化合物の管理 IV

ソース: ケイ ・ スチュワート、RLATG、RVT CMAR;ヴァレリー A. シュレーダー、RVT、RLATG。ノートルダムのノートルダム大学

実験用マウスおよびラットの複合管理の多くの一般的に使用されるルートがあります。プロトコルは、使用頻度の低いルートの使用を必要があります、しかし、: 心内、蹠とレトロな軌道注射。これらの手順を正常に実行するため専門のトレーニングが欠かせません。これらのルートのための正当化は、制度的動物ケアおよび使用委員会 (IACUC) の承認を得るために提供する必要があります。

心腔内投与は、心内直納の心筋梗塞の結果に及ぼす影響の検討と同様、転移癌の動物モデルの開発を含む、アプリケーションの様々 な使用されています。この手順は、多くの場合心臓内の正しい位置に針をガイドする超音波を使用して行われます。²ただし、正しく適切なランドマークを利用した実行されると、このプロシージャ実行できます超音波可視化を使用せず。

プロシージャの侵襲的な性質のため IACUC プロトコルでは、心腔内注入の使用を科学的に正当化する必要があります。1 つだけ生存の注入ができます。この手順には、全身麻酔、吸入または組織内で確立されたガイドラインに従って、注射のいずれかが必要です。針の選択が注入される; 材料の粘度になります可能な最小サイズをする必要があります。通常、27-30 ゲージ針を使用します。最大 300 μ L 100 μ L から注入ボリュームの範囲です。

マウスの尾静脈注射が挑戦し多くの場合失敗します。レトロな軌道神経叢を介して静脈内投与の代替ルートがあります。この手法は、トレーニングとスキルを実行するといえば、間研究は外側尾静脈注射よりもレトロな軌道注入で高い成功率があることを示しています。^{3, 4, 5}麻酔は、マウスがプロシージャの間に移動することを防ぐために必要です。全身吸入麻酔、ベルジャーを介していずれかまたは精度の気化器に接続されている誘導室が有効であります。しかし、吸入剤を使用する場合は、動物注射を実行する準備ができている必要があるので、部屋から取除かれればすぐに回復し始めると、注意します。複数の注射が実行されるときは、局所点眼麻酔 (プロパラカイン、テトラカイン) をお勧めします。

マウスおよびラットの軌道の静脈の構造が異なります。マウスの副鼻腔や眼窩上静脈、鼻背の静脈、下眼瞼静脈、目のまわりの軌道のスペースを埋める浅弓状静脈を含むいくつかの船の収束。ラットの眼窩領域のネットワークまたは血管の神経叢があります。すべての注射と同様針の選択が可能な最小のサイズをする必要があります。一般的に 27-30 ゲージ針です。大量のレポートをされているが、最大音量は目につき 150 μ L です。^{3, 4, 5}生存のプロシージャのための目につき 2 つの注射の目には、1 日あたり 1 つの注入をお勧めします。また、注射の間、少なくとも 1 日の間隔があるはずです。Nonsurvival プロシージャの 500 μ L までボリュームを管理できます。

論争にもかかわらず、注射部位として足のパッドの使用はいくつかの研究が必要です。それは、足パッドを介して注入すると、いくつかのマウス系統において抗体応答大幅より強かったと飛節に挿入され実証されています。⁶すべての動物は、通常歩行、食料消費のレベルの痛みの兆候を密接に監視する必要があります。足の自傷は、破棄されるフィートの範囲に発生します。これは、慢性的な痛みのサインです。自傷を示す動物は、すぐに獣医のスタッフの注目を呼び出す必要があります。

足蹠の測定は毎日行うことがすぐに明らかな腫れが発生しました。エンドポイントは、IACUC ガイドラインに従って場所でなければなりません。一般的に、病変や腫瘍に及ぶや、食料や水に達する動物の能力と干渉する場合は、動物を安楽死する必要があります。足蹠に注入することができます最大音量は 50 μ L です。29-30 ゲージ針は注入に適しています。

1. 心臓内注射

1. ランドマークや位置決め: マウスまたはラットの位置 (上向き左側) と右外側臥床または背の内股とランドマークを識別します。
   1. 胸骨の左肘のポイントだけで約レベル中心を位置します。
   2. 肘の時点で肋骨の間針を挿入します。
   3. 背臥床で動物、テーブルに胸平行に針を挿入します。
   4. 横臥床で動物、胸をテーブルに垂直に針を挿入します。
2. 記事の注入
   1. 心機能を危険にさらすこの引き裂かれて、心膜嚢への出血を引き起こしてから筋肉を防ぐために心臓に挿入した針の最小限の動きがあることを確認します。
   2. 適切な配置を決定する注射器を吸引します。多くの場合は注射器のハブに血液のフラッシュです。
   3. 一度針を中心部に配置されている注入用の注射器に手がない移動したので、シリンジを保持します。
   4. ゆっくりと着実な方法で記事を挿入します。
   5. 出血を最小限に抑えるにゆっくりと針を撤回します。
   6. 注入外傷に関連するその他の後遺症や長時間の運動失調、チアノーゼ発作呼吸困難が発生するマウスを獣医師スタッフによって評価し、彼らの推薦によると安楽死する必要があります。

図 1。マウスの心腔内注射は。

2. 静脈内注射レトロ軌道神経叢を活用

1. インジェクションのランドマークや位置決め
   1. 平らな面に横臥床に動物を配置します。
   2. 機首を 45 ° の角度で目の眼に針を挿入します。
   3. 針の深さは結膜組織に侵入し、眼の神経叢に眼眼窩の後ろに進めるだけで十分である必要があります。針を置き、軌道の後ろに骨は発生する必要があります。
   4. 顎に親指で頭の上に人差し指を置きます。
   5. 皮膚を強化し、眼球の突出、背中と下方をゆっくり引き抜きます。
   6. 気管に圧力をかけるし、空気の流れを制限するように注意してください。
2. インジェクション
   1. 目の後ろとない眼で内針を配置します。
   2. 針がレトロな軌道神経叢に一度挿入最小限の動きまたは血管破裂する目の後ろの組織に出血とエージェントの損失を引き起こすことを確認します。針がレトロな軌道神経叢に位置づけられている一度注入用の注射器に手がない移動したので、シリンジを保持します。
   3. 船が崩壊すると、注射器で吸い出してはいけない。
   4. ゆっくりと着実な方法で記事を挿入します。
   5. 針を撤回し、出血を制御し、止血を提供する目に光の圧力を適用します。
   6. マウスその経験腫脹、結膜炎、または注入外傷に関連するその他の後遺症必要があります獣医のスタッフによって評価し扱われるか、彼らの推薦によると安楽死

図 2。マウスでレトロな軌道注入。

3. 足蹠注射

1. 拘束、隔離された、1 つの脚拘束チューブに動物を配置し、抑圧の上の皮膚をつかんで拡張します。
2. 水やアルコールを注入する前のがれき撤去を足を拭いてください。
3. 注射部位に小さな水疱を形成する脚の中心に皮下注入します。足の長さを実行する血管を避けるためには、注入する容器に並列の正中線のすぐそば。

図 3。マウスおよびラットの足蹠注射。

動物に化合物の管理は、動物の両方の健康と実験データと科学的価値の結果に大きな影響を持つことができます。配信の適切な方法は、実験の成功に不可欠です。研究の科学的な目的、物質、必要な投与量、物質の粘度と動物の健康の pH を含む最適なルートを決定する多くの要因を考慮されなければなりません。技術的専門知識はまたすべて注入法のための要件です。