The authors have no acknowledgements.

כל המחקרים הושלמו בהתאם להנחיות רגולציה ומוסדיות. ההיבטים חיה המחקר הוערכו על ידי תוכנית השתמש קנט מדעי Corporation בעלי חיים, אושר על ידי ועדת טיפול בבעלי חיים פרדו ושימוש (PACUC), וביצע בהתאם מדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה 22. הערה: מערכת ההרדמה דיגיטלית הזרימה הנמוכה בשימוש בפרוטוקול זה מצויד oximeter דופק משולב. 1. להגדיר את מערכת הרדמת הזרימה הנמוכה עם Oximeter הדופק המשולב <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור משלוח Isoflurane <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר מקור גז מוביל. כדי לנצל את משאבת האוויר הפנימית, להתיר כניסת נמל על גב, ומאפשר המשאבה הפנימית לאוויר חדר צריך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר מיכל פחם למצות הנמל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר מתאם Y כדי קדמית של הזרימה הנמוכה, מערכת הרדמה דיגיטלית. השתמש קליפים בצבעים לחבר את הענפים הלבנים ל- tהוא חרטומו, וענפים כחולים לתא האינדוקציה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מלחציים קליפ לבן סגורים קליפ כחול פתוח מלחציים לכוון זרימת אוויר לתא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר מזרק 2 מ&quot;ל. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לניטור פיסיולוגי, שימוש Oximeter הדופק המשולב <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את חיישן כפה הדופק oximeter לנמל בגב המערכת הרדמה זרימה נמוכה, שכותרתו &quot;AUX&quot;. </li></ol></li></ol> 2. הגדר את הגדרות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור הרדמה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את מערכת ההרדמה, ואת לגשת לתפריט הגדרה. העיתונות שהוצבה כדי לגשת לתפריט ראשי&gt; הרדמה&gt; Setup באדום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר את סוכן הרדמה. לחץ על Set Up כדי להדגיש סוג Anest באדום. השתמש בחצים למעלה ולמטה כדי לבחור Isoflurane. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדרת גודל המזרק. העיתונות שהוצבה כדי להדגיש גודל Syr. השתמש בחצים למעלה ולמטה כדי לבחור מזרק 2 מ&quot;ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדרת מיקום רוקן. לחץ על Set עד highlight קבוצה ריק באדום. Secure מזרק הכוס הריקה, מדוכא לגמרי בבלוק שייר מזרק על ידי הצבת את המזרק כך קלאמפ Holding מזרק יושב על צווארון המתכת של מזרק. הקש על חץ למעלה או למטה כדי להזיז את בלוק Pusher כך בלוק Pusher יוצר קשר אור עם החלק העליון של הבוכנה במזרק. לחץ על בחירה כדי לקבוע עמדה ריקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העיתונות שהוצבה כדי להדגיש סר באדום. הסר את המזרק למלא את המזרק עם isoflurane באמצעות מתאם העליון בקבוק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את המזרק למערכת ההרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ראש בצינור אספקת הרדמה. העיתונות שהוצבה כדי להדגיש Tube ממשלה באדום. לחץ כלפי מטה עד ההרדמה עוברת דרך המזרק לתוך הולם השחורה על הבלוק המאדה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר הרדמה. העיתונות שהוצבה כדי להדגיש אפשר באדום. השתמש בחצים למעלה ולמטה כדי לבחור כן. לחץ על הפעלה / חזרה כדי לחזור לתפריט הראשי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר אאספקת ir ונפח דקות. לחץ על Set Up כדי להדגיש אייר סופליי באדום. השתמש בחצים למעלה ולמטה כדי לבחור משאבה פנימית. העיתונות שהוצבה כדי להדגיש כרך דק באדום. קצב הזרימה נקבע ל -250 מ&quot;ל / דקה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לניטור פיסיולוגי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את קצב לב זוהה מינימום העכבר (240). העיתונות שהוצבה כדי לגשת לתפריט ראשי&gt; MouseStat. השתמש בחצים מעלה ומטה כדי להגדיר קצב לב מינימום. </li></ol></li></ol> 3. בגין משלוח הרדמה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשרות את העכבר <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחץ על הפעלה / חזרה פעמיים כדי להיכנס למצב הפעלה ולהתחיל זרימת האוויר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את העכבר בתא אינדוקציה, סגירת המכסה בחוזקה. התאם את ידית ריכוז סוכן ההרדמה עד 3%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צג עד שהעכבר הגיע המטוס הרצוי של הרדמה, נקבע על ידי אובדן ליישר רפלקס. התאם את ריכוז סוכן ההרדמה לפי צורך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שבעל החיים מאבדים את רפלקס ליישר שלהnd הוא הרדים מספיק, סובב את חוגת ריכוז הרדמה ל -0%. המחברים מצאו בעבר כי מתן זרימת האוויר כדי לשטוף בחדר האינדוקציה 30-60 שניות מספיקות כדי לטהר את החדר בלי היפוך עומק הרדמת 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפתיחה מהירה של מלחציים הלבן לכוון את האוויר אל facemask, ולסגור את מלחציים הכחול המוביל לתא האינדוקציה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את תא הרחק חוקר, הסר את העכבר, ומיד להתאים את חרטומו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מרכז את החיה על כרית חימום אינפרא אדומה, להגדיר כדי לשמור על טמפרטורת גוף על 37 מעלות צלזיוס באמצעות בדיקה רקטלית על לולאת משוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר סמן העכבר נמצא יציב על חרטומו, להתאים את ריכוז isoflurane ל -1.5% או לפי צורך בתחזוקה על ידי סיבוב ידית ריכוז סוכן ההרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפחתת נפח דק עבור תחזוקה. קצב זרימת המינימום לתמוך החיה שווה פעמים 1.5-2.2 נפח הדקות של החיה (עבור עכבר 30 גרם,מינימום של 52 מ&quot;ל / דקה). עיין בהוראות היצרן עבור קצב זרימת הגדרה מומלץ ספציפי לסגנון החרטום ולהתאים לפי צורך. העיתונות שהוצבה כדי לגשת לתפריט הראשי, ולאחר מכן לחץ על Set עד הכרך דק הוא מסומן באדום. השתמש בחצים למעלה ולמטה כדי להתאים את זרימת היעד. לחץ על הפעלה / חזרה לחזור למסך הראשי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אשר עומק ההרדמה כפי שנקבע על ידי חוסר רפלקס נסיגה במהלך קמצוץ interdigital. החל משחת עיניים לעיניים למניעת יובש במהלך הרדמה. </li></ol></li></ol> 4. בגין ניטור פיסיולוגי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח חיישן על בלוק של כפה אחורית. מקם את החיישן כך שהאור האדום הוא מתחת הכפה ומאיר את הכף. השתמש בחצים מעלה ומטה על המסך כדי להציג את oxiwave. החיה כעת הוא מורדם בבטחה באמצעות זרימה נמוכה, מונחה מזרק, מאדה דיגיטלית. </li></ol> 5. הסר את החיה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כבה אתמשלוח הרדמה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לעצור את המסירה של הרדמה, להפוך ידית ריכוז סוכן ההרדמה לקבוע מינימום (או 0%) ולהסיר מן החי facemask. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צג את העכבר במהלך התאוששות הרדמה. לאחר העכבר הפך אמבולטורי מלא, להחזיר אותו לכלוב. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Damen, F. W., Adelsperger, A. R., Wilson, K. E., Goergen, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+traditional+and+integrated+digital+anesthetic+vaporizers.">Comparison of traditional and integrated digital anesthetic vaporizers.</a> JAALAS. 54 (6), 756-762 (2015).</li><li>Chakravarti, S., Basu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modern+Anaesthesia+Vapourisers.">Modern Anaesthesia Vapourisers.</a> Indian J Anaesth. 57 (5), 464-471 (2013).</li><li>Carroll, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Small Animal Anesthesia and Analgesia. , (2008).</li><li>Tranquilli, W. J., Thurmon, J. C., Grimm, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Lumb and Jones' veterinary anesthesia and analgesia. , 23-86 (2013).</li><li>Ambrisko, T. D., Klide, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+isoflurane+and+Sevoflurane+vaporizers+over+a+wide+range+of+oxygen+flow+rates.">Evaluation of isoflurane and Sevoflurane vaporizers over a wide range of oxygen flow rates.</a> Am J Vet Res. 67 (6), 936-940 (2006).</li><li>McKelvey, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Veterinary Anesthesia and Analgesia. , (2003).</li><li>Thomas, J., Lerche, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Anesthesia and Analgesia for Veterinary Technicians. , 335 (2011).</li><li>Flecknell, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Laboratory animal anaesthesia. , (2009).</li><li>Mapleson, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+elimination+of+rebreathing+in+various+semiclosed+anaesthetic+systems.">The elimination of rebreathing in various semiclosed anaesthetic systems.</a> Brit J Anaesth. 26 (5), 323-332 (1954).</li><li>Ward, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physical+principles+and+maintenance.">Physical principles and maintenance.</a> Anaesthetic equipment. , (1985).</li><li>El-Attar, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guided+isoflurane+injection+in+a+totally+closed+circuit.">Guided isoflurane injection in a totally closed circuit.</a> Anaesthesia. 46 (12), 1059-1063 (1991).</li><li>Lockwood, G., Chakrabarti, M. K., Whitwam, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+computer-controller+closed+anaesthetic+breathing+system.">A computer-controller closed anaesthetic breathing system.</a> Anaesthesia. 48 (8), 690-693 (1993).</li><li>Lowe, H. J., Cupic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dose-regulated+automated+anesthesia+(Abstract).">Dose-regulated automated anesthesia (Abstract).</a> Br. J. Clin. Pharmacol. 12 (2), 281-282 (1971).</li><li>Soro, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+accuracy+of+the+anesthetic+conserving+device+(Anaconda)+as+an+alternative+to+the+classical+vaporizer+in+anesthesia.">The accuracy of the anesthetic conserving device (Anaconda) as an alternative to the classical vaporizer in anesthesia.</a> Anes Analg. 111 (5), 1176-1179 (2010).</li><li>Walker, T. J., Chackrabarti, M. K., Lockwood, G. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uptake+of+desflurane+during+anaesthesia.">Uptake of desflurane during anaesthesia.</a> Anaesthesia. 51 (1), 33-36 (1996).</li><li>Weingarten, M., Lowe, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+circuit+injection+technic+for+syringe-measured+administration+of+methoxyflurane:+a+new+dimension+in+anesthesia.">A new circuit injection technic for syringe-measured administration of methoxyflurane: a new dimension in anesthesia.</a> Anes Analg. 52 (4), 634-642 (1973).</li><li>Enlund, M., Wiklund, L., Lambert, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+device+to+reduce+the+consumption+of+a+halogenated+anaesthetic+agent.">A new device to reduce the consumption of a halogenated anaesthetic agent.</a> Anaesthesia. 56 (5), 429-432 (2001).</li><li>Kelly, J. M., Kong, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accuracy+of+ten+isoflurane+vaporisers+in+current+clinical+use.">Accuracy of ten isoflurane vaporisers in current clinical use.</a> Anaesthesia. 66 (8), 682-688 (2011).</li><li>Matsuda, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NARCOBIT+-+A+newly+developed+inhalational+anesthesia+system+for+mice.">NARCOBIT - A newly developed inhalational anesthesia system for mice.</a> Exp Anim. 56 (2), 131-137 (2007).</li><li>Matsuda, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+newly+developed+inhalation+anesthesia+system+and+intraperitoneal+anesthesia+on+the+hemodynamic+state+in+mice.">Comparison of newly developed inhalation anesthesia system and intraperitoneal anesthesia on the hemodynamic state in mice.</a> Biol Pharm Bull. 30 (9), 1716-1720 (2007).</li><li>Voightsverger, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sevoflurane+ameliorates+gas+exchange+and+attenuates+lung+damage+in+experimental+lipopolysaccharide-induced+lung+injury.">Sevoflurane ameliorates gas exchange and attenuates lung damage in experimental lipopolysaccharide-induced lung injury.</a> Anesthesiology. 111 (6), 1238-1248 (2009).</li><li>Garber, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , (2011).</li></ol>

פרויקט זה מומן עם ציוד ומימון על ידי קנט מדעי Corporation, איגוד הלב האמריקני כדי CJ Goergen (SDG18220010), ו Purdue University. המחברים קריסטה Bigiarelli ואירינה Toore הנם עובדי תאגיד מדעי קנט המייצר ציוד המשמש במאמר זה. פרסום גישה פתוח למאמר זה ממומן על ידי קנט מדעי חברה.

מערכת ההרדמה הדיגיטלית התזרים נמוך מאפשרת למשתמש להרדים עכברים ביעילות ברמות ספיקה נמוכה מאוד ללא שימוש כל גז דחוס. זה מאוד שונה מאדים פסיבית תקן, שרובם דורשים מקור גז דחוס ברמות ספיקה מינימלית של כ -500 מ&quot;ל / דקה. מאדים רגיל לנצל מחייג כי אינו מדייק בין דרגות, והם חייבים להיות שירות מדי שנה כדי לשמור על דיוק. מערכת הרדמה מונע מזרק יכולה לספק ריכוז מסוים של הרדמה בקצב זרימת הסט לחשב את מהירות דרושה המדויקת של משאבת המזרק. כיולים שיגרתי הם מיותרים, וכתוצאה מכך חיסכון בעלויות ובזמן נוסף. קצב הזרימה המינימאלי המומלץ לשמור חיה הנמצא במעגל הלא rebreathing הוא 1.5-2.2 פעמים את נפח הדקות של החיה. קצב הזרימה של 100 מ&quot;ל / דקה השתמשו במחקר זה עלה מינימלי זה למסור הרדמה מספיק לבעלי החיים. Settin קצב הזרימהGS הן קריטית עבור טכניקת משלוח הרדמה זו, כמו את קצב הזרימה קשור ישירות לכמות של isoflurane בשימוש למשך פרק זמן קצוב. כאשר נעשה שימוש ברמות ספיקה נמוכה, טכניקה זו יכולה לצמצם במידה ניכרת את כמות isoflurane נדרש במהלך שימוש, בעוד החיה עדיין היא מורדמת ביעילות 1,19-21. עלויות ציוד חדשות בין מאדים המסורתי ומכשירי אדים דיגיטליים זרימה נמוכה ניתנות להשוואה. עם זאת, מערכת ההרדמה הדיגיטלית הזרימה נמוכה יש את היכולת לספק גם isoflurane או sevoflurane. זו מבטלת את צורך isoflurane המיועד ומכשירי אדי דיוק sevoflurane, הפחתת עלויות ציוד ראשוניות לקבוצות הן באמצעות סוכני הרדמה. לאחרונה השוואות שפורסמו בין טכנולוגיות המאדות הציעו חיסכון בעלויות לאורך זמן כאשר באמצעות אידוי דיגיטלי זרימה נמוכה 1,19,20. תוצאות ההשוואות האלה אפשר להשתמש בו כדי לאמוד חיסכון בעלויות פוטנציאל במשך שנה. כפי שsuming הגדרות שימוש רגיל שבוצעו 2 במרווחים hr, 5 ימים בשבוע במשך 52 שבועות, מאדה isoflurane המסורתית יצרוך 3.8 ליטר של isoflurane, או שנים עשר 250 מ&quot;ל בקבוקים. מאדה דיגיטלי זרימה נמוכה בשימוש באותו התדר היה לצרוך רק 0.32 L, או שניים 250 מ&quot;ל בקבוקים. צריכת פחם מכל מצטמצמת גם. בהנחה שכל מכל מחזיק 50 גרם של גז פסולת מפסולת, מאדה מסורתית תמלא כ 21 בלוני פחם במשך שנה. לשם השוואה, מאדה דיגיטלית זרימה נמוכה תדרוש 6 או פחות. מאדה מסורתי היה נזקק כ 5 בלוני גז גדולים בשנה, כל אחד עם קיבולת של 9,500 ל משאבת האוויר הפנימית, זמינה בדגמים מסוימים של מאדים הדיגיטלי זרימה נמוכה, המייתר את צורך גז דחוס. אם גז דחוס היה אמור לשמש, המערכת תשתמש רק 1 גליל בשנה 1. הטכניקה ניתן לשנות בהתאם לצורך. vaporiz דיגיטלי זרימה נמוכהERS לאפשר למשתמש להתאים עומק ההרדמה במהירות ובדייקנות. אם עומק ההרדמה חייב להגדיל או להקטין, המשתמש יכול להגדיל את ריכוז ההרדמה במרווחים של 0.1% באמצעות החיוג על החלק העליון של המערכת. קצב הזרימה יכול להיות מותאם גם לפי הצורך לאורך כל ההליך. פרוטוקול זה מנצל מזרק 2 מיליליטר, למרות בגדלי מזרק גדולים זמינים עבור הליכים ארוכים יותר. משאבת האוויר הפנימית מציעה למשתמשים את האפשרות להרדים בעלי חיים ללא צורך מקור גז דחוס. עבור פרוצדורות מחייבות הזרמת גז דחוס או חמצן, יש למשתמש את האפשרות להתחבר למקור גז למערכת-הזרימה הנמוכה ולא באמצעות אוויר שמסביב. המשתמש יכול להמשיך לספק את מקור האוויר הנבחר לאורך כל ההליך, או יכול לעבור בין המשאבה הפנימית ומקור גז דחוס לפי צורך. לדוגמא, המשתמש יכול להגדיר את המערכת כדי לספק אוויר חדר דרך המשאבה הפנימית במהלך אינדוקציה ותחזוקה, אבל לספק אצטילן משלימהgen במהלך ההתאוששות. אמנם יש יתרונות רבים לשימוש מאדה דיגיטלי זרימה נמוכה, יש מגבלות גם כן. בגלל שסתום סומק אינו כלול, שטיפה לתא באופן ידני עם אוויר נקי לפני הפתיחה היא הדרך היחידה לטהר את תא האינדוקציה. מערכת זו מיועדת לפעול ברמות ספיקה נמוכה בלבד ואינו לספק הרדמה מעל ספיקות של 800 מיליליטר / דקה, שבו מאדים מסורתי אינו יכול להיות עם ספיקות עד 10 ליטר / דקה. המערכת המסוימת הזה ולכן הוא מתאים רק עבור מינים של בעלי חיים קטנים. בנוסף, המערכת מחזיקה פחות סוכן הרדמה לעומת מאדה מסורתית. ייתכנו מצבים שבהם מזרק חייב להיות ומילא במהלך הליך. עם זאת, עיכובים במהלך המילוי יכולים להיות מופחתים על ידי מראש מילוי מזרק שני סמוך כדי להחליף את המזרק הריק. בגדלי מזרק עד 10 מ&quot;ל זמינים כדי להפחית את הצורך למלא מזרקים באמצע ההליך. לבסוף, בניגוד מאדה מסורתית, את fl הנמוךמאדה דיגיטלית ow דורשת חשמל. סוללות זמינות לשימוש במקרים בם החשמל אינו זמין או במקרה של הפסקת חשמל. מחקרים קודמים הראו כי מערכות דיגיטליות זרימה נמוכה לצרוך פחות isoflurane, גז מוביל, ומכלי פחם לעומת מערכת הרדמה מסורתית 1,19,20. הפחתת גז הרדמה מפסולת גם יכולה לזהות ירידת גז הרדמה פסולת, למרות שנדרשת עוד עבודה רבה בתחומים אלו. ניתן להשתמש ספקטרוסקופיה גז אינפרא אדום כדי לפקח על ייצור isoflurane פסולת, ותגים מד מינון ניתן להשתמש כדי לכמת את החשיפה isoflurane ל אנשי המעבדה בהשוואות בעתיד. לסיכום, טכניקה זו למסירת הרדמה תהיה מועילה לקבוצות ביצוע הרדמה מכרסמת בשל בטיחות משופרת, יעיל, דיוק מעל מערכות מסורתיות.

ישנם מכשירי אידוי דיוק רבים זמינים לשימוש וטרינרי הפועלות בין הספיקות של 0.5-10 ליטר / דקה 2. ספיקות אלה אינן אידיאליות מכרסמים, כמו הטווח הוא גבוה לעומת נפח דקת הנשימה הקטן שלהם. ספיקה גבוהה אינן מומלצת בפועל וטרינרים בשל לקידומם של היפותרמיה וייבוש של 3,4 בדרכי הנשימה. יתר על כן, מדריכי יצרן מאדה וטרינרים נפוצים רבים מזהירים כי ספיקות גבוהות עלולות לגרום לעלייה הקרה תנודות backpressure. כמו כן הוכח כי מאדים סטנדרטיים רבים להיות מדויק מתחת ספיקות של 500 מ&quot;ל / דקה, ושיעור זה נחשב קצב הזרימה מינימום בתחום וטרינרי 5-7. בעל חיים שאפשר לקיים מעגל T-piece או שונה במעגל ביין באמצעות קצב הזרימה נמוך כמו 1.5-2.2 פעמים את נפח דקות של החיה 8-10. ספיקות אלה נחשבים sufficient כדי למנוע rebreathing גזים פגו ולמנוע עלייה בריכוז הפחמן הדו-חמצני בדם 8. שימוש המלצת קצב הזרימה הזה, עכבר 30 גרם יכול להישמר בקצב זרימה נמוך כמו 52 מיליליטר / דקה, כמעט פי עשרה פחות ממינימום 500 מיליליטר / דקת המקובלים מאדה מסורתי. בעוד מאדה מסורתית תלוי זרימת גז ובלחץ אטמוספרי אידוי הרדמה פסיבי, מאדה הזרקה ישירה מודד את זרימת הגז הטריה הכוללת מזריק האדים ישירות לתוך זרם הגז 2. חלק במכשירי אידוי הזרקה ישירה לנצל משאבת מזרק כדי לנהל הרדמה לתוך זרם הגז. בקרות ממוחשבות לאפשר מערכות אלה כדי להתאים את מהירות משאבת מזרק אוטומטית להזריק נפח הסוכן נזיל הנדרש להגיע לריכוז הרצוי של הרדמה. מאדים מונע מזרק זמין ומאושר לשימוש קליני ילדים, תצורות דומות רבות כאלאסתטי שימור התקנים בקליניקה 11-16. זמן קצר לאחר אישורם, התקני שימור הרדמה עם מאדים משאבת מזרק הותאמו לשימוש במחקרים בבעלי חיים 8,17,18. בניגוד מאדה מסורתית, מערכת הזרקה ישירה ניצול משאבת מזרק אינה מוגבלת על ידי קצב זרימת מינימום כדי לשמור על דיוק. מסיבה זו, הטכנולוגיה הזו היא אידיאלית לשימוש הרדמה מכרסמת ומקרים אחרים בם ספיקות נמוכות נחוצות. היתרונות וחיסכון בעלויות פוטנציאליות הקשורות עיצוב מאדה זו השראה בפיתוח מערכות הרדמה חדשה שתוכננה במיוחד עבור מכרסמים 1,19,20. המערכת החדשה משלבת גם מובנה משאבת אוויר, המאפשר למשתמש לנהל הרדמה ללא צורך מקור גז דחוס. כיתרון נוסף, המערכת היא מראש מכויל לשימוש הן עם isoflurane ו sevoflurane. עם כניסתה של טכנולוגיה מאדה זה בתחום בחיות מעבדה, אניt כיום ניתן להרדים בחיות מעבדה קטנות ברמות ספיקה קרובות לרמות מומלצות ללא צורך גז דחוס.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="873">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Anesthetic Equipment</td>
			<td style="width:131px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:340px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:283px;">SomnoSuite Low-Flow Digital Anesthesia System</td>
			<td style="width:131px;">Kent Scientific Corporation</td>
			<td style="width:119px;">SOMNO</td>
			<td style="width:340px;">Includes anti-spill, anti-vapor bottle top adapter; Y adapter tubing; charcoal scavenging filter</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:283px;">MouseSTAT Pulse Oximeter &#38; Heart Rate Monitor</td>
			<td style="width:131px;">Kent Scientific Corporation</td>
			<td style="width:119px;">SS-MSTAT-Module</td>
			<td style="width:340px;">Integrated into SomnoSuite</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:283px;">MouseSTAT Mouse Paw Sensor</td>
			<td style="width:131px;">Kent Scientific Corporation</td>
			<td style="width:119px;">MSTAT-MSE</td>
			<td style="width:340px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:283px;">2mL Glass Syringe</td>
			<td style="width:131px;">Kent Scientific Corporation</td>
			<td style="width:119px;">SOMNO-2ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:283px;">Low-Cost Induction Chamber, 0.5L</td>
			<td style="width:131px;">Kent Scientific Corporation</td>
			<td style="width:119px;">SOMNO-0705</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:283px;">Low Profile Facemask, x-small</td>
			<td style="width:131px;">Kent Scientific Corporation</td>
			<td style="width:119px;">SOMNO-0304</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Animal Warming</td>
			<td style="width:131px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:283px;">PhysioSuite Physiological Monitoring System with RightTemp Homeothermic Warming</td>
			<td style="width:131px;">Kent Scientific Corporation</td>
			<td style="width:119px;">PS-RT</td>
			<td style="width:340px;">Includes infrared warming pad, rectal probe, and pad temperature probe</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:283px;">Anesthetic Agents 
			and Medications</td>
			<td style="width:131px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:283px;">Isoflurane (250mL bottle)</td>
			<td style="width:131px;">Piramal Healthcare</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Puralube Opthalmic Ointment</td>
			<td style="width:131px;">Perrigo</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

use of a low-flow digital anesthesia system for mice and rats

A traditional vaporizer depends on flowing gas and atmospheric pressure for passive anesthetic vaporization. Newly developed direct injection vaporizers utilize a syringe pump to directly administer volatile anesthetics into a gas stream. Unlike a traditional vaporizer, it can be used at very low flow rates, making it ideal for use on mice and rats. 
The equipment's capability to use low flow rates could result in a substantial cost savings due to the reduced need for anesthetic agents, compressed gas, and charcoal scavenging filters1. A lower flow rate means less waste of anesthetic gas and likely reduces the risk of anesthetic exposure to laboratory personnel. Thus, the high levels of precision and safety associated with direct injection vaporizers, along with a reduced need for anesthetic agents, compressed gas, and charcoal filters are beneficial for research requiring small animal anesthesia. 
The goal of this protocol is to demonstrate the use of a syringe-driven direct injection vaporizer as part of a digital, low-flow anesthesia system. The direct injection vaporizer is capable of accurately delivering anesthesia at very low flow rates compared to a traditional vaporizer, making it a promising alternative for controlled gas anesthetic delivery to rodents.

בעלי חיים עכברות 3 מבוגרים C57 / BL6NTac (Taconic, גיל 6-7 שבועות; משקל 15 +/- 1 גרם) היו מורדמים ומתוחזק עם isoflurane 1.3-1.5% בעוד קצב הלב, ריווי חמצן, ואת קצב הנשימה נוטרו. כל העכברים היו Murine הפתוגן חינם כפי שנקבע על ידי בדיקה שגרתית הספק לפני ההגעה למתקן. החיות היו שוכן קבוצה caging microisolation ובתנאים-גישה חופשית צ&#39;או מכרסמים רגיל ומים בבקבוק. שימוש isoflurane מערכת הרדמת הזרימה הנמוכה מודדת את כמות סוכן הרדמה הנותר בתוך המזרק בזמן שימוש. ההיקף בתוך המזרק, כפי שהיא נמדדת על ידי מערכת ההרדמה צוין החיה הועברה חרטומו, ושוב בסוף תקופת האחזקה. ההיקף הסופי wכמו מפחית את הנפח הראשוני כדי לכמת את כמות הרדמה הצורכת במהלך תקופת האחזקה (איור 1). פרמטרים פיזיולוגיים קצב פעימות הלב, SpO 2, וקצב הנשימה נוטרו במהלך תחזוקה באמצעות הדופק oximetry (איורים 2 - 4). טמפרטורת גוף נשמרה 37.5 ° C באמצעות כרית חימום אינפרא אדומה. כל עכבר נשמרה בהצלחה ברמות ספיקה נמוכה של 100 מ&quot;ל / דקה של אוויר החדר תחת מטוס כירורגית של הרדמה במשך 60 דקות, כפי שנקבע על ידי חוסר רפלקס הנסיגה צביטה interdigital. העכבר לא ער או להגיב צובט interdigital להחיל לסירוגין במהלך תקופת האחזקה. קצב הלב של החיות (איור 2), חמצן בדם (איור 3), ואת קצב נשימה (איור 4) נשאר relat<html> ively יציבה לאורך כל תקופת המחקר. בשל מיצוב בעלי חי חיישן, אות קצב הנשימה מעכבר 1 ועכבר 3 הייתה מקוטעים נקטעה המדידה. כאשר המיצוב של החיה הותאם, האות משופרת ואת קצב הנשימה הנמדד היה דומה לאחרים בנקודות זמן דומים. מערכת ההרדמה דיגיטלית הזרימה הנמוכה בשימוש ממוצע של 0.63 מיליליטר של isoflurane במהלך 60 הדקות של תקופת אחזקה (איור 1). <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/54436/54436fig1.jpg" /> איור 1:.. שימוש Isoflurane כמות isoflurane המשמשת מיליליטר במשך שלושה עכברים שונים מעל 1 שעות של תחזוקת הרדמה באמצעות מערכת הרדמה הדיגיטלית זרימה נמוכה <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54436/54436fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <html> o: keep-together.within-page = &quot;1&quot;&gt; <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/54436/54436fig2.jpg" /> איור 2:.. Heart Rate קצב הלב של שלושה עכברי פעימות לדקה (BPM) 5-60 דקות לאחר אינדוקצית הרדמה ראשונית עם מערכת הרדמת הזרימה נמוכה הדיגיטלית <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54436/54436fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/54436/54436fig3.jpg" /> איור 3:.. ריווי חמצן רמות רוויון חמצן בדם (%) של שלושה עכברים 5-60 דקות לאחר אינדוקצית הרדמה ראשונית עם מערכת הרדמת הזרימה נמוכה הדיגיטלית <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54436/54436fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> e = &quot;1&quot;&gt; <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/54436/54436fig4.jpg" /> איור 4:.. נשימת דרג קצב הנשימה של שלושה עכברי נשימות לדקה (BPM) 5-60 דקות לאחר אינדוקצית הרדמה ראשונית עם מערכת הרדמת הזרימה נמוכה הדיגיטלית <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54436/54436fig4large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Use of a Low-flow Digital Anesthesia System for Mice and Rats at JoVE.com

Use of a Low-flow Digital Anesthesia System for Mice and Rats

Here, we present a protocol to more safely and efficiently administer anesthetic gas to mice using a digital, low flow anesthesia system utilizing a syringe-driven direct injection vaporizer.

שימוש של מערכת הרדמה דיגיטלית זרימה נמוכה עבור עכברים וחולדות

A traditional vaporizer depends on flowing gas and atmospheric pressure for passive anesthetic vaporization. Newly developed direct injection vaporizers ...

use-of-a-low-flow-digital-anesthesia-system-for-mice-and-rats

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

17.8K Views.  Purdue University. Here, we present a protocol to more safely and efficiently administer anesthetic gas to mice using a digital, low flow anesthesia system utilizing a syringe-driven direct injection vaporizer. 

Video: Use of a Low-flow Digital Anesthesia System for Mice and Rats

A Novel Rescue Technique for Difficult Intubation and Difficult Ventilation

We describe a novel non surgical technique to maintain oxygenation and ventilation in a case of difficult intubation and difficult ventilation, which works especially well with poor mask fit.
Can not intubate, can not ventilate" (CICV) is a potentially life threatening situation. In this video we present a simulation of the technique we used in a case of CICV where oxygenation and ventilation were maintained by inserting an endotracheal tube (ETT) nasally down to the level of the naso-pharynx while sealing the mouth and nares for successful positive pressure ventilation.
A 13 year old patient was taken to the operating room for incision and drainage of a neck abcess and direct laryngobronchoscopy. After preoxygenation, anesthesia was induced intravenously. Mask ventilation was found to be extremely difficult because of the swelling of the soft tissue. The face mask could not fit properly on the face due to significant facial swelling as well. A direct laryngoscopy was attempted with no visualization of the larynx. Oxygen saturation was difficult to maintain, with saturations falling to 80%. In order to oxygenate and ventilate the patient, an endotracheal tube was then inserted nasally after nasal spray with nasal decongestant and lubricant. The tube was pushed gently and blindly into the hypopharynx. The mouth and nose of the patient were sealed by hand and positive pressure ventilation was possible with 100% O2 with good oxygen saturation during that period of time. Once the patient was stable and well sedated, a rigid bronchoscope was introduced by the otolaryngologist showing extensive subglottic and epiglottic edema, and a mass effect from the abscess, contributing to the airway compromise. The airway was secured with an ETT tube by the otolaryngologist.This video will show a simulation of the technique on a patient undergoing general anesthesia for dental restorations.

We describe a technique to maintain oxygenation and ventilation using an endotracheal tube inserted nasally to the level of the naso-pharynx while sealing the mouth and nares for successful positive pressure ventilation.

הצלה רומן טכניקה אינטובציה קשה אוורור קשה

We describe a novel non surgical technique to maintain oxygenation and ventilation in a case of difficult intubation and difficult ventilation, which ...

Guidelines for Elective Pediatric Fiberoptic Intubation

Fiberoptic intubation in pediatric patients is often required especially in difficult airways of syndromic patients i.e. Pierre Robin Syndrome. Small babies will desaturate very quickly if ventilation is interrupted mainly to high metabolic rate. We describe guidelines to perform a safe fiberoptic intubation while maintaining spontaneous breathing throughout the procedure. Steps requiring the use of propofol pump, fentanyl, glycopyrrolate, red rubber catheter, metal insuflation hook, afrin, lubricant and lidocaine spray are shown.

We describe guidelines to perform a safe and efficient elective fiberoptic intubation in pediatric patients while maintaining spontaneous ventilation.

הנחיות אינטובציה בחירה fiberoptic ילדים

Fiberoptic intubation in pediatric patients is often required especially in difficult airways of syndromic patients i.e. Pierre Robin Syndrome. Small ...

Use of a Hanging Weight System for Coronary Artery Occlusion in Mice

Murine studies of acute injury are an area of intense investigation, as knockout mice for different genes are becoming increasingly available 1-38. Cardioprotection by ischemic preconditioning (IP) remains an area of intense investigation. To further elucidate its molecular basis, the use of knockout mouse studies is particularly important 7, 14, 30, 39. Despite the fact that previous studies have already successfully performed cardiac ischemia and reperfusion in mice, this model is technically very challenging. Particularly, visual identification of the coronary artery, placement of the suture around the vessel and coronary occlusion by tying off the vessel with a supported knot is technically difficult. In addition, re-opening the knot for intermittent reperfusion of the coronary artery during IP without causing surgical trauma adds additional challenge. Moreover, if the knot is not tied down strong enough, inadvertent reperfusion due to imperfect occlusion of the coronary may affect the results. In fact, this can easily occur due to the movement of the beating heart.
Based on potential problems associated with using a knotted coronary occlusion system, we adopted a previously published model of chronic cardiomyopathy based on a hanging weight system for intermittent coronary artery occlusion during IP 39. In fact, coronary artery occlusion can thus be achieved without having to occlude the coronary by a knot. Moreover, reperfusion of the vessel can be easily achieved by supporting the hanging weights which are in a remote localization from cardiac tissues.
We tested this system systematically, including variation of ischemia and reperfusion times, preconditioning regiments, body temperature and genetic backgrounds39. In addition to infarct staining, we tested cardiac troponin I (cTnI)
as a marker of myocardial infarction in this model. In fact, plasma levels of cTnI correlated with infarct sizes (R2=0.8). Finally, we could show in several studies that this technique yields highly reproducible infarct sizes during murine IP and myocardial infarction6, 8, 30, 40, 41. Therefore, this technique may be helpful for researchers who pursue molecular mechanisms involved in cardioprotection by IP using a genetic approach in mice with targeted gene deletion. Further studies on cardiac IP using transgenic mice may consider this technique.

A murine model for myocardial ischemia and ischemic preconditioning is an important tool study cardioprotective mechanisms in vivo. Here, we report an easy applicable in situ model for cardiac IP using a hanging-weight system for coronary artery occlusion.

השימוש במערכת משקל תליה על חסימת העורקים הכליליים של עכברים

Murine studies of acute injury are an area of intense investigation, as knockout mice for different genes are becoming increasingly available 1-38. ...

Use of a Hanging-weight System for Isolated Renal Artery Occlusion

In hospitalized patients, over 50% of cases of acute kidney injury (AKI) are caused by renal ischemia 1-3. A recent study of hospitalized patients revealed that only a mild increase in serum creatinine levels (0.3 to 0.4 mg/dl) is associated with a 70% greater risk of death than in persons without any increase 1. Along these lines, surgical procedures requiring cross-clamping of the aorta and renal vessels are associated with a renal failure rates of up to 30% 4. Similarly, AKI after cardiac surgery occurs in over 10% of patients under normal circumstances and is associated with dramatic increases in mortality. AKI are also common complications after liver transplantation. At least 8-17% of patients end up requiring renal replacement therapy 5. Moreover, delayed graft function due to tubule cell injury during kidney transplantation is frequently related to ischemia-associated AKI 6. Moreover, AKI occurs in approximately 20% of patients suffering from sepsis 6.The occurrence of AKI is associated with dramatic increases of morbidity and mortality 1. Therapeutic approaches are very limited and the majority of interventional trials in AKI have failed in humans. Therefore, additional therapeutic modalities to prevent renal injury from ischemia are urgently needed 3, 7-9. 
To elucidate mechanisms of renal injury due to ischemia and possible therapeutic strategies murine models are intensively required 7-13. Mouse models provide the possibility of utilizing different genetic models including gene-targeted mice and tissue specific gene-targeted mice (cre-flox system). However, murine renal ischemia is technically challenging and experimental details significantly influence results. We performed a systematic evaluation of a novel model for isolated renal artery occlusion in mice, which specifically avoids the use of clamping or suturing the renal pedicle 14. This model requires a nephrectomy of the right kidney since ischemia can be only performed in one kidney due to the experimental setting. In fact, by using a hanging-weight system, the renal artery is only instrumented once throughout the surgical procedure. In addition, no venous or urethral obstruction occurs with this technique. We could demonstrate time-dose-dependent and highly reproducible renal injury with ischemia by measuring serum creatinine. Moreover, when comparing this new model with conventional clamping of the whole pedicle, renal protection by ischemic preconditioning is more profound and more reliable. Therefore his new technique might be useful for other researchers who are working in the field of acute kidney injury.

A precise murine model for acute kidney injury (AKI) due to ischemia is an important tool to investigate acute kidney injury and possibly find therapeutic tools to treat renal injury. The hanging weight system offers a tool for immediate and reliable renal artery occlusion and reperfusion without causing renal congestion.

השימוש במערכת תלוי במשקל עבור חסימת עורק הכליה מבודדת

In hospitalized patients, over 50% of cases of acute kidney injury (AKI) are caused by renal ischemia 1-3. A recent study of hospitalized patients ...

Use of a Hanging-weight System for Liver Ischemia in Mice

Acute liver injury due to ischemia can occur during several clinical procedures e.g. liver transplantation, hepatic tumor resection or trauma repair and can result in liver failure which has a high mortality rate1-2. Therefore murine studies of hepatic ischemia have become an important field of research by providing the opportunity to utilize pharmacological and genetic studies3-9. Specifically, conditional mice with tissue specific deletion of a gene (cre, flox system) provide insights into the role of proteins in particular tissues10-13 . Because of the technical difficulty associated with manually clamping the portal triad in mice, we performed a systematic evaluation using a hanging-weight system for portal triad occlusion which has been previously described3. By using a hanging-weight system we place a suture around the left branch of the portal triad without causing any damage to the hepatic lobes, since also the finest clamps available can cause hepatic tissue damage because of the close location of liver tissue to the vessels. Furthermore, the right branch of the hepatic triad is still perfused thus no intestinal congestion occurs with this technique as blood flow to the right hepatic lobes is preserved. Furthermore, the portal triad is only manipulated once throughout the entire surgical procedure. As a result, procedures like pre-conditioning, with short times of ischemia and reperfusion, can be easily performed. Systematic evaluation of this model by performing different ischemia and reperfusion times revealed a close correlation of hepatic ischemia time with liver damage as measured by alanine (ALT) and aspartate (AST) aminotransferase serum levels3,9. Taken together, these studies confirm highly reproducible liver injury when using the hanging-weight system for hepatic ischemia and intermittent reperfusion. Thus, this technique might be useful for other investigators interested in liver ischemia studies in mice. Therefore the video clip provides a detailed step-by-step description of this technique.

We established a novel murine model of a hanging weight system for portal triad occlusion. This technique may be useful for future investigations of ischemia in murine hepatic models.

השימוש במערכת תלייה משקל של איסכמיה כבד בעכברים

Acute liver injury due to ischemia can occur during several clinical procedures e.g. liver transplantation, hepatic tumor resection or trauma repair and ...

Use of Animal Model of Sepsis to Evaluate Novel Herbal Therapies

Sepsis refers to a systemic inflammatory response syndrome resulting from a microbial infection. It has been routinely simulated in animals by several techniques, including infusion of exogenous bacterial toxin (endotoxemia) or bacteria (bacteremia), as well as surgical perforation of the cecum by cecal ligation and puncture (CLP)1-3. CLP allows bacteria spillage and fecal contamination of the peritoneal cavity, mimicking the human clinical disease of perforated appendicitis or diverticulitis. The severity of sepsis, as reflected by the eventual mortality rates, can be controlled surgically by varying the size of the needle used for cecal puncture2. In animals, CLP induces similar, biphasic hemodynamic cardiovascular, metabolic, and immunological responses as observed during the clinical course of human sepsis3. Thus, the CLP model is considered as one of the most clinically relevant models for experimental sepsis1-3.
Various animal models have been used to elucidate the intricate mechanisms underlying the pathogenesis of experimental sepsis. The lethal consequence of sepsis is attributable partly to an excessive accumulation of early cytokines (such as TNF, IL-1 and IFN-&gamma;)4-6 and late proinflammatory mediators (e.g., HMGB1)7. Compared with early proinflammatory cytokines, late-acting mediators have a wider therapeutic window for clinical applications. For instance, delayed administration of HMGB1-neutralizing antibodies beginning 24 hours after CLP, still rescued mice from lethality8,9, establishing HMGB1 as a late mediator of lethal sepsis. The discovery of HMGB1 as a late-acting mediator has initiated a new field of investigation for the development of sepsis therapies using Traditional Chinese Herbal Medicine. In this paper, we describe a procedure of CLP-induced sepsis, and its usage in screening herbal medicine for HMGB1-targeting therapies.

Sepsis refers to a systemic inflammatory response syndrome resulting from a microbial infection, and can be simulated by a surgical technique termed cecal ligation and puncture (CLP). Here we describe a method to use CLP-induced animal model to screen medicinal herbs for therapeutic agents.

שימוש במודל של בעלי חיים אלח דם להערכת טיפולים צמחים רומן

Sepsis refers to a systemic inflammatory response syndrome resulting from a microbial infection. It has been routinely simulated in animals by several ...

Intraoperative Detection of Subtle Endometriosis: A Novel Paradigm for Detection and Treatment of Pelvic Pain Associated with the Loss of Peritoneal Integrity

Endometriosis is a common disease affecting 40 to 70% of reproductive-aged women with chronic pelvic pain (CPP) and/or infertility. The purpose of this study was to demonstrate the use of a blue dye (methylene blue) to stain peritoneal surfaces during laparoscopy (L/S) to detect the loss of peritoneal integrity in patients with pelvic pain and suspected endometriosis. Forty women with CPP and 5 women without pain were evaluated in this pilot study. During L/S, concentrated dye was sprayed onto peritoneal surfaces, then aspirated and rinsed with Lactated Ringers solution. Areas of localized dye uptake were evaluated for the presence of visible endometriotic lesions. Areas of intense peritoneal staining were resected and some fixed in 2.5% buffered gluteraldehyde and examined by scanning (SEM) electron microscopy. Blue dye uptake was more common in women with endometriosis and chronic pelvic pain than controls (85% vs. 40%). Resection of the blue stained areas revealed endometriosis by SEM and loss of peritoneal cell-cell contact compared to normal, non-staining peritoneum. Affected peritoneum was associated with visible endometriotic implants in most but not all patients. Subjective pain relief was reported in 80% of subjects. Based on scanning electron microscopy, we conclude that endometrial cells extend well beyond visible implants of endometriosis and appear to disrupt the underlying mesothelium. Subtle lesions of endometriosis could therefore cause pelvic pain by disruption of peritoneal integrity, allowing menstrual or ovulatory blood and associated pain factors access to underlying sensory nerves. Complete resection of affected peritoneum may provide a better long-term treatment for endometriosis and CPP. This simple technique appears to improve detection of subtle or near invisible endometriosis in women with CPP and minimal visual findings at L/S and may serve to elevate diagnostic accuracy for endometriosis at laparoscopy.

Loss of peritoneal integrity provides a new paradigm to understand and treat chronic pelvic pain in women with mild forms of endometriosis and can be easily detected using intraoperative instillation of dye at the time of laparoscopy.

איתור intraoperative של אנדומטריוזיס העדין: פרדיגמה חדשה לאיתור וטיפול בכאב באגן הקשורים לפגיעה בשלמות פריטונאלית

Endometriosis is a  common disease affecting 40 to 70% of reproductive-aged women with chronic  pelvic pain (CPP) and/or infertility. The purpose of this ...

A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice

The circumlimbal suture is a technique for inducing experimental glaucoma in rodents by chronically elevating intraocular pressure (IOP), a well-known risk factor for glaucoma. This protocol demonstrates a step-by-step guide on this technique in Long Evans rats and C57BL/6 mice. Under general anesthesia, a "purse-string" suture is applied on the conjunctiva, around the equator and behind the limbus of the eye. The fellow eye serves as an untreated control. Over the duration of our study, which was a period of 8 weeks for rats and 12 weeks for mice, IOP remained elevated, as measured regularly by rebound tonometry in conscious animals without topical anesthesia. In both species, the sutured eyes showed electroretinogram features consistent with preferential inner retinal dysfunction. Optical coherence tomography showed selective thinning of the retinal nerve fiber layer. Histology of the rat retina in cross-section found reduced cell density in the ganglion cell layer, but no change in other cellular layers. Staining of flat-mounted mouse retinae with a ganglion cell specific marker (RBPMS) confirmed ganglion cell loss. The circumlimbal suture is a simple, minimally invasive and cost-effective way to induce ocular hypertension that leads to ganglion cell injury in both rats and mice.

Chronic ocular hypertension is induced by applying a circumlimbal suture in rats and mice, leading to functional and structural deterioration of the retinal ganglion cells consistent with glaucoma.

דגם של גלאוקומה המושרה על ידי תפרים Circumlimbal אצל חולדות ועכברים

The circumlimbal suture is a technique for inducing experimental glaucoma in rodents by chronically elevating intraocular pressure (IOP), a well-known ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart failure. Multiple small-animal models of heart transplantation have been used to study the acute and long-term effects of novel therapies. However, few are tested and demonstrated success in clinical trials. It is of critical importance to evaluate new therapies in a clinically relevant large-animal model for efficient and reliable translation of basic studies&#39;&#160;findings. Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and previously used to investigate novel cardioprotective strategies. This procedure focuses on acute ischemia-reperfusion injury and is a reliable method to investigate novel interventions which have been tested and validated in smaller experimental models, such as the murine model. We demonstrate its usefulness in assessing cardiac performance during the early post-transplantation period and other potential possibilities enabled by the model.

Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and utilized to investigate novel cardioprotective strategies.

מודל הפרה-קליני של השתלת לב אורתוטופית

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Use of an Integrated Low-Flow Anesthetic Vaporizer, Ventilator, and Physiological Monitoring System for Rodents

Low-flow digital vaporizers commonly utilize a syringe pump to directly administer volatile anesthetics into a stream of carrier gas. Per animal welfare recommendations, animals are warmed and monitored during procedures requiring anesthesia. Common anesthesia and physiological monitoring equipment include gas tanks, anesthetic vaporizers and stands, warming controllers and pads, mechanical ventilators, and pulse oximeters. A computer is also necessary for data collection and to run equipment software. In smaller spaces or when performing field work, it can be challenging to configure all this equipment in limited space.
The goal of this protocol is to demonstrate best practices for use of a low-flow digital vaporizer using both compressed oxygen and room air, along with an integrated mechanical ventilator, pulse oximeter, and far infrared warming as an all-inclusive anesthesia and physiological monitoring suite ideal for rodents.

Here, we present a protocol to safely and effectively administer anesthetic gas to mice using a digital, low flow anesthesia system with integrated ventilator and physiological monitoring modules.

שימוש במכשיר אידוי משולב בעל זרימה נמוכה, מאוורר ומערכת ניטור פיזיולוגית למכרסמים

Low-flow digital vaporizers commonly utilize a syringe pump to directly administer volatile anesthetics into a stream of carrier gas. Per animal welfare ...