Bu yöntem, pozitron emisyon tomografisinin veya PET izleyici galyum-68 FAPI-46'nın iPHASE ilaç sentezleyici üzerinde otomatik üretimini sunar. Galyum-68 FAPI-46, fibroblast aktivasyon proteinini veya FAP'yi hedefleyen yeni bir PET görüntüleme izleyicisidir. FAP, çoğu katı tümörün mikro ortamında kanserle ilişkili fibroblastlar tarafından aşırı eksprese edilir.
Galyum-68 FAPI-46'nın, çoklu kanserlerde altın standart flor-18 FDG'ye göre tanısal avantaja sahip çok umut verici bir PET izleyici olduğu gösterilmiştir. Galyum-68 FAPI-46'nın manuel radyo etiketlemesi daha önce bildirilmiş olsa da, otomatik bir sentezleyicinin kullanılması GMP ile daha uyumludur ve personel için daha düşük radyasyon riski oluşturur. Galyum-68 FAPI-46'nın otomatik sentezi, üretilen jeneratör ve siklotron tarafından üretilen galyum-68 kullanılarak farklı ticari sentezleyicilerde tanımlanmıştır.
Ürün, %89.8 bozunma küratörlüğünde verimle sentezlendi. Nihai ürün, önerilen tüm kalite kontrol spesifikasyonlarını karşıladı ve sentez sonrası üç saat boyunca stabil kaldı. MultiSyn sentezleyicide galyum-68 PSMA-11 veya galyum-68 üreten herhangi bir tesisin, bu protokolü kullanarak galyum-68 FAPI-46 üretmek için tam donanımlı olması gerektiğini tahmin ediyoruz.
MS sentezleyiciyi hazırlamak için, sıcak hücreli basınçlı havayı, nitrojen gazı kaynağını, havalandırmayı, ışığı ve dizüstü bilgisayara ve programlanabilir mantık denetleyicisine giden gücü açın. Modül atık şişesinin seviyesini kontrol edin ve dörtte üçü doluysa boş bir şişeyle değiştirin. Sentezleyici yazılımına giriş yaptıktan sonra tarifi indir'e basın.
Galyum-68 FAPI-46 üretimi için Excel dizi dosyasını seçin ve aç'a basın. Dizi başarıyla indirildikten sonra Tamam'a tıklayın. Başlat'a basın, Tamam'a basmadan önce parti numarasını, reaktif kiti lot numarasını ve açılır penceredeki tüm yorumları girin.
Kullanıcı arayüzündeki adım mesajını takip ederek eski donanım kitini çıkarın ve ileri'ye basın. Ardından, kullanıcı arayüzü talimatına göre, başparmak dayanağını şırınga sürücü yuvasından dışarı çekerek ve şırıngayı jeneratör giriş hattından sökerek jeneratör elüsyon şırıngasını sentezleyiciden çıkarın. Kullanıcı arayüzünde ileri tuşuna basın.
Başlamak için, 50 mililitrelik bir tüpün kapağına yaklaşık iki mililitre su dökün. Şırınga A etiketli beş mililitrelik bir şırıngaya bir mililitre su çekin ve bir iğne ile kapatın. 400 mikrolitre su pipetleyin.
Yedi miligram askorbik asit şişesi etiketli flakon A'ya ekleyin ve çözünmesi için hafifçe sallayın. Sağlanan 0.25 molar sodyum asetat tampon şişesini ve 50 mikrogram FAPI-46 cam şişesini açın. Bir pipet kullanarak, 0,9 mililitre tamponu FAPI-46 cam şişe etiketli şişe B'ye aktarın ve hafifçe karıştırın.
Flakon A ve flakon B'nin içeriğini şırınga A'ya çekin ve hafifçe karıştırın. Yardımcı sette verilen beş mililitrelik şırıngayı şırınga B olarak etiketleyin. Şırınga B ile, 0.1 molar hidroklorik asit torbasından beş mililitre 0.1 molar hidroklorik asit çekin ve verilen dağıtım pimi ile kapatın. Yardımcı kitte verilen üç mililitrelik şırıngayı şırınga C olarak etiketleyin. Asitlendirilmiş beş molar sodyum klorür çözeltisi şişesinden, çözeltinin bir mililitresini şırınga C'ye pipetleyin ve verilen dağıtım pimi ile kapatın.
Şırınga D etiketli beş mililitrelik bir şırıngaya bir mililitre% 0.9 salin çekin ve özel bir steril galyum-68 kaseti monte etmek C.To şişeye ekleyin, kaset zarfını açın ve herhangi bir hasar olup olmadığını kontrol edin. Her yem bağlantısını sıkın ve sıkışmadıklarından ve modüle sığacaklarından emin olmak için kaset üzerindeki her bir musluğu döndürün ve hizalayın. Tüm sivri kapakları çıkarın.
Güçlü katyonik değişim ön arıtma SPE kartuşunu koşullandırmak için, manifold üç valf yedi'ye yerleştirilmiş kartuşu kasetten çıkarın. Reaktif kitinde sağlanan iki mililitre üç molar hidroklorik asit içeren şırıngayı SPE kartuşuna takın ve kartuştan yavaşça damla damla özel bir cam atık şişesine boşaltın. Şırıngayı çıkarın, beş mililitre hava çekin ve SPE kartuşunu bununla yıkayın.
Reaktif kitinde verilen beş mililitre su içeren şırıngayı SPE kartuşuna takın ve yavaşça cam atık şişesine damla damla boşaltın. Kartuşu daha önce gösterildiği gibi hava ile yıkayın. Kullanıcı arayüzünde ileri tuşuna basın.
Kullanıcı arayüzünde gösterildiği gibi, uygun bağlantıları izleyerek yeni kaseti herhangi bir reaktif olmadan monte etmeye ve kurmaya devam edin. İlk olarak, 10 mililitrelik şırıngayı yardımcı setten manifold iki valf altıya bağlayın. Dört manifoldu takın ve sentezleyicinin manyetik kilitlerini kullanarak kaseti kilitleyin.
Reaktörü fırına yerleştirin. Boruları G1, W2, W1, R ve G2 bağlantı noktalarına bağlayın. Manifold bir valf üç sağ taraftaki boruyu manifold üç valf yedi üzerindeki katyon değişim kartuşuna bağlayın.
Manifold iki valf dördüne bir SPE son arıtma kartuşu takın. Son olarak, kullanıcı arayüzünde ileri'ye basın. Başlamak için, etanol, salin ve su şişelerinin kapaklarını reaktif kitinden çıkarın ve her septumu bir alkollü mendille temizleyin.
Sentezleyici tarafından istendiğinde, kullanıcı arayüzünde ileri'ye tıklamadan önce ilgili şişeleri M4 valf 10, M4 valf 11 ve M4 valf 12 konumlarına takın. İğneyi şırınga A'dan çıkarın ve pistonu beş mililitreye çekin. Hattın reaktör orta portuna bağlantısını kestikten sonra, şırınga A içeriğini reaktör orta portu üzerinden reaktör şişesine aktarın.
Hattı reaktör orta bağlantı noktasına yeniden bağlayın ve kullanıcı arayüzünde ileri'ye tıklayın. Jeneratör çıkış hatlarını kaset üzerine M1 vanası iki konumuna takın ve ileri'ye tıklayın. Dağıtım iğnesini şırınga C'den çıkardıktan sonra, M1 valf üç konumuna takın ve ileri'ye tıklayın.
Dağıtım iğnesini şırıngadan çıkarın B. Şırınga B Luer kilidini jeneratör giriş hattı bağlantısına kilitleyin ve şırıngayı B, bir sonrakine tıklamadan önce pistonun başparmak desteği şırınga sürücü yuvasına kayar. Nihai ürün şişesini hazırlamak için, ikinci sınıf bir biyolojik güvenlik kabinine veya eşdeğerine, etiketli 25 mililitrelik steril bir şişeyi tungsten veya uygun şekilde korumalı bir tencereye yerleştirin. Şişenin septumunu alkollü bir mendille temizledikten sonra, tencereye bir kapak yerleştirin ve filtrelenmiş bir havalandırma iğnesi yerleştirin.
Düşük protein bağlayıcı sterilizasyon 0.22 mikron PVDF havalandırmalı filtrenin çıkışını steril 20 gauge hipodermik iğneye bağlayın. Filtreyi ürün parti numarasıyla etiketleyin ve iğneyi havalandırmalı 25 mililitrelik nihai ürün şişesine yerleştirin. Flakon C içeriğini boş şırınga D'ye çekin ve dört mililitre hava ekleyin.
Şırınga D'yi 0.22 mikron havalandırmalı filtrenin girişine bağlayın ve şırınga içeriğini filtreden ve iğneden nihai ürün şişesine itin. Şırıngayı havalandırmalı filtreden çıkarmadan önce filtreyi beş mililitre hava ile iki kez yıkayın. Nihai ürün şişesini içeren kabı sıcak hücreye aktardıktan sonra, M2 valf beşer konumundan uç boruyu ürün şişesi filtresine bağlayın.
İleri'ye tıklayın ve sentezleyicinin ön adımları gerçekleştirmesini bekleyin. Ga-68 jeneratörünü elute etmeye hazır" komutu göründüğünde, kullanıcı arayüzünde ileri düğmesine basın. Otomatik sentez başladığında, stratejik olarak yerleştirilmiş üç radyo aktivitesi dedektörünün, ön arıtma kartuşunun, reaktörün ve son saflaştırma kartuşunun aktivitesini gözlemleyerek şematik sekmede radyo etiketlemesini gerçek zamanlı olarak izleyin.
Alternatif olarak, sentez sırasında her bir dedektörün aktivite profilini gösteren trendler sekmesine bakın. Sentez Tamamlandı "mesajı göründüğünde, sterilizasyon havalandırmalı filtreyi ve filtrelenmiş havalandırma iğnesini nihai ürün şişesinden çıkarın ve tungsten kabını sıcak hücreden alın.
