우리는 방사선 영상으로 그의 지원에 대 한 마크 스미스에 게 감사 하 고 싶습니다. 이 작품은 NIH T32 그랜트 심혈 관 질환 (보아), 미국 심장 협회 (SMC), 및 NIH R35 그랜트 (DKS)에서 학 제 연구에 지원 됩니다.

처리 하는 동물에 대 한 프로토콜 기관 동물 관리 및 사용 위원회의 메릴랜드, 볼티모어 (동물 프로토콜 번호 0116024)에 의해 승인 되었고 AAALAC 국제 표준에 따라 실시.
1입니다. 시 약의 준비
<ol><li>
헤 파 린
	<ol>
<li>희석 250 µ L 1000의 U/mL 헤 파 린 황산 50 ml의 인산 염 버퍼 5 U/mL의 최종 농도 수 있도록 염 분.</li>
		<li>따뜻한는 heparinized (5 U/mL) 인산 염 버퍼 식 염 수, 37 ° c 설정 물 욕조에 맥 관 구조에 혈액 대체 하 게 됩니다</li>
		<li>필요한 튜브를 연결 하 여 압력 제어 펌프를 준비 하 고 2 빈 10 mL 주사기, heparinized 염 분 버퍼에 대 한 1 및 대비 에이전트에 대 한 1.</li>
		<li>버퍼링 따뜻한 heparinized 인산 염으로 튜브와 압력 펌프의 배관에서 공기 방울을 제거.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
대비 에이전트 참고: 참조 하십시오 테이블의 자료 를 대비 에이전트 키트 성분.<ol>
<li>희석제 비율 1:6 염료를 달성 하는 희석제와 함께 색소 화합물을 혼합.</li>
		<li>사용 (단계 2.3.12), 직전 200 µ L 희석된 색소 화합물의 약 각 5 mL 수를 경화제와 혼합 그들 잘 볼륨 (4%)를 추가 합니다. 참고: 제조업체 보고 작업 시간은 40 분입니다. 실리콘 고무 대비 에이전트 시작으로 치료 대리인의 추가 후에 20 분을 유해 하, 그것은 그것의 주입 직전 솔루션을 준비 하는 것이 중요.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
BAPN 식 수
	<ol>
<li>3 g/L (문학에서 설명한 프로토콜에서 적응)9,,1617의 최종 농도 만들려고 식용 수에 있는 β-aminopropionitrile (BAPN)을 분해.</li>
		<li>일단 그들이 마이크로-중부 대 한 관류의 시간까지 나이의 4 주 쥐의 그룹에 포함 하는 BAPN 식 수 관리</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. 수술
<ol><li>
동물 준비
	<ol>
<li>쥐 나이의 3 주에 유아, 12 h 빛/12 h 어두운 주기에, 그들을 유지 하 고 그들을 먹 여 표준 설치류 차 우. BAPN 대우 그룹에 대 한 16-26 주 광고 libitum갓된 BAPN 식 수를 관리 합니다. 표준 음주와 제어 동물 물 광고 libitum제공 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
마 취 기술 참고: CT 분석, 다음 절차에서는 이전 24 시간 수행 됩니다. 수술 절차는 사후 intracardiac 관류에 대 한 표본 준비를 제정 했다.<ol>
<li>100% O2 와 3 %isoflurane 정밀 기화 기를 통해 전달 유도 탱크를 통해 마 취 유도. 마 취 유도 후는 isoflurane 중단 하 고 O2챔버를 플러시. 2-2.5 %isoflurane 1 L/min 코 콘을 통해 O2 의 마 취를 유지 합니다.</li>
		<li>직원을 보호 하기 위해 폐기물 가스 흡착에 대 한 목탄 폐품을 유도 챔버와는 안 면을 첨부 합니다. 유해 자극 (발가락 핀치)에 대 한 응답이 있다는 것을 입증 함으로써 적절 한 마 취 비행기를 확인 합니다.</li>
		<li>수술 트레이 및 필요한 수술 악기의 구성 요원 필드를 준비 합니다.</li>
		<li>동물 수술 필드에 전송 하 고 등 쪽 recumbency에 위치.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
수술 기술
	<ol>
<li>가 위를 사용 하 여, 피부 및 연 조직 overlying 흉 골까지 연장 sternal 노치를 음모 관절 사이에서 피부와 부드러운 조직 통해 중간 절 개를 확인 합니다.</li>
		<li>가 위를 사용 하 여 흉 강 입력 칼 과정에서 격 막에 구멍을 만듭니다.</li>
		<li>가 위를 사용 하 여 양측 복 부 가슴 벽의 격 막 해 부.</li>
		<li>바로 sternal 국경에서 흉 골에서 늑 골을 분리 하는 늑 골 연골을 통해 잘라.</li>
		<li>(근처 칼 과정) 흉 골의 끝에 잘 hemostatic 클램프를 적용 하 고 이동 하는 hemostat cranially 마우스의 머리 위에 배치 됩니다. 이 thymus과 심장, 심 혼 및 중대 한 배 추가 조작에 대 한 노출에서 흉 골을 철회 합니다.</li>
		<li>급격히 심장 및 흉 벽 사이 어떤 부착 해 부.</li>
		<li>미리 로드 버퍼 heparinized 인산 염 (5 U/mL)의 10 mL 주사기에 27-게이지 IV 카 테 테 르 바늘을 연결 하 고 압력 펌프의 튜브에서 공기 방울을 제거 하려면 해당 버퍼와 함께 모든 튜빙을 채우기.</li>
		<li>유체 라인에 거품으로 액체를 준비 하는 동안 주의 작은 혈관의 작성을 방해 수 있습니다. 이 최종 영상에 아티팩트를 소개 하 고 완전 충전에 필요한 볼륨을 변경 절단 선박의 누출에 대비 에이전트를 발생할 것입니다 동물 준비 하는 동안 손상 된 혈관의 수를 제한 합니다.</li>
		<li>왼쪽된 심 실 직각 클램프와 안정 27 게이지 바늘으로 찔린 합니다. 우 심 실 또는 헤 파 린 솔루션 및 혈액을 배출 하는 열 등 한 베 나 카바 incise 즉시. 참고: 헤 파 린은 동물의 죽음 후에 혈관 응고에서 혈액을 방지 하기 위해 항 응고 제로 사용 됩니다.</li>
		<li>2 mL/분 단일 주사기 펌프를 사용 하 여 일정 한 속도로 동물 perfuse Note는 기관의 표시 창백. 정 맥 순환에서 배출 하는 perfusate는 혈액 (약 5-6 mL)의 무료 때까지 관류를 계속 합니다. 펌프를 중지 합니다.</li>
		<li>10 mL 주사기, 좌 심 실에 바늘의 위치를 방해 하지 않도록 주의 복용에서 IV 카 테 테 르 튜브를 분리 합니다.</li>
		<li>즉시 전체 exsanguination 후 5 mL aliquots에 대비 에이전트 솔루션을 분리 하 고이 이번에 경화제를 추가 (단계 1.2 참조). 그들을 잘 섞는다. 10 mL 주사기로 대비 에이전트 믹스의 5 mL을 인출 하 고 그것으로 동물을 perfuse.</li>
		<li>혈관 (동맥 및 정 맥)의 완전 한 작성에 대 한 정 맥 솔루션 종료 볼 수 있다 때 과거 시점 주입을 계속 합니다. 관상 동맥, 폐 동맥, 소장과 간 맥 관 구조에 캐스팅 에이전트의 시각화를 포함 하 여 성공적인 관류의 흔적을 찾고 있습니다.</li>
		<li>대비 에이전트는 실 온에서 약 20 분 후 치료할 것 이다. 치료, 시 필요에 따라 개별 기관, 수확 하 고 10% 중립 버퍼링 된 포 르 말린에 고정. 샘플 마이크로-CT 검사 다음 날에 사용 되지 않는 경우 전체 시체를 수정 합니다. 시체 사용 될 연속적인 일 하는 경우 금속 쟁반에 그들을 놓고 밤새 치료 4 ° C에서 냉장고에 넣어.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. 마이크로-CT 스캔 및 매개 변수
참고: 특정 이미지 수집 매개 변수 사용에 기계에 의존 될 것입니다.
<ol><li>관류 55 kVp, 150 µ A의 전류, 2.19, 시스템 확대 요인 및 CCD 카메라 픽셀 범주화 요소 2의 x 선 관 전압을 사용 하 여 마이크로 CT 스캐너를 사용 하 여 다음 날 각 마우스의 계산 된 x 선 단층 촬영 이미지를 취득 합니다. 이 29 µ m의 효과적인 픽셀 크기를 생성합니다.<ol>
<li>마이크로-CT 스캐너 테이블에 부정사 마우스 시체를 얻을 정찰 x-선 검사.</li>
		<li>대동맥의 전체 길이 이미지를 몸통에 57.4 m m (축) x 37.1 m m (transaxial)의 보기의 탐지기 분야 초점.</li>
		<li>2도 및 투영 2800 ms의 당 한 번의 회전 증가와 180 이미지 계획을 취득 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>수정 된 Feldkamp 알고리즘;를 사용 하 여 이미지를 재구성 재건된 복 크기는 29 µ m3 x 29 x 29 (슬라이스 두께 = 29 µ m) 여기 사용 하는 소프트웨어에 대 한 복합 3D 시각화 플러그인을 사용 하 여.</li>
</ol>4. 후 처리 및 렌더링
<ol><li>적절 한 소프트웨어를 사용 하 여 DICOM 형식으로 CT 데이터를 변환 합니다.</li>
	<li>동맥 류 존재 여부를 식별 하기 위해 이미지를 분석 합니다. 하강 하는 흉부 대동맥, 대동맥 아치의 넓은 시점에서 부 축 직경을 측정 하 고 복 부 대동맥 앞18 (그림 1)에서 설명한. 참고: 우리의 연구에서 이미지 분석 되었다 2 명의 독립적인 관찰자 (1 눈) 동맥 류 존재 여부를 확인 하는 DICOM 뷰어를 이용 하 여. 부 축 직경 대동맥 아치, 앞에서 설명한19 (그림 1)으로 흉부 대동맥, 그리고 복 부 대동맥을 내림차순의 가장 넓은 지점에서 측정 되었다. BAPN 치료 쥐의 비 aneurysmal 동맥 세그먼트 설립 나이 일치 하는 컨트롤 값으로 정상적인 혈관 직경을 의미 합니다.</li>
	<li>동맥 류는 대동맥 직경 보다 큰 50% 기준 직경의 세그먼트의 지역화 된 또는 확산 팽창으로 정의 됩니다. 위의 측정에 따라이 찾습니다.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Meszaros, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+and+clinicopathology+of+aortic+dissection.">Epidemiology and clinicopathology of aortic dissection.</a> CHEST. 117 (5), 1271-1278 (2000).</li><li>Kochanek, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deaths:+final+data+for+2009.">Deaths: final data for 2009.</a> National Vital Statistics Reports. 60 (3), 1-116 (2011).</li><li>Li, J. S., Li, H. Y., Wang, L., Zhang, L., Jing, Z. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+beta-aminopropionitrile-induced+aortic+dissection+model+in+rats+by+different+administration+and+dosage.">Comparison of beta-aminopropionitrile-induced aortic dissection model in rats by different administration and dosage.</a> Vascular. 21 (5), 287-292 (2013).</li><li>Huffman, M. D., Curci, J. A., Moore, G., Kerns, D. B., Starcher, B. C., Thompson, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+importance+of+connective+tissue+repair+during+the+development+of+experimental+abdominal+aortic+aneurysms.">Functional importance of connective tissue repair during the development of experimental abdominal aortic aneurysms.</a> Surgery. 128 (3), 429-438 (2000).</li><li>Wu, D., Shen, Y. H., Russel, L., Coselii, J. S., LeMaire, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+of+thoracic+aortic+dissection.">Molecular mechanisms of thoracic aortic dissection.</a> Journal of Surgical Research. 184 (2), 907-924 (2013).</li><li>Bruel, A., Ortoft, G., Oxlund, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+cross-links+in+collagen+is+associated+with+reduced+stiffness+of+the+aorta+in+young+rats.">Inhibition of cross-links in collagen is associated with reduced stiffness of the aorta in young rats.</a> Atherosclerosis. 140 (1), 135-145 (1998).</li><li>Martinez-Revelles, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lysyl+oxidase+induces+vascular+oxidative+stress+and+contributes+to+arterial+stiffness+and+abnormal+elastin+structure+in+hypertension:+Role+of+p38MAPK.">Lysyl oxidase induces vascular oxidative stress and contributes to arterial stiffness and abnormal elastin structure in hypertension: Role of p38MAPK.</a> Antioxidants &amp; Redox Signaling. 27 (7), 379-397 (2017).</li><li>Kumar, D., Trent, M. B., Boor, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allylamine+and+beta-aminopropionitrile+induced+aortic+medial+necrosis:+Mechanisms+of+synergism.">Allylamine and beta-aminopropionitrile induced aortic medial necrosis: Mechanisms of synergism.</a> Toxicology. 125 (2-3), 107-115 (1998).</li><li>Ren, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=&#946;-Aminopropionitrile+monofumarate+induces+thoracic+aortic+dissection+in+C57BL/6+mice.">&#946;-Aminopropionitrile monofumarate induces thoracic aortic dissection in C57BL/6 mice.</a> Scientific Reports. 6, 28149 (2016).</li><li>Kanematsu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacologically-induced+thoracic+and+abdominal+aortic+aneurysms+in+mice.">Pharmacologically-induced thoracic and abdominal aortic aneurysms in mice.</a> Hypertension. 55 (5), 1267-1274 (2010).</li><li>Weyers, J. J., Carlson, D. D., Murry, C. E., Schwartz, S. M., Mahoney, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retrograde+Perfusion+and+Filling+of+Mouse+Coronary+Vasculature+as+Preparation+for+Micro+Computed+Tomography+Imaging.">Retrograde Perfusion and Filling of Mouse Coronary Vasculature as Preparation for Micro Computed Tomography Imaging.</a> J Vis Exp. (60), e3740 (2012).</li><li>Cortell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silicone+rubber+for+renal+tubular+injection.">Silicone rubber for renal tubular injection.</a> Journal of Applied Physics. 26 (1), 158-159 (1969).</li><li>Bentley, M. D., Ortiz, M. C., Ritman, E. L., Romero, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+microcomputed+tomography+to+study+microvasculature+in+small+rodents.">The use of microcomputed tomography to study microvasculature in small rodents.</a> American Journal of Physiology - Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 282 (5), R1267-R1279 (2002).</li><li>Marxen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroCT+scanner+performance+and+considerations+for+vascular+specimen+imaging.">MicroCT scanner performance and considerations for vascular specimen imaging.</a> Medical Physics. 31 (2), 305-313 (2004).</li><li>Yang, J., Yu, L. X., Rennie, M. Y., Sled, J. G., Henkelman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+structural+and+hemodynamic+analysis+of+vascular+trees.">Comparative structural and hemodynamic analysis of vascular trees.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 298 (4), H1249-H1259 (2010).</li><li>Jia, L. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+stretch-induced+endoplasmic+reticulum+stress,+apoptosis,+and+inflammation+contribute+to+thoracic+aortic+aneurysm+and+dissection.">Mechanical stretch-induced endoplasmic reticulum stress, apoptosis, and inflammation contribute to thoracic aortic aneurysm and dissection.</a> The Journal of Pathology. 236 (3), 373-383 (2015).</li><li>Kurihara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil-derived+matrix+metalloproteinase+9+triggers+acute+aortic+dissection.">Neutrophil-derived matrix metalloproteinase 9 triggers acute aortic dissection.</a> Circulation. 126 (25), 3070-3080 (2012).</li><li>Dillavou, E. D., Buck, D. G., Muluk, S. C., Makaroun, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-dimensional+versus+three-dimensional+CT+scan+for+aortic+measurement.">Two-dimensional versus three-dimensional CT scan for aortic measurement.</a> Journal of Endovascular Therapy. 10 (3), 531-538 (2003).</li><li>Muratoglu, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LRP1+protects+the+vasculature+by+regulating+levels+of+connective+tissue+growth+factor+and+HtrA1.">LRP1 protects the vasculature by regulating levels of connective tissue growth factor and HtrA1.</a> Arterioclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 33, 2137-2146 (2013).</li><li>Badea, C. T., Dragova, M., Holdsworth, D. W., Johnson, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+small+animal+imaging+using+micro-CT+and+digital+subtraction+angiography.">In vivo small animal imaging using micro-CT and digital subtraction angiography.</a> Phys Med Biol. 53 (19), R319-R350 (2008).</li><li>Zhou, Y. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasound-guided+left-ventricular+catheterization:+A+novel+method+of+whole+mouse+perfusion+for+microimaging.">Ultrasound-guided left-ventricular catheterization: A novel method of whole mouse perfusion for microimaging.</a> Laboratory Investigation. 84, 385-389 (2004).</li></ol>

저자는 공개 없다.

마이크로-CT 영상 동물 모델에서 혈관 병 리의 매우 상세 하 고 3 차원 개조를 제공 하기 위해 사용할 수 있습니다. 혈관 내 대비 향상 된 미디어의 사용을 통해 향상 된 비 부드러운 조직, 혈관, 루멘 등 그는 강화에서 분화 수 있다. 레이저 도플러, microangiography, 자기 공명 혈관, confocal, 또는 두 광자 현미경으로 조직학 혈관 침대를 평가 하기 위해 사용 될 수 있습니다, 그리고 그들은 일반적으로 연구의 제한 된 영역에 초점 및 2 차원 평가로 제한 됩니다. 마이크로-CT 기본 신생 혈관 생물학의 이해에 도움이 될 수 있습니다 혈관 구조의 상세한 이미지를 얻기의 비용 효율적인 수단을 제공 합니다. 작은 동물을 이미징의 추가 방법에는 vivo에서 마이크로-CT 및 디지털 감산 혈관 포함 됩니다. 마찬가지로 여기서 설명 하는 기술, 마이크로-CT vivo에서 해상도 증가 시킬 exogenous 대비 에이전트에 의존 합니다. Fenestra VC 및 Isovue-370는 2 같은 혈액 풀 대비 에이전트입니다 마이크로-코네티컷 Fenestra VC 사용 되었습니다 그리고 대동맥 주입20다음 20 분에서에서 ~ 620 Hounsfield 단위 최대 의미의 향상을 보고 사용할 수 있습니다. 또한 다른 나노 입자 기반 조 영제 CT와 MRI에서 잠재적인 표시. 가슴 열지 않고 왼쪽된 심 실 catheterization 설명된21된 microimaging에 대 한 전체 마우스 관류의 또 다른 방법입니다. 혈관 직경의 경도 측정에 대 한 초음파 이미징 생존 연구에 사용할 수 있는 마지막 방법입니다.
이 절차 동안, 적절 한 관류 세부 사항에 주의의 고차를 요구 한다. 그것은 완전히 대조 대리인으로 관류 이전 exsanguinated 수를 맥 관 구조에 대 한 중요 한입니다. 간 희게 하지 않습니다 그것의 어두운 붉은 색을 유지 하는 경우 추가 heparinized 염 분 솔루션 홍 대조와 관류 전에 필요할 수 있습니다. 맥 관 구조의 불완전 한 exsanguination 또는 artifactual 말 초 혈관 않기는 맥 관 구조에 결함 작성으로 나타나는 최종 이미지 품질에 영향을 수 있습니다. 또한, 좌 심 실에 바늘의 삽입은 심 실 벽을 찢 어 또는 우 심 실을 통해 잘라 수 있는 섬세 한 절차입니다. 우 심 실에 바늘을 삽입 하는 경우 폐 신속 하 게 끼얹는다 것입니다 하 고 불완전 한 혈관 관류로 이어지는 관류 동안 일찍 노란색 바뀝니다. 혈관 파열은 불완전 한 관류 하는 최종 합병증 이다. 동맥 트리를 통해 관류 시작 전에 정 맥 순환에서 적절 한 배수 함으로써 혈관 파열의 기회를 최소화할 수 있습니다. 퇴행 성 주입 이전 이미지 관상 맥 관 구조11에 설명 되어 있는 관 침대를 perfusing 하는 대체 방법입니다. 그것은 더 정확 하 게 흉부 및 복 부 대동맥에 생리 혈을 나타냅니다로 관류 하는 antegrade 방법을 선택 했습니다. 마이크로-CT로 얻은 이미지의 품질 능력 평가 교내 혈전 또는 혈 종에 대 한 대동맥을 제한지 않습니다. 그러나, 부드러운 조직 코네티컷 프로토콜을 작성 하는 방법에 따라 아주 잘 구상 될 수 있다. 우리의 연구에 대 한 우리는 세그먼트 작성 intraluminal 혈전에서 stenoses 때문에 아마도 결함으로 대동맥의 것으로 나타났습니다. 으로 기술을 설명 하는 혈관 내 공간을 평가 적합 합니다.
요약,이 프로토콜에는 대동맥 동맥 해 부는 murine 모델의 맥 관 구조의 고해상도 검사를 위한 안전 기술을 제공합니다. 정량 분석은 마이크로-CT 이미지는 맥 관 구조의 정확한 캐스팅을 제공할 수 있습니다를 사용 하 여 쉽게 달성 수 있습니다. 이 책에서 설명 하는 실험의 목적을 위해 우리는 임상 연습에서 대동맥 동맥 류의 측정을 모방 하는 큰 대동맥 직경을 측정 하기로 결정 했다. 해부학와 슬라이스 위치 거리의 조합 필요한 경우 대동맥의 특정 세그먼트를 측정 하기 위해 활용할 수 있습니다. 그것은 또한 perfused 동물 맥 관 구조 몇 군데 하 고 디지털 주요 혈관 및 그것의 작은 말 초 분 지의 3 차원 표현 생성 하기 원하는 금액을 골격 배경에서 분리 수 있습니다 표시 됩니다. 이 프로토콜 파라핀에 포함 된 추가 검사에 대 한 조직학 단면에 사용 될 수 있는 관심의 혈관 조직 유지 합니다.
마이크로-CT는 혈관 생물학 연구를 위한 유망한 이미징 적임. 높은 공간 해상도, 그것은 구조, 조직 및 혈관의 병 리 평가 하는 기회를 제공 합니다. 이 원고에 설명 된 절차에는 여러 기술과 기법 등 동물 취급 및 준비, 이미지 수집, 결과의 정량화 필요 합니다. 이 문서는 성공적으로 쥐에 aortopathies를 식별 하기 위해 혈관 관류에의 한 응용 프로그램을 설명 했다. 다른 동물 모델 및 질병 과정에의 적용 가능성을 평가 하기 위해 추가 연구가 필요 합니다.

대동맥 해 부의 발생률은1년 당 100000 당 3 경우. 대동맥 해 부 및 aneurysmal 계정 10000 죽음에 대 한 미국에서 매년, 서방 국가2에 있는 모든 죽음의 1-2%. 대동맥 해 부 생리 압력에서 대동맥 벽의 층을 통해 혈액의 전파와 그릇의 내 층에 눈물에 의해 시작 됩니다. 높은 환자 펄스 압력 해 부 및 합병증의 발생률이 증가와 연결 됩니다. 증가 벽 전단 응력 선도 동맥 형성3,4대동맥 벽 확장 연결 됩니다. 대동맥 해 부의 결과 두뇌, 신장, 대변, 및 사지, 만성 동맥 류, 파열, 또는 죽음5,,67의 형성을 포함 하 여 먼 장기에 혈액 흐름의 폐색을 포함 합니다.
현재, 개시 및 대동맥 동맥 류 및 해의 진행에 관련 된 생화학과 세포 프로세스 여전히 제대로 이해 하 고. 대동맥 동맥 류 및 해 부 재현 동물 모델은 그들의 병 태 생리학을 이해 하는 열쇠입니다. Β-aminopropionitrile (BAPN)은 lysyl 산화 효소 억제제, 엘라 스 틴과 콜라겐의 교차 연결을 방지 하 고 혈관 벽 세포 외 매트릭스와의 biomechanical 무결성6의 구조를 크게 변경 표시 되었습니다, 8. BAPN로 치료 하는 설치류 대동맥 동맥 및 해 부9,10의 일반적인 동물 모델 활용 되어 있다.
혈관 이미징 형식 혈관 병 리를 확인 하 고, 선박 patency 확인 평가 기관 관류에 있습니다. 최근, 마이크로 계산 된 단층 촬영 (마이크로 CT)은 쥐와 유사 하 게 치수가 재 진된 동물의 맥 관 구조를 공부 하 이용 되었습니다. Intraluminal 혈액은 본질적으로 비교적 radiolucent 뼈와 달리 단층에 의해 혈관의 축 이미징, 제한 됩니다. 그러나 혈관 내 조 영제와 결합 하면,, 마이크로-CT 수 있습니다 매크로 해부학 혈관 병 리11연구를 위한 동물 vasculatures의 상세한 3 차원 복원을.
선택한 대비 에이전트는 방사선 불 투과성 실리콘 고무 리드 크롬과 리드를 포함 하는 ( 테이블의 자료를 참조). 촉매의 면 전에 서 관류, 시 신속 하 게 견고 하 게 캐스팅 배경 조직 달리 높은 방사선 불 투과성는 맥 관 구조를 만드는 혈관의 매크로 해부학 아키텍처에 최소한의 변경으로 맥 관 구조를 형성 하는 경우 radiographically 검사. 이 대비 에이전트 처리를 쉽게 하 고 조직 저하와 자주 관련 혈관 캐스트 부식 된 파손으로 인해 선박 손실 방지 때문에 유리 하다. 그것은 최소한의 수축12치료, 혈관 혈액의 허가 특허 유지 하 고는 동물 매크로-맥 관 구조 비 생존 실험에의 한 정확한 평가 대 한 허용. 이전 작업은 성공적으로 동물 연구의 다양 한 방사선 불 투과성 실리콘 고무-대비를 사용 했다. 특히, 관상, 사, 태 반, 그리고 대뇌 순환11,12,13,,1415 머릿속에 적용 표시 되었습니다. 이 논문에서 우리 세부 양적 마이크로-코네티컷에 의해 마우스 모델에서 대동맥 병 리 BAPN 유도 하 리드 기반의 방사선 불 투과성 실리콘 고무의 혈관 내 관류에 대 한 오픈 왼쪽 심 실 펑크의 방법론

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Microfil</td>
			<td>Flow Tech, Inc</td>
			<td>MV-122</td>
			<td>We use yellow, a different color can be ordered as desired. Kit includes MV-Compound, MV-Diluent, and MV-Curing Agent.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin (1000 U/mL)</td>
			<td>Sagent Pharmaceuticals</td>
			<td>25021-400-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline</td>
			<td>Corning</td>
			<td>21-031-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Vet One, MWI</td>
			<td>502017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-Aminopropionitrile fumarate salt</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A3134</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single syringe pump</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-831-200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27-gauge scalp vein set needle</td>
			<td>Exel Int</td>
			<td>26709</td>
			<td>27G x 3/4&#34;, 12&#34; tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inveon Micro-CT scanner</td>
			<td>Siemens Medical Solutions</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osirix MD</td>
			<td>Pimxmeo SARL</td>
			<td></td>
			<td>Version 8.0.2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inveon Research Workplace</td>
			<td>Siemens Medical Solutions</td>
			<td></td>
			<td>Version 4.2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Chow</td>
			<td>Harlan Teklad</td>
			<td>2018sx</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantitative micro-ct analysis of aortopathy in a mouse model of &#946;-aminopropionitrile-induced aortic aneurysm and dissection

대동맥 동맥 류 및 해 부 상당한 병 적 상태와 사망률은 인구에 연결 되어 있으며 매우 치명적일 수 있다. 대동맥 질환의 동물 모델 존재는 맥 관 구조의 이미징 vivo에서 제한 되었습니다. 최근 몇 년 동안, 미세 전산화 단층 촬영 (마이크로 CT) 모두 크고 작은 혈관 이미징에 대 한 기본 양식 적임 떠오르고 있다 vivo에서 및 전 비보. 함께 관 주조 방법, 주파수 및 C57/Bl6 마우스 β-aminopropionitrile 치료에 대동맥 병 리의 분포 특성 마이크로-CT를 사용 성공적으로 했습니다. 이 방법의 기술적 한계 가난한 동물 준비, 선박 크기 정량화에 대 한 적절 한 방법론의 응용 프로그램 및 비-이 절차의 생존에 의해 소개 하는 관류의 품질에 변화를 포함 합니다. 이 문서는 동맥 및 해 부의 마우스 모델에서 aortopathy의 양적 특성에 대 한 리드 기반의 방사선 불 투과성 실리콘 고무의 혈관 내 관류에 대 한 방법론을 자세히 설명합니다. 대동맥 병 리를 시각화, 뿐만 아니라 다른 혈관 침대에 vivo에서 또는 혈관 침대 제거 사후 조사이 메서드를 사용할 수 있습니다.

이 프로토콜을 평가 하기 위해 20 남성 성인 쥐, 혼합된 배경으로 앞에서 설명한19 의 그리고 20-30 주 나이, 또는 BAPN 치료 없이 리드 기반의 방사선 불 투과성 실리콘 고무 끼얹는다 했다 ( 테이블의 자료를 참조 ) 위에 상세한 프로토콜을 사용 하 여. 그들은 수술 다음 날에 마이크로-CT 검사 (그림 1 및 그림 2). 비교 그룹 중 쥐의 년에서 상당한 차이가 있었다.
작은 축 직경 다음이 쥐에 정량 했다. BAPN 치료 쥐에 오름차순 대동맥의 평균 직경은 치료 나이 일치 하는 컨트롤의 그것 보다 훨씬 더 큰 (1.43 ± 0.56 m m 대 0.93 ± 0.11 mm; p = 0.023, 홀 학생 t-테스트). BAPN와 lysyl 산화 효소의 저해 하강 하는 나이 일치 하는 컨트롤에 비해 흉부 또는 복 부 대동맥 직경 의미에 큰 영향 없어 (p > 0.082, 짝이 없는 학생 t-테스트, 그림 3).
동맥 류는 1.5 x 치료 그룹의 평균 직경으로 정의 되었다. 동맥 류는 BAPN-치료 BAPN 치료 컨트롤 (치료 쥐;의 0% 대 BAPN 치료 쥐의 50%와 비교 된 쥐의 수에 있는 상당한 증가 P = 0.042) 피셔의 정확한 시험. BAPN 취급 생쥐에서 동맥 류는 대동맥에 독점적으로 흉부 대동맥 (식별 10 동맥 류에서 8)에서 식별 된 대다수와 확인 되었다. 4 마우스 개발 1 이상의 동맥 BAPN 치료 (표 1).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57589/57589fig1.jpg"> 그림 1: 대표적인 단면 마이크로-CT 이미지. A. 이것은 BAPN 치료 쥐의 횡단면 화상 진 찰. B. 이것은 BAPN 처리 쥐의 횡단면 화상 진 찰. 부 축 직경 측정 대동맥 아치의 수준에서 만들어집니다.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57589/57589fig2.jpg"> 그림 2: 마우스 대동맥 동맥 및 마이크로 코네티컷으로 식별 해 부의 3 차원 재구성 A. 이것은 saccular 복 부 대동맥 동맥 그리고 대동맥 아치 동맥 류와 BAPN 처리 마우스의 대표 3 차원 재구성. B.이 패널 대표 BAPN 취급 마우스에서 흉부 대동맥 해 부를 내림차순으로 보여줍니다. True 및 false 루멘 내 플랩으로 구분 됩니다. 진실한 루멘 (TL)은 혈액의 정상적인 통로 이며 거짓 루멘 (FL) 새로 만든된 통로.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57589/57589fig3.jpg"> 그림 3: 대동맥 직경에 BAPN 치료의 효과. 이러한 패널 표시 의미 부 축 선박 직경 BAPN 치료 및 BAPN 처리 남성 생쥐에서 마이크로-CT로 측정. 동맥 류를가지고 결정 그 생쥐는 빨간색으로 강조 표시 됩니다. 치료 그룹의 의미는 각 패널에 점선으로 표시 됩니다. 한. 이것은 오름차순 대동맥/아치 (AAo/아치); 0.93 ± 0.11 대 1.43 ± 0.56 m m; p = 0.023. b. 이것은 하강 흉부 대동맥 (DTA); 0.82 ± 0.04 대 1.11 ± 0.43 m m; p = 0.0817. c. 이것은 복 부 대동맥; 0.66 ± 0.11 대 0.89 ± 0.58 m m; p = 0.296. 모든 데이터는 평균 ± 표준 편차로 표시 됩니다. <a href="/files/ftp_upload/57589/57589fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td>없음 BAPN (n = 8)</td>
			<td>BAPN (n = 12)</td>
		</tr>
<tr>
<td>동맥으로 총 동물</td>
			<td>0</td>
			<td>6 *</td>
		</tr>
<tr>
<td>동맥 류의 총 수</td>
			<td>0</td>
			<td>10</td>
		</tr>
<tr>
<td>AAO/아치</td>
			<td>0</td>
			<td>5</td>
		</tr>
<tr>
<td>DTA</td>
			<td>0</td>
			<td>3</td>
		</tr>
<tr>
<td>ABD 대동맥</td>
			<td>0</td>
			<td>2</td>
		</tr>
</tbody></table>표 1입니다. BAPN 치료 없이 남성 생쥐에서 확인 된 동맥 류의 해부학 분포. 이 표에서 동맥 류의 부각으로 마이크로-CT에 의해 식별 (n = 20). AAO 오름차순 대동맥; = DTA 흉부 대동맥; 내림차순 = ABD 대동맥 = 복 부 대동맥. p < 0.05.

Watch this Scientific Journal Video about Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of ÃŽÂ²-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection at JoVE.com

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of &#946;-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

이 문서는 대동맥 동맥 및 해 부의 마우스 모델에 대동맥 직경 정량화에 대 한 murine 맥 관 구조 perfuse를 방사선 불 투과성 리드 기반 실리콘 고무를 사용 하 여 상세한 방법론을 설명 합니다.

Β-aminopropionitrile-유도 대동맥 동맥 및 해 부의 마우스 모델에서 Aortopathy의 양적 마이크로 CT 분석

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of ...

quantitative-micro-ct-analysis-aortopathy-mouse-model

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

9.5K 조회수.  University of Maryland School of Medicine. 이 문서는 대동맥 동맥 및 해 부의 마우스 모델에 대동맥 직경 정량화에 대 한 murine 맥 관 구조 perfuse를 방사선 불 투과성 리드 기반 실리콘 고무를 사용 하 여 상세한 방법론을 설명 합니다.

비디오: Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of β-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Quantitative Analysis of Cancer Metastasis using an Avian Embryo Model

During metastasis cancer cells disseminate from the primary tumor, invade into surrounding tissues, and spread to distant organs. Metastasis is a complex process that can involve many tissue types, span variable time periods, and often occur deep within organs, making it difficult to investigate and quantify. In addition, the efficacy of the metastatic process is influenced by multiple steps in the metastatic cascade making it difficult to evaluate the contribution of a single aspect of tumor cell behavior. As a consequence, metastasis assays are frequently performed in experimental animals to provide a necessarily realistic context in which to study metastasis. Unfortunately, these models are further complicated by their complex physiology. The chick embryo is a unique in vivo model that overcomes many limitations to studying metastasis, due to the accessibility of the chorioallantoic membrane (CAM), a well-vascularized extra-embryonic tissue located underneath the eggshell that is receptive to the xenografting of tumor cells (figure 1). Moreover, since the chick embryo is naturally immunodeficient, the CAM readily supports the engraftment of both normal and tumor tissues. Most importantly, the avian CAM successfully supports most cancer cell characteristics including growth, invasion, angiogenesis, and remodeling of the microenvironment. This makes the model exceptionally useful for the investigation of the pathways that lead to cancer metastasis and to predict the response of metastatic cancer to new potential therapeutics. The detection of disseminated cells by species-specific Alu PCR makes it possible to quantitatively assess metastasis in organs that are colonized by as few as 25 cells. Using the Human Epidermoid Carcinoma cell line (HEp3) we use this model to analyze spontaneous metastasis of cancer cells to distant organs, including the chick liver and lung. Furthermore, using the Alu-PCR protocol we demonstrate the sensitivity and reproducibility of the assay as a tool to analyze and quantitate intravasation, arrest, extravasation, and colonization as individual elements of metastasis.

Using quantitative PCR, we demonstrate how the well-established chick CAM model can be used to quantitatively analyze the metastasis of human tumor cells to distant organs.

조류 엠브료 모델을 사용하여 암 전이의 정량 분석

During metastasis cancer cells disseminate from the primary tumor, invade into surrounding tissues, and spread to distant organs. Metastasis is a complex ...

연구

의학

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of Abdominal aortic aneurysm (AAA) pathophysiology. There is no abdominal aortic aneurysm endograft exclusion model cheap and reproducible, which would allow deep investigations of AAA before and after treatment. We hereby describe how to induce, and then to exclude with a covered coronary stentgraft an abdominal aortic aneurysm in a rat. The well known elastase induced AAA model was first reported in 19901 in a rat, then described in mice2. Elastin degradation leads to dilation of the aorta with inflammatory infiltration of the abdominal wall and intra luminal thrombus, matching with human AAA. Endovascular exclusion with small covered stentgraft is then performed, excluding any interactions between circulating blood and the aneurysm thrombus. Appropriate exclusion and stentgraft patency is confirmed before euthanasia by an angiography thought the left carotid artery. Partial control of elastase diffusion makes aneurysm shape different for each animal. It is difficult to create an aneurysm, which will allow an appropriate length of aorta below the aneurysm for an easy stentgraft introduction, and with adequate proximal and distal neck to prevent endoleaks. Lots of failure can result to stentgraft introduction which sometimes lead to aorta tear with pain and troubles to stitch it, and endothelial damage with post op aorta thrombosis. Giving aspirin to rats before stentgraft implantation decreases failure rate without major hemorrhage. Clamping time activates neutrophils, endothelium and platelets, and may interfere with biological analysis.

Histological and biochemical modifications after aneurysm endograft exclusion are still unclear. We describe a new model of endograft implantation on a murine aneurysm. Through thrombus analysis with and without persistant circulating blood stream interface, and new endovascular biomaterials evaluation, this model will help to better understand endovascular aneurysm exclusion pathobiology.

혈관 동맥류 수리의 새로운 쥐과 모델

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Quantitative Analysis and Characterization of Atherosclerotic Lesions in the Murine Aortic Sinus

Atherosclerosis is a disease of the large arteries and a major underlying cause of myocardial infarction and stroke. Several different mouse models have been developed to facilitate the study of the molecular and cellular pathophysiology of this disease. In this manuscript we describe specific techniques for the quantification and characterization of atherosclerotic lesions in the murine aortic sinus and ascending aorta. The advantage of this procedure is that it provides an accurate measurement of the cross-sectional area and total volume of the lesion, which can be used to compare atherosclerotic progression across different treatment groups. This is possible through the use of the valve leaflets as an anatomical landmark, together with careful adjustment of the sectioning angle. We also describe basic staining methods that can be used to begin to characterize atherosclerotic progression. These can be further modified to investigate antigens of specific interest to the researcher. The described techniques are generally applicable to a wide variety of existing and newly created dietary and genetically-induced models of atherogenesis.

We describe procedures to quantify and characterize atherosclerotic lesions in mouse models using precision sectioning of the aortic sinus and ascending aorta combined with histochemical and immunohistochemical analysis.

쥐의 대동맥 부비동의 동맥 경화 병변의 정량 분석​​ 및 특성

Atherosclerosis is a disease of the large arteries and a major underlying cause of myocardial infarction and stroke. Several different mouse models have ...

Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the aorta in mice using the sleeve method was short and easy averaging 20 min, permitting studies of iso/allo grafts. The following article describes the aortic transplantation procedure used in our laboratory. The mice were anesthetized with a mixture of 1.5% volume isoflurane and 100% oxygen through a face mask. At this point, the segment of the aorta between the renal arteries and its bifurcation was separated from the vena cava, freely prepared and clampedat the proximal and distal segments with a single silk suture. Prior to the removal of the aorta, a saline solution containing heparin was injected into the inferior vena cava. Then the aorta was cut between the clamps and a saline heparin solution was used to flush the lumen. The sleeve technique with monofilament sutures was used in order to transplant the abdominal aorta in the orthotopic position.

We present an orthotopic aortic transplantation model using the sleeve technique in mice. It is a very rapid anastomosis method, which can be employed in studies of vascular disease.

대동맥 이식-교육용 비디오의 마우스 모델에서 소매 기법을 사용 하 여

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the ...

Dissection of the Mouse Pancreas for Histological Analysis and Metabolic Profiling

We have been investigating the pancreas specific transcription factor, 1a cre-recombinase; lox-stop-lox- Kristen rat sarcoma, glycine to aspartic acid at the 12 codon (Ptf1acre/+;LSL-KrasG12D/+) mouse strain as a model of human pancreatic cancer. The goal of our current studies is to identify novel metabolic biomarkers of pancreatic cancer progression. We have performed metabolic profiling of urine, feces, blood, and pancreas tissue extracts, as well as histological analyses of the pancreas to stage the cancer progression. The mouse pancreas is not a well-defined solid organ like in humans, but rather is a diffusely distributed soft tissue that is not easily identified by individuals unfamiliar with mouse internal anatomy or by individuals that have little or no experience performing mouse organ dissections. The purpose of this article is to provide a detailed step-wise visual demonstration to guide novices in the removal of the mouse pancreas by dissection. This article should be especially valuable to students and investigators new to research that requires harvesting of the mouse pancreas by dissection for metabolic profiling or histological analyses.

This video article provides a detailed demonstration of the procedures required to successfully remove the pancreas from a mouse by dissection for histological analysis and metabolic profiling.

조직학 분석 및 대사 프로 파일링에 대 한 마우스 췌의 해 부

We have been investigating the pancreas specific transcription factor, 1a cre-recombinase; lox-stop-lox- Kristen rat sarcoma, glycine to aspartic acid at ...

Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

The adventitial vasa vasorum (VV) provides oxygen and nourishment to the aortic wall. Hypoxia in the aortic wall can cause enlarged abdominal aortic aneurysms (AAAs). This article introduces and describes a standard protocol used to induce AAAs through adventitial VV hypoperfusion created with a combination of polyurethane catheter insertion into the aortic lumen and suture ligation of the infrarenal abdominal aorta.
The protocol involves the use of male rats weighing 300-400 g, which are provided food and water ad libitum. After laparotomy with a ventral midline abdominal incision, exfoliation of the aorta is performed, which blocks blood flow from the perivascular tissue. Aortotomy involving a small incision adjacent to the renal artery branches is performed, and a polyurethane catheter is inserted using an 18-gauge indwelling needle. After repairing the incision, tight ligation of the aorta over the catheter blocks VV blood flow from the proximal direction through the aortic wall without disturbing the aortic blood flow. This technique can induce an AAA with progressive aortic dilatation.
The greatest benefit of this model is that VV hypoperfusion causes tissue hypoxia and the development of an infrarenal AAA, which has morphological and pathological characteristics similar to those of a human AAA.

Polyurethane catheter insertion into the aortic lumen and suture ligation of the aorta induce chronic hypoxia due to hypoperfusion of the adventitial vasa vasorum. This article describes a novel animal model of abdominal aortic aneurysm (AAA) with characteristics similar to those of AAA in humans.

Adventitial 바사 Vasorum 관류를 차단 하 여 복 부 대동맥 동맥 류의 설치류 모델의 생성

The adventitial vasa vasorum (VV) provides oxygen and nourishment to the aortic wall. Hypoxia in the aortic wall can cause enlarged abdominal aortic ...

Induction and Micro-CT Imaging of Cerebral Cavernous Malformations in Mouse Model

Mutations in the CCM1 (aka KRIT1), CCM2, or CCM3 (aka PDCD10) gene cause cerebral cavernous malformation (CCM) in humans. Mouse models of CCM disease have been established by tamoxifen induced deletion of Ccm genes in postnatal animals. These mouse models provide invaluable tools to investigate molecular mechanism and therapeutic approaches for CCM disease. An accurate and quantitative method to assess lesion burden and progression is essential to harness the full value of these animal models. Here, we demonstrate the induction of CCM disease in a mouse model and the use of the contrast enhanced X-ray micro computed tomography (micro-CT) method to measure CCM lesion burden in mouse brains. At postnatal day 1 (P1), we used 4-hydroxytamoxifen (4HT) to activate Cre recombinase activity from the Cdh5-CreErt2 transgene to cleave the floxed allele of Ccm2. CCM lesions in mouse brains were analyzed at P8. For micro-CT, iodine based Lugol&#39;s solution was used to enhance contrast in brain tissue. We have optimized the scan parameters and utilized a voxel dimension of 9.5 &#181;m, which lead to a minimum feature size of approximately 25 &#181;m. This resolution is sufficient to measure CCM lesion volume and number globally and accurately, and provide high-quality 3-D mapping of CCM lesions in mouse brains. This method enhances the value of the established mouse models to study the molecular basis and potential therapies for CCM and other cerebrovascular diseases.

This protocol demonstrates the induction of cerebral cavernous malformation disease in a mouse model and uses contrast enhanced micro computed tomography to measure lesion burden. This method enhances the value of established mouse models to study the molecular basis and potential therapies for cerebral cavernous malformation and other cerebrovascular diseases.

유도 및 마우스 모델에서 대뇌 동굴 같은 기형의 마이크로-CT 영상

Mutations in the CCM1 (aka KRIT1), CCM2, or CCM3 (aka PDCD10) gene cause cerebral cavernous malformation (CCM) in humans. Mouse models of CCM disease have ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

Myography 와이어를 사용 하 여 마우스 Mesenteric 동맥의 isometric 수축 측정

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. An aneurysm forms as a result of progressive weakening and eventual dilation of the aorta, which can rupture or tear once it reaches a critical diameter. Aneurysms of the descending aorta in the chest, called descending thoracic aortic aneurysms (dTAA), make up a large proportion of aneurysm cases in the United States. Uncontained dTAA rupture is almost universally lethal, and elective repair has a high rate of morbidity and mortality. The purpose of our model is to study dTAA specifically, to elucidate the pathophysiology of dTAA and to search for molecular targets to halt the growth or reduce the size of dTAA. By having a murine model to study thoracic pathology precisely, targeted therapies can be developed to specifically test dTAA. The method is based on the placement of porcine pancreatic elastase (PPE) directly on the outer murine aortic wall after surgical exposure. This creates a destructive and inflammatory reaction, which weakens the aortic wall and allows for aneurysm formation over weeks to months. Though murine models possess limitations, our dTAA model produces robust aneurysms of predictable size. Furthermore, this model can be used to test genetic and pharmaceutical targets which may arrest dTAA growth or prevent rupture. In human patients, interventions such as these could help avoid aneurysm rupture, and difficult surgical intervention.

We describe a surgical protocol to consistently induce robust descending thoracic aortic aneurysms in mice. The procedure involves left thoracotomy, thoracic aorta exposure, and placement of a sponge soaked in porcine pancreatic elastase on the aortic wall.

국소 엘라스타아제의 뮤린 외과 모델은 내림차순 흉부 대동맥류를 유도

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. ...

Porcine Model of Infrarenal Abdominal Aortic Aneurysm

Large animal models to study abdominal aortic aneurysms are sparse. The purpose of this model is to create reproducible, clinically significant infrarenal abdominal aortic aneurysms (AAA) in swine. To achieve this, we use a combination of balloon angioplasty, elastase and collagenase, and a lysyl oxidase inhibitor, called &#946;-aminopropionitrile (BAPN), to create clinically significant infrarenal aortic aneurysms, analogous to human disease.
Noncastrated male swine are fed BAPN for 7 days prior to surgery to achieve a steady state in the blood. A midline laparotomy is performed and the infrarenal aorta is circumferentially dissected. An initial measurement is recorded prior to aneurysm induction with a combination of balloon angioplasty, elastase (500 units)/collagenase (8000 units) perfusion, and topical elastase application. Swine are fed BAPN daily until terminal procedure on either postoperative day 7, 14, or 28, at which time the aneurysm is measured, and tissue procured. BAPN + surgery pigs are compared to pigs that underwent surgery alone.
Swine treated with BAPN and surgery had a mean aortic dilation of 89.9% &#177; 47.4% at day 7, 105.4% &#177; 58.1% at day 14, and 113.5% &#177; 30.2% at day 28. Pigs treated with surgery alone had significantly smaller aneurysms compared to BAPN + surgery animals at day 28 (p &#60; 0.0003). The BAPN + surgery group had macroscopic and immunohistochemical evidence of end stage aneurysmal disease.
Clinically significant infrarenal AAA can be induced using balloon angioplasty, elastase/collagenase perfusion and topical application, supplemented with oral BAPN. This model creates large, clinically significant AAA with hallmarks of human disease. This has important implications for the elucidation of AAA pathogenesis and testing of novel therapies and devices for the treatment of AAA. Limitations of the model include variation in BAPN ingested by swine, quality of elastase perfusion, and cost of BAPN.&#160;

This novel model creates robust infrarenal abdominal aortic aneurysms in swine using a combination of balloon angioplasty, elastase/collagenase perfusion, topical elastase application, and oral compound &#946;-aminopropionitrile administration, which interferes with collagen cross-linking.

돼지 모델 의 관막 복 대동맥류

Large animal models to study abdominal aortic aneurysms are sparse. The purpose of this model is to create reproducible, clinically significant infrarenal ...