Administración de compuestos II

Fuente: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Universidad de Notre Dame, en

Administración compuesta suele ser un componente integral de un estudio en animales. Muchos factores deben ser evaluados para asegurarse de que el compuesto sea entregado correctamente. La vía de administración afecta a los mecanismos de absorción. Las características de la sustancia a ser introducen (pH, viscosidad y concentración) puede dictar qué vía de administración es selected.1,2,3

Las dos vías de administración principales son enterales (vía digestiva) y parenteral (administrado fuera de la zona digestiva). La elección de la vía de administración es determinada principalmente por los requerimientos del estudio. La principal ventaja con la dosis parenteral es que el compuesto no es sometido a metabolismo hepático, lo que resulta en biodisponibilidad más alta. Sin embargo, existen muchos protocolos experimentales que requieren los compuestos para ser administrado por vía oral para imitar mejor el producto natural de una sustancia. La mejor ruta a utilizar está determinada por las propiedades de la sustancia de ensayo.

La dosificación oral es el método más comúnmente utilizado de la administración de drogas en los seres humanos. Esto se realiza con tabletas, cápsulas o líquidas formas de medicación. Tabletas y cápsulas administración es impráctico en roedores, por lo que la dosificación oral común para ratones y ratas se logra disolviendo el compuesto en agua potable, utilizando alimentos especializados que incorpora la prueba de compuesto en la fórmula, o colocando el compuesto en golosinas. Cuando la dosis a través de agua potable, sacarosa a menudo se agrega al agua para mejorar la palatabilidad. Sin embargo, se debe ser finamente equilibrado para fomentar la ingesta de agua normal y beber alcohol en exceso no por el sabor azucarado.

Muchos estudios han demostrado que repitió oral por sonda nasogástrica es estresante a ratones y ratas^{. 4,5} es también de mano de obra intensiva para el personal de cuidado de los animales. Hay disponibles en el mercado alimentos que comúnmente ha dosificado compuestos, tales como el Fenbendazol, que se utiliza para eliminar parásitos de roedores-incorporado en él. Otras empresas ofrecen golosinas medicadas que contienen antiinflamatorios, analgésicos, antiparasitarios y antibióticos. Alimentación de las compañías que fabrican las dietas formuladas para ratones y ratas creará las dietas de prueba especializados para cumplir un requisito experimental. Muchos laboratorios han formulado sus propias golosinas con el uso de miel, mantequilla de maní o gelatina con sabores de frutas. ^{4, 5}

Dosificación oral carece de precisión porque la ingesta de un compuesto depende de la aceptación de la comida o agua, la estabilidad del compuesto y el número de animales presentes en la jaula. Sin embargo, si la dosificación exacta no es fundamental para el experimento, este método no invasivo de la dosificación es mejor para el bienestar de los animales.

Oral por sonda nasogástrica es un método mucho más preciso de la administración enteral, ya que permite para la deposición del compuesto directamente en el estómago del animal en un momento específico y en un volumen especificado. Sin embargo, la formación es necesaria para asegurar el éxito. Correcta sujeción del animal es fundamental para el éxito de esta técnica. Lesiones en la cavidad bucal, faringe, laringe, tráquea, esófago y estómago pueden resultar de una colocación incorrecta de la cabeza y el cuerpo. El animal debe ser firmemente agarrado, tal que la cabeza no es capaz de girar, para evitar que este tipo de lesiones.

Agujas de dosificación están disponibles en formatos reutilizables o desechables. Aunque costoso, el uso de agujas desechables elimina la amenaza de la contaminación cruzada cuando dosis múltiples animales. Hay varios tamaños de agujas por sonda nasogástrica, que van desde calibre 20-22 para los ratones y calibre 18-20 para las ratas. La elección de la aguja se determina por el tamaño del animal, el volumen de líquido y la viscosidad de la solución a administrar.

Gavaging oral se debe realizar en un animal consciente para reducir la posibilidad de colocar la aguja en la tráquea. Un animal que es consciente conserva el reflejo de deglución y el reflejo nauseoso, facilitando la colocación adecuada en el esófago. Un estudio se llevó a cabo que demuestre que el mismo la aguja de la sonda nasogástrica con sacarosa induce el reflejo de deglución y redujeron la cantidad de tiempo necesario para pasar la aguja hacia el esófago. ⁶ 

Un agente tópico que se coloca directamente sobre la superficie de la piel generalmente se pretende afectar sólo la zona a la que se aplica. Estos pueden ser cremas, lociones, ungüentos, espumas o geles. Como los animales tienden a preparar el área donde se aplica el agente, debe considerarse la toxicidad del consumo oral.

Compuestos administrados por vía tópica están formulados para ser absorbido a través de las capas de la dermis y el espacio subcutáneo a través de los folículos pilosos y las glándulas accesorias. Factores que afectan la absorción de los compuestos incluyen la condición de la piel, la superficie utilizada, la concentración de la sustancia, la liposolubilidad del compuesto y la cantidad de tiempo está en contacto con la superficie de la piel. Capas de la piel bien hidratada y delgada disminuirá el tiempo de absorción.

Cuando se aplica una sustancia por vía tópica, existe la posibilidad de absorción sistémica por el animal en el área de la preparación. Deben tomarse medidas preventivas para evitar la ingestión de accidente o de la temprana eliminación de la sustancia. Collares pequeños o escudos están disponibles para evitar que el animal llegue a afectadas partes del cuerpo. Vivienda individual también se requiera para prevenir el acicalamiento de compañeros de jaula.

1. tópico

1. Antes de aplicar los ungüentos y cremas, eliminar toda piel de la zona mediante el uso de una crema depilatoria o por el afeitado.
2. Completamente limpio y seque la piel.
3. Aplicar la sustancia directamente sobre la piel con un aplicador con punta de algodón o a través de una gota colocada directamente para evitar el contacto por el técnico.
4. Para mejores resultados, aplique varias capas finas de ungüento o crema que se oponen a una sola aplicación de una capa gruesa.
5. Aplicar líquido partiendo el cabello y aplicando una gota en la piel expuesta.
6. Cuando se aplica una sustancia por vía tópica, existe una posibilidad de absorción sistémica por el animal en el área de la preparación. Deben tomarse medidas preventivas para evitar la ingestión de accidente o de la temprana eliminación de la sustancia. Collares pequeños o escudos están disponibles para evitar que el animal llegue a afectadas partes del cuerpo. Vivienda individual también se requiera para prevenir el acicalamiento de compañeros de jaula.

Figura 1. Aplicación tópica en ratones.

2. oral dosis

1. Al proporcionar compuestos a animales por alimentos o agua, se debe calcular una dosis diaria mínima basada en el peso corporal. El peso promedio de la cepa de ratón o rata se utilizan en el experimento se puede utilizar para hacer los cálculos, a menos que se especifica que se pesó cada animal y la dosis se calculó para cada individuo.
2. Para los protocolos que requieren medir precisamente que la ingesta de alimentos o de agua, los animales necesitan ser alojados individualmente.
3. Alimentación especializada o golosinas pueden fabricarse para satisfacer las necesidades experimentales.
   1. Reemplazar la dieta estándar con la formulación, que permite a los animales a ingerir el compuesto durante todo el día.
   2. La comida puede necesitar ser substituido más a menudo que el alimento estándar debido a la inestabilidad compuesta.
4. Sustancias también pueden administrarse mediante la disolución en el agua potable, lo que permite a los animales recibir un compuesto durante todo el día
   1. Una pequeña cantidad de azúcar es añadida al agua para hacerla aceptable. La cantidad exacta para añadir está determinada por la aceptación del agua por los ratones. Utilice el más pequeño posible de incremento.
   2. La frecuencia de cambiar el agua depende de la estabilidad del compuesto. Algunas sustancias pueden ser sensibles a la luz o precipitado con el tiempo.

3. procedimiento sonda nasogástrica

calibre de 20-25 x 1.5 en agujas rectas o curvas de dosificación se utilizan para los ratones. Para las ratas, calibre 18-20 x 2-3 en recto o curvo dosificación agujas se utilizan. Éstos están disponibles como agujas de acero inoxidable reutilizables o desechables agujas. Las agujas desechables pueden tener una varilla de plástico flexible o metálica con una punta de silicona.

1. Fije la aguja dosificadora una jeringa seleccionada basada en el volumen y la viscosidad de la solución de ensayo. Para dosificación de líquidos espesos, se prefiere una jeringa con cierre Luer. Estas son generalmente disponible a partir de 3 tamaño cc que tiene 100 μl graduaciones. Esto puede no ser conveniente para volúmenes más pequeños o cuando existe una necesidad de dosis exacta volúmenes en incrementos menores.
2. Fijar la jeringa a la aguja que pueden leerse las graduaciones en el barril sin girar la aguja. Una vez que la aguja se ha colocado en el esófago, cualquier rotación puede romper el esófago, dando por resultado la muerte del animal.
3. Llene una jeringa con el volumen apropiado del artículo que se administrará (óptimo volumen = volumen de 5 ml/kg y máximo = 20 ml/kg)⁴
4. El sistema de seguridad adecuado es esencial para este procedimiento. ⁷
   1. Frenar manualmente ratones sujetando la piel en la base de la cabeza y scruffing ellos. Es importante que el cuerpo llevará a cabo tal que se suspende en una línea recta desde la cabeza hasta la cola. Cualquier torsión del cuerpo impedirán la colocación de la aguja de la sonda nasogástrica hacia el esófago.
   2. Agarre firmemente el pescuezo para que la cabeza tiene un mínimo movimiento de lado a lado. Los cuartos traseros deben ser estabilizados para evitar la rotación del cuerpo.
   3. Para gavaging una rata, agarre sobre los hombros usando el dedo índice y medio a cada lado del cuello y la palma en la parte posterior del animal. El pulgar, tercero y cuarto dedos deben rodear el pecho para evitar que el animal para poder moverse hacia adelante o hacia atrás. La posición de los dedos a cada lado del cuello evita que la rata de girar su cabeza.
   4. Es importante que el cuerpo en línea recta y no torcido para ayudar en la colocación de la aguja de la sonda nasogástrica sin daño a la boca, la faringe, el esófago o el estómago.
   5. Asegúrese de que la cabeza no tiene exceso de movimiento de lado a lado.
   6. Los cuartos traseros pueden ser estabilizados para evitar la rotación del cuerpo. Esto se logra permitiendo que los pies espaldos descanse sobre la parte superior del mostrador o de la jaula.
5. Administración de la sustancia
   1. Coloque la aguja con la curva hacia abajo y en línea con la curva natural del cuello. Introducir la aguja en la boca del lado derecho o izquierdo, entre los incisivos y molares en un ángulo hacia la parte posterior de la faringe.
   2. Una vez la aguja en la cavidad bucal, inclinar la cabeza con la aguja de la sonda hasta que la nariz apunte hacia arriba. Esto es especialmente importante al usar agujas rectas. La aguja debe deslizarse fácilmente hacia el esófago. No fuerce la aguja hacia abajo. Si se siente alguna resistencia, se retiran la aguja y vuelva a intentarlo.
   3. Una vez que la aguja está en posición en el estómago, depositar suavemente el compuesto.
   4. Retire la aguja, asegurándose de que no hay rotación de una aguja curvada tiene lugar.
   5. Si el animal comienza a luchar, sacar la aguja dosificadora y refrenar el animal más segura.
   6. Al realizar el procedimiento, si el animal muestra signos de cianosis o dificultad respiratoria, o si hay solución que sale de su boca, la aguja de dosificación debe ser inmediatamente eliminado y el animal lanzado en su jaula.
   7. En general, cuando gavaging ratas y ratones, particularmente con una sustancia cáustica, es una práctica recomendada inicialmente entregar una pequeña cantidad – para probar para la expectoración – antes de todo el volumen. De esta manera, si la aguja está bien colocada, el volumen entregado a los pulmones es pequeño y el animal tiene una mejor oportunidad de recuperación.

Figura 2. Sonda oral en ratones (izquierda) y ratas (derecha).

El método más seguro y más humano de administración compuesto es a través de una dosificación oral si es posible incorporar en el alimento o el agua. Oral por sonda nasogástrica es un método de dosificación precisa pero también es muy estresante para el animal, y se requiere de capacidad técnica. La administración tópica se logra generalmente con poca o ninguna retención del animal, una vez que el área está preparado. Cuidadosa de la vía de administración debe factor en el posible estrés para los animales.

1. Turner, P.V., Pekow, C., Vasbinder, M. A., and Brabb, T. 2011. Administration of substances to laboratory animals: equipment and considerations, vehicle selection, and solution preparation. JAALAS. 50:5. 614-627.
2. Shimizu, S. 2004. Routes of Administration in The Laboratory Mouse. Elsevier.
3. Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B. F., Pritchett-Corning, K. R. 2012. Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats. J. Vis. Exp. (67), e2771, doi:10.3791/2771.
4. Turner, P. V., Brabb, T., Pekow, C., Vasbinder, M. A. 2011. Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider. JAALAS. 50, 600-613.
5. Hoggart, A.F., Hoggart, J., Honerlaw, M., and Pelus, L.M. 2010. A spoonful of sugar helps the medicine go down: a novel technique to improve oral gavage in mice. JAALAS. 49:3. 329-334.
6. Gonzales, C., Zaleska, M.M., Riddell, D.R., Atchison, K.P., Robshaw, A., Zhou, H., and Rizzo, S.J. 2014. Alternative method of oral administration by peanut butter pellet formulation results in target engagement of BACE1 and attenuation of gavage-induced stress responses in mice. Pharmacology, Biochemistry, and Behavior. 126:28-35.
7. Zumkehr, B., Hermann, C., Theurillat, R., Thormann, W., Gottstein, B., and Hemphill, A. 2012. Voluntary ingestion of antiparasitic drugs emulsified in honey represents an alternative to gavage in mice. JAALAS. 51:2. 219-223.