מקור: אליזבת סוטר1, כריסטופר קורבו1, ג'ונתן בלייז1
1 המחלקה למדעי הביולוגיה, מכללת וגנר, דרך הקמפוס 1, סטטן איילנד ניו יורק, 10301
הטור וינוגרדסקי הוא מערכת אקולוגית זעירה וסגורה המשמשת להעשרת קהילות מיקרוביות משקעים, במיוחד אלה המעורבות ברכיבה על אופניים גופרית. הטור שימש לראשונה את סרגיי וינוגרדסקי בשנות ה-80 של ה-19 ומאז הוא מיושם במחקר של מיקרואורגניזמים רבים ומגוונים המעורבים בביוגוכימיה, כגון פוטוסינתזה, מחמצני גופרית, מפחית גופרתיים, מתנוגנים, מחמצני ברזל, רוכבי חנקן ועוד (1,2).
רוב המיקרואורגניזמים על פני כדור הארץ נחשבים בלתי ניתנים לחישוב, כלומר הם לא יכולים להיות מבודדים במבחנה או על צלחת פטרי (3). הסיבה לכך היא גורמים רבים, כולל כי מיקרואורגניזמים תלויים אחרים עבור מוצרים מטבוליים מסוימים. התנאים בטור של וינוגרדסקי מחקים מקרוב את בית הגידול הטבעי של מיקרואורגניזם, כולל האינטראקציות שלהם עם אורגניזמים אחרים, ומאפשרים לגדל אותם במעבדה. לפיכך, טכניקה זו מאפשרת למדענים לחקור אורגניזמים אלה ולהבין כיצד הם חשובים למחזורים הביו-גיאוכימיים של כדור הארץ מבלי לגדל אותם בבידוד.
סביבות כדור הארץ מלאות במיקרואורגניזמים המשגשגים בכל סוגי בתי הגידול, כגון קרקעות, מי אוקיינוס, עננים ומשקעים במעמקי הים. בכל בתי הגידול, מיקרואורגניזמים תלויים זה בזה. ככל שהמיקרואורגניזם גדל, הוא צורך מצעים מסוימים, כולל דלקים עשירים בפחמן כמו סוכרים, כמו גם חומרים מזינים, ויטמינים וגזים נשימתיים כמו חמצן. כאשר משאבים חשובים אלה נגמרים, מיקרואורגניזמים שונים עם צרכים מטבוליים שונים יכולים לפרוח ולשגשג. לדוגמה, בעמודה וינוגרדסקי, חיידקים צורכים תחילה את החומר האורגני שנוסף תוך כדי פירוק החמצן בשכבות התחתונות של העמודה. ברגע שהחמצן מנוצל, אורגניזמים אנאירוביים יכולים להשתלט ולצרוך חומרים אורגניים שונים. התפתחות רצופה זו של קהילות מיקרוביות שונות לאורך זמן נקראת ירושה (4). ירושת מיקרוביאלית חשובה בטור וינוגרדסקי, שבו פעילות מיקרוביאלית משנה את הכימיה של המשקעים, אשר לאחר מכן משפיע על פעילות של חיידקים אחרים וכן הלאה. מיקרואורגניזמים רבים בקרקעות ובמ משקעים חיים גם לאורך שיפועים, שהם אזורי מעבר בין שני סוגים שונים של בתי גידול המבוססים על ריכוזי המצעים (5). בנקודה הנכונה במעבר הצבע, חיידק יכול לקבל כמויות אופטימליות של מצעים שונים. עם התפתחות טור וינוגרדסקי, הוא מתחיל לחקות את השיפועים הטבעיים הללו, במיוחד בחמצן וגופרית (איור 1).
איור 1: ייצוג של שיפועי חמצן (O2) וגופרית (H2S) המתפתחים בעמודה של וינוגרדסקי.
בעמוד וינוגרדסקי, בוץ ומים מבריכה או ביצות מעורבבים בעמוד שקוף ומותר להם לדגור, בדרך כלל באור. מצעים נוספים מתווספים לעמודה כדי לתת למקורות הקהילה של פחמן, בדרך כלל בצורה של תאית, וגופרית. פוטוסינתזות בדרך כלל מתחילות לגדול בשכבות העליונות של המשתך. מיקרואורגניזמים פוטוסינתזה אלה מורכבים ברובם ציאנובקטריה, המייצרים חמצן ומופיע כשכבה ירוקה או אדומה-חומה (איור 2, טבלה 1). בעוד הפוטוסינתזה מייצרת חמצן, חמצן אינו מסיס מאוד במים והוא יורד מתחת לשכבה זו (איור 1). זה יוצר שיפוע של חמצן, החל בריכוזים גבוהים של חמצן בשכבות העליונות לאפס חמצן בשכבות התחתונות. השכבה המחומצנת נקראת השכבה האירובית והשכבה ללא חמצן נקראת השכבה ה אנאירובית.
בשכבה אנאירובית, קהילות מיקרוביות רבות ושונות יכולות להתרבות בהתאם לסוג וכמות המצעים הזמינים, למקור החיידקים הראשוניים ולנקבוביות המשקעים. בתחתית העמוד, אורגניזמים שמפרקים חומר אורגני באופן אנאירובי יכולים לשגשג. תסיסה מיקרוביאלית מייצרת חומצות אורגניות מפירוק תאית. חומצות אורגניות אלה יכולות לשמש לאחר מכן על ידי מפחית סולפט, אשר מחמצנים את אותם אורגנים באמצעות סולפט, ומייצרים גופרתיתו כיוצר לוואי. הפעילות של מפחית גופרתיים מסומנת אם המשתך הופך שחור, כי ברזל וגופרית מגיבים ליצירת מינרלים שחורים מברזל גופרתי (איור 2, טבלה 1). הגופרית גם מתפזרת כלפי מעלה ויוצרת שיפוע נוסף שבו ריכוזי הגופרית גבוהים בתחתית העמוד ונמוכים בחלק העליון של העמודה (איור 1).
בסמוך לאמצע העמוד, מחמצני גופרית מנצלים את אספקת החמצן מלמעלה וגופרית מלמטה. עם הכמות הנכונה של אור, חמצון גופרית פוטוסינתזה יכול להתפתח בשכבות אלה. אורגניזמים אלה ידועים כחיידק גופרית ירוק וסגול , ולעתים קרובות מופיעים כחיתים וכתמים ירוקים, סגולים או סגולים-אדומים (איור 2, טבלה 1). חיידקי גופרית ירוקה יש סובלנות גבוהה יותר עבור גופרית ובדרך כלל לפתח בשכבה ישירות מתחת חיידקי גופרית סגולה. מעל חיידקי הגופרית הסגולה, חיידקים סגולים שאינם גופרית עשויים להתפתח גם. אורגניזמים אלה פוטוסינתזה באמצעות חומצות אורגניות כתורמים אלקטרונים במקום גופרתי ולעתים קרובות מופיעים כמו שכבה אדומה, סגולה, כתומה או חומה. מחמצני גופרית לא-פוטוסינתטיים יכולים להתפתח מעל החיידקים הסגולים שאינם גופרית, ואלה מופיעים בדרך כלל כחיתים לבנים (איור 2, טבלה 1). בנוסף, בועות עשויות להיווצר גם בעמודה וינוגרדסקי. בועות בשכבות האירוביות מצביעות על ייצור חמצן על ידי הציאנובקטריה. בועות בשכבות אנאירוביות נובעות ככל הנראה מפעילות של מתנוגנים, אורגניזמים אשר באופן אנאירובי לשבור חומר אורגני וליצור מתאן כמו תוצר לוואי.
מיקום בעמודה | קבוצה פונקציונלית | דוגמאות לאורגניזם | מחוון חזותי |
סביבון | פוטוסינתזות | ציאנובקטריה | שכבה ירוקה או חומה אדמדמה. לפעמים בועות של חמצן. |
מחמצני גופרית לא-פוטוסינתטיים | בג'יאטואה, תיובסילוס | שכבה לבנה. | |
חיידקים סגולים שאינם גופרית | רודומיכרוביום, רודוספירילום, רודופסאודמונאס | שכבה אדומה, סגולה, כתומה או חומה. | |
חיידקי גופרית סגולה | כרומטיום | שכבה סגולה, או סגולה-אדומה. | |
חיידקי גופרית ירוקה | כלורוביום | שכבה ירוקה. | |
חיידקים להפחתת גופרתית | Desulfovibrio, Desulfotomaculum, Desulfobacter, Desulfuromonas | שכבה שחורה. | |
ישבן | מתנוגנים | מתנוקוקוס, מתנוזרצ'ינה | לפעמים בועות של מתאן. |
טבלה 1: הקבוצות העיקריות של חיידקים שעשויים להופיע בעמודה וינוגרדסקי קלאסית, מלמעלה למטה. דוגמאות של אורגניזמים מכל קבוצה ניתנות, ואת האינדיקטורים החזותיים של כל שכבה של אורגניזמים מפורטים. מבוסס על פרי ואח ' (2002) ורוגן ואח ' (2005).
1. הגדרת
2. הרכבת טור וינוגרדסקי
3. שינויים אופציונליים בעמודה הקלאסית של וינוגרדסקי
4. ניתוח נתונים
איור 2א: תמונה של טור וינוגרדסקי קלאסי שדגר בטמפרטורת החדר במשך 21 יום. שים לב למ משקעים ירוקים, המעידים על ציאנובקטריה, בחלק העליון של העמודה.
בניסוי זה נאספו מים ומשקעים מבית גידול של מים מתוקים. שני עמודי וינוגרדסקי נבנו והותר להם להתפתח: טור וינוגרדסקי קלאסי דגירה באור בטמפרטורת החדר (איור 2א) וטור וינוגרדסקי דגירה בחושך בטמפרטורת החדר (איור 2B).
איור 2ב: תמונה של טור וינוגרדסקי קלאסי (משמאל), דגירה בטמפרטורת החדר באור במשך 68 ימים ועמוד וינוגרדסקי דגירה בטמפרטורת החדר בחושך במשך 68 ימים (מימין).
לאחר שאפשרו לעמודות להתפתח במשך 7-9 שבועות, ניתן להשוות את השכבות בעמודה הקלאסית לעמודה המודגרת בחושך (איור 2B). בעמודה הקלאסית של וינוגרדסקי, ניתן לצפות בשכבה ציאנובקטריאלית ירוקה ליד החלק העליון של הצינור. ליד מרכז הצינור, ניתן לראות שכבה אדומה-סגולה, המעידה על חיידקים סגולים שאינם גופרית. מתחת לשכבה זו, שכבה סגולה-אדומה נצפתה, המעידה על חיידקי גופרית סגולה. ישירות מתחת לשכבה זו, משקעים שחורים ניתן לראות באזור אנאירובי של הטור, המעיד על הפחתת גופרית חיידקים.
הטור שגדל בחושך (איור 2B) התפתח באופן שונה מהטור הקלאסי של וינוגרדסקי. בדומה לעמודה הקלאסית, הטור הכהה הניב משקעים שחורים בתחתית העמודה, מה שמעיד על הפחתת חיידקים גופרתיים. העמודה הכהה לא הניבה את השכבה הציאנובקטריאלית הירוקה, וגם לא את השכבות האדומות, הסגולות או הירוקות המעידות על לא גופרית סגולה, גופרית סגולה וחיידקי גופרית ירוקים, בהתאמה. קבוצות אלה תלויות באור לצמיחה, ולכן אינן מסוגלות לצמוח בחושך.
התוצאות המדויקות של כל טור וינוגרדסקי ישתנו במידה רבה עם תנאי הדגירה שלהם ובתי הגידול שלהם.
קהילות מיקרוביות שמקורן בבתי גידול של מים מתוקים לא יורגלו לריכוזים גבוהים של מלח ותוספת מלח עשויה להאט או לעכב את הצמיחה. לעומת זאת, ייתכנו מספיק חיידקים הלופיליים בבתי גידול מליחים ומים מלוחים, כך שתוספת מלחים אינה משנה או אפילו משפרת את הצמיחה של שכבות מסוימות בהשוואה לעמוד ללא מלחים נוספים.
משקעים חוליים הם יותר נקבוביים מאשר משקעים בוציים. אם מספיק גופרית מיוצרת משקעים נקבוביים כאלה, גופרתיים יכולים לפזר כל הדרך לראש העמוד ולעכב צמיחה של אורגניזמים אירוביים. במקרה זה, העמודה עשויה להכיל רק שכבות המעידות על אנארובים ואינה יכולה להכיל אירובים, כגון ציאנובקטריה.
מים מתוקים מכילים בדרך כלל פחות סולפט מאשר מים מלוחים. סולפט חשוב לצמיחת חיידקים מפחיתי גופרית. מפחית סולפט יוצרים גופרית כיוצרי לוואי ומצטיינים על ידי התפתחות שכבה שחורה בתחתית העמודה. אם סולפט אינו מתווסף לקהילות מים מתוקים, מפחית גופרית לא יכול לייצר מספיק גופרית. יצירת תוצר לוואי גופרתי חשובה לצמיחת חיידקי גופרית ירוקה וסגולה ומחמצן גופרית לא-פוטוסינתטי. במקרים אלה, מחמצני גופרית עדיין יכולים לגדול באמצעות חלמון הביצה כמקור לגופרית, גם אם מפחית הגופרית (שכבה שחורה) לעולם לא מתפתחים.
אורכי גל שונים של אור צריך לבחור עבור אורגניזמים עם פיגמנטים ספיגה שונים. עמוד שנשמר בחושך יאפשר רק לאורגניזמים לא-פוטו-סינתטיים לגדול, כולל מפחית סולפטים, מחמצני ברזל ומתנוגנים. לפוטוסינתזים יש פיגמנטים הסופגים אור באורכי גל שונים בטווח הנראה (כ-400-700 ננומטר). על-ידי כיסוי עמודה עם, למשל, צלופן כחול, אור כחול (~ 450-490nm) נחסם מלהיכנס לעמודה. כל הפוטוסינתזים בעמודה כוללים פיגמנטים הדורשים את אורכי הגל הכחולים (6) ויש לעכב את צמיחתם. מצד שני, צלופן אדום יחסום אור של ~ 635-700nm. אורכי גל אלה חשובים לפיגמנטים המשמשים ציאנובקטריה (6), בעוד גופרית סגולה, גופרית ירוקה וחיידקים סגולים שאינם גופרית עשויים עדיין להיות מסוגלים לגדול.
לקהילות מיקרוביות שונות עשויות להיות יכולות הסתגלות שונות בתכלית להתמודד עם שינויים בטמפרטורות. טמפרטורות גבוהות יכולות לשפר את שיעורי הפעילות המיקרוביאלית כאשר קיימים מספיק תרמולילים. מצד שני, בהיעדר תרמודילים, טמפרטורות גבוהות עשויות להקטין את הפעילות המיקרוביאלית הכוללת. באופן דומה, טמפרטורות נמוכות עשויות להקטין את הפעילות המיקרוביאלית הכוללת אלא אם הקהילה המיקרוביאלית מכילה מספיק פסיכיאטרים.
הטור של וינוגרדסקי הוא דוגמה למערכת אקולוגית מיקרוביאלית תלויה זו בזו. לאחר ערבוב בוץ, מים, ומצעים נוספים של פחמן וגופרית בעמוד אנכי, המערכת האקולוגית המרובדת צריכה להתייצב לאזורים נפרדים ויציבים במשך מספר שבועות. אזורים אלה תפוסים על ידי מיקרואורגניזמים שונים אשר פורחים בנקודה מסוימת לאורך השיפוע בין המשק העשיר בסולפיד בתחתית לבין משקעים עשירים בחמצן בחלק העליון. על ידי מניפולציה של התנאים והמצעים בתוך הטור וינוגרדסקי, נוכחות ופעילות של מיקרואורגניזמים שונים כגון הלופילים, תרמופילים, psychrophiles, מחמצני גופרית, מפחית גופרית, מחמצני ברזל, פוטוסינתזה ניתן לראות.
Skip to...
Videos from this collection:
Now Playing
Microbiology
128.6K Views
Microbiology
314.4K Views
Microbiology
131.8K Views
Microbiology
165.8K Views
Microbiology
188.1K Views
Microbiology
293.7K Views
Microbiology
93.5K Views
Microbiology
362.6K Views
Microbiology
185.8K Views
Microbiology
86.4K Views
Microbiology
38.1K Views
Microbiology
29.0K Views
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved