Method Article
Apresentamos aqui um protocolo para usar hipertermia controlada, gerada por ultrassom focalizado de alta intensidade guiado por ressonância magnética, para desencadear a liberação de drogas de lipossomas sensíveis à temperatura em um modelo de rabdomiossarcoma em camundongos.
O ultrassom focalizado de alta intensidade guiado por ressonância magnética (MRgHIFU) é um método estabelecido para produzir hipertermia localizada. Dada a imagem em tempo real e a modulação da energia acústica, esta modalidade permite o controle preciso da temperatura dentro de uma área definida. Muitas aplicações térmicas estão sendo exploradas com essa tecnologia não invasiva e não ionizante, como a geração de hipertermia, para liberar fármacos de portadores lipossomais termossensíveis. Essas drogas podem incluir quimioterapias como a doxorrubicina, para as quais a liberação direcionada é desejada devido aos efeitos colaterais sistêmicos limitantes da dose, ou seja, cardiotoxicidade. A doxorrubicina é um pilar para o tratamento de uma variedade de tumores malignos e é comumente usada no rabdomiossarcoma (RMS) recidivante ou recorrente. RMS é o tumor extracraniano sólido de partes moles mais comum em crianças e adultos jovens. Apesar da terapia agressiva e multimodal, as taxas de sobrevida da RMS permaneceram as mesmas nos últimos 30 anos. Para explorar uma solução para atender a essa necessidade não atendida, um protocolo experimental foi desenvolvido para avaliar a liberação de doxorrubicina lipossomal termossensível (TLD) em um modelo de RMS singênico imunocompetente usando MRgHIFU como fonte de hipertermia para liberação de fármacos.
O rabdomiossarcoma (RMS) é um tumor de músculo esquelético que ocorre mais comumente em crianças e adultosjovens1. A doença localizada é frequentemente tratada com tratamento multimodal, incluindo quimioterapia, radiação ionizante e cirurgia. O uso de esquemas quimioterápicos multidrogas é mais prevalente em pacientes pediátricos, com melhores resultados em comparação com seus pares adultos2; no entanto, apesar dos esforços de pesquisa em andamento, a taxa de sobrevida em 5 anos permanece em torno de 30% na forma mais agressiva da doença 3,4. O tratamento padrão de quimioterapia é um esquema multidrogas que inclui vincristina, ciclofosfamida e actinomicina D. Em casos de doença recidivante ou recorrente, quimioterapias alternativas são usadas, incluindo doxorrubicina (FD) padrão (livre) e ifosfamida1. Embora todas essas quimioterapias tenham toxicidade sistêmica, a cardiotoxicidade da doxorrubicina impõe uma limitação de dose por toda a vida 5-7. Para aumentar a quantidade de fármaco entregue ao tumor e minimizar a toxicidade sistêmica, formulações alternativas têm sido desenvolvidas, incluindo o encapsulamento lipossomal. Podem ser doxorrubicina não termossensível, aprovada para o tratamento de câncer de mama e carcinoma hepatocelular, ou doxorrubicina termossensível, cujos ensaios clínicos estão em andamento 8,9,10,11,12,13. Métodos alternativos para a administração de drogas lipossomais encapsuladas, como lipossomas multivesiculares e lipossomas direcionados por ligantes, têm sido avaliados e se mostram promissores para o tratamento detumores9. Neste estudo, a adição de calor tem impactos multifatoriais, incluindo a liberação do fármaco14. A combinação de hipertermia (HT) gerada com ultrassom focalizado de alta intensidade guiado por ressonância magnética (MRgHIFU) e doxorrubicina lipossomal termossensível (TLD) é uma nova abordagem terapêutica multimodal para o uso dessa droga tóxica, mas eficaz no tratamento da SMR, minimizando a toxicidade limitante da dose e potencialmente aumentando a resposta imune ao tumor.
A doxorrubicina liberta-se rapidamente de TLD a temperaturas >39 °C, muito acima da temperatura média do corpo humano de 37 °C, mas não suficientemente elevada para causar danos nos tecidos ou ablação; isso começa a ocorrer a 43 °C, mas ocorre mais rapidamente quando as temperaturas se aproximam de 60 °C15. Vários métodos têm sido utilizados para gerar TH in vivo, incluindo lasers, micro-ondas, ablação por radiofrequência e ultrassom focado, muitos dos quais são métodos invasivos de aquecimento16. MRgHIFU é um método de aquecimento não invasivo e não ionizante que facilita ajustes precisos de temperatura dentro do tecido alvo in situ. A ressonância magnética (RM) fornece imagens em tempo real, onde o software de computador pode ser usado, para calcular uma medida de termometria do tecido durante o tratamento; Posteriormente, esses dados podem ser utilizados para controlar a terapia ultrassônica em tempo real para atingir e manter um set point de temperaturadesejado17. O MRgHIFU tem sido testado em vários tipos de tecidos e pode ser usado para uma ampla gama de tratamentos de temperatura, desde TH leve até ablação, bem como clinicamente para tratar com sucesso metástases ósseas dolorosas18. Além disso, foi demonstrado que a TH causa citotoxicidade tumoral, modula a expressão proteica e altera a resposta imune no microambiente tumoral 19,20,21,22. Um estudo combinou TH leve com DTL, seguido de ablação com MRgHIFU, em um modelo sinérgico de R1 emratos23, resultando em necrose no núcleo do tumor e liberação da droga para a periferia. Tradicionalmente, a radioterapia tem sido usada como terapia adjuvante para danificar as células tumorais e diminuir a recorrência local da doença. No entanto, seu uso é limitado pela dosagem ao longo da vida e danos fora do alvo1. Assim, a HT é única na medida em que pode causar alguns dos mesmos efeitos sem as mesmas toxicidades ou limitações.
Modelos animais pré-clínicos para RMS incluem modelos imunocompetentes singênicos e xenoenxertos derivados de pacientes (PDX) em hospedeiros imunocomprometidos. Embora os modelos imunocomprometidos permitam o crescimento dos tumores humanos, eles não possuem o microambiente tumoral apropriado e são limitados em sua capacidade de estudar a resposta imune24. A mutação ativadora do FGFR4 é um marcador promissor de mau prognóstico e um potencial alvo terapêutico em RMS adulto e pediátrico 1,25. Nos modelos singênicos de RMS desenvolvidos no laboratório de Gladdy, os tumores são capazes de crescer em um hospedeiro imunocompetente, que desenvolve respostas imunes inatas e adaptativas aotumor26. Como a TH influencia a resposta imune, a observação da alteração na resposta imune murina é uma vantagem valiosa desse modelo tumoral. Para testar tanto a resposta tumoral ao TLD em comparação com a DF, quanto a mudança na resposta imune do tumor tanto à quimioterapia quanto à TH, um protocolo foi desenvolvido e empregado para tratar tumores RMS murinos singênicos in vivo usando MRgHIFU e TLD, que é o foco deste estudo.
A pesquisa foi realizada em conformidade com os comitês de cuidados com animais com protocolos de uso de animais aprovados sob um veterinário supervisor nas instalações de pesquisa animal do Centro de Fenogenômica (TCP) e do Centro de Recursos Animais (ARC) da University Health Network (UHN). Todos os procedimentos, exceto o MRgHIFU, envolvendo os animais foram realizados em um gabinete de segurança biológica (BSC) para minimizar a exposição dos animais ao ar externo ou infecção suscetível.
1. Criação de camundongos
NOTA: Um total de 65 camundongos (linhagem B6.129S2-Trp53tm1Tyj/J) foram incluídos no estudo piloto (macho: n = 23; fêmea: n = 42). Camundongos machos e fêmeas foram usados com 7-9 semanas de idade. Seus filhotes foram desmamados e genotipados, e os camundongos heterozigotos p53 foram utilizados para os experimentos.
2. Genotipagem em camundongos
3. Preparo do modelo tumoral (Figura 1)
4. Injeção intramuscular de células
NOTA: As células M25FV24C são injetadas no membro posterior direito de camundongos entre 4 e 6 semanas de idade. A injeção em 4 semanas produz um pequeno camundongo com um tumor que pode ser mais difícil de tratar, pois há menos tecido circundante para dispersão de HT; esperar até 6 semanas rende um camundongo maior, facilitando o tratamento do tumor.
5. Ressonância magnética de rastreamento
6. Experimento: preparação animal do dia do tratamento de HIFU
7. Experimento: Procedimento de imagem e sonicação de modelo de camundongo para estudos agudos
8. Experimento: Procedimento de imagem e sonicação de modelo de camundongo para estudos de sobrevivência
NOTA: Para estudos de sobrevivência, siga o procedimento de preparação do animal no dia do tratamento com HIFU (passo 6.1 a 6.25).
Usando o protocolo de hipertermia gerada por MRgHIFU, os tumores no membro posterior foram capazes de ser consistentemente aquecidos até a temperatura desejada durante o tratamento (Figura 4 mostra um tratamento representativo, 10 ou 20 min, n = 65). Para considerar um tratamento bem-sucedido, a ROI teve que ser mantida acima de 39 °C durante todo o tratamento, com variação de <6 °C ao longo do tratamento e sem aquecimento do tecido fora do alvo. Além disso, a temperatura central deveria permanecer abaixo de 39 °C, com base na sonda retal ou na temperatura retal inicial mais a mudança na temperatura da sonda esofágica (Figura 2 suplementar). Uma vez interrompida a sonicação do MRgHIFU, o tumor retornou rapidamente à temperatura basal.
Os tumores foram direcionados a 40,5 °C para atingir uma temperatura de liberação rápida da droga, evitando efeitos cumulativos de temperatura acima de 43 °C. A temperatura média da ROI em todos os tumores tratados foi de 40,6 °C (n = 65), com uma diferença média entre os voxelsdo percentil 10 edo percentil 90 de 4,3 °C. O desvio padrão da temperatura média foi de 1,3 °C para a duração do tratamento, tanto para os tratamentos de 10 quanto para 20 min (Figura 5). A taxa de sucesso dos tratamentos para atender aos critérios de inclusão melhorou sensivelmente ao longo do estudo, de 11% para 100% (Figura 6).
Após a otimização do protocolo de tratamento, a duração da hipertermia foi avaliada quanto à eficácia da liberação do fármaco em comparação com camundongos normotérmicos (NT). Para determinar o tempo ideal de tratamento da hipertermia para estudos posteriores, duas durações de tratamento foram testadas: 10 min e 20 min. Essas durações foram selecionadas pela viabilidade de manter consistentemente a normotermia central e a hipertermia tumoral. Cromatografia líquida de alta eficiência e espectrometria de massas (HPLC-MS) foi utilizada para avaliar a quantidade de doxorrubicina nos tumores e quantificar a diferença de acúmulo de doxorrubicina entre as durações testadas. Houve uma porcentagem significativamente maior da dose inicial (%ID) de doxorrubicina nos tumores nos camundongos tratados com 20 min HT + TLD em comparação com os camundongos NT de 20 min de TLD (Figura 7, q = 0,000108). Não houve diferença significativa entre os grupos HT + DTL de 10 min e 20 min; no entanto, houve um desvio padrão maior no grupo de tratamento de 10 min em comparação com o grupo de 20 min (3,698 vs. 2,065 %ID/g de tumor). Notavelmente, houve quatro valores próximos de zero dentro do grupo de tratamento HT + TLD de 10 min, que foram todos tratados com um único lote de TLD. TLD foi caracterizado antes do uso em experimentos in vivo , como descrito anteriormente por Dunne et al.28. Resumidamente, TLD foi caracterizado em termos de tamanho, potencial zeta, temperatura de transição de fase de fusão e concentração do fármaco, e lipossomas foram usados dentro de 72 h de armazenamento a 4 °C. Embora todos os lotes de TLD tenham sido testados antes do uso, é possível que os lipossomas tenham liberado a doxorrubicina durante a montagem experimental, antes do uso. Além disso, o movimento durante o exame pode resultar em cálculos de temperatura falsamente elevados no software, subaquecendo o tumor e resultando em menor liberação da droga. Alternativamente, valores falsamente baixos também poderiam ser causados se a droga nunca fosse injetada, por exemplo, se o cateter da veia caudal tivesse sido removido ou colocado inadequadamente. Como visto acima, a configuração do trenó de RM incluiu a inserção de sonda de temperatura (retal e esofágica), inserção de cateter de veia caudal e colocação de monitor respiratório, seguido de movimentação do trenó, mouse, cateter da veia caudal, três sondas de temperatura de fibra óptica, monitor respiratório e linhas de anestesia para o furo da RM. Há vários pontos de tempo durante esse processo que o cateter da veia caudal pode se deslocar. Isso foi controlado verificando o refluxo de sangue na linha, sangramento do local de inserção do cateter e acúmulo de drogas sob a fita após o tratamento, mas o erro continua sendo uma possibilidade.
Figura 1: Protocolo experimental para tratamentos com animais e grupos de tratamento associados para os estudos de duração do TH. Os camundongos foram injetados com células M25FV24C em seu membro posterior direito, e foram triados para a formação de tumor usando RM após 2-3 semanas. Eles foram então divididos em grupos normotérmicos (Não-HT) ou hipertérmicos (HT), com DTL ou DF em durações de 10 ou 20 min. Abreviação: Dox = Doxorrubicina. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 2: Configuração do mouse durante o tratamento com HIFU . (A) Um suporte impresso em 3D (branco) com forro interno de borracha (vermelho) e um recorte para permitir a passagem do feixe de ultrassom para o posicionamento do mouse. (B) Configuração do mouse dentro de um suporte de mouse impresso em 3D com um suporte de temperatura retal (cabo verde), cateter da veia caudal (branco) e monitor respiratório (azul). (C) Posicionamento do mouse no leito de RM HIFU durante o procedimento. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 3: Camundongo na RM durante o tratamento com MRIgHIFU. (A) O tumor (circundado em laranja) e o tubo de deriva usado para medir a temperatura ambiente (circundado em azul claro) são visíveis. (B) Durante o tratamento, a medida da temperatura da termometria é sobreposta à imagem de RM. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 4: Temperatura (°C) monitorada durante o tratamento. Temperatura média (verde), do percentil 10superior (vermelho) e do percentil 90superior (ciano) de todos os voxels no ROI. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 5: Temperaturas médias durante o tratamento dentro da ROI para cada camundongo testado durante a fase de otimização com o desvio padrão durante o tratamento. A temperatura média global e o desvio padrão durante o tratamento também são mostrados (laranja). Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 6: As taxas de sucesso do tratamento da hipertermia melhoraram ao longo do tempo. O sucesso do tratamento foi dependente dos critérios de inclusão (temperatura sistêmica, temperatura tumoral e variação com a ROI, e ausência de aquecimento distal). Linha azul = % de camundongos para os quais o tratamento foi bem-sucedido. Barras laranjas = número de camundongos tratados com HT. Cada tratamento (tratamento 1-6) refere-se a uma data separada em que os experimentos foram conduzidos. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 7: Quantidade de doxorrubicina no tumor após tratamento medicamentoso. (A) Múltiplos testes de Mann-Whitney com correção de FDR para comparações múltiplas dos resultados de HPLC-MS demonstram significância (q < 0,05) entre a quantidade de doxorrubicina no tumor no grupo DTL + HT de 20 min em relação ao controle TN. (B) Não foram observadas diferenças no tumor nos grupos DF. %ID = porcentagem da dose inicial. = q < 0,0001. Abreviações: HT = hipertermia, NT = normotermia. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Nome da sequência | Ax_Screen | Ax_Loc | Sag_Loc | Cor_TestShot | Terma |
Tipo de sequência | TARE T2w | TARE T2w | TARE T2w | LAMPEJO | LAMPEJO |
Orientação | Axial | Axial | Sagital | Coronal | Axial/Sagital |
Tempo de eco (ms) | 40 | 72 | 72 | 6 | 6 |
Tempo de repetição (ms) | 3200 | 4500 | 4500 | 39.06 | 39.06 |
Ângulo de inversão (graus) | 90/180 | 90/180 | 90/180 | 10 | 10 |
Campo de visão (mm) | 28,8 x 28,8 | De 36 a 36 anos | De 35 a 35 anos | De 35 a 35 anos | |
Tamanho da matriz | De 128 a 128 anos | De 128 a 128 anos | De 128 a 128 anos | De 128 a 128 anos | De 128 a 128 anos |
Resolução (mm) | 0,225 x 0,225 | 0,281 x 0,281 | 0,281 x 0,281 | 0,273 x 0,273 | 0,273 x 0,273 |
Número da fatia | 20 | 20 | 20 | 3 | 2 |
Espessura de corte (mm) | 1 | 1 | 1 | 1.5 | 1.25 |
# Médias | 3 | 1 | 1 | 1 | 1 |
# Repetições | 1 | 1 | 1 | 9 | 9 ou 300 |
Tempo de varredura | 4 min 0 s | 1 min 12 s | 1 min 12 s | 45 s | 25 minutos |
Tabela 1: Parâmetros para captura de RM com nomes de sequências associados.
Figura suplementar 1: Um suporte de mouse modelo 3D (branco) com forro interno de borracha (vermelho). Dimensões: comprimento = 43 mm, raio externo = 15 mm, largura interna = 20,7 mm. Clique aqui para baixar este arquivo.
Figura suplementar 2: Temperatura (°C) monitorada durante o tratamento. Temperatura central medida por sondas retal (azul) e esofágica (laranja). Clique aqui para baixar este arquivo.
Arquivo de codificação suplementar 1: arquivo de impressão 3D para o suporte do mouse. Clique aqui para baixar este arquivo.
O protocolo aqui desenvolvido foi utilizado para atingir tumores de membros pélvicos utilizando MRgHIFU para tratamento leve de TH e liberação de fármacos encapsulados de lipossomas in vivo. Várias etapas críticas foram encontradas nesse protocolo durante o estudo piloto, e a otimização dessas etapas críticas foi responsável pelo melhor sucesso do tratamento em relação ao estudo piloto. A primeira é a remoção completa dos pelos na área a ser sonicada. Qualquer aprisionamento de gás dentro da pele impede a passagem do feixe de ultrassom e bloqueia a passagem do ultrassom para o tecido alvo1. Em segundo lugar, o posicionamento do mouse é vital para o sucesso do tratamento; O tumor deve ser colocado superiormente no suporte do mouse para ficar em contato mais próximo com o transdutor de ultrassom. Além disso, as estruturas ósseas devem ser posicionadas fora do caminho do feixe de ultrassom sem ferir o camundongo. Foi demonstrado que o osso absorve as ondas de ultrassom de forma eficiente, atuando posteriormente como uma fonte de aquecimento in situ . Pode afetar o perfil de aquecimento enquanto bloqueia a transdução do ultrassom para a região de interesse4. O membro contralateral também deve ser colocado fora do caminho do ultrassom, seja enfiando a perna sob o resto do corpo ou estendendo-a e preenchendo o ar entre as pernas com gel de ultrassom ou uma almofada de gel. O reto também deve estar fora do caminho do ultrassom para evitar o aquecimento fora do alvo e a reflexão da sonda de temperatura. O posicionamento cuidadoso do tumor é o passo mais importante para completar um tratamento bem-sucedido.
Após o correto posicionamento, a colocação da sonda térmica esofágica deve ser realizada com cuidado para evitar a oclusão traqueal. Ao inserir o mouse no furo da RM, o hub de conexão de metal entre o cateter na cauda e o cateter da bomba de injeção deve ser fixado com fita distal à área da imagem para evitar a criação de artefatos. O transdutor de ultrassom deve ser colocado de forma que fique em contato com a área sem pelos da perna e não deslocando o monitor respiratório. Para a sobrevivência do rato, é necessário um cuidadoso controlo da temperatura corporal central do rato durante o tratamento e subsequente ajuste do sistema de aquecimento por convecção. Devido à proximidade do reto e do tumor em alguns camundongos, a adição da sonda esofágica foi importante para determinar a mudança da temperatura central, uma vez que a temperatura retal só poderia refletir o aquecimento local, em oposição ao aquecimento do núcleo corporal.
Na concepção e implementação deste protocolo, a solução de problemas extensiva foi executada com sucesso por uma equipe multidisciplinar. Para o posicionamento do mouse, um suporte de mouse foi projetado e impresso em 3D para uso em um trenó de RM de rato para permitir o fluxo do ar aquecido ao redor do mouse para ajuste intraprocedimento da temperatura corporal. Os materiais para este suporte foram escolhidos com base em sua capacidade de segurar o mouse com segurança, permitindo a transdução de ultrassom. Uma inserção de borracha dentro do suporte impresso permitia ajustes individuais do mouse, enquanto o recorte na parte inferior impedia a reflexão da onda de ultrassom e o aquecimento não intencional.
Existem limitações associadas ao modelo, como a proximidade dos tumores com estruturas próximas - osso (fêmur) e reto - que podem absorver ou refletir ondas de ultrassom, respectivamente. O aquecimento não intencional do fêmur pode resultar em destruição da medula óssea e dor, enquanto a reflexão do ultrassom do ar no reto pode causar aquecimento local e dano tecidual. Além disso, houve casos de aprisionamento da onda de ultrassom devido ao recrescimento da pele após o tratamento nos camundongos sobreviventes, causando aquecimento localizado da pele. Suspeita-se que isso se deva ao aprisionamento de ar ao redor do folículo piloso que não é deslocado com o gel de ultrassom entre o transdutor e a pele. Em cada caso, a pele parecia mais escura do que a pele sem pelos circundante. Nos cortes imunohistoquímicos desses membros de camundongos, pelos foram vistos dentro da epiderme, mas nenhuma fibrose tumoral ou outra explicação foi encontrada para que o ultrassom não pudesse passar através da pele e tecidos subcutâneos.
Com o desenvolvimento desse protocolo, novos estudos estão planejados para ampliar os sistemas modelo para testar outros tumores sólidos pediátricos, como osteossarcoma e mixofibrossarcoma, para tratamento com TH e TLD. Isso é promissor, pois esses pacientes podem enfrentar dor debilitante com opções limitadas de tratamento nesse contexto clínico. Este protocolo pode ser estendido a outros tipos de tumores sólidos localizados nas extremidades que são alvo do MRgHIFU29,30. Em conclusão, os dados suportam que a combinação de lipossomas termossensíveis pode ser extrapolada para encapsular outras formas de quimioterapia ou drogas onde a liberação de drogas direcionadas seria benéfica e ter uma forma não invasiva de aquecimento, como MRgHIFU, seria ideal.
Os autores não têm interesses financeiros ou conflitos de interesse a divulgar.
Gostaríamos de reconhecer nossas fontes de financiamento para este projeto e o pessoal envolvido, incluindo: C17 Research Grant, Canada Graduate Scholarship, Ontario Student Opportunity Trust Fund e James J. Hammond Fund.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
1.5mL Eppendorf tubes | Eppendorf | 22363204 | |
1kb plus DNA Ladder | Froggabio | DM015-R500 | |
2x HS-Red Taq (PCR mix) | Wisent | 801-200-MM | |
7 Tesla MRI BioSpec | Bruker | T184931 | 70/30 BioSpec, Bruker, Ettlingen, Germany |
C1000 Thermal cycler | Biorad | 1851148 | |
Clippers | Whal Peanut | 8655 | |
Compressed ultrasound gel | Aquaflex | HF54-004 | |
Convection heating device | 3M Bair Hugger | 70200791401 | |
Depiliatory cream | Nair | 61700222611 | Shopper's Drug Mart |
DMEM | Wisent | 219-065-LK | |
DNeasy extraction kit | Qiagen | 69504 | |
DPBS | Wisent | 311-420-CL | |
Drug injection system | Harvard Apparatus | PY2 70-2131 | PHD 22/2200 MRI compatible Syringe Pump |
Eye lubricant | Optixcare | 50-218-8442 | |
F10 Media | Wisent | 318-050-CL | |
FBS | Wisent | 081-105 | |
Froggarose | FroggaBio | A87 | |
Gel Molecular Imager | BioRad | GelDocXR | |
Glutamax | Wisent | 609-065-EL | |
Heat Lamp | Morganville Scientific | HL0100 | Similar to this product |
Intravascular Polyethylene tubing (0.015" ID x 0.043" OD, 20G) | SAI infusion | PE-20-100 | |
Isoflurane | Sigma | 792632 | |
M25FV24C Cell line | Gladdy Lab | N/A | |
Microliter Syringe | Hamilton | 01-01-7648 | |
Molecular Imager Gel Doc XR | Biorad | 170-8170 | |
Mouse holder | The 3D printing material used was ABS-M30i, and it was printed on FDM Fortus 380mc machine | N/A | Dimensions: length = 43 mm, outer radius = 15 mm, inner width (where the mouse would sit) = 20.7 mm. |
MyRun Machine | Cosmo Bio Co Ltd | CBJ-IMR-001-EX | |
Nanodrop 8000 Spectrophotometer | Thermo Scientific | ND-8000-GL | |
p53 primers | Eurofins | N/A | Custom Primers |
PCR tubes | Diamed | SSI3131-06 | |
Penicillin/Streptomycin | Wisent | 450-200-EL | |
Proteus software | Pichardo lab | N/A | |
Respiratory monitoring system | SAII | Model 1030 | MR-compatible monitoring and gating system for small animals |
Small Bore HIFU device, LabFUS | Image Guided Therapy | N/A | LabFUS, Image Guided Therapy, Pessac, France Number of elements 8 frequency 2.5 MHz diameter 25 mm radius of curvature 20 mm Focal spot size 0.6 mm x 0.6 mm x 2.0 mm Motor: axes 2 Generator: Number of channels 8 Maximum electrical power/channel Wel 4 Maximum electrical power Wel 32 Bandwidth 0.5 - 5 MHz Control per channel: Freq., Phase and. amplitude Measurements per channel: Vrms, Irms, cos(theta) Duty Cycle at 100% power % 100% for 1 min. Transducer: Number of elements 8 frequency 2.5 MHz diameter 25 mm radius of curvature 20 mm Focal spot size 0.6 mm x 0.6 mm x 2.0 mm |
SYBR Safe | ThermoFisher Scientific | S33102 | |
TAE | Wisent | 811-540-FL | |
Tail vein catheter (27G 0.5" ) | Terumo Medical Corp | 15253 | |
Thermal probes | Rugged Monitoring | L201-08 | |
Trypan blue | ThermoFisher Scientific | 15250061 | |
Trypsin | Wisent | 325-052-EL | |
Ultrasound Gel | Aquasonic | PLI 01-08 |
An erratum was issued for: Magnetic Resonance-Guided High Intensity Focused Ultrasound Generated Hyperthermia: A Feasible Treatment Method in a Murine Rhabdomyosarcoma Model . The Authors section was updated from:
Claire Wunker1,2
Karolina Piorkowska3
Ben Keunen3
Yael Babichev2
Suzanne M. Wong3,4
Maximilian Regenold5
Michael Dunne5
Julia Nomikos1,2
Maryam Siddiqui6
Samuel Pichardo6
Warren Foltz7
Adam C. Waspe3,8
Justin T. Gerstle3,9
Rebecca A. Gladdy1,2,10
1 Institute of Medical Science, University of Toronto
2 2Lunenfeld-Tanenbaum Research Institute, Mount Sinai Hospital
3 The Wilfred and Joyce Posluns Centre for Image-Guided Innovation and Therapeutic Intervention, The Hospital for Sick Children
4 Institute of Biomedical Engineering, University of Toronto
5 Leslie Dan Faculty of Pharmacy, University of Toronto
6 Departments of Radiology and Clinical Neurosciences, University of Calgary
7 Department of Radiation Oncology, University of Toronto
8 Department of Medical Imaging, University of Toronto
9 Department of Pediatric Surgery, University of Toronto
10 Department of Surgery, University of Toronto
to:
Claire Wunker1,2
Karolina Piorkowska3
Ben Keunen3
Yael Babichev2
Suzanne M. Wong3,4
Maximilian Regenold5
Michael Dunne5
Julia Nomikos1,2
Maryam Siddiqui6
Samuel Pichardo6
Warren Foltz7
Adam C. Waspe3,8
Justin T. Gerstle3,9
James M. Drake1,3,4,10
Rebecca A. Gladdy1,2,10
1 Institute of Medical Science, University of Toronto
2 Lunenfeld-Tanenbaum Research Institute, Mount Sinai Hospital
3 The Wilfred and Joyce Posluns Centre for Image-Guided Innovation and Therapeutic Intervention, The Hospital for Sick Children
4 Institute of Biomedical Engineering, University of Toronto
5 Leslie Dan Faculty of Pharmacy, University of Toronto
6 Departments of Radiology and Clinical Neurosciences, University of Calgary
7 Department of Radiation Oncology, University of Toronto
8 Department of Medical Imaging, University of Toronto
9 Department of Pediatric Surgery, University of Toronto
10 Department of Surgery, University of Toronto
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