Method Article
يوفر زراعة الكبد مساعد دعم مؤقت في فشل كبدي حاد، وحتى تجديد الكبد بالفشل. زرع منتبذ مساعدة الكبد (سكتة) مع arterialization الوريد البابي (PVA) يجعل وظيفة الكبد كافية. قمنا بتطوير تقنية مشابهة في الفئران، لدراسة تأثير arterialization الوريد البابي على التشكل وظيفة من الكسب غير المشروع.
فشل كبدي حاد في زراعة الكبد مساعد هو نهج بديل للاهتمام. الهدف هو توفير الدعم المؤقت لحين إعادة إنشاء الكبد الأصلي فشلها. 1-3 APOLT-الأسلوب، وزرع مثلي من segments- مساعد يحول دون الإصابة معظم المشاكل التقنية. ولكن هذا الأسلوب يتطلب استئصال واسعة من كل من الكبد الأصلي والكسب غير المشروع. 4 في عام 1998، وضعت ايرهارد زرع منتبذ مساعدة الكبد (سكتة) باستخدام الوريد البابي arterialization (PVA) (الشكل 1). وأظهرت هذه التقنية واعدة النتائج السريرية الأولية. 5-6 طورنا توقف دام تقنية مع تنظيم تدفق PVA في الفئران لدراسة تأثير التنظيم تدفق PVA على التشكل الكسب غير المشروع وظيفة (الشكل 2).
والكسب غير المشروع الكبد خفضت إلى 30٪ من حجمها الأصلي، وزرع heterotopically في منطقة الكلى اليمنى للمستلم بعد explantation من الكلية اليمنى.60. تم anastomosed الوريد الأجوف الأشعة تحت الكبد من الكسب غير المشروع مع الوريد الأجوف infrahepatic للمتلقي. تم تنفيذ arterialization من الوريد البابي المتبرع بها عن طريق الشريان الكلوي الأيمن المستلم مع تقنية الدعامات. وقد تحقق تنظيم تدفق الدم من الوريد البابي arterialized مع استخدام الدعامة التي يبلغ قطرها الداخلي 0.3 مم. كان الجذع الاضطرابات الهضمية من الكسب غير المشروع وزرع نهاية إلى الجانب anastomosed مع الشريان الأورطي المستلم والقناة الصفراوية في الاثني عشر. أجري استئصال المجموع الفرعي للكبد الأم للحث على الفشل الكبدي الحاد. 7
بهذه الطريقة تم إجراء 112 عملية زرع. كان معدل البقاء على قيد الحياة المحيطة بالجراحة 90٪ وكان معدل البقاء على قيد الحياة لمدة 6 أسابيع 80٪. بعد ستة أسابيع من العملية، والكبد الأصلي مجدد، والتي تبين زيادة في الوزن من 2.3 ± 0.8 غرام إلى 9.8 غرام ± 1. في هذا الوقت، انخفض الوزن الكسب غير المشروع من 3.3 ± 0.8 غرام إلى 2.3 ± 0.8 غرام. تمكنا من الحصول على نتائج واعدة على المدى الطويل من حيث التشكل الكسب غير المشروع والوظيفة. سكتة مع تنظيم تدفق PVA الجسور موثوق الفشل الكبدي الحاد حتى يجدد الكبد الأصلي.
الفشل الكبدي الحاد يشكل مشكلة حادة في الطب السريري مما يؤدي إلى معدل وفيات من 60-80٪. 8 في الفشل الكبدي الحاد، وزرع الكبد هو العلاج المساعد بديل واعد لسد المرحلة الحادة. يتم ترك الكبد الأصلي لتجديد والتالية إلى تجديد الأدوية المناعة يمكن وقفها. ونتيجة لذلك الكسب غير المشروع سيصبح الضموري. لكن تقنية المنطوق لزرع الكبد المساعد لا يزال مناقشتها. 1-3 وفي هذا السياق، ذكرت تيربسترا عدم وجود مساحة للالكسب غير المشروع، والدم البابي سرقة ظاهرة ومشكلة الازدحام وريدي والصرف. 9-10 الوريد البابي المتبرع تم anastomosed نهاية إلى جنب لالبابي المستلم. وأدى ذلك إلى تدفق بوابة المنافسة بين الفساد والكبد الأصلي وبوابة خثار الأوردة. ويمكن تجنب معظم تلك المشاكل التقنية مع استخدام APOLT-طريقة (orthotopجيم زرع شرائح المساعدة). 4 ولكن هذا الأسلوب يتطلب استئصال واسعة من كل من الكبد الأصلي والكسب غير المشروع. 4 في عام 1998، ايرهارد وفريقه بتطوير زرع منتبذ مساعدة الكبد (سكتة) باستخدام الوريد البابي arterialization (PVA) (الشكل 1 ). تحترم نقير والوريد البابي للكبد الأم مع استخدام هذا الأسلوب. أن قطع الغيار المستلم من آثار جانبية غير مرغوبة مثل تخثر الوريد البابي والدم البابي سرقة الظاهرة، التي يمكن أن تعيق الانتعاش الكبد الأصلي. بالإضافة إلى ذلك، ليس هناك حاجة لاستئصال الكبد واسعة من الكبد الأصلي والكسب غير المشروع لهذا الأسلوب، وبالتالي أقل والمزيد من نزيف المتبقية مجموع كتلة متني الكبد لسد (الكسب غير المشروع) والتجديد (الكبد الأصلي). وأظهرت هذه التقنية واعدة النتائج السريرية الأولية. 5-6 وكان الهدف من هذا العمل التجريبي في تطوير تقنية سكتة مع arterialization في الوريد البابيالفئران لأغراض البحث (الشكل 2). في التجارب الأولية لم نأخذ بعين الاعتبار تنظيم تدفق الدم من البوابة arterialized الوريد، مما أدى إلى احتقان الكسب غير المشروع المزروع بعد ضخه ونزيف حاد من الكبسولة الكبد 11 ومنذ ذلك الحين تدفق الدم في الوريد البابي arterialized كان ينظمها الدعامة مع قطرها الداخلي 0.3 ملم وبطول 8 ملم. وقد أظهرت التجارب الرائدة التي يبلغ قطرها 0.3 ملم من الدعامات غلة متوسط تدفق الدم في الوريد البابي arterialized التي هي ضمن نطاق الفسيولوجية العلوي (1.7 + 0.4 مل / دقيقة / غرام وزن الكبد) 12 نتائجنا دون تنظيم تدفق الدم ترتبط نتائج كونغ، الذين أدوا سكتة مع PVA عبر الشريان الحرقفي للمتلقي 13 في تجاربه دون تنظيم تدفق الدم البوابة الضخمة ووقع الاختناقات جيباني؛ شبه جيبي.
الهدف من الفيديو لدينا هو دemonstrate خطوة بخطوة هذه التقنية الجراحية التجريبية ne.w في الفئران. على المدى الطويل التقنية المقترحة يمكن أن تستخدم في الدراسات على تجديد الكبد والمنافسة بين الكبد والوريد البابي arterialization، بوابة الوريد البابي hyperperfusion وتنظيم تدفق الدم.
1. حيوانات التجارب
2. التخدير والتحضير المنطوق
3. الإجراء الجراحي
4. الإنعاش وإدارة ما بعد الجراحة
5. حساب من الأولي الأصلية الكبد الوزن
حساب وزن الكبد الأصلي الأولي على النحو التالي: طرح وزن فصوص الكبد مقطوعة من وزن الكبد الكامل (عازم 2.66٪ من وزن الجسم (هذه القيمة مع انحراف معياري من +/- 0.49٪ في التجارب السابقة مع ن = 80 الحيوانات من نفس السلالة وجنرال الكتريك)) 15
كان متوسط مدة زرع حوالي 150 دقيقة. كانت المرة نقص التروية البارد 64 + 7 دقائق، كان الوقت نقص التروية الدافئ أقل من 25 دقيقة.
كان معدل البقاء على قيد الحياة المحيطة بالجراحة 90٪ وكان معدل البقاء على قيد الحياة لمدة 6 أسابيع 80٪. كانت الخسارة 20٪ بسبب التهاب الصفاق بسبب خلع الدعامات والتسرب الصفراوي (أربعة حيوانات) خلال الأسبوع الأول بعد الجراحة وبسبب الالتهاب الرئوي وخراج داخل البطن والعلوص (سبعة حيوانات) خلال خمسة أسابيع التالية. كانت هذه الحيوانات على قيد الحياة في الحالة العامة ممتازة.
كانت ضمن المعدل الطبيعي بعد ستة أسابيع من العملية المعلمات الكبد التوليف (104 + 6٪ القيمة السريع ل: 110 + 7.8٪، AT III).
عند هذه النقطة الزمن، والكبد الأصلي مجدد، والتي تبين زيادة في الوزن من 2.3 ± 0.8 غرام إلى 9.8 ± 1 غ (P: 0.0065). انخفض الوزن الكسب غير المشروع من 3.3 ± 0.8 غرام إلى 2.3 ± 0.8 جم (P: 0.06). عشره كان مجموع وزن كل من الكبد ضمن نسبة الفسيولوجية للوزن الكبد / وزن الجسم (الشكل 7).
في وصمة عار النسيجية من الطعوم مع هيماتوكسيلين-يوزين في 6 أسابيع بعد توقف، وقد لوحظت خلايا الكبد منتظمة مع لا ذمة ولا انحطاط الدهنية (الشكل 8). وأظهرت جميع الطعوم انتشار طفيف في القنيات الصفراوية والتهاب الأقنية الصفراوية بسبب تشكيل الحمأة (الشكل 8). ويمكن ملاحظة المنخفض الجودة داخل متني التنخر الكبدية في اثنين فقط من الطعوم. بعد ستة أسابيع من الأنسجة من الكبد الأصلي لم تكشف عن التعديلات.
الرقم 1. عرض تخطيطي من زرع منتبذ مساعدة الكبد (سكتة) مع الوريد البابي arterialization (PVA) في الإنسان. والبرتغالوarterialized التل الوريد (3) عن طريق الشريان الحرقفي التشعب مداخلة الكسب غير المشروع (5) الذي هو أيضا وحدة التغذية السفينة من الشريان الكبدي (6).
الشكل 2. عرض تخطيطي من زرع منتبذ مساعدة الكبد (سكتة) مع arterialization الوريد البابي (PVA) في الفئران. وarterialized الوريد البابي (أ) عن طريق الشريان الكلوي الأيمن (ه) من قبل الدعامات.
يتم إدخال الرقم 3. البوابة arterialization الوريد أثناء سكتة مع PVA في الفئران. (A) والدعامات في الوريد البابي في الشريان الكلوي الأيمن. (B) والبرتغال ترتبط التل الوريد والشريان الكلوي الأيمن مع اثنين من الغرز. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 4. بتوضع الكسب غير المشروع بعد ضخه عبر الوريد البابي arterialized في الفئران. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم، الرجاء النقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
خريج "العرض =" 500 "/>
الرقم 5. Choledocho-duodenostomy خلال وقف الفئران. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 6. بتوضع بعد سكتة مع PVA في الفئران. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 7. العرض البياني للوزن الكبد (غرام) من الكبد الأصلي، والكسب غير المشروعإجمالي الكبد، عند نقطة ووقت العملية وبعد ستة أسابيع.
الرقم 8. النسيجية قسم من الكسب غير المشروع بعد ستة أسابيع، ملطخة هيماتوكسيلين-يوزين (HE) (X100 التكبير (A) وX400 (B)). يرجى النقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
ووصف مساعد أول زرع كبد الفئران منتبذ بواسطة لي وآخرون، 16 في عام 1966 تليها هيس. تم anastomosed 17 الوريد البابي من الكسب غير المشروع مع الوريد البابي للمتلقي. خلال هذا الإجراء، هو خطر وصول الدم الوريدي البابي للكبد الأم.
في عام 1991 أجريت كونغ سكتة مع PVA عبر الشريان الحرقفي للمتلقي 13 بدون تنظيم تدفق الدم البوابة الضخمة ووقع الاختناقات جيباني؛ شبه جيبي.
وعلاوة على ذلك Aguirrezabalaga وآخرون. ووقف تنفيذها مع PVA، مع ذلك دون دفع الاهتمام اللازم لتنظيم تدفق الدم في الوريد البابي arterialized 18
استخدام الدعامات وجود قطرها الداخلي 0.3 ملم وبطول 8 ملم غلة متوسط تدفق الدم البابي بعد ضخه من الوريد البابي arterialized التي هي ضمن رن الفسيولوجية العلويه 12
الصرف الصفراوي هو كعب أخيل زرع الكبد. الحيوانات المتلقي في خطر للموت بسبب تسرب الصفراوية والتهاب الصفاق. لهذا الغرض استخدمنا الدعامة لأداء choledocho-duodenostomy. بالإضافة إلى ذلك طبقنا خياطة pursestring مع زوج من خيوط إضافية لتجنب التسرب والانقطاع. ونتيجة لذلك، تم تخفيض مضاعفات المرارية إلى 4٪.
في هذه الدراسة الحالية، تم إجراء استئصال المجموع الفرعي للكبد الأم للحث على فشل الكبد الحاد. وقد وصفت هذه التقنية أول مرة من قبل Emond، فمن موحد ويظهر أي آثار جانبية على أجهزة الجسم الأخرى أو على الكسب غير المشروع. 7
في عام 2002، نشرت Palmes تقنية APOLT في الفئران مع معدل البقاء على قيد الحياة من 70-80٪، وقد ضحى الحيوانات بعد اسبوعين 19 وفي هذا النموذج تم زرعها الفص الأيسر من الكسب غير المشروع بعد استئصال الفص الأيسر من ناتإيف الكبد. تم anastomosed الوريد البابي الكسب غير المشروع في نهاية إلى نهاية للالأيسر الوريد البابي قطعي للمتلقي، مما أدى إلى صعوبة الجراحية لتنفيذ العملية، منذ تجويف الأوعية يصبح صغير جدا.
خلافا لزرع الكبد مثلي، خلال زرع الكبد منتبذ لا يوجد المرحلة anhepatic. لا يمكن أن يؤديها في anastomoses دون أي ضغط الوقت. وعلاوة على ذلك، في موقف منتبذ، ليس هناك تدخل من الحجاب الحاجز يتحرك. وعلاوة على ذلك، لا يتم فرضت الوريد البابي المستلم، وبالتالي تجنب الازدحام وريدي من الأمعاء الدقيقة والطحال والبنكرياس والمعدة.
حصلنا على نتائج جيدة على المدى الطويل بشأن الكسب غير المشروع دوران الأوعية الدقيقة، مورفولوجيا وظيفة 20 سكتة مع تدفق تنظيم PVA يمكن سد موثوق مرحلة الفشل الكبدي الحاد بينما تجدد الكبد الأصلي 15
سكتة مع تدفق تنظيم PVA هون تقنية مبتكرة وسهلة نسبيا لإنشاء. هذا النموذج يتيح الدراسات المستقبلية على تجديد الكبد والمنافسة بين الكبد والوريد البابي arterialization، الوريد البابي hyperperfusion وتنظيم تدفق الدم البابي 20، 21
أعلنت جميع المؤلفين لا المصالح المتنافسة.
وقد تم تمويل هذه الدراسة من قبل "الألمانية للبحوث" (DFG). وأيد K. Schleimer من قبل ليز مايتنر زمالة من وزارة العلوم والبحوث من NRW. نود أن نشكر السيدة ماري جوان Blümich لها المساعدة التحرير ممتازة. وقد تم تمويل الدكتورة ماريا Kokozidou من فريزنيوس 2011_A61.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Braided Silk black 7-0 | Ethicon Products | 892100 | |
Vicryl 3-0 | Ethicon Products | J285G | |
Vicryl 4-0 | Ethicon Products | J284G | |
Ethilon 8-0 | Ethicon Products | 1714G | |
Ethilon 10-0 | Ethicon Products | 7770G | |
Vasofix safety 14G | B Braun | 2758853 | |
Vasofix safety 20G | B Braun | 2758818 | |
2 French (.012”/0.3mm ID x .025”/0.6mm OD) x 24”/60cm polyurethane catheter | Access technologies a division of Norfolk Medical, Inc., Illinois, USA | CNC-2P | |
HTK solution, | Dr. Franz Köhler Chemie GmbH, Alsbach-Hähnlein, Germany | ||
Custodiol | |||
Isofluorane 5 % | Any genericon | ||
Heparin | Any genericon | ||
0.9% saline | Any genericon | ||
Buprenorphine | Any genericon |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved