Una técnica para biopsia de tejido adiposo Abdominal subcutáneo mediante un método no-diatermia

Estandarizó una biopsia de tejido adiposo abdominal utilizando un método de diatermia no realizado bajo anestesia local. Se produjeron tres casos de excesiva después de la operación sangrado fuera de 115 operaciones (2,61%). Concluimos que una biopsia quirúrgica de tejido adiposo abdominal utilizando un método de diatermia no puede aplicarse con seguridad a hombres sanos.

Biopsias de tejido adiposo ofrecen muestras de tejido que, en el análisis, pueden proporcionar interesantes descripciones de mecanismos relacionados con el metabolismo y la enfermedad. Para obtener biopsias de tejido adiposo subcutáneo en la zona abdominal, los investigadores y los médicos utilizan una cirugía o una técnica basada en la aguja. Sin embargo, biopsias quirúrgicas de grasa subcutáneas pueden ofrecer muestras de tejido que pueden proporcionar una visión más completa de las complejidades de índices biológicos en tejido adiposo blanco. Por lo general, una biopsia quirúrgica de tejido adiposo incluye un tratamiento de diatermia para la cauterización de los vasos de sanguíneos prevenir el sangrado excesivo. Sin embargo, efectos secundarios, como fogonazos y las lesiones de piel en el tejido, se han divulgado después de diatermia. Por lo tanto, el objetivo fue estandarizar una biopsia de tejido adiposo abdominal quirúrgica realizada bajo anestesia local utilizando un método no-diatermia. Se realizaron biopsias de tejido adiposo subcutáneo 115 en hombres sanos utilizando un método no-diatermia abdominal biopsia quirúrgica. Nuestros resultados mostraron tres casos de excesiva después de la operación sangrado fuera de 115 operaciones (2,61%). En conclusión, nuestra biopsia quirúrgica de tejido adiposo abdominal subcutáneo estandarizado utilizando un método de diatermia no puede aplicarse con seguridad a hombres sanos en la cabecera, con efectos secundarios mínimos.

Biopsias de tejido adiposo ofrecen muestras de tejido que, en el análisis, pueden proporcionar una visión general perspicaz de mecanismos relacionados con el metabolismo y la enfermedad. Por ejemplo, se utilizan para el cáncer de mama tumor identificación¹, ácido graso composición examen²e investigación sobre enfermedades metabólicas y hormonales importantes vías³. Para obtener biopsias de tejido adiposo subcutáneo en la zona abdominal, los investigadores y los médicos utilizan una cirugía o una técnica basada en la aguja. Sin embargo, las biopsias quirúrgicas de grasa subcutáneas pueden ofrecer muestras de tejido que pueden proporcionar una visión más completa de mecanismos biológicos complejos [por ejemplo, Mensajero (ARNm) el ácido ribonucleico expresión, análisis histológico, etc.]⁴ . Previamente han sido utilizados en adultos sanos⁴ y puede realizarse con seguridad en la noche⁵.

La técnica de biopsia de la aguja requiere liposucción intensa que puede destruir la integridad del tejido, y generalmente recupera una pequeña cantidad de tejido (100-500 mg)⁶. Estas muestras de tejido pueden no ser apropiadas para estudios de investigación compleja. Además, en comparación con la técnica de aguja, biopsias quirúrgicas de grasa subcutáneas pueden ofrecer muestras de tejido que pueden dibujar un cuadro más completo de varios índices inflamatorios (por ej., células T y B de la señalización); regulación del citoesqueleto; vías celulares; vías metabólicas de los lípidos, carbohidratos y aminoácidos. y fosforilación oxidativa vías⁴. La técnica de aguja incluye también, un mayor riesgo de contaminación de células de la sangre que la quirúrgica⁴, mientras que proporciona poca información sobre las regiones fibróticas del tejido^4,7,8 .

Por lo general, una biopsia quirúrgica de tejido adiposo incluye un tratamiento de diatermia para la cauterización de los vasos sanguíneos para prevenir el sangrado excesivo⁹. Una diatermia también se utiliza para quemar y destruir los tejidos afectados por neoplasias y verrugas o tejidos que son infectados por la enfermedad⁹. Esta técnica es particularmente aplicable en neurocirugía y ojo cirugía⁹.

El uso excesivo de la diatermia puede conducir a la formación de tejido necrótico, que causan infecciones y retardando la cicatrización proceso¹⁰. De hecho, se han divulgado efectos secundarios como fogonazos y las lesiones de piel en el tejido después de diatermia⁹. Además, se han planteado preocupaciones sobre la toxicidad del humo quirúrgico publicado por diatermia en el entorno de la cirugía, que puede ser inhalado por el paciente y el participante y el personal operativo⁹. De hecho, el uso de la diatermia puede causar toxicidad del aire en la sala de operaciones igual a la producida por fumar cigarrillos seis¹¹ y, aunque las salas de operaciones suelen tener sistemas de ventilación, la contaminación puede durar al menos 20 min¹² . Sin embargo, en los pacientes realizando una cirugía de amigdalectomía, el método de diatermia ha demostrado menos, pero el dolor no significativa, post-operatorios,¹³ y¹⁴ de sangrado que el método de hemostasia ligadura clásica. En general, existe evidencia respecto a las diferencias en el dolor postoperatorio y sangrado apenas las tasas después de biopsias de tejido adiposo en individuos sanos. Dada la falta de pruebas y los efectos secundarios de la diatermia, la estandarización de un método no-diatermia para biopsia de tejido adiposo está garantizado. Por consiguiente, el objetivo de este estudio fue estandarizar una técnica quirúrgica para biopsia de tejido adiposo abdominal subcutáneo, realizada bajo anestesia local utilizando un método no-diatermia en hombres sanos. Por otra parte, describiremos los procedimientos para la recolección de tejido para determinar la expresión del mRNA y la proteína concentración y realizar análisis histológicos.

el estudio se ajustó a las normas establecidas por la declaración de Helsinki y fue aprobado por la Universidad de Tesalia, Departamento de Ciencias de ejercicio, Βiοethics Comité.

1. preparación de los equipos de cirugía y consumibles

1. colocar un campo quirúrgico desinfectado en un soporte de Mayo quirúrgico de 4 ruedas.
2. Posición de los siguientes insumos y equipo quirúrgico en un soporte de Mayo quirúrgico 4 ruedas:
   Un par de tijeras de operación recta (15 cm)
   un bisturí (Nº 11)
   mango de una bisturí
   un par de tijeras curvas (14 cm)
   pinza un mosquito
   un par de pinzas de Kocher
   una pinza quirúrgica
   povidona-yodo (en un estéril gasa)
   una sutura (4.0)
   un par de tijeras rectas (11 cm)
   (15 cm) del sostenedor de la uno aguja
   cinco gasas estériles
   una gasa estéril adhesivo
   una jeringa de 10 mL con una aguja desinfectada
   10 mL de xilocaína 2% (sin adrenalina)
   uno par de guantes quirúrgicos desinfectados
3. Coloque los siguientes materiales sobre un banco separado:
   dos tubos de microcentrífuga
   un tubo que contenga 5 mL de formalina al 10%
   un recipiente pequeño que contenga 50-100 mL de nitrógeno líquido a-190 ° C.

2. Preparación de los participantes

1. que los participantes siguen un rápido de 8 h ¹⁵ antes del procedimiento de biopsia.
2. Tienen los participantes abstenerse de ejercicio físico, estrés excesivo, el alcohol y activo y pasivo antes de 72 h la biopsia ^{16 , 17}.

3. Realizar la biopsia de tejido adiposo subcutáneo

1. posición del participante en el lecho quirúrgico en una posición supina.
2. Desinfectar la región de la incisión con povidona-yodo.
3. Inyectar 10 mL de xilocaína 2% (sin adrenalina) lentamente y constantemente ¹⁸ en la región seleccionada para servir como anestesia local.
4. Colocar un campo quirúrgico estéril sobre el área a cubrir el cuerpo de los participantes, excepto la región de la incisión.
5. Al menos 3-5 min después, aplique presión con un par de pinzas en el área de anestesia local y pregunta al participante si siente cualquier dolor ¹⁹ para asegurarse de que la anestesia local se ha logrado.
6. Coloque el bisturí Nº 11 en el mango del bisturí.
7. Crear una incisión de 2-2.5 cm de longitud, 3-5 cm hacia la izquierda o derecha del ombligo.
8. Quitar el tejido subcutáneo con un par de recta 15 cm tijeras del funcionamiento.
9. Una vez que el tejido adiposo se revela, capturarlo con un par de pinzas y tijeras curvas 14 cm.
10. Corte y retire aproximadamente 1 g de tejido adiposo.
11. Después del retiro de tejido, coloque gasas estériles sobre la incisión para conseguir la hemostasia.
12. Cuando se confirma la hemostasia, capturar la 4.0 sutura con una aguja de 14 cm y la piel con un par de pinzas quirúrgicas hasta el tejido subcutáneo.
13. Insertar la aguja de sutura en la piel, hacia el tejido subcutáneo, mientras que la piel y subcutáneo están estrechamente alineados.
14. Con la aguja de sutura, seguir una técnica en continuo zig-zag en el tejido subcutáneo hasta que impulsado desde el exterior de la piel. Continúe hasta que se cierra la incisión de la piel.
15. Externamente atar la sutura.
16. Limpiar la zona de la incisión con solución salina y cubrir con una gasa estéril adhesivo.

4. La deposición del tejido

1. separar el tejido adiposo recogido en tres piezas: 150, 350 y 500 mg.
2. Posición de las piezas de magnesio 150 y 350 del tejido de la muestra en tubos de microcentrífuga.
3. Tubos de microcentrífuga de sumergir los dos en el pequeño recipiente con nitrógeno líquido a-190 ° C hasta la deposición final en un congelador a -80 ° C.
   Nota: por adelantado, use una aguja estéril para perforar un pequeño agujero en los tubos de microcentrífuga para evitar fracaso de Copa durante la inmersión de los tubos de microcentrífuga en nitrógeno líquido a -190 ° C.
4. Sumergir la pieza de 500 mg de tejido de la muestra-que se utilizará para el análisis histológico-en un tubo que contenga 5 mL de formalina al 10%.
   Nota: Use las pinzas de mosquito sólo en casos de sangrado excesivo durante la cirugía. En tales casos, capturar la nave con las pinzas de mosquito para ligar y cerrar hasta logra hemostasia.

Las características de los participantes se proporcionan en la tabla 1. Los puntos de sutura en la zona de la incisión se cayeron en los próximos días 8-12. Completamos un total de 115 biopsias de tejido adiposo subcutáneo mediante el método de diatermia no biopsia quirúrgica abdominal en hombres adultos sanos (edad: 35,2 ± 6,9 años, índice de masa corporal: 27,3 ± 4.4; y porcentaje de grasa corporal: 27,0 ± 9.0%). Sangrado excesivo después de la biopsia fue observado en tres casos (prevalencia: 2,61%) dos días después de la cirugía. Los tres individuos que experimentaron sangrado excesivo eran mayores que sus contrapartes que no experimentó efectos secundarios [t₍₁₁₃₎=-2.115, p = 0,037], y no otros (es decir, masa cuerpo e índice de porcentaje de grasa corporal) se observaron diferencias (p) > 0.05) entre los dos grupos. Finalmente, tres meses después de cada operación, ninguno de los participantes informó efectos secundarios (incluyendo heridas de la piel).

Tabla 1: Características de los participantes.

El objetivo de este estudio fue estandarizar una técnica quirúrgica para la biopsia de tejido adiposo abdominal subcutáneo, realizada bajo anestesia local con un método no-diatermia en hombres sanos. La diatermia se utiliza comúnmente en la sala de operaciones; sin embargo, pueden ocurrir efectos secundarios (es decir, fogonazos y toxicidad ambiental)⁹ y retrasos en la curación de¹⁰ . Estos efectos no deseados de la diatermia pueden generar riesgos para la salud para el personal operativo y pacientes/participantes. Por lo tanto, un método quirúrgico no diatermia para biopsia de tejido adiposo subcutáneo está garantizado.

Se observó un excesivos sangrado en tres de los participantes dos días después de la cirugía. Estos tres individuos informaron de dolor en el área de la incisión. Para tratar estos casos, se reabrió la zona de la incisión de la piel, cualquier exceso de sangre fue quitado, y el área se limpia con solución salina y cerrado utilizando la misma técnica descrita anteriormente. Complicaciones no se informaron después y cicatrización normal se observó en los días subsecuentes. Nuestros resultados han mostrado efectos secundarios mínimos después del método no diatermia: tres casos de excesiva después de la operación sangrado fuera de 115 operaciones (2,61%). Pruebas anteriores de las biopsias de tejido adiposo basada en aguja demostraron menor sangrado en uno de cada 10 participantes 12 h después de la cirugía¹⁵, mientras que sangrado significativo no ocurrió en individuos obesos sanos después de una biopsia de tejido adiposo de corte lateral técnica⁶de la aguja. En base a nuestros resultados, esperamos que un método de biopsia no diatermia quirúrgica el tejido adiposo puede eliminar el riesgo de lesión de piel, fogonazos y toxicidad en el entorno, que son causadas por diatermia durante cirugía del tejido adiposo biopsia.

Informes anteriores han indicado que el envejecimiento es positivamente asociado con anormalidades en la hemostasia²⁰. Curiosamente, los tres individuos que experimentaron sangrado excesivo en el estudio actual fueron significativamente mayores (de ocho años, en promedio) que quienes no experimentaron efectos secundarios. Por lo tanto, puede señalarse que individuos de edad avanzada tienen un mayor riesgo de efectos secundarios cuando se aplica el método de biopsia no diatermia quirúrgica el tejido adiposo. Sin embargo, creemos que la prevalencia de estos efectos secundarios es muy baja (es decir, 2,61%) a causar alguna preocupación importante. Cabe señalar que los participantes de antemano llena un cuestionario de historial médico para determinar su estado de salud. No hay condiciones previas de la enfermedad crónica fueron divulgadas por los participantes, incluyendo a los tres participantes que demostró una hemorragia excesiva después de la operación. Del mismo modo, tratamiento previo de la medicación crónica no fue reportado por los participantes que demostraron tanto los que no presentaron sangrado excesivo. Por lo tanto, la posterior a la operación sangría excesiva que se observó en el estudio actual no puede atribuirse a condiciones previas de enfermedad crónica o tratamiento crónico de la medicación anterior. En este sentido, el predominio de este efecto secundario puede ser diferente si la técnica se aplica a las poblaciones clínicas.

Un paso crítico durante la biopsia quirúrgica propuesta el tejido adiposo es anestesia local antes de la incisión, lo que impide cualquier dolor y molestia en el participante. Además, se realizará una preselección de historia alérgica a la anestesia para prevenir complicaciones alérgicas durante la inyección anestésica. Además, es crucial asegurar la hemostasia antes de la incisión se cierra para prevenir el sangrado después de la operación, mientras que es importante estar en contacto con los participantes durante varios días después de que el procedimiento se realiza hasta logra una cura completa para descubrir cualquier anormalidad potencial y para prevenir la infección o en casos de sangrado después de la operación.

Limitaciones de la técnica de biopsia de la propuesta incluyen la molestia que área de la incisión puede provocar en los participantes, especialmente relacionadas con su capacidad de sentarse cómodamente y tomar un baño, hasta logra una cura completa. Los participantes deben indicarse para evitar el lavado de la zona de la incisión para prevenir la infección, así como para reemplazar la gasa estéril adhesivo sobre el área de la incisión todos los días hasta logra una cura completa. Este procedimiento diario puede causar malestar. Finalmente, es importante tener en cuenta que nuestro propósito era introducir y estandarizar una técnica nueva. En este sentido, no utilizamos un control grupo empresa basada en aguja subcutánea grasa biopsias con el fin de cuantificar las diferencias entre esta técnica y el método de diatermia no recién introducido.

Como sugerido anteriormente^4,7,8, la técnica de biopsia quirúrgica propuesta puede ofrecer muestras de tejido con más integridad que la técnica de aguja. De hecho, usando esta técnica, hemos podido realizar mRNA y análisis de proteínas en el tejido obtenido y, además, a los cubos de parafina forma para utilizan en el análisis histológicos. Además, sugerimos evitar diatermia en biopsias de tejido adiposo subcutáneo quirúrgica, dado que se logra la hemostasia y la cicatrización normal con nuestra técnica.

En conclusión, nuestra biopsia quirúrgica de tejido adiposo abdominal subcutáneo estandarizado utilizando un método de diatermia no se puede realizar con seguridad en hombres sanos en la cabecera, con efectos secundarios mínimos.

Los autores declaran que no tienen intereses financieros que compiten.

Este trabajo recibió financiación de horizonte 2020 (beca Convenio Nº 645710) de la Unión Europea y marco 7 (acuerdos de subvención Nº 612547 y 319010) programas. Los autores desean agradecer a Dr. Fotini Sourli-Chasioti por la ayuda con el procedimiento de biopsia. Los autores agradecen también el Sr. Yiorgos Paterakis por su valiosa ayuda en la preparación del video.