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Biochemistry

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Nanyang Technological University

Purification et Reconstitution de TRPV1 pour analyse spectroscopique

Cet article décrit des méthodes spécifiques pour obtenir des quantités biochimiques de TRPV1 solubilisée détergent pour analyse spectroscopique. Les protocoles combinés offrent des outils biochimiques et biophysiques qui peuvent être adaptées afin de faciliter les études structurales et fonctionnelles des canaux ioniques mammifères dans un environnement contrôlé en membrane.

Chapitres dans cette vidéo

0:04

Title

0:54

TRPV1 Mutagenesis

2:19

Generating the Recombinant Bacmid and Baculovirus for Protein Expression

5:14

eTRPV1 and Single-cysteine Mutant Purification

7:18

eTRPV1 Single-cysteine Mutant Site-directed Spin Labeling

8:12

eTRPV1 Spin-labeled Single Cysteine Mutant Reconstitution

9:30

Results: Characterization of the Minimal Cysteine-less TRPV1 Construct and Single-cysteine Mutants used for Spectroscopic Analysis

11:08

Conclusion

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