이 방법은 iPHASE 의학 합성기에서 양전자 방출 단층 촬영 또는 PET 추적자 갈륨-68 FAPI-46의 자동 생산을 제공합니다. 갈륨-68 FAPI-46은 섬유아세포 활성화 단백질(FAP)을 표적으로 하는 새로운 PET 이미징 추적자입니다. FAP는 대부분의 고형 종양의 미세환경에서 암 관련 섬유아세포에 의해 과발현됩니다.
갈륨-68 FAPI-46은 여러 암에서 황금 표준 플루오린-18 FDG보다 진단적 이점이 있는 매우 유망한 PET 추적자인 것으로 나타났습니다. 갈륨-68 FAPI-46의 수동 무선 라벨링은 이전에 보고되었지만, 자동 합성기를 사용하면 GMP를 더 잘 준수하고 인력에 대한 방사선 위험이 낮습니다. 갈륨 -68 FAPI-46의 자동화 된 합성은 생산 된 발전기와 사이클로 트론이 생산 된 갈륨 -68을 사용하여 다른 상업용 합성기에서 설명되었습니다.
이 제품은 89.8 % 붕괴 큐레이티드 수율로 합성되었습니다. 최종 제품은 모든 권장 품질 관리 사양을 충족했으며 합성 후 3시간 동안 안정적이었습니다. MultiSyn 신디사이저에서 갈륨-68 PSMA-11 또는 갈륨-68을 제조하는 모든 사이트는 이 프로토콜을 사용하여 갈륨-68 FAPI-46을 생산할 수 있는 장비를 갖추어야 합니다.
MS 신디사이저를 준비하려면 핫 셀 압축 공기, 질소 가스 공급, 환기, 조명 및 랩톱 및 프로그래밍 가능한 로직 컨트롤러의 전원을 켭니다. 모듈 폐기물 병의 수위를 확인하고 4분의 3이 찼으면 빈 병으로 교체하십시오. 신디사이저 소프트웨어에 로그온한 후 레시피 다운로드를 누릅니다.
갈륨-68 FAPI-46 생산을 위한 엑셀 시퀀스 파일을 선택하고 열기를 누릅니다. 시퀀스가 성공적으로 다운로드된 후 확인을 클릭합니다. 시작을 누르고 확인을 누르기 전에 배치 번호, 시약 키트 로트 번호 및 팝업 창에 설명을 입력합니다.
사용자 인터페이스의 단계 메시지에 따라 이전 하드웨어 키트를 제거하고 다음을 누릅니다. 다음으로, 사용자 인터페이스 지침에 따라 주사기 드라이버 슬롯에서 엄지 받침대를 당겨 빼내고 발전기 입구 라인에서 주사기의 나사를 풀어 신디사이저에서 발전기 용출 주사기를 제거합니다. 사용자 인터페이스에서 다음을 누릅니다.
시작하려면 50ml 튜브의 캡에 약 2ml의 물을 붓습니다. 주사기 A라고 표시된 5ml 주사기에 1ml의 물을 뽑고 바늘로 뚜껑을 씌웁니다. 피펫 400 마이크로 리터의 물.
A라고 표시된 7mg의 아스코르브산 바이알에 넣고 부드럽게 흔들어 녹입니다. 제공된 0.25몰 아세트산나트륨 완충액 바이알과 50마이크로그램 FAPI-46 유리 바이알을 엽니다. 피펫을 사용하여 0.9ml의 버퍼를 B라고 표시된 FAPI-46 유리 바이알에 옮기고 부드럽게 혼합합니다.
바이알 A와 바이알 B의 내용물을 주사기 A에 넣고 부드럽게 섞습니다. 보조 세트에 제공된 5밀리리터 주사기에 주사기 B로 라벨을 붙이고, 주사기 B를 사용하여 0.1몰 염산 백에서 0.1몰 염산 5밀리리터를 빼내고 제공된 분배 핀으로 캡을 씌웁니다. 보조 키트에 제공된 3밀리리터 주사기를 주사기 C로 표시합니다.산성화된 5몰 염화나트륨 용액 바이알에서 용액 1ml를 주사기 C에 피펫팅하고 제공된 분배 핀으로 캡을 씌웁니다.
0.9%식염수 1ml를 Syringe D라고 표시된 5mL 주사기에 넣고 바이알에 넣 C.To 전용 멸균 갈륨-68 카세트를 조립하고 카세트 봉투의 포장을 풀고 손상 여부를 확인합니다. 각 루어 연결을 조이고 카세트의 각 스톱콕을 회전하고 정렬하여 끼지 않고 모듈에 맞도록 합니다. 모든 스파이크 캡을 제거합니다.
강한 양이온 교환 사전 정제 SPE 카트리지를 조절하려면 카세트에서 매니폴드 3 밸브 7에 위치한 카트리지를 제거합니다. 시약 키트에 제공된 2밀리리터의 3몰 염산이 들어 있는 주사기를 SPE 카트리지에 부착하고 카트리지를 통해 전용 유리 폐기물 병에 천천히 용리합니다. 주사기를 제거하고 5ml의 공기를 빼낸 다음 SPE 카트리지를 플러시합니다.
시약 키트에 제공된 5ml의 물이 들어 있는 주사기를 SPE 카트리지에 부착하고 유리 폐기물 병에 천천히 용출합니다. 앞에서 설명한 대로 카트리지를 공기로 세척합니다. 사용자 인터페이스에서 다음을 누릅니다.
사용자 인터페이스에 표시된 것처럼 적절한 연결에 따라 시약 없이 새 카세트를 조립하고 설치하십시오. 먼저 보조 세트의 10ml 주사기를 매니폴드 2밸브 6에 연결합니다. 4개의 매니폴드를 설치하고 신디사이저의 마그네틱 잠금 장치를 사용하여 카세트를 잠급니다.
반응기를 오븐에 넣으십시오. 튜브를 G1, W2, W1, R 및 G2 포트에 연결합니다. 매니폴드 1 밸브 3 오른쪽 튜브를 매니폴드 3 밸브 7의 양이온 교환 카트리지에 연결합니다.
매니폴드 2 밸브 4에 SPE 정제 후 카트리지를 설치합니다. 마지막으로 사용자 인터페이스에서 다음을 누릅니다. 먼저 시약 키트에서 에탄올, 식염수 및 물 바이알의 캡을 제거하고 알코올 물티슈로 각 격막을 면봉으로 닦습니다.
합성기에서 메시지가 표시되면 사용자 인터페이스에서 다음을 클릭하기 전에 M4 밸브 10, M4 밸브 11 및 M4 밸브 12 위치에 해당 바이알을 설치합니다. 주사기 A에서 바늘을 제거하고 플런저를 5밀리리터로 당깁니다. 반응기 중간 포트로 가는 라인을 분리한 후 반응기 중간 포트를 통해 주사기 A의 내용물을 반응기 바이알로 옮깁니다.
라인을 반응기 중간 포트에 다시 연결하고 사용자 인터페이스에서 다음을 클릭합니다. M1 밸브 2 위치에 있는 카세트의 발전기 출구 라인을 설치하고 다음을 클릭합니다. C주사기에서 디스펜싱 니들을 제거한 후 M1 밸브 3 위치에 설치하고 다음을 클릭합니다.
주사기 B에서 분배 바늘을 제거합니다.주사기 B를 연결하고 발전기 흡입구 라인 피팅에 잠금 장치를 걸고 주사기 B를 밀어 플런저의 엄지 받침대가 주사기 드라이버 슬롯으로 밀어 넣도록 다음 버튼을 클릭합니다. 최종 제품 바이알을 준비하려면 클래스 2 생물 안전 캐비닛 또는 이와 동등한 캐비닛에 라벨이 부착된 25ml 멸균 바이알을 텅스텐 또는 적절하게 차폐된 냄비에 넣습니다. 알코올 물티슈로 바이알의 격막을 닦은 후 냄비에 뚜껑을 덮고 여과된 통풍 바늘을 삽입합니다.
저단백질 결합 멸균 0.22미크론 PVDF 벤트 필터의 배출구를 멸균 20게이지 피하 주사 바늘에 연결합니다. 필터에 제품 배치 번호를 표시하고 바늘을 통풍이 되는 25ml 최종 제품 바이알에 삽입합니다. 바이알 C의 내용물을 빈 주사기 D에 넣고 4ml의 공기를 넣으십시오.
주사기 D를 0.22미크론 벤트 필터의 입구에 연결하고 필터와 바늘을 통해 주사기 내용물을 최종 제품 바이알에 밀어 넣습니다. 벤트 필터에서 주사기를 제거하기 전에 5ml의 공기로 필터를 두 번 세척하십시오. 최종 제품 바이알이 들어 있는 포트를 핫 셀로 옮긴 후 위치 M2 밸브 5의 엔드 튜브를 제품 바이알 필터에 연결합니다.
다음을 클릭하고 신시사이저가 예비 단계를 수행할 때까지 기다립니다. Ready to elute Ga-68 generator"라는 메시지가 나타나면 사용자 인터페이스에서 다음을 누릅니다. 자동 합성이 시작되면 전략적으로 배치된 3개의 방사능 검출기, 사전 정제 카트리지, 반응기 및 정제 후 카트리지의 활동을 관찰하여 회로도 탭에서 실시간으로 무선 라벨링을 모니터링합니다.
또는 합성 중 각 검출기의 활성 프로파일을 보여주는 추세 탭을 참조하십시오. Synthesis Complete" 메시지가 나타나면 최종 제품 바이알에서 멸균 벤트 필터와 여과된 벤트 니들을 제거하고 뜨거운 셀에서 텅스텐 포트를 회수합니다.
