JoVE Journal

Biochemistry

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Nanyang Technological University

Purificação e reconstituição de TRPV1 para análise espectroscópica

Este artigo descreve métodos específicos para obter quantidades bioquímicas de detergente-solubilizado TRPV1 para análises espectroscópicas. Os protocolos combinados fornecem ferramentas bioquímicas e biofísicas que podem ser adaptadas para facilitar estudos estruturais e funcionais para os canais de íon mamíferos em um ambiente controlado por membrana.

Capítulos neste vídeo

0:04

Title

0:54

TRPV1 Mutagenesis

2:19

Generating the Recombinant Bacmid and Baculovirus for Protein Expression

5:14

eTRPV1 and Single-cysteine Mutant Purification

7:18

eTRPV1 Single-cysteine Mutant Site-directed Spin Labeling

8:12

eTRPV1 Spin-labeled Single Cysteine Mutant Reconstitution

9:30

Results: Characterization of the Minimal Cysteine-less TRPV1 Construct and Single-cysteine Mutants used for Spectroscopic Analysis

11:08

Conclusion

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