Técnicas de manipulación y sujeción de roedores

Fuente: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Universidad de Notre Dame, en

se ha demostrado que incluso un mínimo manejo de ratones y ratas es estresante para los animales. Manejo de cambio de jaula y otros procedimientos no invasivos provoca un aumento en la frecuencia cardíaca, presión arterial y otros parámetros fisiológicos, tales como los niveles de corticosterona sérica. Las fluctuaciones pueden continuar para hasta varias horas. Los métodos de contención necesaria para las inyecciones y retiros de la sangre también causa cambios fisiológicos que pueden afectar los datos científicos. Capacitación en el manejo adecuado de los ratones y ratas es necesaria para reducir al mínimo los efectos de los animales. ¹ ratones y ratas pueden ser sujetadas manualmente con dispositivos de retención, o con agentes químicos. Métodos manuales y el uso de dispositivos de retención están cubiertos en este manuscrito. Todos los métodos de retención incluyen el proceso de levantar los animales desde su jaula casa.

métodos comunes para eliminar un ratón o una rata de su jaula implican levantar el animal por la cola, con unas pinzas para agarrar el pescuezo del cuello o la base de la cola, utilizando un tubo u otro dispositivo de enriquecimiento, ² agarrando alrededor de la cuerpo, o recoger el animal en la palma. ^3,4

al levantar un ratón o una rata por la cola, es imperativo que la cola se cuenta en la base cerca de la grupa del animal. Debe levantar el animal desde el extremo de la cola, la piel de la cola puede deglove y ser halada por la tensión del peso corporal; la cola está amputada producirá una lesión degloving. ³ pasar un animal de una jaula a otra o a una superficie de trabajo, debe hacerse rápidamente y constantemente. El animal la suspensión en el aire por largo tiempo no sólo causar señal de socorro, sino pueden también llevar el animal para torcer o lucha, posiblemente dando por resultado daño a la cola. El controlador no debe poner su mano debajo del animal, porque-como se levanta por su cola-es instintivo del animal intentar agarrar la mano para seguridad, resultando en una picadura de.

en muchas instalaciones de producción de ratón, pinzas se utilizan para eliminar animales de sus jaulas. Esto se hace para la bioseguridad, pues se cree que hay menos posibilidades de contaminación cruzada de animal a animal. Las puntas del fórceps deben guardarse en alcohol entre el manejo de los animales individuales, o grupos de animales. Hay una gran variedad de pinzas que utiliza para agarrar ratones. El más de uso general incluye fórceps largo con puntas atraumáticas- o con la goma, plástico o silicona tubería colocadas sobre los extremos de las pinzas para proporcionar un amortiguador- o pinzas con empuñaduras de goma de la lengüeta. ⁴

fórceps pueden agarrar un ratón en el pescuezo del cuello o en la base de la cola. La mayoría de ratones rápidamente se acostumbran a este método y no luchan. Sin embargo, la paciencia y la práctica es necesaria para convertirse en expertos en la captura de los animales. Principiantes, necesitará ser entrenado sobre la manera de captar bien los ratones, especialmente en el pescuezo, pues esto puede interferir con la respiración. Al usar pinzas en la cola, se debe tener cuidado al colocar las pinzas cerca de la base de la cola para evitar lesiones.

para animales que están inquietos o presentan stereotypies, colocación de tubos en la caja puede disminuir la dificultad de manejo y reducir la respuesta de vuelo/susto a diario ganadería. Un tubo hecho de un material no poroso puede ser añadido para el enriquecimiento y servir como un lugar para el animal al refugio o refugio seguro. Tales tubos pueden ser abiertos o cerrados en un extremo. La mayoría de ratones o ratas voluntariamente entrará en los tubos cuando se abre su jaula y pueda guiar fácilmente al tubo. Una vez que el animal está dentro del tubo, se cubre el extremo abierto para transportar al animal a la nueva ubicación. Cuando se coloca en una jaula nueva, el tubo puede ser ligeramente inclinado hacia arriba para alentar a los animales a dejar. Animales se condicionan fácilmente a este método de cambio de jaula y entrarán inmediatamente en los tubos, haciendo de este método rápido y fácil como otros para mover animales de un lugar a otro. Aunque los tubos no tienen que estar presentes en la casa jaula para ser eficaz, tener un tubo en el principal recinto aumenta el reconocimiento de un sitio seguro familiar, así como proporciona enriquecimiento de jaula. ²

algunas instituciones prefieren levantar animales por el cuerpo para la rutina de manejo, especialmente para el manejo de las ratas. Animales deben estar habituados a este método desde muy temprana edad. Ratas jóvenes entre 2 a 4 semanas de edad tienden a saltar hacia arriba. Colocando una mano sobre la rata ' espalda hará que salte en la palma del controlador, lo que le permite ser comprendido. Puede ser necesaria una segunda mano para evitar que la rata retorciéndose de asimiento antes de ponerla en otra jaula. Ratas adultas se agarró suavemente alrededor del tórax, se levantan y se colocan rápidamente en otra jaula o sobre una superficie.

al cambiar de jaulas con ratas o con ratones recién nacidos, a menudo es necesario eliminar, manteniendo intacto el nido. Con el uso de dos manos para sacar el nido y los recién nacidos desde el fondo de la jaula el nido intacto se mueve en una nueva jaula. Sin embargo, para evitar que caiga de los cachorros, los dedos de cada mano deben mantenerse estrechamente. Una vez que se trasladó a una nueva jaula, es importante verificar que los cachorros están presentes. Es recomendable contar los cachorros antes y después de moverlos. Una bola de plástico se puede utilizar en lugar de las manos. Si se utiliza este método, debe colocarse una mano sobre la parte superior de la pala para evitar que a los recién nacidos de ondulación o saltando de la pala. Este método de transferencia de crías, en comparación con el manejo individual de las crías, es menos angustiante a los cachorros y las presas.

restricción de procedimientos técnicos requiere un tacto seguro y firme, pero suave,. Acercamientos tentativos pueden ocasionar picaduras de controlador. Si el controlador se enrolla como un animal chilla, ese animal Aprende rápidamente cómo evitar la retención. Sin embargo, el manejo agresivo puede resultar en la lesión o muerte de los roedores. Un equilibrio entre un enfoque enérgico pero suave es el objetivo para el manejo de roedor.

ratones y ratas pequeñas pueden ser refrenadas sujetando la piel en la nuca del cuello, denominado scruffing. Precauciones para este método incluyen ambos agarrando la piel demasiado firmemente o demasiado suelto. Si la piel es captada muy bien, la vía aérea puede ser limitada, que puede conducir a la muerte. Si captado mucha soltura, el animal será capaz de girar su cabeza y potencialmente morder el controlador de.

animales agitados o extremadamente temerosos son mucho más propensos a morder. Es mejor calmar al animal antes de la manipulación. Existen varias técnicas de calmantes que se han probado con éxito variable. El método más confiable es utilizar a algún tipo de restricción química, más a menudo un anestésico inhalante. Isoflurano o sevoflurano son anestésicos de inhalación de acción corta que se pueden entregar con sólo el manejo requerido para transferir el animal de su jaula a una cámara de inducción. Una vez que el animal está anestesiado, puede ser manipulados o refrenados manualmente para el procedimiento de.

un método para calmar una rata es envolverlo en una toalla gruesa, permitiendo que se esconden debajo de la toalla. Colocar en una manga de capa del laboratorio para que puede enterrar la cabeza en los pliegues del codo también puede proporcionar un sentido de seguridad seguro para el animal. Este mismo resultado puede lograrse colocando el animal en un lugar oscuro durante unos minutos.

1. scruffing

ratones están sujetos más a menudo posible usando la técnica de scruffing, pero ratas jóvenes también pueden ser restringidas con este método. Ratas adultas son más difíciles de refrenar con esta técnica debido a un cuello más musculoso, una cantidad reducida de piel suelta y una aversión a este método.

1. El método de sujeción con una sola mano se utiliza más a menudo en cepas de ratón que son muy tranquilas, como el desnudo athymic, SCID y algunas cepas de gema. Sin embargo, existe un mayor riesgo de ser picado con este método. Manejadores de animales novato deben quedar cómodos con la técnica de moderación a dos manos antes de intentar el método con una sola mano.
   1. Lugar al animal sobre una superficie que puede agarrar, como una tapa de jaula de la barra de alambre o una estera.
   2. Mantenga la cola entre los dedos terceros y cuarto de la mano no dominante y aplique suave tracción hacia atrás. Esto causa el animal aferrarse a la superficie y los resultados en el cuerpo se estira y alargado.
   3. Girar la mano de forma que la palma quede hacia el cuerpo del animal.
   4. Con el dedo índice y el pulgar, prender el roedor sobre los hombros.
   5. Suavemente Deslice el pulgar y el dedo índice hacia adelante y colocar en la base del cráneo. Sujete la piel floja en el cuello y levantar el animal.
   6. Utilizar el dedo medio para estabilizar el animal a lo largo de la espalda fijando la piel dorsal de la base del pulgar.
2. Sujeción a dos manos
   1. colocar el animal sobre una superficie que puede agarrar.
   2. Mantener la cola en la base (dentro de 1-2 cm del cuerpo) con la mano dominante y aplique suave tracción hacia atrás. Esto causa el animal aferrarse a la superficie y los resultados en el cuerpo se estira y alargado.
   3. Con el dedo índice y el pulgar de la otra mano, prender el roedor sobre los hombros.
   4. Suavemente Deslice el pulgar y el dedo índice hacia adelante y colocar en la base del cráneo. Sujete la piel floja en el cuello y levantar el animal.
   5. Usar los dedos restantes para estabilizar el animal a lo largo de la espalda fijando la piel dorsal de la base del pulgar.
   6. Asegurar los cuartos traseros por fijar la cola contra la palma con el cuarto dedo, o permitiendo que los miembros posteriores descansar sobre una superficie sólida.

figura 1: método de sujeción con una mano y dos manos para ratones

2. guantes

hay una gran variedad de guantes disponibles para los controladores usar para protección contra mordeduras de rata. Son generalmente inadecuados para el trabajo con ratones debido a la pérdida de destreza. A menudo, las desventajas de muchos tipos de guante compensan las ventajas.

1. tela de algodón no son resistentes a la mordedura, pero proporcionan una pequeña cantidad de la protección de los dientes y las uñas. No ofrecen buen agarre como se deslizan fácilmente sobre el lugar
2. Guantes de cuero de buena calidad son resistentes a la mordedura. Sin embargo, su rigidez provoca una reducción en destreza. El espesor de la piel, aunque protectora, reduce movilidad táctil de agudeza y de la mano.
3. Cota guantes proporcionan una sensación psicológica de seguridad para el controlador del animal. Sin embargo, son pesados y más ratas ' dientes pueden penetrar entre los enlaces. Además, estos guantes disminuir la destreza manual y si está utilizado incorrectamente son más peligrosos para el animal y el controlador de.
4. De goma-guantes aislantes que se utilizan en los hogares para lavar los platos ofrecen una textura superficie palmar y permiten un agarre seguro en la capa de pelo de roedores. La superficie de látex elástica es lo suficientemente gruesa como para resistir pinchazos por incisivos de roedores y fina lo suficiente como para ser capaces de sentir y controlar al animal. La desventaja principal es que están hechos de látex, que es una preocupación para las personas con alergias al látex. Además, estos guantes se deterioran en luz y necesitan ser reemplazados regularmente.

3. Sujeción del cuerpo

1. la " T. rex grip " es un método de moderación a dos manos para las ratas.
   1. Colocar una rata sobre una superficie que puede ser agarrada.
   2. Sujeta la base de la cola con una mano, llevar la otra mano hacia arriba y sobre la espalda con la fractura del dedo índice y medio.
   3. Coloque la mano sobre el hombro con la index finger en un lado de la cabeza y el dedo medio en el otro lado. Los dedos a cada lado de la cabeza restringen el movimiento de lado a lado de la cabeza.
   4. Rodean el cuerpo detrás de las patas delanteras con el tercer dedo, cuarto dedo y el pulgar. Debe tenerse cuidado para evitar comprimir el pecho y comprometer la respiración. Esta adherencia impide la rata hacia adelante o atrás de la mano.
   5. Estabilizar la cola y cuartos traseros sujetando la base de la cola con o sin aferrarse a los pies traseros.
   6. Esta moderación funciona bien con las ratas más grandes y cuando accede a la cabeza es necesario.
2. El método de entrecruzamiento de miembro anterior es un método de moderación a dos manos.
   1. Colocar el animal sobre una superficie que puede agarrar.
   2. Mantener la cola en la base (dentro de 1-2 cm del cuerpo) con la mano dominante y aplique suave tracción hacia atrás. Esto causa el animal para agarrarse a la superficie y los resultados en el cuerpo se estira y alargado.
   3. Llevar la otra mano desde atrás sobre la espalda.
   4. Agarrar la rata directamente detrás de los hombros, con los dedos en un lado y el pulgar en el otro lado del pecho y deslice la mano hacia adelante, forzando así a las patas delanteras hacia adelante.
   5. Las patas delanteras se cruzan debajo de la rata ' chin s, creando una barrera física y la prevención de la rata de moviendo su cabeza hacia los dedos.
   6. Tenga cuidado para evitar comprimir el pecho y comprometer respiraciones.

figura 2: T-rex grip y miembro anterior atraviesan método para refrenar las ratas

4. Dispositivos de retención

figura 3: dispositivo de restricción de Broome-estilo

figura 4: limitador de roedor base plana

1. rígido dispositivos vienen en una variedad de tipos y son generalmente hechas de material no poroso que se desinfecta fácilmente.
   1. El alojamiento de estilo Broome está diseñado para proporcionar acceso a la cola para inyecciones intravenosas. Se construye con una ranura que recorre toda la longitud del dispositivo, que permite que el animal se tiró primero en los cuartos traseros limitador. Una boquilla plástica se inserta para mantener el animal en su lugar.
      1. Quitar la boquilla del cuerpo del tubo de retención aflojando el tornillo.
      3. Es a menudo ventajoso colocar el animal sobre una superficie lisa para facilitar su colocación en el tubo de.
      4. Una vez que el animal está totalmente en el tubo-y ha dibujado para el cerrado final-deslizamiento del cabezal plástico en el tubo para ocluir la apertura.
      5. Coloque el montaje de la tobera para que el animal ' nariz de s está en la abertura central. No coloque la boquilla firmemente que el animal no puede respirar.
   2. El fondo plano limitador de roedor es un medio cilindro con aberturas que permiten el acceso desde la parte superior y la parte inferior del dispositivo de sujeción. Una puerta de plástico rígida se introduce en una de varias ranuras graduadas para mantener al animal dentro del dispositivo.
      1. Sostenga el animal por la base de la cola con la mano dominante sobre una superficie lisa, o en la cima de la jaula.
      2. Sujete el tubo de retención fondo plano en la otra mano y ángulo para que el extremo abierto es en el animal ' cabeza a 45° de ángulo a la superficie de la mesa y la jaula.
      3. Algunos animales inmediatamente entrará en el tubo, mientras que otros son reacios y requieren el controlador dirigir en el tubo de.
      4. Coloque el tubo sobre el animal ' cabeza. Pulse inmediatamente el animal ' grupa s y mantener la presión para evitar que el animal soporte arriba
      5. Una vez que el animal está en el dispositivo de sujeción, deslice la puerta de plástico en la ranura adecuada para mantener el animal en el dispositivo de seguridad.
   3. Tubo alojamientos son cilindros de plexiglás con un extremo cerrado que contiene los agujeros o aberturas para circulación del aire. Algunos son modificados con una amplia slothalf la longitud de la cylinderto dar cabida a la exposición de un miembro trasero para inyecciones intramusculares, colección de sangre safena y femoral, o el acceso a la superficie dorsal de las inyecciones subcutáneas.
      1. Sujete al animal por la base de la cola con la mano dominante sobre una superficie lisa, o en la cima de la jaula.
      2. Sujete el tubo de retención en el otro lado y ángulo para que el extremo abierto es en el animal ' cabeza a 45° de ángulo a la superficie de la mesa y la jaula.
      3. Algunos animales entrará inmediatamente en el tubo. Otros animales son reacios y requieren el controlador dirigir en el tubo de.
      4. Coloque el tubo sobre el animal ' cabeza. Pulse inmediatamente el animal ' grupa s y mantener la presión para evitar que el animal soporte arriba
      5. Scruff y manual guía animales inmanejables en el tubo, permitiendo que la piel se llevó a cabo se deslice a través de la ranura en el tubo de.
      6. Una vez que el animal está en el dispositivo de sujeción, es necesario ocluir la abertura para evitar que el animal de arriba del forro
      7. Dependiendo del procedimiento, se colocan varios dedos a través de la abertura.
      8. Cosas un gran guante de látex en la abertura. Los guantes generalmente son de textura y se apoderará de la superficie de plexiglás.
      9. Algunos tubos de sujeción tendrán cierres específicos a ese estilo o tamaño.

figura 5: dispositivo de sujeción del tubo

2. Restrainers flexibles son conos desechables de plástico flexibles. Están disponibles en plástico ya sea transparente u opaco. El plástico es lo suficientemente delgado como para permitir la penetración de una aguja para realizar las inyecciones sin retirar el animal del dispositivo de sujeción. Vienen en una variedad de tamaños para adaptarse a ratones y ratas, destetadas y adultas.
   1. Corte el plástico con unas tijeras para permitir el acceso a otros sitios de la inyección, las extremidades y la cola.
   2. Seleccione un tamaño de cono apropiado para el animal. El cono debe ser lo suficientemente larga para extenderse 2-3 pulgadas más allá del animal ' grupa s.
   3. Introducir el animal en el cono
      1. abrir el cono y sujete alrededor de la mitad superior.
      2. Tome el animal por la base de la cola con la mano dominante, colocar sobre una superficie lisa o una tapa de la jaula.
      3. Sostenga el cono de sujeción en el otro lado y ángulo para que el extremo abierto es en el animal ' cabeza a 45° de ángulo a la superficie de la mesa y la jaula.
      4. Algunos animales inmediatamente entrará en el cono. Otros animales son reacios y requieren el controlador dirigir en el cono de sujeción.
      5. Colocar el cono sobre el animal ' cabeza. Pulse inmediatamente el animal ' grupa s y mantener la presión para evitar que el animal de copia de seguridad. Debido al diámetro de la abertura del cono, son mucho más propensos a dar la vuelta para salir el cono animales.
      6. Tan pronto como el animal entra en el cono, sostenga el extremo abierto y sellarlo a la fuerza animal para el final.
      7. Garantizar la apertura doblando el plástico a un lado de la cola y aplicar el gancho de la carpeta al plástico doblado, siendo cuidadoso para evitar el pinzamiento de la cola o la piel. También puede recoger el plástico alrededor de la cola uniformemente y colocar la ligadura lo más cerca posible para garantizar la apertura del cuerpo.

figura 6: limitador Flexible

5. Métodos de sujeción para los procedimientos técnicos específicos

1. exposición Ventral se requiere inyecciones intraperitoneales.
   1. Scruffing
      1. pescuezo del animal y la mano hasta que es expuesto el abdomen.
      2. Incline el animal para que la cabeza esté apuntando hacia abajo en un ángulo de 30°.
      3. La cola contra la palma con el dedo cuarto de clavos para asegurar los cuartos traseros.
      4. Por otra parte, los cuartos traseros pueden ser inmovilizados por fijar el exceso de piel a lo largo de la espalda entre los dedos y la base del pulgar.
   2. T. rex grip y miembro anterior métodos de sujeción-trama
      1. tome el animal (sólo en ratas) utilizando cualquiera de las técnicas arriba.
      2. Con la mano libre, Sujete ambas patas traseras sobre el corvejón y extienden caudalmente.
      3. Soportar el peso del animal con la palma de la mano en la parte trasera.
      4. Incline el animal para que la cabeza esté apuntando hacia abajo en un ángulo de 30°.
      5. Otra persona realiza la inyección.
   3. Rígido limitador
      1. más rígido de sujeción no puede impedir que el animal instintivamente del balanceo para permanecer en posición vertical.
      2. Si se utiliza un limitador de rígido, gire el animal para que su cabeza apunte hacia abajo y es perpendicular a la mesa.
   4. Limitador flexible
      1. cuando se coloca correctamente en un cono de plástico flexible, el animal es incapaz de girar sobre o alrededor de.
      2. Debe tener cuidado de colocar el animal tal que los miembros posteriores están lo suficientemente separados para permitir el acceso al abdomen.
      3. Como el animal está comprimido, es imprescindible que la inyección sea lo suficientemente baja en la superficie ventral para evitar la punción de bazo, hígado, riñón o estómago.
2. Exposición dorsal es necesaria para las inyecciones en el espacio subcutáneo.
   1. Scruffing
      1. pescuezo del animal y sus patas traseras descansar sobre una superficie sólida y plana.
      2. Levantar el pescuezo para crear una tienda de piel en el cuello y los hombros.
      3. Poner el peso de la mano en la tabla cuando se inyectan en ratones. Colocar peso en el ratón puede causar asfixia.
      4. Sujete las ratas con peso en los cuartos traseros, pero nunca el pecho.
      5. Inyectar la sustancia en el espacio por debajo de los dedos en el cuerpo del animal.
   2. Restrainers rígidos
      1. Coloque el animal en un dispositivo de contención con una abertura lo suficientemente grande como para tirar la piel de arriba
      2. Puede ser necesario utilizar pinzas para agarrar la piel.
      3. Mayoría de los animales permanece en la postura correcta a menos que se gira el sistema de seguridad.
      4. No inyectar un volumen que impide el retroceso de la abertura una vez completada la inyección la piel.
3. La sujeción de las extremidades es necesario para la inyección intramuscular, retiro de la sangre de la vena safena, vena femoral o la arteria femoral; e inyección en la almohadilla.
   1. Scruffing de ratones y ratas pequeñas (menos de 200 gramos)
      1. pescuezo del animal y la mano hasta que es expuesto el abdomen.
      2. Acceso el trasero del pie, colocando un pie entre los dedos.
      3. Este método se utiliza mejor para las inyecciones de bandolero.
   2. T. rex grip o miembro anterior atraviesan
      1. este método requiere de dos personas: uno para la sujeción del cuerpo y uno para la sujeción de la extremidad y el rendimiento de la inyección.
      2. Extender la rata ' pierna sujetando el pie para el acceso a la vena safena, vena femoral o la arteria, o el músculo para inyección s.
      3. Mantener la pierna justo por encima del corvejón para la inyección de la almohadilla.
   3. Restrainers rígidos
      1. Coloque el animal en un cabezal de válvulas de retención primero.
      2. Exponer la cola y cuartos traseros tirando suavemente hacia atrás del tubo de.
      3. Inmovilizar la pierna sujetando la piel del flanco y bloqueo de la rodilla recta. Esto proporciona acceso al músculo cuádriceps para la inyección en el ratón o rata y evita que el animal sale el dispositivo de seguridad.
      4. En dispositivos con ranuras grandes, coloque la pierna fuera del tubo para el acceso a los vasos sanguíneos para la inyección de muestreo o bandolero.
      5. Esos tubos de retención con extremos planos permiten el tubo descanse sobre la mesa y estabilizar el dispositivo durante el procedimiento.
      6. Porque el animal se asegura de esta manera, es posible realizar inyecciones o toma de muestras de ratas por un solo técnico de sangre.
   4. Sujeción flexible
      1. restricciones plástico Flexible pueden ser modificadas por las aberturas de corte para dar cabida a la exposición de las extremidades.
      2. Las aberturas hechas pueden personalizarse para cada animal, o para procedimientos específicos.
      3. Como el animal se asegura de esta manera, es posible que un solo técnico realizar inyecciones o muestreo de las ratas de sangre.

rutina de procedimientos cambiantes y técnicos de la jaula es una causa de estrés para los animales de experimentación. Aunque este tipo de estrés no es una amenaza para el bienestar general del animal, puede causar fluctuaciones en los parámetros fisiológicos que pueden tener un efecto adverso sobre los datos de la investigación. El uso de personal especializado, técnicas adecuadas y equipo puede mitigar algunos de lo estrés.

1. Balcombe, J.P., Barnard, N.D., and Sandusky, C. 2004. Laboratory routines cause animal stress. Contemporary Topics. 43:6. 42-51
2. Gouveia, K. and Hurst, J.L. 2013. Reducing mouse anxiety during handling: effect of experience with handling tubes.
3. AALAS Learning Library*. Animal handling and restraint in: Working with the laboratory rat. https://www.aalaslearninglibrary.org/Pages/Courses/CourseAllPages.aspx?intLessonID=27691
4. AALAS Learning Library*. Animal handling and restraint in: Working with the laboratory mouse. https://www.aalaslearninglibrary.org/Pages/Courses/course.aspx?intCourseID=2451&intPageID=94993

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