Ведение беременности и кормления кроликов, перенесших эмбрионы и генетически модифицированных

В данном протоколе описана методика ведения беременности и кормления кроликов, перенесших эмбрионы и генетически модифицированные, направленная на снижение смертности новорожденных кроликов и повышение эффективности подготовки генетически отредактированных кроликов.

С развитием научных исследований растет спрос на генетически отредактированные модели кроликов. Тем не менее, существуют ограниченные системы управления беременностью и кормлением для генетически отредактированных кроликов, что приводит к низким показателям выживаемости среди генетически отредактированных кроликов, подготовленных многими неопытными исследователями. Поэтому правильное руководство имеет важное значение. В данной статье обобщены разработанные в лаборатории автора методы стельности и кормления генетически модифицированных кроликов и изложен ряд фундаментальных процессов. К ним относятся диагностика беременности, дородовой уход, акушерство, вспомогательное грудное вскармливание, отлучение от груди и другие процедуры, а также спасение и уход за слабыми новорожденными кроликами. По сравнению с традиционными методами естественных родов и вскармливания, используемыми в кролиководческих хозяйствах, этот подход предполагает более совершенное управление, требующее дополнительного времени и усилий, но значительно повышающее выживаемость подсосных кроликов. Методы, описанные в этой статье, подходят для большинства сценариев лабораторного разведения кроликов с отредактированными генами или эмбрионами и являются простым и эффективным ориентиром для других исследователей.

Кролики являются классической животной моделью для биомедицинских исследований и все чаще становятся предпочтительной трансляционной моделью для преодоления разрыва между моделями грызунов и моделями крупных животных ^1,2. По сравнению с крупными животными, кролики имеют умеренные размеры тела, небольшое пространство для кормления, низкую стоимость кормления и удобный забор крови, что способствует повторному сбору данных исследований и хирургическим операциям. Кролики характеризуются хорошей репродуктивной способностью, коротким периодом беременности (28-32 дня для новозеландских белых кроликов), большим количеством родов, быстрым ростом ^3,4. По сравнению с грызунами, кролики ближе к человеку по филогенезу⁵. Это экономически эффективный и практичный экспериментальный заменитель свиней и нечеловекообразных приматов⁶. По сравнению с другими крупными и средними животными для редактирования генов (свиньи, крупный рогатый скот, овцы, кошки, собаки, обезьяны) стоимость подготовки кроликов для редактирования генов низкая, а цикл короткий. С развитием генной терапии ^7,8,9, терапии стволовыми клетками 10,11,12,13, исследований в области мозга ¹⁴ и других научных областей 1,15,16,17,18 спрос на виды без грызунов в редактировании генов увеличивается.

Кролики, занимающиеся редактированием генов, когда-то считались одними из животных среднего размера, которые могли бы реализовать промышленное применение⁶. Однако до сегодняшнего дня кроликам с редактированием генов не удалось добиться широкомасштабного производства. Одна из основных причин заключается в том, что производство и разведение кроликов с редактированием генов является сложной задачей, и сложность намного выше, чем у мышей или крыс с редактированием генов. Существует не так много лабораторий, которые могут эффективно выращивать кроликов с редактированием генов. Новичкам часто бывает сложно успешно подготовить кроликов по редактированию генов, и они часто сталкиваются с такими неприятными проблемами, как низкая стельность¹⁹, аборты²⁰, дистоция²¹, отказ от лактации самками крольчихи²², падеж подсосных крольчат²³. Тем не менее, существует мало систематических данных или литературных рекомендаций по беременности и кормлению кроликов с редактированием генов или кроликов, перенесших эмбрионы. Большинство из них основаны на опыте обычных кролиководческих ферм.

Поэтому в данной статье обобщен зрелый опыт ведения беременности и кормления генетически модифицированных кроликов из авторской лаборатории, а также представлен комплекс основных процессов эмбрионального переноса кроликов и генетически модифицированных кроликов, включая диагностику беременности, дородовое наблюдение, акушерство, искусственное вспомогательное вскармливание, аблактацию, а также спасение и выхаживание слабых крольчат. Этот процесс специально налажен для разведения кроликов с редактированием генов или кроликов, перенесших эмбрионы. По сравнению с традиционным методом естественных родов и вскармливания на кролиководческих фермах, модель ведения беременности и кормления требует больше времени и энергии, но она может значительно снизить смертность крольчат, и усилия того стоят.

Все протоколы экспериментов на животных были одобрены Комитетом по этике экспериментов на животных Центра медицинских лабораторных животных провинции Гуандун. Номер этического обзора для разведения кроликов с модифицированным геном MKRN3, участвующих в этом исследовании, составляет B202210-6. В исследовании соблюдены процедуры, соответствующие этическим нормам, изложенным в Хельсинкской декларации 1975 года (пересмотренной в 1983 году). Новозеландские кролики, использованные в этом исследовании, были получены из Центра медицинских лабораторных животных провинции Гуандун в Китае. Описанный в этой статье процесс беременности и кормления генетически модифицированных кроликов является кратким изложением ежедневной практики разведения животных в лаборатории автора. Подробная информация об используемых реагентах и оборудовании приведена в Таблице материалов.

1. Диагностика беременности

1. На^{12-14 день после} переноса эмбрионов (выберите одну из временных точек) подтвердите беременность путем прямой пальпации.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Этот шаг можно пропустить. Если пальпация будет слишком грубой и принудительной, это может привести к выкидышу у беременных крольчих.
   1. Одной рукой придерживайте кожу шеи за ушами кролика, дайте ягодицам кролика сжаться вперед, приблизившись к брюшной полости ягодиц кролика, а затем другой рукой раскройте ладонь и аккуратно пропальпируйте задний конец живота.
   2. Надавите на живот до определенной степени. Если прощупать непрерывную нить гладких и эластичных шариков из мякоти, похожих по размеру на бобы конфорки, то считается беременность²⁴.
2. Если позволяют условия, используйте УЗИ на^15-й день после переноса эмбрионов, чтобы определить, беременна ли крольчиха. Диагностика схватки кроликов основывается на наличии небольших, крепких эхогенных точек (гестационных мешочков) в жидкой темной зоне.
3. В период с 16-го^{по 18-й} день после переноса эмбрионов наблюдайте за кроликом два раза в день утром и вечером, примерно по 15 минут каждый раз. Если во время родов или течки наблюдается такое поведение, как беспокойство, учащенное дыхание, выщипывание шерсти для строительства гнезд и т. д., это указывает на то, что самка кролика псевдобеременна и по-настоящему не забеременела.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Если перенос эмбрионов не удается, у самок крольчихи будет ложная беременность, похожая на роженицу или течку, на 16-18-й день из-за снижения лютеинового гормона.

2. Дородовое наблюдение

1. Позволяйте беременным крольчихам свободно питаться во время беременности и добавляйте свежий зеленый корм раз в неделю.
2. Утром или вечером^25-го дня после переноса эмбрионов переведите беременных крольчих в клетку для родов.
   1. Заранее продезинфицируйте клетку для родов, инкубатор для животных, обрезки бумаги или стружку.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Выбирайте клетку для доставки кроликов, которая соответствует международным критериям по размеру. Убедитесь, что в клетке для родов достаточно места для перемещения крольчихи. Выбирайте инкубатор, который сможет противостоять грызению крольчихи. Выбирайте плотные обрезки бумаги с хорошим водопоглощением. В соответствии с требованиями и предложениями местного руководства животноводческого хозяйства, выберите подходящие методы дезинфекции.
   2. Закрепите инкубатор с одной стороны клетки для родов и положите полотенца, стружку или обрезки бумаги в инкубатор для животных, чтобы беременные крольчихи могли сделать гнездо.
   3. Обеспечьте достаточное количество корма и питьевой воды.
   4. Аккуратно переместите беременных крольчат в клетку для родов.
   5. Обратите внимание на то, сделали ли беременные крольчихи гнездо в инкубаторе каждый день. Если нет, добавьте немного обрезков бумаги и полотенец за пределы инкубатора утром^28-го дня беременности.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Если беременные крольчихи не гнездятся в инкубаторе, они, скорее всего, не будут рожать в инкубаторе. Положите немного полотенец и обрезков бумаги за пределы инкубатора, чтобы новорожденные кролики не теряли температуру и не умирали вне коробки.

3. Роды

ПРИМЕЧАНИЕ: День 0 относится к вскоре после оплодотворения и образования прокариот. Кролики – животные, стимулирующие овуляцию, у которых происходит овуляция через 10-12 ч после спаривания. Эмбрионы одноклеточной стадии, полученные на следующий день после спаривания, считаются эмбрионами на^0,5-й день. Если эмбрионы одноклеточной стадии культивируют in vitro всего 2-3 ч, а затем переносят суррогатным кроликам, то это также считается^0,5-й день беременности.

1. Пренатальное наблюдение
   ПРИМЕЧАНИЕ: Срок беременности кроликов составляет 28-32 дня. Если крольчиха рожает до^30-го дня беременности, то размеры плода обычно относительно небольшие, и бывают редкие случаи тяжелых родов. До^30-го дня не требуется чрезмерного вмешательства.
   1. Утром^30-го дня беременности у крольчих проводят абдоминальную пальпацию, чтобы примерно определить количество, размеры и активность плода.
      1. Одной рукой придерживайте кожу шеи за ушами кролика, дайте ягодицам кролика сжаться вперед, приблизившись к брюшной полости ягодиц кролика, а затем другой рукой раскройте ладонь и аккуратно пропальпируйте задний конец живота. Сила должна быть легкой.
         ПРИМЕЧАНИЕ: Надавливание на живот в определенной степени приведет к пальпации нескольких эллипсоидов размером с яйцо, которые могут ощущать движение плода.
   2. Если установлено, что количество плодов, зачатых беременными крольчихами, составляет всего 1-2, то на^30-й день беременности в 17 часов внутримышечно вводят 0,02 мг клопростенола, чтобы вызвать роды у крольчат на следующий день.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Беременные крольчихи имеют только 1-2 плода, которые склонны к дистоции или срыву родов в зрелом возрасте.
2. Ускорьте роды
   Примечание: Если беременная крольчиха не рожает утром^31-го дня беременности, она может рассмотреть вопрос о том, нужно ли ей ускорить роды в соответствии со следующими условиями. Если плода больше 2, никаких дальнейших действий предпринято не будет.
   1. Если беременная крольчиха беременна только 1-2 плодами и накануне ей ввели клопростенол, утром^31-го дня беременности введите 10 единиц окситоцина в мышцы, чтобы вызвать роды.
   2. Если у беременной крольчихи наблюдаются признаки родов (такие как беспокойство, учащенное дыхание, расширение сосудов уха, выщипывание и изготовление гнезда, планирование грунта и т.д.), введите в мышцы 10 единиц окситоцина, чтобы вызвать родовую деятельность.
   3. Если у беременной крольчихи нет признаков родоразрешения и движения плода в норме, продолжайте наблюдение. Если родов нет утром^32-го дня беременности, введите 10 единиц окситоцина в мышцы, чтобы вызвать роды.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Обычно, применение окситоцина может решить сложные роды. Как правило, через 5-10 минут после введения окситоцина у беременных крольчих начинаются роды. Окситоцин эффективен в течение примерно получаса и может быть введен повторно через полчаса. Не рекомендуется вызывать роды окситоцином более 3 раз. Если окситоцин неэффективен, попросите ветеринара провести кесарево сечение. В противном случае плод погибнет в матке, размягчится, и будет выделяться из влагалища.

4. Акушерство

1. Обустройте и подготовьте инкубаторы (рисунок 1).
   ПРИМЕЧАНИЕ: Подготовьтесь заранее, прежде чем крольчиха родит. Размер инкубатора, использованного в данном исследовании, составляет 45 см × 30 см × 15 см в длину × ширину × высоту.
   1. Добавьте стерильную абсорбирующую набивку. Рекомендуется использовать гранулы кукурузного початка.
   2. Расстелите полотенце в виде коврика, покрытого искусственным пухом.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Материалом искусственного пухового хлопка является детское полиэфирное волокно, которое не токсично. Искусственный пух очень подходит для новорожденных кроликов, согревающихся в тепле. Тем не менее, его нельзя использовать для создания гнезда для матери-крольчихи, или он может быть съеден в желудок.
2. Быстро вытрите слизь на новорожденных крольчатах полотенцем. Убедитесь, что они дышат ровно, а затем поместите их в инкубатор.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Если дыхание новорожденных крольчат остановилось, немедленно надавите на грудную клетку для вспомогательного дыхания (25-35 раз/мин) для уменьшения диаметра грудной клетки на 25%-30% до восстановления спонтанного дыхания.
3. После рождения беременных крольчих подсчитайте количество родившихся плодов. Наклейте на инкубатор информационные карточки: измененные гены, количество новорожденных крольчат, дата рождения и т.д.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Подходящая температура окружающей среды для новорожденных кроликов составляет 30-32 °C. Помещение в инкубатор соответствующего количества кроличьей шерсти или искусственного пухового хлопка может достичь хорошего изоляционного эффекта. В кроличьем домике следует поддерживать температуру 16-25 °C. У самок кроликов обычно 6-8 сосков. Если малышей слишком много, некоторых малышей могут кормить другие крольчата-мамы.

5. Послеродовой уход

1. Уход за крольчатами (Рисунок 2)
   ПРИМЕЧАНИЕ: После родов дайте крольчихе отдохнуть около 1 часа перед кормлением грудью. Кроликов обычно кормят грудью 1-3 раза в день.
   1. Перед первым кормлением очистите все соски крольчихи спиртовой ватой. За исключением грудного вскармливания, в остальное время крольчат и крольчат содержат отдельно.
   2. Аккуратно помассируйте каждый сосок и аккуратно выдавите первую каплю молока.
   3. Кормление 1-2-дневных крольчат: Каждый раз кладите крольчатину на коврик в боковом положении или в положении лежа и прикладывайте сосущих кроликов по одному к их соскам, чтобы они сосали молоко (Рисунок 2А). 1-2-дневных кроликов нужно кормить 2-3 раза в день.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Недоношенные кролики или крольчата с низкой массой тела при рождении склонны к гипогликемии. Кормите 1 мл 5% глюкозы и употребите грудное молоко как можно скорее. Если крольчиха слишком слаб для питья, то сразу вводят 1 мл 5% глюкозы в брюшную полость.
   4. На второй день после рождения с помощью маркера пронумеруйте спину каждого крольчатина. Обрежьте небольшое количество ткани хвоста для генотипирования.
   5. Кормление крольчат старше 2 дней: Во время кормления поместите крольчатину в инкубатор и дайте ей самостоятельно кормить грудью (Рисунок 2B). 2-9-дневных кроликов нужно кормить 1-2 раза в день, а свыше 9-дневных кроликов нужно кормить один раз в день до отъема. Убедитесь, что крольчата сыты (рисунок 2C).
      ПРИМЕЧАНИЕ: Если крольчиха не желает кормить грудью, ее можно кормить свежими овощами, чтобы она была более склонна к сотрудничеству. При необходимости крольчат-матерей можно кормить грудью после помещения в устойчивое положение. Аккуратно выдавите первую каплю молока из каждого соска крольчихи, чтобы облегчить набухание и боль в груди, что полезно для крольчат сосать молоко. Если вышеперечисленные методы неэффективны, для кормления следует использовать других кормящих крольчат-матерей.
   6. В течение первых 4 дней после рождения очищайте промежность крольчатина два раза в день влажными ватными шариками, чтобы стимулировать выведение мекония и мочи (рисунок 2D).
   7. По мере того, как шерсть крольчатина отрастает, каждый день убирайте из инкубатора немного пуховой ваты.
   8. Меняйте полотенце один раз в день, пока крольчиха не вырастет до такой степени, что все его тело будет покрыто шерстью.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Как правило, полотенце больше не нужно на^8-й день после рождения.
   9. Если у крольчат (в возрасте 1-2 недель) наблюдается диарея, немедленно скармливайте 3 капли гентамицина животного происхождения (концентрация 0,04 г/мл) два раза в день в течение 5 дней подряд.
      Примечание: Диарея у крольчат обычно вызвана сосанием молока у крольчат с маститом или высокой температурой и влажностью окружающей среды. Смертность крольчат при диарее очень высока.
   10. После того, как молодой кролик откроет глаза (возраст около 2 недель), переместите его в клетку для кормления с помощью полотенца. Добавьте немного зеленого корма и ежедневный рацион.
       ПРИМЕЧАНИЕ: Подходящая температура для крольчат (в возрасте 2-3 недель) составляет 23-30 °C.
   11. Отделите крольчатину от крольчат и открывайте перегородку только один раз в день для кормления грудью.
       ПРИМЕЧАНИЕ: Это может помешать крольчатам кусать сосок матери-крольчихи.
2. Послеродовой уход за матерью-крольчихой
   1. Во время лактации позволяйте крольчихам свободно пить и есть и кормите их подходящими зелеными кормами, чтобы обеспечить достаточное питание.
   2. Если крольчиха страдает маститом, немедленно прекратите грудное вскармливание и назначьте соответствующие ветеринарные антибиотики для лечения (рекомендуются цефалоспорины). Скармливайте молодых крольчат другим кормящим крольчихам с аналогичными сроками родов.

6. Аблактация

1. Убедитесь, что большинство молодых кроликов отлучены от груди в возрасте 35 дней. Слабых кроликов отлучают от груди в возрасте 40 дней.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Подходящая температура для молодых кроликов (от 3 недель до 3 месяцев) составляет 20-25 °C. Подходящая температура для молодых кроликов (3-6 месяцев) и взрослых кроликов также составляет 15-25 °C.
2. Рассмотрите, следует ли прививать обычные вакцины в соответствии с экспериментальными требованиями после отъема.

В данной статье описывается процедура ведения беременности и кормления кроликов, перенесших эмбрионы и генетически модифицированных. В конце 2022 года авторская лаборатория приступила к разработке платформы для подготовки генно-модифицированных кроликов. В течение этого периода было обнаружено несколько распространенных проблем, включая аборты, невыполнение родов в срок, дистоцию, неспособность выщипывать шерсть для подготовки гнезда перед родами, нежелание матерей-крольчат кормить грудью или случаи каннибализма, недостаточное количество грудного молока из-за большого размера помета и неспособность крольчат пить молоко. Эти проблемы значительно снизили эффективность разведения генетически модифицированных кроликов.

Обобщив опыт и изучив эти проблемы, был разработан протокол ведения беременности и кормления новорожденных кроликов, перенесших эмбрионы и генетически модифицированных (Рисунок 3). Этот протокол позволил значительно повысить выживаемость новорожденных кроликов и снизить смертность в период лактации (табл. 1). Для большинства случаев, за исключением специфических генетически модифицированных моделей заболеваний с тяжелыми постнатальными фенотипами генетических заболеваний, приводящими к более высоким показателям смертности, этот подход доказал свою эффективность и приемлемость.

В настоящее время авторская лаборатория перешла от традиционных естественных методов родов и вскармливания к вновь созданной модели ведения беременности и кормления. На сегодняшний день этот метод способствовал успешному выведению более десяти новых разновидностей генетически модифицированных кроликов, в результате чего было получено многочисленное потомство. Хотя такой подход увеличивает рабочую нагрузку, он очень эффективен. На рисунке 4 показан реальный пример разведения генетически модифицированного потомства кроликов MKRN3, демонстрирующий процесс от рождения до отлучения от груди.

Рисунок 1: Устройство инкубаторов для крольчат. Этапы подготовки инкубатора для крольчат: (1) Подготовка инкубатора; (2) Набивка; (3) Расстелить полотенце; (4) Добавление искусственного пуха из хлопка; (5) Помещение крольчата внутрь; (6) Прикрепление информационной карточки. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

Рисунок 2: Вспомогательное грудное вскармливание для крольчат. (А) Кормление крольчат в возрасте 1-2 дней. (Б) Кормление крольчат старше 2-дневного возраста. (В) Сравнение брюшной полости щенков кроликов до и после кормления, показывающее заметное выпячивание и видимое белое грудное молоко в желудке (обозначено красным кружком). (D) Выведение мекония из желудочно-кишечного тракта в течение 3 дней после рождения (обозначено красной стрелкой). Промежность требует регулярной чистки влажным ватным тампоном (обозначен желтой стрелкой). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

Рисунок 3: Процесс ведения беременности и кормления новорожденных кроликов, перенесших эмбрионы и генетически модифицированных. Этапы в процессе ведения: Диагностика беременности; Дородовой уход; Акушерство; Послеродовой уход; Аблактировка. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

Рисунок 4: Рост и развитие генетически модифицированных кроликов от рождения до амортации. (А) Изображения крольчат в возрасте от 1 до 8 дней. (В) Пятнадцатидневные крольчата, с матерью-крольчихой слева и крольчатами справа. (В) Тридцатипятидневные молодые кролики, отлученные от груди. (D) Кривая роста крольчат в течение первых трех недель после рождения. Крольчата были из одного помета: ID1, ID2 и ID3 представляют кроликов с модифицированным геном mkrn3 , в то время как ID4, ID5 и ID6 представляют кроликов дикого типа. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

Таблица 1: Выживаемость детенышей кроликов при различных режимах управления разведением. Сравнение показателей выживаемости детенышей кроликов при различных стратегиях управления разведением.

Основными этапами ведения беременности и кормления эмбрионов и генетически модифицированных кроликов являются акушерство и раннее вспомогательное грудное вскармливание. Трудные роды – распространенная проблема у кроликов¹⁹. Длительные сроки родов часто приводят к ишемии, гипоксии и смерти плода²⁵. Надлежащее использование окситоцина может эффективно сократить время родов и уменьшить случаи дистоции плода²⁶. Многие первородящие крольчихи не выщипывают шерсть для подготовки гнезд, что увеличивает риск потери температуры и смертности у новорожденных крольчат^27,28. Как правило, после внутримышечного введения окситоцина у крольчат в течение 5-10 мин начинаются роды, что облегчает искусственное родоразрешение и повышает выживаемость новорожденных. Плохое материнское поведение или неопытность часто препятствуют правильному росту крольчат. Управление вспомогательным кормлением обеспечивает достаточное грудное вскармливание новорожденных кроликов и размещение в комфортабельных инкубаторах, что значительно улучшает их выживаемость²⁹.

В этом исследовании использовался простой инкубатор с использованием искусственного пухового хлопка и полотенец для согревания. Оптимальная температура окружающей среды для новорожденных крольчат составляет 30-32 °^С30. Если это возможно, оборудование для контроля температуры и влажности может еще больше улучшить результаты. На поздних стадиях беременности у самок крольчихи могут проявляться такие симптомы, как учащенное дыхание, респираторные хрипы, расширение ушных сосудов и нежелание есть^{или двигаться}. Эти симптомы напоминают гипертензию, вызванную беременностью человека, и требуют немедленного внимания. В тяжелых случаях может наступить материнская смерть и смерть плода. В таких условиях беременных крольчих следует содержать в более просторных клетках с обрезками бумаги, чтобы стимулировать гнездование, приучать к физическим упражнениям и обеспечивать их свежим зеленым кормом. Эти меры в целом облегчают неблагоприятные симптомы у беременных крольчих. Однако в критических случаях необходима внутримышечная инъекция 0,02 мг клопростенола, чтобы вызвать прерывание беременности на ранних сроках³².

В этом исследовании установлен протокол ведения беременности и кормления для эмбриональных и генетически модифицированных кроликов, что значительно повышает эффективность разведения генетически модифицированных кроликов. По сравнению с традиционными методами разведения кролиководческих ферм, такой подход требует больше рабочей силы и материальных ресурсов и предполагает более кропотливый процесс. Тем не менее, для стандартных лабораторных условий этот метод отвечает экспериментальным потребностям и предлагает практические знания и навыки.

При разведении моделей кроликов на определенные генетические заболевания, таких как мышечная атрофия кроликов или голые кролики, слабая врожденная конституция этих моделей часто приводит к их неспособности конкурировать с кроликами дикого типа в том же помете за грудное молоко, что приводит к высоким показателям смертности вскоре^{после рождения.} Вспомогательное сестринское обслуживание эффективно смягчает эти проблемы, предотвращая преждевременную гибель детенышей кроликов. Кроме того, этот протокол позволяет исследователям наблюдать и определять генотип новорожденных кроликов сразу после рождения, снижая опасения по поводу того, что самки кроликов могут кусать или есть их потомство. В целом, этот протокол имеет многообещающее применение в создании эмбриональных и генетически модифицированных кроликов.

Авторам нечего раскрывать.

Это исследование было поддержано Национальным фондом естественных наук Китая (грант No 82101937), Проектом Фонда медицинских исследований науки и техники провинции Гуандун, Китай (грант No B2024069) и проектом плана науки и техники в Гуанчжоу, Китай (грант No 100). SL2023A04J02229, присвоение No 2024A04J4923).