齧歯動物識別私

ソース: ケイ ・ スチュワート、RLATG、RVT CMAR;ヴァレリー A. シュレーダー、RVT、RLATG。ノートルダムのノートルダム大学

生物医学研究の基本的な要件は、研究動物の適切な id です。右の動物がプロシージャとデータ収集のために使用されているが不可欠です。実験用マウスやラットは次の永久的な方法で識別できる: 耳タグ、耳パンチ コード、マイクロ チップの注入、成体マウスのテール入れ墨および新生児のためのつま先の入れ墨。染料・ マーキングペンの一時的な方法は、急性の研究も使用できます。このビデオでは、タグ付けと動物の調査の種類について、それぞれのメリットと同様に、マウスおよびラットの耳の技術的な側面をカバーしています。(別のビデオで説明) 各動物の基本的なマニュアル抑制技術の知識は、これらの識別方法を正しく完了するために必要です。

耳のタグは、安価で簡単に行うには、結果として、個々 のマウスおよびラットの同定に一般的に使用されます。タグは、一連の数字と文字の組み合わせでオーダーメイドすることができます。マウス/ラット系統またはに原則捜査官 (PI)、記録管理やデータベース管理、特に大規模な繁殖コロニーでの側近に特定のコードを割り当てることがある複数の系統や小僧。また、市販のタグのさまざまながあります。金属タグそれらに刻まれた文字であります。このエッチングは明らかに、それをマウスを使って作業がしばしばタグのサイズが小さいためタグのコードを読むためにそれを拾う必要があります。他のオプションは、数字や鮮やかな色の背景の文字とプラスチックのタグまたはプラスチック表面にバーコードのタグします。これらのオプションの両方は、動物を扱うことがなく読めるようにタグを許可します。プラスチック製のタグに別の利点は、mri との互換性です。

耳にタグの位置は、いくつかの不幸な結果を持つことができます不適切な位置決めに重要です。彼らはか耳介で曲がりが発生、動物の移動を妨害または、ケージングの任意の部分をキャッチするよう、タグを配置する必要があります。タグがあまりにも近くに配置されている場合引き裂かれた耳介の組織から簡単に耳の端。頭に余りに近く位置し、頸部の皮膚は炎症、痛み、運動制限が作成されますタグでキャッチできます。これは、タグ、耳からリッピングまたはタグに巻き込まれる左足負傷動物から自己トラウマに可能性があります。適切な配置とテクニックのトレーニングは不可欠です。¹

タグは、マウスやラットの個人識別子を提供する間、彼らは絶対ではありません。タグは戦い、過剰グルーミング、自己外傷や感染症、感受性系統の皮膚炎のため失われます。²ラット特に耳タグさほど寛大は、しばしば自己トラウマを与えた、それらを削除します。ラットのより積極的な繁殖行動は、耳介から引き裂かれて耳タグにつながることができます。マウスやラットは、ペアやグループは建物、1 つ以上の動物の耳タグの損失があれば面倒です。識別 - タグ、あるいは尻尾や足指のタトゥーの反対側の耳で使用されるパンチ コードなどの二次形態は、この問題を回避するために-使用する必要があります。施設はタグ耳の選択と他の耳やつま先に使用されるコードの両方を標準化する必要があります。ケージのカード上にすべてのコードを明記してください。

耳パンチ コードの使用により、迅速かつ簡単な識別法の技術制限があります。一般的に使用されるコード使用、通常 100 に 399 の最大可能な数の上限があります。耳パンチ コードを読み取る、ほとんどの動物は、首筋に把握する必要があります。パンチが同時に達成されるべき動物の同定と遺伝子型サンプリングを可能にする PCR 遺伝子型の組織サンプルとして倍増できます。繰り返し処理から、動物にストレスの少ないでこの結果します。³

耳パンチの 3 つの様式がある: はさみパンチ、親指パンチとレバー パンチ。すべてが均等に有効であるが、それぞれに長所と短所があります。たとえば、ラットの年齢として彼らの耳の皮膚が厚くなります。彼らが引き離される幼若ラットの耳パンチを実行することをお勧めします。、身分証明書を必要とする大人のラットの吸入麻酔の使用を考えるべきです。人間工学に基づいて、レベルのパンチは特に、古いラットの厚い耳の親指パンチよりも使いやすいです。ただし、これらのパンチの両方はつまむ指の動きが必要です。はさみパンチ手根管の疲労や怪我を避けるため、つまむ動きを必要としない人間工学的利点があります。対照的に、親指パンチは、エッペン チューブにサンプル、組織材料のヒントとして収まるジェノタイピングを収集するため便利です。使用するパンチのスタイルは、タスクおよびラットの年齢を実行する個人によって決められるべきです。

、ラットの金属タグはよく使われますが、研究を示しているそれらを使用する影響があります。炎症、腫瘍性病変とも慢性的な痛みは、数ヶ月の金属の耳タグを着用している動物で観察されています。^3,4,5,6タグ除去されるべき速やかに耳から調べ、治療、その後の負傷、副作用がある場合、必要に応じて獣医のスタッフによって。

適切なケアとメンテナンスのパンチは、その使用方法を拡張します。パンチのすべてのタイプは、消毒剤でそれらをきれいにしアルコールで洗浄し勧め場合オートクレーブ、鈍くなります。その後、彼らは徹底的に錆を防ぐために乾燥が必要があります。PCR のパンチを使用している場合彼らべき浸し 3 分残留の DNA または RNA を削除するソリューション。使用前にアルコールで洗浄、乾燥拭いています。

1. 耳パンチ同定

耳パンチ コードは、個々 の動物のラベルに迅速かつ安価な方法として開発されています。耳パンチの 3 つの様式がある: はさみパンチ、親指パンチとレバー パンチ。動物の右耳は数十または何百ものために耳の中央の左耳一桁に使用されます。

1. 耳が簡単にアクセスできるように、動物を抑制します。ほとんどのマウスは、耳離乳時の個体識別のためのタグです。彼らのより小さくより壊れやすいサイズのための穏やかな処理が必要です。いくつかのマウスは、後肢がケージの上やカウンター トップなど表面に休むことができる場合は苦労する可能性が低く。
2. 動物の実験の番号に対応するケージ内でそれを識別するために必要な耳パンチを決定します。
   1. パンチは、ノッチまたは使用されるコードによって穴になります。
   2. 耳タグの最後の番号は、身分証明書の第 2 の方法だと多くの場合耳パンチ識別子として使用されます。
   3. 動物が安定しておりグループでの短期留学の場合、彼らは連続番号を指定できます。耳タグの存在がない場合多くの場合これです。
3. パンチの耳を作る。
   1. ノッチをするためには、パンチは、耳介の端に配置されます。
   2. 穴をするためには、目的の位置に耳介余白からパンチの穴が表示されるよう、パンチで耳を配置します。
   3. 耳の皮膚を切って、しっかりと親指レバー パンチまたはシザー パンチすばやく閉じる圧力を適用されます。
   4. 親指またはレバーのパンチを使用するときに、耳からパンチをそっと持ち上げます。耳から削除するはさみパンチを開きます。
   5. 引っ張るか、または耳をテアリングを防ぐためパンチのねじれを避けます。
   6. パンチは、時間後鈍いか。パンチは耳を切って、パンチをリリース、新しい耳パンチを選択すべき。同じ場所に新しいパンチの位置を変更します。
4. 各使用後きれいにパンチ。
   1. オートクレーブ処理した場合、すべてのパンチの種類が鈍くなります。彼らは消毒剤で洗浄してアルコールで洗浄をお勧めします。錆を防ぐために徹底的に乾かします。
   2. PCR に使用する耳パンチは、残留の DNA または RNA を削除するソリューションで 3 分間定期的にぬれています。使用前にアルコールで洗浄、乾燥拭いています。

図 1。耳はさみパンチを用いたマウスでのパンチします。

2. 耳タグ識別

カスタマイズされた耳タグをマウス系統や探偵の分化が可能アルファベットや数値のコードを持つメーカーから注文できます。金属やプラスチックの耳タグが可能です。

1. 識別される動物の適切な耳タグを選択します。耳タグ製造業者から利用できる適用元の複数の様式があります。必ず、特定のサイズと使用されている耳タグのスタイル適用元を注文してください。
2. 優しく段ボール ホルダーからタグを削除、applier の切欠きの範囲上の穴端が置かれたので、applier にそれを方向づけます。タグの先の尖った端は切り込みの反対する必要があります。
3. 耳が簡単にアクセスできるように、動物を抑制します。動物は、後肢がケージの上やカウンター トップなど、表面に休むことができる場合は苦労するより可能性があります。
4. 正しく配置の耳タグを配置します。
   1. 深く、できるだけ耳のコンチャにタグ番号顔動物の背中のように、耳タグのポイントを置きます。
   2. 動物の鼻に直面して耳タグ番号がある、耳の裏に耳介の基部にタグのポイントを配置します。
5. タグを適用します。
   1. 閉鎖適用元をしっかりと絞る。耳のタグは、一緒に耳とロックを突き刺すでしょう。
   2. 、Applier を解放し、タグ付けの耳が applier の落ちる。

図 2。耳介に正しく配置されている耳タグを持つマウス。

6. 金属の耳タグを削除します。
   注: 場合によっては、金属耳タグを引き起こす可能性が炎症や耳の腫れの。腫れや炎症をしばしば耳介の感染症に します。治療は、タグの除去を含める必要があります。ただし、重度の炎症や感染症の場合、動物は麻酔する必要があります。
   1. 消毒液で湿らせた綿棒でタグの周りからの残骸を削除します。
   2. ワイヤー カッターのエッジからタグ ループの上部をカットします。タグを圧縮、耳をつまむし、さらにダメージが、平らな面にわたって切断しないでください。
   3. 耳を引き裂くことを防ぐために削減しながらトルクを適用しないでください。
7. 耳タグを離れての切り口を広げるためには、止血剤を使用します。
   1. を通じて耳タグをゆっくりとガイド- と止血剤を使用しての耳を。ピアスの穴の拡大を回避し、圧着端が耳を通過しませんので、うちのタグを入れることによって外傷を減らします。
   2. タグがなくなって、アプリケータ、防腐剤に浸した綿の棒で耳を拭きます。
   3. 耳からの膿性分泌物がある場合必要がありますフォロー アップ治療と評価のための獣医のスタッフとの協議をお勧めします。

適切な識別方法を選択するときは、多くの要因を審議する必要があります。各テクニックは、長所と短所が実験のニーズに関連して考慮する必要があります。コストは、他の要因と共に検討する必要があります、技術の使いやすさと、動物に不快感のレベルには、主要な考慮事項が必要があります。^{3, 4}

少ないコスト、手順を簡単に行うための耳パンチ/ノッチ、マウスとラットで使用されます。399 に 100 の上限を持っているほとんどのコードで使用できるコードは限られています。耳パンチ コードを読み取る、ほとんどの動物は、首筋に把握する必要があります。しかし、パンチは、繰り返し処理から動物にストレスの少ないため、PCR 遺伝子の多型の同定と遺伝子型サンプリング、同時に達成できるための組織サンプルとして倍増できます。⁵

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