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啮齿动物鉴定 (2)

Overview

来源: 凯斯图尔特, RVT, RLATG, CMAR;瓦莱丽. 施罗德, RVT, RLATG。圣母大学, 在

动物记录必须得到准确的维护, 以确保数据收集是正确的。记录的范围从保持笼卡的信息, 以拥有一个详细的数据库与所有有关的信息, 每个动物。记录记录的主要组成部分是研究动物的个体识别。有多种方法可用于鉴别小鼠和大鼠。本视频描述了纹身、微芯片放置和临时识别方法的程序技术, 并探讨了每个步骤的优点.

Principles

使用尾部纹身在许多研究协议中都是有益的。尾巴纹身是理想的动物, 是在核磁共振成像机, 或一个是基因倾向于溃疡性皮炎。为了快速识别笼子里的动物, 不需要加以抑制, 尾巴纹身很容易被形象化。然而, 这项技术需要技能, 实践, 和稳定的手;还需要专门的设备。 1

实验性协议可能需要早在第一天就对新生儿进行基因分型。因此, 必须永久性地识别这些幼崽。在这个年轻的年龄, 耳朵片没有足够的发展, 以插入一个耳朵标签, 和耳朵冲床还不能用于他们。在过去, 研究人员使用脚趾去除代码来识别新生儿是很常见的。然而, 这对幼小的动物和水坝都是压力重重, 因此被认为是不人道的。 2 使用脚趾纹身可以使动物永久地被识别, 直到它们足够大以进行耳朵标记或耳朵冲孔。 3

虽然植入微芯片的过程相对容易, 但有几个因素限制了它对小鼠的识别作用。不育的微晶片是大粒大米的大小, 需要10到12口径的针头来运送。因此, 它们是非常大的鼠标。由于小鼠的寿命短, 并且动物的数量通常是广泛的, 所以芯片和阅读装置的成本也会很高。那些注定要在核磁共振成像机中成像的动物不能植入他们的体内。然而, 如果有一组有价值的动物必须被永久识别, 那么可以使用微芯片。 4

需要将动物识别为数小时或几天的急性研究, 不必使用永久性识别。无毒标记是专门为着色动物皮毛, 并有几种颜色。这些标记染料可以在几个星期内保持可见。这些标记还可以与其他方法一起使用, 以方便地发现群中的特定动物。

Procedure

1. 尾部纹身

尾部纹身很容易阅读, 不需要处理动物.

Figure 1
图1。成年老鼠的尾巴纹身

  1. 根据制造商和 #39 的说明准备纹身设备。少量墨水是必需的。黑染料应用于白化小鼠或大鼠, 绿色染料的色素小鼠或大鼠.
  2. 为识别准备动物.
    注意: 为了尽量减少忧虑或苦恼, 应在手术室而不是在动物居住区进行尾部纹身。
    1. 适当地限制动物进行纹身, 以使运动最小.
    2. 断奶大鼠使用塑料缺口杯进行克制, 在纹身平台上的螺栓下固定杯子的唇, 并通过缺口延伸到尾部.
    3. 成年小鼠可以通过一杯抑制剂来克制, 尾巴从开口处拉紧, 杯子的法兰通过平台或其他装置举行.
    4. 用棉签擦拭后用少量的稀释组织清洁剂清洁尾部。成年大鼠通常有规模和尾部的碎片堆积, 必须在应用纹身之前清洗。肥皂和水擦洗的尾巴将清除大部分的污垢和碎片。在继续之前先把尾巴干好.
    5. 在纹身前用棉签将组织油涂抹在皮肤上。组织油是必要的, 以减少组织损害, 软化皮肤和润滑纹身针。此外, 油溶解任何污垢没有清除的清洗过程和防止油墨染色的 nontattooed 皮肤.
  3. 应用纹身。
    1. 将针的尖端浸入颜料中, 并关闭机器.
    2. 用脚踏板激活的枪将针头的尖端带到纹身站点.
    3. 在一个方向上使短, 甚至笔画。数字和字母应该用这样的方式纹身, 以便它们以最小的角度和曲线 (可能时) 的片段构造.
    4. 深穿透到真皮中, 用针进行永久性色素沉积。激活针的声音的变化可以帮助辨别深度.
    5. 用针接近皮肤 90 o 角度来充分沉积颜料.
  4. 后纹身清除和护理
    1. 印迹 (不擦) 已完成的纹身过量颜料与纸巾.
    2. 纹身或纸巾上的血迹表明纹身的深度太深, 因此不太可能是永久性的.
    3. 用附加色素增强纹身字符的薄区域。字符是加强与色素沉积平行, 但不是在上面, 已经沉积颜料.
    4. 添加额外的色素, 将针尖浸入染料库中, 每两个字符为小鼠和每一个字符的老鼠.
    5. 褪色纹身的原因包括色素含量不足, 纹身太浅, 纹身太深, 针头不合适的角度, 使用钝或钩针, 或纹身太快.
    6. 根据制造商和 #39 的说明在每次使用后彻底清洗纹身设备

2。新生儿脚趾纹身

实验性协议可以要求新生儿的基因分型早于第一天, 这就使得这些幼崽必须被永久性地识别。使用脚趾纹身允许动物识别, 直到它们足够大的耳朵标签或耳朵冲压.

Figure 2
图2。对新生鼠进行文身的适当抑制技术。柳叶刀的尖端有绿色的染料.

  1. 约束 preweaned 的 pup。
    1. 将手上的新生儿放在纱布垫上。将脚放在食指的拇指和钩之间, 露出所选择的脚趾或脚趾, 以进行纹身.
    2. 保持脚靠近脚趾, 使脚趾在它后面有一个坚实的表面, 防止它弯曲掉.
    3. 定位脚时不要 overtwist 腿。受约束的幼崽可能会摆动, 但没有必要听到发声.
  2. 准备设备。
    1. 选择 4.5 mm 黄花动物柳叶刀.
    2. 在孔表面放置一小点绿色纹身膏; 铝箔效果良好.
    3. 在纹身膏中只蘸柳叶刀的尖端.
    4. 只使用少量的粘贴.
  3. 应用纹身。
    1. 根据标识代码, 用黄花柳叶刀戳所需的脚趾.
    2. 穿刺皮肤, 将糊状物引入皮肤, 留下印记.
    3. 戳相同的斑点三次, 以确保适当的渗透.
    4. 避免戳得太深, 脚趾流血; 这会导致一个微弱的纹身.
  4. 后纹身清理和护理
    1. 用吸水擦拭/毛巾轻轻涂抹斑点以去除多余的糊状物.
    2. 不要尝试清除脚或身体上的多余粘贴.
    3. 将动物返回笼子.
    4. 当护理幼崽被纹身时, 最好也刺青大坝。这可能会阻止她对幼崽的反应过度, 这可能导致过度梳理纹身.
    5. 对每个垃圾使用新的柳叶刀.
    6. 纹身应在手术后的次日进行验证。如果斑点是微弱或不可见的, 重做纹身。如果在纹身后的那一天, 这些点是可见的, 那么它们在动物的生命周期中仍然是可见的.

3。成年大鼠和小鼠的脚趾纹身

当一窝新生儿被纹身时, 建议母亲也要纹身, 这样她的幼崽身上的糊状物就不是她的外型了.

  1. 对该动物的限制。
    1. 通过使用塑料锥或有机玻璃抑制剂来约束动物, 使其能够进入后脚.
    2. 将脚从约束装置中伸出.
    3. 在食指的拇指和钩之间放置脚, 以露出所选的脚趾或脚趾, 以进行纹身
    4. 保持脚靠近脚趾, 使脚趾在它后面有一个坚实的表面, 防止脚趾弯曲掉.
    5. 定位脚时不要 overtwist 腿。受限制的成年人可能会试图撤回脚.
  2. 准备设备。
    1. 选择 5 mm 黄花动物柳叶刀.
    2. 在孔表面放置一小点绿色纹身膏; 铝箔效果良好.
    3. 在纹身膏中只蘸柳叶刀的尖端.
    4. 只使用少量的粘贴.
  3. 应用纹身。
    1. 根据标识代码, 用黄花柳叶刀戳所需的脚趾.
    2. 穿刺皮肤, 将糊状物引入皮肤, 留下印记.
    3. 戳相同的斑点三次, 以确保适当的渗透.
    4. 避免戳得太深, 脚趾流血; 这会导致一个微弱的纹身.
  4. 后纹身清理和护理
    1. 轻轻地在吸水性擦拭/毛巾上涂抹斑点, 以去除多余的浆糊.
    2. 不要尝试清除脚或身体上的多余粘贴.
    3. 将动物返回笼子.
    4. 对每种动物使用新的柳叶刀.
    5. 纹身应在手术后的次日进行验证。如果斑点是微弱或不可见的, 重做纹身。如果在纹身后的那一天, 这些点是可见的, 那么它们在动物的生命周期中仍然是可见的.

4. 晶片

RFID 芯片的植入是一种用于识别动物的常用方法.

  1. 将微芯片装入变更, 或选择预加载的注射器.
  2. 用有机玻璃约束管抑制动物, 使其能够在肩部上抓取皮肤.
  3. 帐篷的皮肤, 创造一个口袋.
  4. 将针放在皮肤上, 向上倾斜并平行于脊柱, 并将其指向尾部.
  5. 弹出微芯片.
  6. 取出针头并在注射点处捏紧皮肤。这样可以防止微芯片从皮肤中取出针。继续施加压力, 为任何皮肤出血提供止血.
  7. 从约束装置中取出动物并扫描芯片以确认识别码.

Figure 3
图3。成年大鼠的微芯片植入.

5. 小鼠的临时鉴定

无毒染料和动物标记物可用于小鼠的临时鉴定.

  1. 限制鼠标, 使肩胛骨之间的区域可用于毛皮上的标记.
  2. 在该区域的毛皮上放置一个标记、斑点或条纹的染料。该区域用于防止动物在梳理时去除标记.
  3. 如果将标记作为唯一标识符使用了几天, 请定期检查它.
  4. 尾部也可以用于短工期。然而, 动物可能会去除它的标记, 而梳理.

6。老鼠的临时识别

  1. 抑制鼠, 使染料或标记应用的区域易于访问。在某些情况下, 当只需要一个条纹或点, 动物将不需要被限制, 但允许自由移动在笼子里.
  2. 手动约束通过抓住尾巴和保持它绷紧, 而应用识别通常是这样做的.
  3. 临时固定使用吸入麻醉剂可以为脾气暴躁的动物做.
  4. 如果使用此方法作为唯一标识符超过几天, 则定期检查标记.

Application and Summary

在选择适当的识别方法时, 必须慎重考虑许多因素。每种技术都有其优缺点, 必须在实验需要方面加以考虑。虽然成本必须与其他因素一起权衡, 但技术的简单性和对动物的不适程度应该是首要考虑。 45

References

  1. Robinson, V., Morton, D.B., Anderson, D., Carver, J.F.A., Francis, R.J., Hubrecht, R., Jenkins, E., Mathers, K.E., Raymond, R., Rosewell, I., Wallace, J., and Wells, D.J. 2003. Refinement and reduction in production of genetically modified mice. Laboratory Animals. 37:S1-S50.
  2. Schaefer, D.C., Asner, I.N., Seifert, B., Bürki, K., and Cinelli, P. 2010. Analysis of physiological and behavioural parameters in mice after toe clipping as newborns. Laboratory Animals. 44:7-13
  3. Castelhano-Carlos, M.J., Sousa, N., Ohl, F., and Baumans, V. 2010. Identification methods in newborn C57BL/6 mice: a developmental and behavioural evaluation. Laboratory Animals. 44: 88-103.
  4. Danneman, P.J., Suckow, M.A., and Brayton, C.F. 2013. The laboratory mouse. Second edition. New York, NY: CRC Press.
  5. Institute for the Laboratory Animal Research. 2011. Guide for the care and use of laboratory animals, 8th ed. Washington (DC): National Academies Press.

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Overview

1:06

Considerations for Identification Methods

3:40

Tail Tattooing in Adults

6:24

Toe Tattooing in Neonates and Adults

9:16

Microchip Placement

10:24

Method for Temporary Identification

11:21

Applications

13:00

Summary

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