经非透法皮下腹脂肪组织活检技术

我们用局部麻醉下的 non-diathermy 法对腹部脂肪组织进行了活检。三例术后大出血115手术 (2.61%) 发生。我们的结论是, 腹部脂肪组织手术活检使用 non-diathermy 的方法可以安全地应用于健康男性。

脂肪组织活检提供组织样本, 经分析后, 可提供有关代谢和疾病机制的有见地的概述。为了获得腹部区域的皮下脂肪组织活检, 研究人员和医生使用的是外科手术或 needle-based 技术。然而, 手术皮下脂肪活检可以提供组织样本, 可以提供更全面的概述的复杂性生物指标的白色脂肪组织。通常, 手术脂肪组织活检包括透治疗烧灼血管, 以防止过度出血。然而, 在透后, 有报道称, 在组织中出现了闪光和皮肤损伤等副作用。因此, 我们的目的是规范一个外科腹部脂肪组织活检进行局部麻醉使用 non-diathermy 方法。我们进行了115皮下脂肪组织活检的健康男性使用 non-diathermy 腹部手术活检方法。我们的结果显示, 三例术后出血过多, 115 手术 (2.61%)。总之, 我们的标准化皮下腹部脂肪组织手术活检使用 non-diathermy 方法可以安全地应用于健康的人在床边, 最小的副作用。

脂肪组织活检提供组织样本, 经分析后, 可以提供有关新陈代谢和疾病的机制的有见地的概述。例如, 它们用于乳腺癌肿瘤的鉴定¹, 脂肪酸组成检查的², 以及重要的代谢和荷尔蒙疾病通路的研究³。为了获得腹部区域的皮下脂肪组织活检, 研究人员和医生使用的是外科手术或 needle-based 技术。然而, 手术皮下脂肪活检可以提供组织样本, 可能提供一个更全面的概述复杂的生物机制 [例如,信使核糖核酸 (mRNA) 的表达, 组织学分析,等]⁴.它们以前已用于健康成人⁴ , 可在床边⁵中安全地执行。

needle-based 活检技术需要强烈的抽脂, 可能破坏组织的完整性, 它通常检索少量的组织 (100-500 毫克)⁶。这些组织标本可能不适合复杂的研究研究。此外, 与 needle-based 技术相比, 手术皮下脂肪活检可以提供组织样本, 可以绘制一个更完整的图片的几个炎症指数 (例如, b-和 T 细胞信号);细胞骨架调节;细胞通路;脂质、碳水化合物和氨基酸的代谢途径;和氧化磷酸化途径⁴。此外, needle-based 技术包括更高的风险, 血液细胞污染比外科手术一个⁴, 而提供了关于组织的纤维化区域的小信息^4,7,8.

通常, 手术脂肪组织活检包括透治疗烧灼血管, 以防止过多出血⁹。透也被用于烧伤和破坏受疾病感染的组织和疣或组织的影响⁹。这项技术特别适用于神经外科和眼科手术⁹。

过度使用透可能导致坏死组织的形成, 导致感染和延迟愈合过程¹⁰。事实上, 在透⁹之后, 报告的副作用如闪光火和组织中的皮肤损害。此外, 有人担心透的外科烟雾对手术环境的毒性, 这可能会被参与者/病人和操作人员吸入⁹。事实上, 使用透可能会导致手术室空气的毒性等于吸烟六香烟的¹¹和, 虽然手术室通常有良好的通风系统, 污染可以持续至少20分钟¹².然而, 在进行扁桃体手术的患者中, 透方法显示出较少, 但显著, 术后疼痛¹³和出血的¹⁴比传统的结扎止血方法。总的来说, 关于健康个体脂肪组织活检后疼痛和出血率差异的证据几乎不存在。鉴于缺乏证据和透的副作用, 有必要对脂肪组织活检的 non-diathermy 方法进行标准化。因此, 本研究的目的是规范一项手术技术的皮下腹部脂肪组织活检, 进行局部麻醉下使用 non-diathermy 法的健康男性。此外, 我们概述了组织收集的程序, 以确定 mRNA 的表达和蛋白质浓度, 并进行组织学分析。

该研究符合《赫尔辛基宣言》规定的标准, 并获得萨利大学、运动科学系、#914; 我和 #959; 道德委员会.

1. 手术设备和消耗品的准备

1. 将一个消毒的外科手术场放置在一个4轮手术的梅奥站上.
2. 将下列耗材和手术设备放置在4轮手术的梅奥站上:
   一双直操作剪刀 (15 厘米)
   一手术刀 (No. 11)
   一手术刀柄
   一双弯曲剪刀 (14 厘米)
   一只蚊子钳
   一对科克镊子
   一个外科镊子
   聚维酮碘 (在无菌纱布)
   一条缝合线 (4.0)
   一双直剪刀 (11 厘米)
   一针架 (15 厘米)
   五无菌纱布
   一胶粘剂无菌纱布
   一10毫升注射器与消毒针
   10mL 2% 因 (没有肾上腺素)
   一消毒手术手套
3. 将以下材料放在单独的工作台上:
   两个离心管
   一管含有5毫升的10% 福尔马林
   一个小容器, 其中含有50-100 毫升液氮在-190 和 #176;

2。参加者的准备

1. 在活检过程之前让参与者遵循8小时的快速 ¹⁵ 。
2. 让参加者在活检之前不要进行体育锻炼, 过度的压力, 酒精, 主动和被动吸烟72小时 ^{16 , 17} .

3。执行皮下脂肪组织活检

1. 将参与者置于仰卧位的手术床上.
2. 使用聚维酮碘对切口区域进行消毒.
3. 将10毫升的2% 因 (无肾上腺素) 缓慢而稳步地注入到选定区域中, 作为局部麻醉.
4. 在该区域放置一个无菌手术场, 以覆盖参与者的身体, 不包括切口区域.
5. 至少3-5 分钟后, 用一对镊子按压局部麻醉区域, 并询问参与者是否感到疼痛 ¹⁹ 以确保局部麻醉已实现.
6. 将 No. 11 手术刀附在手术刀柄上.
7. 创建切口 2-2. 5 厘米长度, 3-5 厘米到左边或右侧的肚脐.
8. 用一对直15厘米的操作剪刀将皮下组织取出.
9. 一旦脂肪组织显露, 用一对镊子和一对弯曲的14厘米剪刀捕捉它.
10. 切割并除去大约1克脂肪组织.
11. 组织切除后, 在切口处放置无菌纱布, 以达到止血效果.
12. 当止血被证实时, 用14厘米针和皮肤用一双外科镊子捕捉4.0 缝合, 直到皮下组织可见.
13. 将缝合针插入皮肤, 向皮下组织移动, 而皮肤和皮下紧密排列.
14. 用缝合针, 沿着一个连续的曲折技术进入皮下组织, 直到从皮肤外部驱动。继续, 直到皮肤切口关闭.
15. 外部绑住缝合线
16. 用生理盐水清洗切口面积, 并用无菌纱布覆盖.

4。组织的沉积

1. 将收集的脂肪组织分离为三块: 150、350和500毫克.
2. 将150和350毫克样品组织放置在离心管中.
3. 将两个离心管浸入小容器中, 将液氮浸泡在-190 和 #176; c 直到在-80 和 #176 的冷冻库中最终沉积; c.
   注: 预先使用无菌针头刺穿离心管中的一个小孔, 以避免在-190 和 #176 的液氮浸入离心管时发生杯状故障; C.
4. 浸泡500毫克样品组织-用于组织学-一管含有5毫升10% 福尔马林.
   注: 只有在手术过程中出血过多的情况下才使用蚊虫钳。在这种情况下, 捕获的船只与蚊子钳结扎和关闭, 直到止血达到.

参与者的特征在表 1中提供。切口区域的缝线在接下来的8-12 天内脱落。我们一共完成了115皮下脂肪组织活检使用 non-diathermy 腹部外科活检方法在健康成人 (年龄: 35.2 ±6.9 年; 身体质量索引: 27.3 ± 4.4; 和身体脂肪百分比: 27.0 ± 9.0%)。术后两天观察三例 (患病率: 2.61%) 后活检过度出血。三名经历过大出血的人比没有经历过任何副作用的人年长 (t₍₁₁₃₎=-2.115, p = 0.037), 没有其他差异 (即,身体质量指数和体脂百分比) 观察 (p和 #62; 0.05) 两组之间。最后, 每次手术后三月, 我们的参与者都没有报告任何副作用 (包括皮肤创伤)。

表 1: 参加者的特征。

本研究的目的是规范一项手术技术的皮下腹部脂肪组织活检, 进行局部麻醉下进行了 non-diathermy 方法的健康男性。透在手术室里常用;但是, 可能出现的副作用 (即,闪火和环境毒性)⁹和愈合中的延迟¹⁰ 。透的这些有害影响会给操作人员和患者/参与者带来健康风险。因此, 有必要进行皮下脂肪组织活检的手术 non-diathermy 方法。

在手术后两天后, 我们观察到三的参与者出血过多。这三人报告了切口部位的疼痛。为了治疗这些病例, 皮肤切口的面积重新开放, 任何多余的血液被清除, 并使用上述相同的技术, 用生理盐水和封闭区进行清洁。在此之后没有出现并发症, 并在随后的几天内观察到正常的愈合情况。我们的结果显示, non-diathermy 方法后的副作用最小: 三例术后大出血115手术 (2.61%)。以前的证据从 needle-based 脂肪组织活检显示轻微出血的10名参加者12小时后的手术¹⁵, 而没有显着出血发生在健康的肥胖个体后侧切脂肪组织活检针技术⁶。根据我们的结果, 我们预计, non-diathermy 手术脂肪组织活检方法可以消除风险的皮肤损害, 闪光的火灾和毒性释放在操作环境, 这是造成的透在手术脂肪组织活检.

以前的报告表明, 老化是积极与异常止血²⁰。有趣的是, 在目前的研究中经历过大出血的三人比那些没有任何副作用的人年龄要大 (平均八岁)。因此, 可以注意到, 当 non-diathermy 手术脂肪组织活检方法应用时, 老年人的副作用有较高的风险。然而, 我们认为这种副作用的盛行率太低 (即, 2.61%) 导致任何重大问题。应该指出的是, 我们的参与者预先填写了一份病史调查表, 以确定他们的健康状况。参加者不报告既往的慢性病情况, 包括三名表现出过度出血的患者。同样, 以前没有出现过慢性药物治疗的患者和未显示过大出血的患者。因此, 在目前的研究中, 我们观察到的术后过度出血不能归因于以前的慢性病和/或以前的慢性药物治疗。在这种情况下, 这种副作用的流行可能是不同的, 如果该技术适用于临床人群。

在建议的手术脂肪组织活检的关键步骤是确保局部麻醉前切口, 这可以防止任何疼痛和不适的参与者。此外, 必须对麻醉剂过敏史进行筛选, 以预防麻醉注射过程中的过敏性并发症。此外, 这是至关重要的, 以确保止血之前, 切口关闭, 以防止术后出血, 而重要的是要保持与参与者的接触, 在手术完成后的几天, 直到完全愈合达到发现任何潜在的异常, 并防止感染和/或术后出血的情况。

所建议的活检技术的局限性包括切口区域对参加者可能造成的不适, 特别是与他们舒适地坐下来洗澡/洗澡的能力有关, 直到达到完全愈合为止。应指示参与者避免冲洗切口区域以防止感染, 并在切口区域每天更换不粘胶纱布, 直至达到完全愈合。这个日常程序可能会引起不适。最后, 重要的是要注意, 我们的目的是引进和标准化一项新技术。在这一点上, 我们没有使用控制组进行 needle-based 皮下脂肪活检, 以量化该技术和新引进的 non-diathermy 方法之间的差异。

如前所建议的^4,7,8, 建议的外科活检技术可以提供比 needle-based 技术更高的完整性的组织样本。事实上, 利用这一技术, 我们能够对获得的组织进行 mRNA 和蛋白质分析, 此外, 还可以在组织学分析中形成石蜡立方体。此外, 我们建议避免透在外科皮下脂肪组织活检, 鉴于止血和正常愈合可以实现我们的技术。

总之, 我们的标准化皮下腹部脂肪组织手术活检使用 non-diathermy 方法可以安全地执行在健康的男性在床边, 最小的副作用。

作者声明他们没有竞争的金融利益。

这项工作得到了欧洲联盟2020期 (赠款协议 645710) 和第七框架 (赠款协议612547和 319010) 方案的资助。作者希望感谢 Dr. Fotini Sourli-Chasioti 对活检程序的帮助。作者还感谢 Mr. Yiorgos Paterakis 在视频制作方面的宝贵帮助。