Uma técnica para biopsia de tecido adiposo Abdominal subcutâneo através de um método não-diatermia

Nós padronizada uma biópsia abdominal tecido adiposo usando um método não-diatermia realizado sob anestesia local. Ocorreram três casos de excessiva pós operação sangrando 115 operações (2,61%). Podemos concluir que uma biópsia cirúrgica abdominal tecido adiposo usando um método não-diatermia pode ser aplicada com segurança para homens saudáveis.

Biópsias de tecido adiposo oferecem amostras de tecido que, após a análise, podem fornecer súmulas perspicazes dos mecanismos relacionados com o metabolismo e doença. Para obter biópsias do tecido adiposo subcutâneo na região abdominal, pesquisadores e médicos usam um cirúrgico ou uma técnica baseada na agulha. No entanto, a cirúrgicas biópsias de gordura subcutâneas podem oferecer amostras de tecido que podem fornecer uma visão mais abrangente das complexidades de índices biológicos no tecido adiposo branco. Geralmente, uma biópsia cirúrgica de tecido adiposo inclui um tratamento de diatermia para cauterização dos vasos sanguíneos evitar sangramento excessivo. No entanto, efeitos colaterais, tais como o flash dispara e lesões de pele, no tecido, têm sido relatados após diatermia. Portanto, tivemos como objetivo padronizar uma biópsia cirúrgica abdominal adiposo tecido realizada sob anestesia local, usando um método não-diatermia. Realizamos 115 biópsias do tecido adiposo subcutâneo em homens saudáveis, usando um método não-diatermia de biópsia cirúrgica abdominal. Nossos resultados mostraram três casos de excessiva pós operação sangrando 115 operações (2,61%). Em conclusão, nossa biópsia cirúrgica de tecido adiposo subcutâneo abdominal de padronizado usando um método não-diatermia pode ser aplicada com segurança para homens saudáveis ao lado do cama, com efeitos colaterais mínimos.

Biópsias de tecido adiposo oferecem amostras de tecido que, após a análise, podem fornecer uma visão perspicaz dos mecanismos relacionados com o metabolismo e doença. Por exemplo, eles são utilizados para pesquisas sobre doenças metabólicas e hormonais importantes vias³, identificação tumor de câncer de mama-¹e ácido graxo composição exame². Para obter biópsias do tecido adiposo subcutâneo na região abdominal, pesquisadores e médicos usam um cirúrgico ou uma técnica baseada na agulha. No entanto, a cirúrgicas biópsias de gordura subcutâneas podem oferecer amostras de tecido que podem fornecer uma visão mais abrangente de mecanismos biológicos complexos [expressão de ácido ribonucleico (mRNA)por exemplo, mensageiro, análise histológica, etc]⁴ . Eles foram usados anteriormente em adultos saudáveis⁴ e podem ser realizados com segurança no cabeceira⁵.

A técnica baseada em agulha biópsia requer intensa lipoaspiração que pode destruir a integridade do tecido, e ele geralmente recupera uma pequena quantidade de tecido (100-500 mg)⁶. Estas amostras de tecido podem não ser apropriadas para pesquisas complexas. Além disso, em comparação com a técnica de agulha-baseado, biópsias de gordura subcutâneas cirúrgicas podem oferecer amostras de tecido que podem extrair uma imagem mais completa de vários índices inflamatórios (por exemplo, sinalização de células B e T); Regulamento do citoesqueleto; vias de celulares; vias metabólicas de lipídios, carboidratos e aminoácidos; e fosforilação oxidativa caminhos⁴. Além disso, a técnica baseada na agulha inclui um maior risco de contaminação de células do sangue do que o cirúrgico one⁴, enquanto fornece pouca informação sobre as regiões fibróticas do tecido^4,7,8 .

Geralmente, uma biópsia cirúrgica de tecido adiposo inclui um tratamento de diatermia para cauterização de vasos sanguíneos para evitar sangramento excessivo⁹. A diatermia é também usada para queimar e destruir os tecidos afetados por tumores e verrugas ou tecidos que são infectados pela doença⁹. Esta técnica é especialmente aplicável em neurocirurgia e olho cirurgia⁹.

O uso excessivo de diatermia pode levar à formação de tecido necrótico, causando infecções e retardar a cicatrização do processo¹⁰. De fato, efeitos secundários tais como o flash dispara e lesões de pele, no tecido já foram relatados após diatermia⁹. Além disso, as preocupações têm sido levantadas sobre a toxicidade do fumo cirúrgico lançado pela diatermia no ambiente de cirurgia, que podem ser inaladas pelo participante/paciente e o pessoal operacional⁹. Na verdade, o uso de diatermia pode causar toxicidade do ar na sala de operação igual àquela produzida por fumar seis cigarros¹¹ e, apesar de salas de cirurgia, geralmente, têm sistemas de boa ventilação, a contaminação pode durar pelo menos 20 min¹² . No entanto, em pacientes a realização de uma cirurgia de amigdalectomia, o método de diatermia mostrou menos, mas a dor pós-operatória, não-significativas¹³ e sangramento¹⁴ que o método de hemostasia clássico da ligadura. Em geral, existem evidências relativas diferenças na dor pós-operatória e sangramento taxas após biópsias de tecido adiposo em indivíduos saudáveis, mal. Dada a falta de provas e os efeitos colaterais da diatermia, padronização de um método não-diatermia para biopsia de tecido adiposo é garantida. Nesse sentido, o objetivo deste estudo foi padronizar uma técnica cirúrgica para biópsia de tecido adiposo abdominal subcutâneo, realizada sob anestesia local, usando um método não-diatermia em homens saudáveis. Além disso, descrevem os procedimentos para coleta de tecido para determinar a expressão de RNAm e concentração de proteína e realizar análises histológicas.

o estudo em conformidade com as normas estabelecidas pela declaração de Helsinque e foi aprovado pela Universidade de Tessália, departamento de ciência do exercício, Βiοethics Comissão.

1. preparação da cirurgia equipamentos e consumíveis

1. posicionar um campo cirúrgico desinfectado em um carrinho 4 rodas de Mayo cirúrgico.
2. Posicionar os seguintes consumíveis e equipamentos cirúrgicos em um carrinho 4 rodas de Mayo cirúrgico:
   Um par de tesouras de funcionamento em linha reta (15 cm)
   um bisturi (n. º 11)
   pega um bisturi
   um par de tesouras curvas (14 cm)
   pinça um mosquito
   um par de pinças de Kocher
   uma pinça cirúrgica
   iodo-povidona (em uma estéril gaze)
   uma sutura (4.0)
   um par de tesouras reta (11 cm)
   de uma agulha (15 cm)
   cinco gazes estéreis
   uma gaze estéril adesivo
   uma seringa de 10 mL com uma agulha desinfectada
   10 mL de xilocaína 2% (sem adrenalina)
   um par de luvas cirúrgicas desinfectadas
3. posicionar os seguintes materiais num banco separado:
   dois tubos microcentrifuga
   um tubo contendo 5 mL de formol a 10%
   um pequeno recipiente contendo 50-100 mL de nitrogênio líquido a-190 ° C.

2. Preparação dos participantes

1. ter os participantes seguem um rápido 8 h ¹⁵ antes do procedimento de biópsia.
2. Tem participantes abster-se de exercício físico, estresse excessivo, álcool e ativo e tabagismo passivo 72 h antes da biópsia ^{16 , 17}.

3. Realizar a biópsia de tecido adiposo subcutâneo

1. posicionar o participante na cama cirúrgica em posição supina.
2. Desinfectar a região da incisão utilizando iodo-povidona.
3. Injetar 10 mL de xilocaína 2% (sem adrenalina) lentamente e firmemente ¹⁸ na região selecionada para servir como anestesia local.
4. Posicionar um campo cirúrgico estéril sobre a área a cobrir o corpo do participante, excluindo a região da incisão.
5. Pelo menos 3-5 min depois, aplique pressão com um par de pinças para a área de anestesia local e perguntar o participante se ele sente alguma dor ¹⁹ para garantir que a anestesia local foi alcançada.
6. Anexar o bisturi n º 11 para a alça para bisturi.
7. Criar uma incisão de 2 a 2,5 cm de comprimento, 3 a 5 cm para a esquerda ou direita do umbigo.
8. Remover o tecido subcutâneo com um par de reta 15 cm, funcionamento tesoura.
9. Uma vez que o tecido adiposo é revelado, capturá-lo com um par de pinças e um par de tesouras curvas 14 cm.
10. Cortar e remover cerca de 1 g de tecido adiposo.
11. Após a remoção de tecido, coloque gazes estéreis sobre a incisão para obter hemostasia.
12. Quando a hemostasia é confirmada, capturar a sutura 4.0 com uma agulha 14 cm e a pele com um par de pinças cirúrgicas até o tecido subcutâneo é visível.
13. Inserir a agulha de sutura da pele, se movendo em direção ao tecido subcutâneo, enquanto a pele e subcutâneo estão alinhados.
14. Com a agulha de sutura, siga uma técnica de zig-zag contínuo para o tecido subcutâneo até expulsos externamente a pele. Continue até que a incisão da pele é fechada.
15. Externamente amarrar a sutura.
16. Limpar a área da incisão com soro fisiológico e cobri-lo com uma gaze estéril adesivo.

4. Deposição do tecido

1. separar o tecido adiposo coletado em três partes: 150, 350 e 500 mg.
2. Posicionar as peças de mg 150 e 350 de tecido de amostra em tubos microcentrifuga.
3. Tubos de microcentrifuga mergulhar os dois no recipiente pequeno com o nitrogênio líquido a-190 ° C, até a deposição final em um congelador a -80 ° C.
   Nota: com antecedência, usar uma agulha estéril para perfurar um furo pequeno em tubos de microcentrifuga para evitar o fracasso da Copa durante a imersão dos tubos microcentrifuga no nitrogênio líquido a -190 ° C.
4. Mergulhe a peça de 500 mg de tecido de amostra-a ser usado para análise histológica-em um tubo contendo 5 mL de formol a 10%.
   Nota: Use a pinça mosquito apenas em casos de sangramento excessivo durante a cirurgia. Em tais casos, capturar o navio com a pinça mosquito ligate e fechar até alcançar a hemostasia.

As características dos participantes são fornecidas na tabela 1. Os pontos na área da incisão caiu dentro dos próximos dias 8-12. Nós completamos um total de 115 biópsias do tecido adiposo subcutâneo utilizando o método não-diatermia de biópsia cirúrgica abdominal em homens adultos saudáveis (idade: 35,2 ± 6,9 anos; índice de massa corporal: 27,3 ± 4,4; e percentual de gordura corporal: 27,0 ± 9,0%). Pós-biópsia de sangramento excessivo foi observada em três casos (prevalência: 2,61%) dois dias após a cirurgia. Os três indivíduos que experimentaram sangramento excessivo eram mais velhos do que suas contrapartes que experimentaram sem efeitos colaterais [t₍₁₁₃₎=-2.115, p = 0.037], e não outras (ou seja, massa corpo e índice percentual de gordura corporal) foram observadas diferenças (p > 0,05) entre os dois grupos. Finalmente, três meses depois de cada operação, nenhum dos nossos participantes relataram efeitos colaterais (incluindo feridas da pele).

Tabela 1: Características dos participantes.

O objetivo deste estudo foi padronizar uma técnica cirúrgica para biópsia de tecido adiposo abdominal subcutâneo, realizada sob anestesia local com um método não-diatermia em homens saudáveis. Diatermia é comumente usada na sala de cirurgia; no entanto, podem ocorrer efeitos secundários possíveis (ou seja, flash dispara e toxicidade ambiental)⁹ e atrasos na cura¹⁰ . Estes efeitos indesejados de diatermia podem gerar riscos para a saúde para o pessoal operacional e os pacientes/participantes. Portanto, justifica-se um método não-diatermia cirúrgico para biópsia do tecido adiposo subcutâneo.

Observamos um excessivos sangramento em três dos nossos participantes, dois dias após a cirurgia. Estes três indivíduos relataram dor na área da incisão. Para tratar esses casos, a área da incisão da pele foi reaberta, qualquer excesso de sangue foi removido e a área foi limpa com solução salina e fechada usando a mesma técnica descrita acima. Sem complicações foram registradas depois disso e cicatrização normal foi observada nos dias subsequentes. Nossos resultados mostraram efeitos colaterais mínimos após o método não-diatermia: três casos de excessiva pós operação sangrando 115 operações (2,61%). Provas anteriores de biópsias do tecido adiposo baseada em agulha mostraram menor sangramento em um de 10 participantes 12 h após a cirurgia de¹⁵, enquanto nenhum sangramento significativo ocorreu em indivíduos obesos saudáveis após uma biópsia do tecido adiposo de lado-corte agulha de técnica⁶. Com base nos nossos resultados, prevemos que um método de biópsia do tecido adiposo cirúrgica de diatermia não pode eliminar o risco de lesão de pele, flash dispara e toxicidade lançado no ambiente operacional, que são causados por diatermia durante cirúrgica de tecido adiposo biópsia.

Relatórios anteriores indicaram que o envelhecimento é positivamente associado com anormalidades na hemostasia²⁰. Curiosamente, os três indivíduos que experimentaram sangramento excessivo no estudo atual foram significativamente mais velhos (por oito anos, em média) do que aqueles que não experimentaram efeitos secundários. Portanto, pode-se notar que indivíduos mais velhos têm um risco maior de efeitos colaterais quando o método de biópsia do tecido adiposo cirúrgica de diatermia não é aplicado. No entanto, acreditamos que a prevalência de tais efeitos colaterais é muito baixa (ou seja, 2,61%) para causar alguma preocupação significativa. Note-se que os nossos participantes previamente preenchido um questionário de histórico médico para determinar seu estado de saúde. Sem condições de doença crônica anterior foram relatadas pelos participantes, incluindo os três participantes que mostrou sangramento excessivo de pós operação. Da mesma forma, nenhum tratamento medicação crônica anterior foi relatado por ambos os participantes que mostraram e aqueles que não apresentaram qualquer sangramento excessivo. Portanto, a pós-operação hemorragia excessiva que observamos no estudo atual não pode ser atribuída a condições anteriores de doença crônica e/ou tratamento de medicação crônica anterior. Com esta luz, a prevalência desse efeito colateral pode ser diferente se a técnica é aplicada a populações clínicas.

Um passo crítico durante a biópsia cirúrgica proposta adiposo tecido é garantir uma anestesia local antes da incisão, que impede qualquer dor e desconforto no participante. Além disso, uma pré-seleção da história alérgica ao anestésico deve ser feita para evitar complicações alérgicas durante a injeção do anestésico. Além disso, é essencial para garantir a hemostasia antes que a incisão é fechada para prevenir hemorragias pós operação, embora seja importante manter contato com os participantes durante vários dias após o procedimento é realizado até que a cura completa é alcançada para descobrir quaisquer anormalidades potenciais e para prevenir a infecção e/ou casos de hemorragia pós operação.

Limitações da técnica proposta biópsia incluem o desconforto que a área da incisão pode causar aos participantes, particularmente relacionados com sua capacidade de confortavelmente sentar e tomar uma duche/banheira, até alcançar a cura completa. Os participantes devem ser instruídos a evitar lavar a área da incisão para prevenir a infecção, bem como para substituir a gaze estéril adesiva sobre a área da incisão, todos os dias até a cura completa é alcançada. Este procedimento diário pode causar desconforto. Finalmente, é importante ressaltar que nosso objetivo foi apresentar e padronizar uma técnica nova. Nesta luz, nós não usamos um controle grupo empresa baseada em agulha subcutânea gordura biópsias para quantificar as diferenças entre esta técnica e o método não-diatermia recém-introduzida.

Como sugerido anteriormente^4,7,8, a técnica de biópsia cirúrgica proposta pode oferecer amostras de tecido com maior integridade do que a técnica de agulha-baseado. Com efeito, usando esta técnica, fomos capazes de executar o mRNA e análises de proteína no tecido obtido e, além disso, a cubos de parafina formulário para usam na análise histológica. Sugerimos também, evitando a diatermia em biópsias cirúrgicas tecido adiposo subcutâneo, dado que a hemostasia e cicatrização normal podem ser conseguidos com nossa técnica.

Em conclusão, nossa biópsia cirúrgica de tecido adiposo subcutâneo abdominal de padronizado usando um método não-diatermia pode ser realizada com segurança em homens saudáveis ao lado do cama, com efeitos colaterais mínimos.

Os autores declaram que eles têm não tem interesses financeiro concorrente.

Este trabalho recebeu financiamento do Horizonte 2020 (grant acordo n. º 645710) da União Europeia e quadro 7 programas (concessão acordos n. º 612547 e 319010). Os autores desejam agradecer Dr. Fotini Sourli-Chasioti para a assistência com o procedimento de biópsia. Os autores também agradecer o Sr. Yiorgos Paterakis por sua valiosa ajuda na preparação do vídeo.