Method Article
Функциональное транскраниальное допплерография дополняет другие функциональные методы визуализации с его измерением высокого временного разрешения стимул-индуцированных изменений мозгового кровотока в базальных мозговых артериях. В этой статье приводятся пошаговые инструкции по использованию функционального транскраниального допплерографии для выполнения эксперимента по функциональной визуализации.
Функциональное транскраниальное допплеровское ультразвуковое исследование (fTCD) - это использование транскраниального допплерографии ультразвука (TCD) для изучения нейронной активации, происходящей во время стимулов, таких как физическое движение, активация тактильных датчиков в коже и просмотр изображений. Нейронная активация выводится из увеличения скорости мозгового кровотока (CBFV), снабжающей область мозга, участвующую в обработке сенсорного ввода. Например, просмотр яркого света вызывает повышенную нейронную активность в затылочной доле коры головного мозга, что приводит к усилению кровотока в задней мозговой артерии, которая снабжает затылочную мочку. При фТКД изменения в CBFV используются для оценки изменений мозгового кровотока (CBF).
Благодаря измерению скоростей кровотока в основных мозговых артериях с высоким временным разрешением, fTCD дополняет другие установленные методы функциональной визуализации. Целью данного документа по методам является предоставление пошаговых инструкций по использованию fTCD для выполнения функционального эксперимента по визуализации. Сначала будут описаны основные этапы выявления средней мозговой артерии (MCA) и оптимизации сигнала. Далее будет описано размещение фиксатора для удержания зонда TCD на месте во время эксперимента. Наконец, будет продемонстрирован эксперимент с задержкой дыхания, который является конкретным примером функционального эксперимента по визуализации с использованием fTCD.
В исследованиях в области неврологии часто желательно контролировать активность мозга в режиме реального времени неинвазивно в различных средах. Однако обычные функциональные методы нейровизуализации имеют ограничения, которые препятствуют способности улавливать локализованные и/или быстрые изменения активности. Истинное (недрожащее, неретроспективное) временное разрешение функциональной магнитно-резонансной томографии (фМРТ) в настоящее время составляет порядка нескольких секунд1,что может не фиксировать переходные гемодинамические изменения, связанные с транзиторной нейронной активацией. В другом примере, хотя функциональная ближняя инфракрасная спектроскопия (fNIRS) имеет высокое временное разрешение (миллисекунды) и разумное пространственное разрешение, она может исследовать только гемодинамические изменения в коре головного мозга и не может предоставить информацию об изменениях, происходящих в более крупных артериях, снабжающих мозг.
Напротив, fTCD, классифицируемый как модальность нейровизуализации, «визуализация» относится к измерениям времени и пространства, а не к двум ортогональным пространственным направлениям, которые более знакомы в «изображении». fTCD предоставляет дополнительную информацию к другим модальностям нейровизуализации путем измерения гемодинамических изменений с высоким временным разрешением (обычно 10 мс) в точных местах в сосудах базального мозгового кровообращения. Как и в случае с другими модальностями нейровизуализации, fTCD может быть использован для различных экспериментов, таких как изучение латерализации церебральной активации во время связанных с языком задач2,3,4,изучение нейронной активации в ответ на различные соматосенсорные стимулы5и изучение нейронной активации в различных когнитивных стимулах, таких как визуальные задачи6,умственные задачи7и даже производство инструментов8.
Хотя fTCD предлагает несколько преимуществ для использования в функциональной визуализации, включая низкую стоимость оборудования, портативность и повышенную безопасность (по сравнению с тестом WADA3 или позитронно-эмиссионной томографией [ПЭТ]), эксплуатация машины TCD требует навыков, полученных на практике. Некоторые из этих навыков, которые должны быть изучены оператором TCD, включают в себя способность идентифицировать различные мозговые артерии и двигательные навыки, необходимые для точного манипулирования ультразвуковым зондом во время поиска соответствующей артерии. Целью данной статьи по методам является представление методики использования fTCD для выполнения эксперимента по функциональной визуализации. Во-первых, будут перечислены основные шаги по выявлению и оптимизации сигнала от MCA, который перфузирует 80% полушария головного мозга9. Далее будет описано размещение фиксатора для удержания зонда TCD на месте во время эксперимента. Наконец, будет описан эксперимент с задержкой дыхания, который является одним из примеров эксперимента по функциональной визуализации с использованием fTCD, и будут показаны репрезентативные результаты.
Все исследования на людях проводились в соответствии с Институциональным наблюдательным советом Университета Небраски-Линкольна, и было получено информированное согласие от всех субъектов.
1. Поиск сигнала MCA от руки TCD
ПРИМЕЧАНИЕ: "Freehand" TCD относится к работе TCD с портативным преобразователем для поиска сигнала CBFV до начала эксперимента fTCD.
Рисунок 1:Изображение виллизиевого круга и крупных артерий мозговой системы кровообращения. Раздвоение ICA на ACA и MCA отмечено черным кругом. Показан сегмент M1 MCA. Эта цифра была изменена с24. Сокращения: ACA = передняя мозговая артерия; Биф. = бифуркация; ICA = внутренняя сонная артерия; MCA = средняя мозговая артерия. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 2:Транстемпоральное окно (отмечено пунктирным эллипсом), скуловая дуга (стрелка) и подокна11. (A) Фронтальное подоко. (B) Переднее подоко. (C) Среднее подокнь. (D) Заднее подокнь. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 3:Выборка доплеровских спектров и изображений М-режима из средней точки сегмента M1 MCA. (A)Спектр, полученный сразу после применения преобразователя к височному окну, прямо перед ухом. (B) Доплеровский спектр образца в том же месте и глубине, что и(A). Единственное изменение заключается в том, что преобразователь был слегка наклонен вверх (лучше). Как в(A),так и(B)глубина = 50 мм, коэффициент усиления = 50, объем образца = 12 мм, мощность = 420 мВт/см2 и фильтр =100Гц. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 4:Спектральное доплеровско-доплеровское (сверху) и М-модное (снизу) изображение бифуркации ICA в MCA и ACA. Глубина = 65 мм, коэффициент усиления = 50, объем образца = 12 мм, мощность = 420 мВт/см2 и фильтр =100Гц. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
2. Перемещение MCA после установки фиксированного устройства
ПРИМЕЧАНИЕ: Для экспериментов с fTCD необходимо контролировать CBFV в течение 10-90 минут или дольше. Поэтому фиксируемое устройство(рисунок 5)имеет решающее значение для обеспечения стабильности.
Рисунок 5:Субъект носит пользовательское устройство фиксации. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
3. Выполнение маневра задержки дыхания
ПРИМЕЧАНИЕ: Этот раздел приведен в качестве примера функционального эксперимента, который может быть выполнен с использованием экспериментальной установки, описанной в разделах 1 и 2.
На рисунке 3 показан образец доплеровских спектров и цветных М-режимов из средней точки сегмента M1 MCA. Рисунок 3А,В были взяты в одном и том же положении на коже головы, но под разными углами. Обратите внимание, как очень небольшое изменение угла, без изменения положения контакта на коже головы,может значительно улучшить силу доплеровского сигнала, как показано более высокоинтенсивной желтой окраской спектрограммы на рисунке 3B. Отметим также, что M-режим на рисунке 3B показывает две артерии (синюю и красную, соответствующие ACA и MCA соответственно).
На рисунке 4 показан образец доплеровского спектра и М-режима от бифуркации ICA на ACA и MCA. Обратите внимание на перекрывающиеся красно- и синие области в изображении M-режима, обозначающие MCA и ACA соответственно. Также отметим симметрию доплеровской спектральной формы волны при сравнении потока в сторону преобразователя (положительного) с потоком от преобразователя (отрицательным).
На рисунке 6 показаны образцы спектров и изображения в М-режиме из разных временных точек в маневре задержки дыхания. На рисунке 6А показан базовый спектр TCD и M-режим в начале задержки дыхания. Обратите внимание на среднюю скорость 56 см/с. На рисунке 6B показан спектр TCD и M-режим в конце задержки дыхания. Обратите внимание, что средняя скорость теперь увеличилась до 70 см/с. На рисунке 6C показан спектр TCD и M-режим после окончания задержки дыхания. Обратите внимание на недостречу скорости ниже базовых значений, при этом среднее значение снижается до 47 см/с. Обратите внимание, что ACA виден как поток от датчика в доплеровском спектре.
На рисунке 7 показан весь эксперимент с задержкой дыхания. Обратите внимание, что оболочка остается приподнятой в течение примерно 15 с после окончания задержки дыхания, падает до значений ниже, чем в начале задержки дыхания в течение ~ 20 с, а затем, наконец, восстанавливается до исходных значений. Обратите внимание, что ACA виден как поток от датчика в доплеровском спектре.
На рисунках 6 и 7 показана хорошая интенсивность сигнала в mcA-части спектра TCD (MCA представлена положительными скоростями); Обратите внимание, что белая линия, представляющая оболочку, очень точно следует за спектром TCD, когда спектр яркий. Спектры рисунков 6 и 7 могут быть улучшены путем уменьшения глубины мониторинга на 5–10 мм, с тем чтобы часть спектра TCD ACA не была видна (ACA представлена отрицательными скоростями) и путем изменения масштаба вертикальной оси в спектре TCD с примерно -100 см/с до 100 см/с, что позволило бы обеспечить максимальную скорость отбора проб спектра TCD в вертикальном направлении.
На рисунке 8 показаны примеры двусторонних спектров TCD и M-режимов, подходящих для двустороннего fTCD. Рисунки 8А и 8В демонстрируют приемлемые, но не оптимальные двусторонние спектры и М-моды. Обратите внимание, что коэффициент усиления выше на рисунке 8A (левый MCA), чем на рисунке 8B (правый MCA), чтобы компенсировать более слабый сигнал, и как качество огибающей на рисунке 8A немного хуже, чем на рисунке 8B. Также обратите внимание, что максимальная скорость в систоле на рисунке 8A немного ниже, чем на рисунке 8B. Напротив, обратите внимание, что два спектра на рисунке 8C и рисунке 8D очень похожи с точки зрения настроек, включая глубину, коэффициент усиления, мощность и объем образца, и как спектральные формы волн с обеих сторон имеют одинаковые максимальные скорости и формы. Для решения этой проблемы рекомендуется последовательно размещать спектр от левого MCA в левом окне, а спектр от правого MCA в правом окне, особенно для экспериментов, связанных с латерализацией кровотока.
Рисунок 6:Выборка доплеровских спектров и М-режимных изображений из MCA на разных этапах маневра задержки дыхания. (A) Спектр и M-режим в начале задержки дыхания. Вертикальная желтая линия в центре обозначает начало задержки дыхания. (B) Спектр и М-режим в конце задержки дыхания. Вертикальная желтая линия в центре обозначает конец задержки дыхания при вдохе субъекта. (C)Спектр и М-режим после окончания задержки дыхания, показывающие снижение скорости потока, которое сохраняется в течение примерно 30 с после задержки дыхания. Во всех спектрах глубина = 56 мм, коэффициент усиления = 50, объем образца= 8 мм, мощность = 420 мВт/см2 и фильтр = 100 Гц. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 7:Спектр и М-режим от MCA во время задержки дыхания. Глубина = 56 мм, коэффициент усиления = 50, объем образца =8 мм, мощность = 420 мВт/см2 и фильтр = 100 Гц. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 8:Примеры двусторонних спектров и M-режимных изображений из MCA. (A) Приемлемый, но не оптимальный, спектр и M-режим левого MCA, с глубиной = 62 мм, коэффициентом усиления = 69, объемом образца = 12 мм, мощностью = 420 мВт/см2 , и фильтром = 100 Гц. (B) Хороший спектр и M-режим правого MCA, с глубиной = 62 мм, коэффициент усиления = 56, объем образца = 12 мм, мощность = 420мВт/см2,а фильтр = 100 Гц. (C) Хороший спектр и M-режим левого MCA. (D) Хороший спектр и М-режим правильного MCA. Как для(C),так и для(D)глубина = 62 мм, коэффициент усиления = 56, объем образца = 12, мощность = 420мВт/см2и фильтр = 100 Гц. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Возраст | Глубина средней мозговой артерии (мм) |
0–3месяца | 25 |
3–12месяцев | 30 |
1–3года | 35–45 |
3–6лет | 40–45 |
6–10лет | 45–50 |
10–18лет | 45–50 |
>18 летб | 50 |
Таблица 1: Глубины MCA в различных возрастах. Источники: a = Боде25, b = Александров и др.10
Критические шаги в протоколе включают в себя 1) нахождение MCA, 2) размещение оголовья и 3) выполнение маневра задержки дыхания.
Изменения могут быть необходимы в зависимости от субъектов исследования. Например, субъекты с болезнью Альцгеймера могут испытывать трудности с выполнением инструкций, что обусловливает необходимость использования капнографа для обеспечения соблюдения инструкций по задержке дыхания15. Маленькие дети могут испытывать трудности с выполнением инструкций и могут стесняться экспериментатора; следовательно, экспериментальные протоколы, возможно, потребуется упростить для такой популяции (см. Lohmann et al.2). Некоторые настройки на машине TCD также могут быть изменены в зависимости от интересующей группы населения. Например, при инсонировании младенцев, у которых тонкие черепные кости, максимально уменьшают мощность, особенно если мониторинг ТХД будет проходить в течение периода продолжительностью в несколько часов16.
Устранение неполадок часто сосредотачивается на трудностях с поиском хорошего, стабильного спектрального сигнала TCD. Например, у людей старше 50 лет височное акустическое окно становится все меньше с возрастом увеличивается из-за повышенной пористости кости черепа и имеет тенденцию локализоваться в область непосредственно перед ухом («межтраговое пространство»)12. В такой популяции найти хороший спектральный сигнал MCA с обеих сторон головы иногда может быть невозможно, а очень незначительные изменения угла или положения преобразователя могут привести к потере сигнала. Поскольку сигнал хорошего качества необходим для экспериментов, которые зависят от формы сигнала огибающей для анализа, следует приложить все усилия для увеличения интенсивности и качества спектрального сигнала MCA. Например, коэффициент усиления может быть отрегулирован для оптимизации сигнала, а громкость выборки может быть увеличена для получения более сильного сигнала. В крайнем случае, мощность может быть увеличена. Наконец, важно отметить, что примерно у 10% больных временное акустическое окно может отсутствовать11,17. Временное акустическое окно можно легко найти у младенцев и маленьких детей, и его труднее всего найти у взрослых старше 50 лет.
Ограничения fTCD включают получение информации CBFV в одном пространственном месте17, а не в широком поле зрения, хотя и с очень высоким временным разрешением. Таким образом, fTCD является дополнением к фМРТ, которая дает мозговую гемодинамическую информацию (а значит, и нейронную активность) с широким полем зрения при низком временном разрешении18,19. Действительно, fTCD имеет временное разрешение, сопоставимое с разрешением fNIRS20,с важным отличием, что fTCD измеряет гемодинамические изменения на уровне основных мозговых артерий, тогда как fNIRS измеряет изменения в коре. Таким образом, fTCD может заполнить важные детали о церебральных гемодинамических изменениях в ответ на нейронную активацию, которые ни один другой метод нейровизуализации в настоящее время не способен измерить.
Потенциальные применения TCD включают мониторинг образования церебральной эмболии во время кардиохирургии16 и мониторинг для выявления результатов лечения активатором тканевого плазминогена при инсульте21. Потенциальные применения fTCD включают любой исследовательский вопрос, связанный с нейронной реакцией на внутренние или внешние раздражители, такой как изучение латерализованной обработки языка в человеческом мозге2,3,4,соматосенсорная «сенсорная» стимуляция5или латерализация визуальной обработки6. Кроме того, fTCD может быть использован для изучения физиологических (с изменениями нейронной активности или без них) реакций на стимулы, такие как упражнение22 и задержка дыхания13,15,23. Наконец, низкая стоимость, портативность и простота fTCD делают визуализацию большого количества субъектов практичной, что является преимуществом перед фМРТ и другими методами нейровизуализации, такими как ПЭТ, например, при скрининге на доклиническую болезнь Альцгеймера15.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Этот проект основан на исследованиях, которые были частично поддержаны Сельскохозяйственной экспериментальной станцией Небраски при финансировании из Закона Хэтча (номер присоединения 0223605) через Национальный институт продовольствия и сельского хозяйства Министерства сельского хозяйства США.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Aquasonic | Parker Laboratories, Inc., Fairfield, NJ, USA | 01-50 | Ultrasound Gel |
Doppler Box X | DWL Compumedics Gmbh, Singen, Germany | Model "BoxX" | Transcranial Doppler with 2-MHz monitoring probes |
Kimwipes | Kimberly-Clark Professional | 34256 | Delicate Task Wipers |
Transeptic | Parker Laboratories, Inc., Fairfield, NJ, USA | 09-25 | Cleaning Spray |
Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи
Запросить разрешениеThis article has been published
Video Coming Soon
Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены