   。
   4. 拘束デバイスを移動する動物とテーブル上に立っている ' s 頭が下向きまたはテーブルに横になっている注射を実行している間、デバイスの安定化を許可するように技術者の体に向かって指摘した
   。
   5. 注入のランドマークは以下のとおりです: マウスとラットの両方の脚が、後肢で最大の筋肉で構成される臀部の筋肉 (尾側の太ももの筋肉) と小さい; 後肢の二番目に大きい筋肉は腓腹筋 (ふくらはぎの筋肉)。注射は、脚の尾の側面から作られます。
      1. 検索、殿筋質量、大腿骨の後方。骨を触診することができ、大きな筋肉が簡単に感じられます
      。
      2. 後面から脚の正中線が尾に飛節のポイントから実行されることに注意してください。髪があります、それは外側と内側のサーフェスから反対方向に大きくなっても一緒に、来るリッジ
      。
      3. 注射は、正中線を太ももの外側面に向けて作られています。これは神経や脚の内側の表面にある血管の損傷の可能性を低減
      4. 外側伏在静脈の位置の注意深い考察と後部側面から腓腹筋に作られた注射が行われています
      。
   6. ランドマーク内資料の注入
      1. 臀筋の 5 mm の最大深さと腓腹筋の 3 mm の最大値を上記のように正中線を大腿骨に垂直に針を挿入します
      。 筋肉組織内の針の余分な動きへの外傷を避けるため
      2. を防止する必要があります。注射器は注射を実行するための手の位置の変更を必要としない方法で開催する必要があります
      。
      3. 筋肉内のそしてない血管の配置を確保するため注射器吸引します
      。
      4. は、安定した、流体の動きで材料を挿入します。ない筋肉の遅い展開を許可するよう急速に注入を行います。急速静注は、組織の外傷を原因となります
      。

図 3。ラットの臀筋に筋肉内注射します

4。 尾静脈を用いた静脈注射

1. 動物の拘束は動物の麻酔かどうかに依存しているまたは目がさめています。
   1. 用円筒鋼管意識下マウスやラット、毛や裸を除いて動物。毛のない動物の油性の性質のため、硬質プラスチックに付着する傾向がある彼らの皮膚再配置およびアクリルの restrainers からそれらを削除することは困難です。したがって、柔軟なプラスチック製のコーンを使用します
   。
   2. 照明プラットフォーム、温水のプラットフォーム、およびマウスが尾の張力を厳密に円錐形で保存されている硬質のプラスチック コーン他の噴射装置が含まれます
   。
   3. 麻酔下マウスには拘束が必要があります
   。
   4. 暖かい体全体や尻尾の血管の血管拡張を確保するためテールだけ。
      1. 媒体や循環水毛布 on 電気暖房パッドで体全体を暖かきます
      。
      2. 熱源に包まれた拘束装置で動物を配置します
      。
      3. は、動物を密接に観察、血管を拡張させるとすぐに熱源から取り外します。体全体が地球温暖化は、ケージに指示熱ランプを使って実現できます。熱ランプを使用する場合、動物観察されなければならない密接にそれらを過熱しがちだと
      。 タオル、湯瓶から温湿布を使用してまたは暖かい水に尾を水没、体全体が温暖化ができないとき、一人で尻尾を加熱するときの
      4. を実現できます。注意は、湯たんぽ、温めたタオルと暖かい水の温度コントロールを持っていないので尾の書き込みを避けるために採用する必要があります。最初過熱する熱源が一般的です。これらの熱源もすばやく冷却します
      。
   5. ・ ティシュー ・ オイルの使用は血管の可視化を強化する別の方法。
      1. 組織オイルに綿の先端アプリケータを浸しし、安定化のためスイングアー尾の部分からもオイルを適用します。ティッシュ オイル原因血管をより明確に定義された表示します
      。
      2. が、市販皮膚と蒸発を伴う血管拡張の温暖化を作成する定式化に化学物質が含まれている無害のオイルです。これらのオイルを適用し、血管が表示されてとき、いくつかの瞬間後余分な油はコットン ボールを持つ拭い
      。
      3. すべてのオイル尾を保持するためにより困難にすることができます
      。
      4. オイルを使用する場合、注入しなければならないすぐに血管の可視化します
      。
   6. 注入ランドマークは、次のとおり:
      1. 外側尾静脈、尾の両側に位置します。また、背側と腹側中線尾の注入の目的のために適しているないに沿って走る血管があります
      。 外側の血管注入の容易さのために直面しているので、
      2. 、落で動物を回転できます。注射用より受諾可能な位置に船をもたらすに尾をオンことができますまたは、します
      。
      3. 血管が非常に表面的です。表面的、尾の根元に届くようになる
      。
   7. 記事の尾静脈注入スキルが必要です。血管の外傷を避けるためには、針の余分な動きを防がれなければなりません。注射器は注射を実行するための手の位置の変更を必要としない方法で開催されます。
      1. が尾を配置、容器が表示され、張力の下で握られました。尾に過度の緊張は適用されませんまたは血管を伸ばすことができるし、血流が減少した
      。
      2. できるだけ限り遠位血管に直接針を配置します
      。
      3. はわずかな圧力を適用し、針を脊椎に尾平行にスライドさせます。釣り針を避けるため下方、針が血管を縦断面。内腔に進出は、少なくとも 2 ミリメートル針が容器に表示する必要があります
      。
      4. 容器の破裂を避けるためにゆっくりと、流体の動きで材料を挿入します
      。
      5. 注入中に尻尾に特別な注意を払う。容器に正しく挿入されて、容器に流れる注入材料が抵抗なく感じています。注入材料に血液が押し出されると血管を湯通しする必要があります
      。
      6. 針が、容器内でない場合があります強い抵抗を注入します。力で注入材料が皮下の領域がいっぱいし、尾がバルーンします。静脈内に注入するのに設計されている材料が周囲の組織に苛性ソーダありますを直ちに停止します。針を撤回し、尻尾に頭側より別の注射を試みる
      。
      7. 成功注入後、針を撤回し、ケージに動物を返す前に良い止血を保証するために、注射部位に圧力を適用します
      。

図 4。マウスに静脈注射を尾します

物質管理は、動物を使用する実験的プロトコルの一般的なコンポーネントです。配達のルートを選択すると、管理する動物、動物の大きさ、量と、流体の粘度を投与を担当する技術者の技術的な習熟度を含む、多くの要因を審議する必要があります。これらの要因を慎重に考慮する動物の幸福と実験の全体的な結果強化されます

1. Turner, P.V., Pekow, C., Vasbinder, M. A. and Brabb, T. 2011. Administration of substances to laboratory animals: equipment and considerations, vehicle selection, and solution preparation. JAALAS. 50:5. 614-627.
2. Shimizu, S. 2004. Routes of Administration in The Laboratory Mouse. Elsevier.
3. Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B. F., Pritchett-Corning, K. R. 2012. Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats. J. Vis. Exp. (67), e2771, doi:10.3791/2771
4. Turner, P. V., Brabb, T., Pekow, C., Vasbinder, M. A. 2011. Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider. JAALAS. 50, 600-613