저자는 NeuroDevNet (우수 국가 센터)를 포함하는 우리의 자금 조달 기관을 감사드립니다의 알바 재단, 여성과 어린이 건강 연구소, 알버타 대학.

앨버타 대학의 동물 관리 및 사용위원회, 건강 과학은 모든 동물 연구를 승인했다. 참고 :이 프로토콜은 다른 종과 균주에 적용 할 수 있지만,이 프로토콜은 긴 에반스 쥐를 대상으로합니다. 이러한 래트 다른 설치류 균주에 비해 우수한 성능 모터 시력을 보여왔다. 다음 타이밍 임신,식이 보충제, 모체 염증 및 신경 발달 반사 25, 26 프로토콜이다. 1. 실험 동물 <ol><li> 쥐 동물 주택 시설에 도착하면, 그들의 새로운 환경에 적응 할 수 있도록 하루 이틀을위한 상호 작용 삼가. 적응 후 약 5 일 동안 매일 쥐를 처리하지, 또는 쥐 때 더 이상 스트레스의 조짐을 보이고. 인간에 의한 스트레스 테스트 결과와 르를 변경할 수 있습니다임신 손실 광고. </li><li> 쥐가 익숙해지면, 번식이 시작됩니다. (오전 8시 - 오후 3시) 두 여성 및 2 층 사육 케이지 한 수컷 쥐 (H = 38cm, 1,800cm 2 면적) 밤새 놓는다. 이 케이지는 스트레스와 혼잡을 방지합니다. 아침에 전달 피펫을 사용하여, 식염수의 약 0.25 mL를 암쥐의 질을 세척. 미세 원심 튜브에 솔루션을 전송합니다. </li><li> 다시 각각 기존의 새장에 두 여성과 남성을 놓습니다. </li><li> 래트 발생한 정자 여부가 존재하는 발정주기의 어느 단계를 결정하기 위해 광학 현미경 (100 배) 아래의 섹션 1.2에서 수집 된 용액을보기. 정자가있는 경우, 배아 일 (E1) (그림 1)과 날짜를 기록합니다. 임신을하면 여성에게 E14에 자신의 새장을 제공합니다. 참고 : 질 도말 검사에서 세포는 분명, 따라서 낮은 조명 설정을 사용합니다. 콘덴서가 가장 낮은 설정으로 조정되어 있는지 확인합니다. 광고단지 휘도 제어 광을 어둡게한다. 밝기 전화를 사용할 수있는 경우, 1로 설정합니다. </li></ol> 2.식이 보충제 참고 :이 프로토콜은 임신 마지막 주 동안식이 브로콜리 새싹 소비의 치료 효과를 평가하기위한 것입니다. 우 등의 알에 따른 콩나물 성장. (27). <ol><li> 3 시간 - 2 브로콜리 새싹 씨앗을 만끽 해보세요. 조리대 씨 sprouter 상자에 씨앗을 확산하고 발아 따뜻한 표면에 설정합니다. </li><li> (오전 9시 - 8)과 한 번 오후에 (3-4 PM) 한 번 오전에, 하루에 두 번 씨앗을 물. </li><li> 5 일째에, 일에 대한 창으로 콩나물을 배치 (콩나물은 두 잎 각을 가져야 하루 위에 녹색이 될 것이다). </li><li> 하루의 끝에서, 부드럽게 체로 상자 밖으로 브로콜리 콩나물을 당겨 콩나물을 수확하고 건조 평평한 표면에 누워. </li><li> 콩나물이 완전히 건조되면, w밀봉 된 플라스틱 백 아웃 eigh 200 mg의 장소. </li><li> E14에서부터 PD21 (새끼가되는 이유 일)까지 매일 건조 브로콜리 콩나물 각각 200 mg의 임신 한 쥐 먹이. </li></ol> 3. 염증 <ol><li> 염증을 유발하고 자손에 흰색 물질 부상을 재현, 지질 다당류 (LPS) E19과 E20의 모든 12 시간 임신 쥐를 주입합니다. 주사의 날, 주거 시설에서 연구실에 새장을 가지고. 임신 한 쥐에 적응 적어도 1 시간 동안 침착이 될 수 있습니다. 쥐가 영구적으로 전신 또는 신장 손상의 임상 적 징후가 표시되면, 즉시 안락사와 연구에서 제거됩니다. </li><li> 임신 댐의 무게를. </li><li> 식염수를 100 μL의 : LPS 200 ㎍ / kg (B8 혈청 0127)을 녹인다. ½ 30 G 바늘을 구비 한 1 ml 주사기로 상기 용액을 대기음. <ol><li> 각 주입에 대한 새 바늘을 사용합니다. 이 솔루션은 불편을 최소화하기 위해 몇 분 동안 예열합니다. </리&gt; </ol></li><li> 시간을 기록하고 복강 임신 댐을 주입. 양쪽 번갈아 주사는 동일한 분포를 보장한다. 참고 : Machholz 등. 적절한 억제 및 주입 절차를 설명한다. (28) </li></ol> 4. 발달 반사 테스트 <ol><li> PD1 (출생 일)에, 댐 및 기록 출생 무게에서 새끼를 제거합니다. 다시 각각의 케이지에 새끼를 놓고 PD3 때까지 동물 시설로 이동합니다. 이 댐과 강아지 사이의 산모 결합을 보장합니다. <ol><li> 신뢰성 평가를위한 반사 테스트를 기록합니다. 이 프레임 단위의 분석 (1 / 1,000 S)의 최대 셔터 속도 오도록 비디오 카메라를 조정한다. 이 위 또는 쥐 강아지 각 반사에 사용되는 모든 재료 바로 옆에 있도록 비디오 카메라를 배치합니다. 예컨대, 사지에 배치하기위한, 승강 및 뒷다리의 배치가 포착되도록 래트 새끼 옆에 카메라를 배치했다. </li><li> 가속 바로 잡기 위해, 공중에서 오른쪽으로 강아지의 능력을 기록하기 위해 쥐의 강아지 및 방문 패드 위에 카메라를 배치합니다. </li></ol></li><li> 실험이 끝날 때까지 매일 기록의 무게. PD3에서 신경 발달 반사 테스트 (그림 4)를 시작합니다. 환경에 적응 수 있도록 시험 전에 1 시간의 최소 조용한 방에 새장을 이동합니다. </li><li> 쥐가 야행성으로 매일 일정한 시간에 신경 발달 반사 테스트를 수행합니다. 예를 들어 9 시까 지 테스트 - 매일 정오. 36.5 ° C의 안정된 체온을 유지하기 위해, 직접 항상 가열 램프 아래 또는 열 패드 새끼 유지; 이 시대의 쥐 새끼 쉽게 열을 잃게됩니다. 직장 온도 프로브로 측정한다. 효율적으로 수행하는 경우가 댐과 충분히 쓰레기에서 제거되지 않기 때문에, 새끼의 체온은 변경되지 않습니다. 참고 : 37 ° C를 초과하지 않도록하는 가열 램프의 온도를 모니터링. <ol&gt; <li> 긍정적 인 반응이 관찰 될 때까지 매일 각 반사의 점수를 기록합니다. 강아지가 이틀 연속에서 작업을 수행 할 수있을 때 긍정적 인 반사 반응이 발생합니다. 긍정 응답의 첫번째 발생의 날짜는 정량화에 사용된다. 더 이상의 테스트는 긍정적 인 반응 다음 필요하지 않습니다. 따라서, 각 반사적 종료 날짜는 가변적이다. </li></ol></li><li> 앞다리 파악하는 <ol><li> PD3 일부터의 앞다리 파악 반사 테스트를 실시합니다. 각 앞발의 손바닥에 대해 평활로드 놓고 수동 가벼운 압력을 적용한다. 가벼운 압력이 약간 이루어지는 것이 접촉을 보장하기 위해 앞발을 치환해야하며, 새끼에는로드를 느낄 수있다. 파악하는는로드 주변의 모든 자리의 굴곡으로 나타납니다. 두 앞발은 연속 이틀간로드를 파악할 때 반사의 성공적인 획득은 발생한다. </li><li> 앞다리 파악 점수 : 더 욕심 0 성공 왼쪽으로 한 앞발로 파지 (또는 R 1ight의 앞발은) 여기에 지정 될 수 있습니다 두 앞발로 성공을 잡는 2 </li></ol></li><li> 뒷다리 파악하는 <ol><li> PD3에 시작하는 후지 파악 반사 테스트를 실시합니다. 각 뒷발의 발바닥에 대해 평활로드 놓고 수동 가벼운 압력을 적용한다. 가벼운 압력이 약간 이루어지는 것이 접촉을 보장하기 위해 뒷발을 치환해야하며, 새끼에는로드를 느낄 수있다. 로드의 성공 욕심은로드 주변의 숫자의 굴곡으로 나타납니다. hindpaws 모두가 연속 이틀간로드를 파악할 때 반사의 성공적인 획득은 발생한다. </li><li> 사지 이해 점수 : 더 욕심 0 1 일 뒷발로 잡고 성공을 위해 (왼쪽 또는 오른쪽 뒷발은 여기에 지정 될 수 있습니다) 모두 hindpaws에 의해 성공을 잡는 2 </li></ol></li><li> 바로 잡고 <ol><li> PD3에 시작하는 바로 잡고 반사 테스트를 시작합니다. 네 발 수직으로 단단히, 앙와위에서 강아지를 누르고 있습니다. 오 가자강아지 f를 바로하면 타이머를 시작합니다. 강아지가 / 플립 네 발에 롤오버 할 때 바로 잡고 달성되고, 각각의 발 신체에 수직이다. 각 강아지이 목표를 달성하기 위해 15 s의 최대 값을 지정합니다. </li><li> 복원 정 점수 : 0 (최대 할당 된 시간 또는 15 초) 뒷면에 누워에 대한 1 측면에 거짓말 (왼쪽 또는 오른쪽은 여기에 지정 될 수 있습니다) 또는 (최대 할당 된 시간 또는 15 초) 잘못된 자세 오른쪽에 있지만에서 강아지의 능력 성공적인 복원 정 적절한 자세 2 </li></ol></li><li> 뒷다리 배치 <ol><li> PD4 일부터 반사 테스트를 놓기 사지를 시작합니다. 몸통에 의해, 공중에 수직으로 강아지를 잡으십시오. 부드럽게 스트로크 무딘 표면과 뒷발의 배부 (같은 테이블의 가장자리). 래트 새끼가 다운 그 표면에 배치 뒷다리이어서 자극 뒷다리를 철회 할 때 정확한 배치 반사이다. </li><li> 사지 PL 점수반사를 acing : 어떤 성공 0 1 일 뒷발의 배치에 대 한 (왼쪽 또는 오른쪽 뒷발은 여기에 지정 될 수 있습니다) 모두 hindpaws 성공적인 사지 배치에 대 2 </li></ol></li><li> 클리프 회피 <ol><li> PD4 일부터 절벽 회피 테스트를 시작합니다. 강아지의 앞발과 주둥이가 낭떠러지이되도록 평탄면의 에지에서 래트 새끼를 놓는다. 정확한 결과는 래트 새끼 절벽 모서리 쉬게 보호 반응이다. 실험자의 손이나 거품 착륙 가을에서 강아지를 잡으려고 절벽 아래에 배치됩니다. </li><li> 절벽 회피 점수 : 0 어떤 운동이나 가장자리에서 떨어지는 멀리 절벽에서 이동하는 시도를하지만 매달려 사지 1 멀리 절벽에서 성공적인 운동 2 </li></ol></li><li> 보조 <ol><li> PD6에 걸음 걸이의 평가를 시작합니다. 15 센티미터 diamet의 센터에있는 새끼어 원과 작업을 완료하기 위해 강아지에게 30 초를 할 수 있습니다. 쥐 강아지 미만 30 초에 원 내외 앞발을 움직일 수있을 때 14 성공적인 걸음 걸이가 수행됩니다. </li><li> 이 원의 외부 이동 래트 새끼 걸리는 시간 (초)로 보용 점수. 이 원 안팎 앞발을 이동 강아지 걸리는 시간을 기록한다. 기록 30 초 강아지가 주어진 시간 내에 작업을 완료 할 수없는 경우 </li></ol></li><li> 청각 놀람 <ol><li> PD10에 청각 놀람의 분석을 시작합니다. 놀라게 응답이 존재하는지 여부를 평가하기 위해 직접 강아지 통해 시끄러운 소음 (종)을 제시한다. 강아지 멀리 사운드로부터는 &#39;쳐주는 운동을 표시 할 때 긍정적 놀라게 응답이 관측된다. </li><li> 청각 놀람 점수 : (또는) 않음 놀라게 응답 (예) 긍정적 인 놀라게 응답 </li></ol></li><li> 자세 <ol><li> PD에 대한 자세 분석 시작12.의 비 개방 미끄러운 표면 새끼, 그리고 이동할 때 강아지가 갖는 자세를 관찰한다. 미숙 자세 이동 복부 신체에 대하여 앞발과 hindpaws 모두 직교 좌표의 드래그에 의해 반사된다. 이동 몸체에 강아지가 표면으로부터 복부를 올릴 수 있고, 앞발과 hindpaws 모두 직선 뾰족하거나 평행하면 성숙한 자세를 취득한다. </li><li> 자세 점수 : 어떤 운동 0 미숙 한 자세로 이동 성숙한 자세 2 움직이면서 </li></ol></li><li> 눈 열기 <ol><li> PD12에 눈을 열어 분석을 시작합니다. 두 눈꺼풀이 열려 하루를 기록한다 : 눈에 띄는 눈 0 (1) 하나의 볼 눈용 (좌측 또는 우측 여기 지정 가능) 2 개의 볼 눈 </li></ol></li><li> 가속 바로 잡고 <ol><li> PD14 일부터 가속 바로 잡고 테스트를 시작합니다. 앙와위 30.48 C에 배치 강아지거품 착륙 위 entimeters. 강아지를 삭제하고 그 자체를 잘 할 수있는 능력을 관찰한다. 바로 잡고는 강아지가 발에 발생하기 쉬운 위치 및 토지에 인계 할 수있을 때를 말한다. </li><li> 가속 복원 정 점수 : 그 뒤에 떨어지는 0 1 옆에 떨어지는 위해 (왼쪽 또는 오른쪽은 여기에 지정 될 수 있습니다) 그것의 발에 착륙 2 </li></ol></li></ol> 참고 : 반사의 정량화의 종류는 조사관의 질문에 따라 사용할 수 있습니다. 반사의 정량화는 초기 반사의 관찰, 리플렉스의 실종까지 등장까지의 첫날,이 작업을 성공적으로 수행하는 데 걸리는 시간, 성능의 속도 및 / 또는 시간 경과에 따른 성능의 향상으로 수행 할 수 있습니다. ㄴ 13, 14, 29, 30, 31urrent 연구는, 외관의 첫 날은 점수를 사용 하였다. 다산 모델을 사용하는 경우, 같은 쓰레기에서 새끼는 일반적으로 자궁과 산후 환경, 영양 가용성, 그들의 유전자 구조와 유사하게 동작합니다. (32) 따라서, 하나의 새끼 인해 쓰레기 바이어스에 N = 1로 설명 될 수 없다. 각 깔짚이 없음을 나타내도록 담가 내에 조사 새끼 = 1 평균화 될 수있다. 32, 33 또는, 같은 쓰레기 내의 여러 새끼 같은 쓰레기 내 계정 새끼 고려한 혼합 효과 모델을 이용하여 분석 될 수있다. 32 33

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M., Ramsay, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resolution+of+neurological+symptoms+in+high-risk+infants+during+the+first+two+years+of+life.">Resolution of neurological symptoms in high-risk infants during the first two years of life.</a> Dev. Med. Child Neurol. 30 (1), 26-35 (1988).</li><li>Shiotsuki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rotarod+test+for+evaluation+of+motor+skill+learning.">A rotarod test for evaluation of motor skill learning.</a> J. Neurosci. Methods. 189 (2), 180-185 (2010).</li><li>Vorhees, C. V., Williams, M. 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신경 발달 플렉스 시험 명백한 병리학 분명없는 상황 의미 일 수있다 비정상적인 피질 개발과 성숙의 예측 계수이다. 신경 발달 테스트하는 동안,이 새끼가 매일 같은 시간에 조사되어 있는지 확인하는 것이 중요합니다. 쥐는 야행성 및 테스트가 하루 중 다른 시간에 수행되는 경우 때문에, 자신의 일주기 리듬 성능을 변경할 수 있습니다. 시끄러운 소리가 새끼에 스트레스를 추가 할 수있는 34 테스트는 조용한 방에 완료되어야한다. 35 새끼 반송 인간 처리 및 신규 설정 새끼에 응력을 유도 할 수 있기 때문에, 새로운 환경에 적응하기 위해 최소 1 시간을 필요로한다. 35 개 새끼도 가열 램프 아래 또는 가열 패드 위에 직접 테스트 할 필요가있다. 새끼 더 젊은 덜 수 그들은 thermoregulate 할 수 있습니다. 이러한 이유로, 36, 15 새끼 주어진다의 각각의 PD6 PD3에 복원 정 보행을 행하기위한 30 개 초. 출생시 체중이 교란 요인을 나타내는 첨가량 36은 제어 새끼는 성장이 제한되어서는 안된다. 동일한 영양 성별의 표현을 제공하기 위해 - 10 리터도 8 추려한다. 새끼가 태어난 후에는 산모의 방치를 방지하기 위해 댐과 결합을 형성하기 위해 쥐의 하루 허용하는 것이 중요하다. 새끼는 하루에 테스트해야 또는 두 개의 이전에 하루에 그들은 모양의 발병을 캡처하기 위해 반사를 획득. 실험 모델에 따라 일부 수정이 필요할 수 있습니다. 신생아 마우스는 쥐보다 훨씬 작다. 따라서 가질 수도 사용 설비의 크기는 신생 마우스의 크기를 조정할 수있다. 일부 문제 해결도 요구 될 수있다. 다른 변종과 종은 반사의 개시의 약간 다른 타이밍이있을 수 있습니다. 13이 보고서에 설명 된시기는보고 특정입니다PD3, 4, 6, 10, 12 일부터 새로운 반사를 테스트하고, (14) (도 3) 롱 에반스 새끼에 C. 실험 시험 전에 자연 반사 진행을 확립하기 위해 3 리터 - 조사관 2에 반사 테스트를 수행해야 할 수 있습니다. 데이터에 대한 통계적 분석을 수행 할 때 수집 또한, 실험자는 쓰레기 편향을 방지하기 위해 적절한 방법을 사용한다. 같은 쓰레기에서 새끼 때문에 쓰레기는 n = 1이 아닌 개별 강아지를 나타내고, 서로 동일하게 수행되는 경향이있다. 32 33 더 복잡한 행동 테스트는이 나이에 할 수 없습니다 이후 신생아 설치류 사용할 수있는 유일한 시험이기 때문에 신경 발달 반사 신경을 테스트하는 것이 중요합니다. 다른 방법은 무게와 외모 외에 초기 기간에 사용할 수 없습니다. 여기에 제공된 방법을 따라서지지 여러 연구자들에 의해 사용되어왔다특히 다른 행동 검사가 가능하지 않은 젊은 설치류에, 신경 반사 테스트의 사용합니다. 13, 14, 29, 30, 31, 37, 38이 시험은 신경 발달 장애의 예측은 뇌성 마비 같다 인간 유아 실시 테스트 리플렉스에 평행하고, 신경망의 개체 발생에 관한 추가 정보를 제공한다. 반사의 출현은 신경계의 성숙을 반영 preweaning 기간 동안 특정 시간 동안 발생한다. 이 프로토콜의 39 한계는 모든 실험 모델이 리플렉스 테스트를 실시 할 수없는 점이다. 설치류는 자신의 출생 후 개발이 반사 개발의 발병을 캡처의 장점을 제공하도록, 미성숙 태어난다. 다른 동물 모델 등어린 양으로 성숙 태어난과 반응 시험 중 일부는이 모델에 적용되지 않도록, 설치류 다르게 개발한다. 또한, 반사 테스트는인지 나 행동 이상을 직접 측정하지 않고, 어떤 관찰 된 이상이 일시적 또는 영구적인지 불확실하다. 반사 이외에, 행동 시험은 노년에 보완적인 분석을 수행 할 수있다. 비정상적인 반사 지연이 항상 신경 발달 장애로 연결되지 않기 때문에 이것은 중요하다. 2, 40 테스트는 전형적으로 설치류인지 모터 작업을 수행 할 때 PD21 (이유의 일)에 시작하여 투여된다. 이 테스트는 로타로드 (rotarod), 모리스 물 미로, 상승 된 플러스 미로에 국한되지 봇을 포함한다. 간략하게, 로타로드 (rotarod) 시험 기간 동안 또는 설치류 떨어질 때까지로드에 성능을 회전 막대에 쥐를 배치하고 기록함으로써 수행떨어져서. 이 테스트는 운동 학습 및 강도뿐만 아니라, 기저핵과 소뇌 등의 뇌 구조의 무결성을 평가합니다. 41 모리스 물 미로 유백색 물이 수영장에서 쥐를 배치하고,이 침수 플랫폼을 찾기 위해 설치류 걸리는 시간을 기록으로 구성되어 있습니다. 큐는 항상 플랫폼 위와 같은 큐와 풀의 각 사분면 위에 배치 할 수 있습니다. 이 해마 매개 공간 학습 및 기억의 allocentric 형태 VS 중심적 검사한다. 42 높은 플러스 미로 테스트 측정 두려움과 불안뿐만 아니라 고유의 탐색 행동. 설치류는 지상 상승 4 개의 팔, 묶인 두 개의 개방 및 중앙에 배치된다. 43 회피 탐색 동작은 설치류가 기록들 (각각의 암에서 소비 된 시간으로서 평가). 43이 개 추가 시험은에 대한 조사를 허용, 감각 및인지 기능을 검사모욕은 성인으로 지속하거나 과도 여부 여부를 SESS. 발달 지연을 예측하고, 추가 행동 테스트는 나중에 인생에서 장애의 존재에 대한 보완적인 증거를 제공해야합니다. 또한, 제어 응답 전에 이러한 조건에도 불구하고 등 긴장과 종의 차이, 유전 적 변화, 약물 투여, 실험에 최적화되어야한다, 설명 된 기술은 빠르고 쉽게 저렴, 마스터, 학습 및 개발에 관한 중요한 정보를 제공하고 있습니다 신경계. 그들이 성숙 행동 작업을 수행 할 수없는 경우에 그들은 나이에 새끼의 신경계의 개체 발생과 성숙을 평가 할 수있는 기회를 제공합니다. 또한, 인간 유아 발달 종종 반사 검사를 받아야하고, 따라서, 설치류 반사 번역 가능성 테스트하는 수단을 제공한다. 결론적으로, 이러한 비정상의 심사를위한 우수한 방법인지와 행동의 이상 조사로 이어질 수있는 신생아의 신경 발달.

신경 발달 반사 신경, 또는 발달 이정표는 인간의 신생아 및 유아에 사용되는 초기 평가의 하나입니다. 신경 반사 신경은 뇌간과 척수의 반사 신경을 보여 불수의 반복적 인 운동이다. 이주 수초 및 synaptogenesis 진화하는 것을 특징으로 높은 두피 네트워크의 성숙 자율 제어 및 피질 억제를 촉진한다. 중추 신경계의 진화의 정상적인 진행의 변화는 신경 발달 반사 지연이나 결석을 일으키는 비정상적인 대뇌 피질의 배선, 기능 및 수초의 결과로, 두뇌 발달을 방해 할 수 있습니다. 신경 발달 장애 위험이 높은 인간의 유아는 종종 비정상 초기 반사를 표시합니다. 이상은 나중에 반사의 인수없는 지연 장기간 존재하거나 재현로서 존재하고, 발달 장애 예측할 수있다. 1,2 따라서신경 발달 장애의 실험 모델에서 반사 지연을 모방하는 것이 중요하다. 설치류는 일반적으로 실험 모델로 사용된다. 쥐 새끼 그러므로 특정 복잡한 모터, 감각 및 / 또는인지 행동 업무를 수행하기에 너무 미성숙 태어 때 altricial, 그리고. 이와 관련하여, 그들의 발달 미숙은 모두 물리적 및 장기 개발에 관한 것이다. 쥐, thermoregulate 무능력과 털이 태어 블라인드, 그리고 걸을 수없는된다. 두뇌 발달을 참조하면, 상당한 대뇌 피질의 성숙은 출생 후 발생합니다. PD7-10 새끼가 근에 해당하는 반면 28 주 임신 - (23)의 조기 인간의 뇌와 비슷한 뇌의 성숙 수준에 도달하기 위해 제안되었다; 신생아 쥐 새끼 (PD1 출생의 날이 출생 후 하루 1로 함) 용어는 인간의 두뇌. 3, 4, 5, 6이 상관은 총 해부학 적 분석에 기반하지만, 이러한 수초 진폭 집적 뇌파 등의 뇌 성숙 다른 방법도 기재되어있다. 예를 들어, 5, 7, 올리고 덴드로 사이트가 사전 (23)로부터 현상 인간 태아 뇌에서 주된 세포이다 - 자궁 32 주, 이러한 성숙 단계는 PD1-3 설치류에 대응한다. 래트 새끼에 그 주위 PD7-10 전뇌에 나타나는 반면, 5, 8, 9, 10이 또한, 수초 형성은 인간 자궁 시작; 신생아 쥐의 뇌는 대부분 해제 유수 남아있다. 11, 12 터커 등. P1 및 쥐의 진폭 집적 뇌파 패턴은 23 주 gesta 유사 할 것으로기 태아하는 PD7 및 PD10 강아지는 30에 가깝다 반면, - 각각 32주 및 용어 유아. 7 이러한 이유로, 신생아 쥐 새끼 신생아 반사 테스트는 개체 발생 및 / 또는 두뇌 개발의 중단을 캡처하는 기회를 제공한다. 후술 반사의 전지는 WM 폭스 마우스에서 반사의 개체 발생에 대하여 초기 조사원 중 하나 WM 폭스 Lubics A. 13 (14)에 의한 연구에서 적응된다. (13 개)이 반사는 포함하지만, 걸음 걸이, 청각 놀라는, 자세, 아이 오프닝을 바로 잡고, 사지 잡고 배치, 절벽 회피에 국한되지 않습니다 바로 잡고 가속. 양쪽 앞다리와 뒷다리 파 (각각 인간의 손바닥과 발바닥 파라고 함)은 척수 반사 및 비 - 일차 운동 피질 영역에서 저해에 의해 촉진된다. 15, 16 뒷다리 배치 (발바닥 반사)는 피질 기관의 성숙을 반영한다. 16, 17, 18 벼랑 회피 (보호 반응) (미로)을 바로 잡고, 그리고 (예 코털 (vibrissae) 전정 시스템과 관련된 것과 같은) 감각 입력 및 모터 출력 사이의 통합과 관련된 통신 바로 잡는 가속. 19, 20, 21 보행은 운동을 반영한다. (14) 청각 깜짝 놀라는 핵 pontis의 caudalis을 reticularis에서 음향 자극 거대한 뉴런의 시냅스 연결을 평가합니다. 21 자세 적절한 피질 척수 - / - 피질 척수 돌기, 근육 강도 및 신경근 신경 분포를 포함한다. 22, 23 마감마 아미노 부티 산 수용체 turation 눈 개구와 연관된다. 24 반사가 훨씬 더 복잡한 네트워크를 반영하고 여기에 제공된 일반적인 상관 관계가 있다는 사실을 유지하는 것이 중요합니다. 또한, 이러한 반사 신경보다 복잡한 행동 테스트가 가능하지 않습니다 아주 어린 나이에 신경 발달을 평가하는 빠르고 쉬운 방법을 제공합니다. 본 연구의 목적은 쉽게 실험 신생아 래트 연구에 혼입 될 수 반사 신경 발달 테스트에 대한 일반적인 가이드 라인을 제공하는 것이다. 기술 된 방법론은 긴 에반스 신생아 쥐 새끼에서 수행 된 결과의 정량화는 외관의 첫 날을 기준으로했다. 테스트를 리플렉스 하루가 시작되고 사용되는 장비는 더 나은 (예 : 다른 변종과 종과 같은) 다른 실험 모델에 맞게 수정 될 수있다. 심판의 정상적인 생리 학적 진행을 구축함으로써특정 동물 모델에서 렉스 성숙, 연구자들은 외부 스트레스, 내생 조작 및 / 또는 신생아 쥐 모델에서 신경 발달에 대한 치료 적 개입의 효과를 평가할 수 있습니다. 전반적으로, 뇌 성숙 결정으로서 반사의 사용 산기 뇌 손상을 예측하는데 유리하다 이상 신경 발달 결과를 반영한다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Breeding</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipettes</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>12-711-9AM</td>
			<td>Used for vaginal flushes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Saline</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>7983254</td>
			<td>The solution used to collect cells during vaginal flushes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>400 &#181;l Microcentrifuge tubes</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>05-408-120</td>
			<td>Used to hold the saline solution.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Leica ATC 2000</td>
			<td>For observation of the saline solution. Can be any light microscope used in the lab.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slides</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>12-552-5</td>
			<td>The saline solution is placed on the slide. Can be any slides used in the lab.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslips</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>12-545-F</td>
			<td>To coverslip the slides. Can use any coverslips used in the lab.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dietary&#160; Supplementation</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Broccoli Sprouts seeds</td>
			<td>Mumm&#39;s Sprouting Seeds</td>
			<td></td>
			<td>Broccoli sprouts seeds are ordered and grown in the lab.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Countertop Seed Sprouter Box</td>
			<td>Mumm&#39;s Sprouting Seeds</td>
			<td></td>
			<td>A box is used to germinate and grow the seeds prior to harvest.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>250 mL beaker</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>The beaker is used to soak the seed. Any size beaker that would fit can be used.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Maternal Inflammation</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipoplysaccharide (LPS)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L3129</td>
			<td>The endotoxin used to mimic maternal inflammation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL Syringe</td>
			<td>BD Syringe</td>
			<td>309659</td>
			<td>Used to inject the pregnant rat.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauge (30G X 1/2)</td>
			<td>BD PrecisionGlide Needle</td>
			<td>305106</td>
			<td>Use the smallest needle to avoid pain and discomfort.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Saline (0.9% Sodium Chloride, USP)</td>
			<td>Hospira</td>
			<td></td>
			<td>Saline is used to dissolve LPS.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weights</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scale</td>
			<td>Denver Instrument</td>
			<td></td>
			<td>For recording the weights. Can be any scale with 2 decimal places used in the lab.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurodevelopmental Reflexes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thin blunt rod</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Can be a paperclip or toothpick. This is for forelimb and hindlimb grasping.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round filter paper</td>
			<td>Whatman</td>
			<td>1001 150</td>
			<td>15 cm diameter paper used for gait analysis.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Timer</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>06-662-51</td>
			<td>For timing the time allocated to righting and gait.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt surface</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Can be an edge of a table. This is for hindlimb placing and cliff avoidance.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foam landing</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For when the pups perform accelerated righting.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Video recorder</td>
			<td>Sony</td>
			<td>VCT-D580RM</td>
			<td>To record all reflexes tested. Must be able to record at 1/1000 fps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bell</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For auditory startle.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat lamp or pad</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>To maintain the body temperature of the pups underoing examination.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

neurodevelopmental reflex testing in neonatal rat pups

신경 발달 반사 테스트는 일반적으로 신경계의 성숙을 평가하기 위해 임상에서 사용된다. 반사 신경 발달은 원시적 반사 칭한다. 그들은 민감하고 나중에 결과와 일치한다. 이상은 반사 신경 발달 장애 위험이 높은 유아의 예측 지표이다 반사의 부재, 지속성, 재현성, 또는 지연과 같이 설명한다. 인간의 유아에서 관찰 할 것 같은 뇌성 마비와 같은 신경 발달 장애의 동물 모델은 종종 비정상적인 발달 반사를 표시합니다. 설명 된 기술은 신생아 래트에서 반사 신경 발달의 다양한 평가. 신경 발달 반사 테스트는 연구자에게 같은 젊은 동물, 그렇지 않으면 사용할 수없는 시험 방법을 제공합니다. 여기에 제시된 방법론은 감지 조기 발병의 BR하는 방법으로 신생아 쥐의 발달 이정표를 검사에 수사관을 지원하는 것을 목표로아인 부상 및 / 또는 치료 적 개입의 효과를 결정. 여기에 제시된 방법은 연구자에 대한 일반적인 지침을 제공하는 것을 목표로하고있다.

이 실험 설계의 타임 라인은 그림 2에 제시되어있다. 30 개 방법 및 결과는 이전에 발표되었다. 연구의 30 목적은 브로콜리 임신 동안 콩나물과 preweaning 기간식이 보충이 LPS 자궁 내 노출에 의해 유도 된 신경 발달 지연의 자손을 보호 여부를 평가하는 것이다. 타이밍 임신 래트 식염수 (대조군, 100 μL) 또는 12 시간마다 E19 및 E20에 LPS (200 ㎍ / kg은 멸균 생리 식염수에 희석 100 μL)을 복강 내 주사를 받았다. 임의로 선택된 임신 댐은 E14에서 PD21 건조 브로콜리 콩나물 하였다 (200 mg / 일)의식이 보충제를 받았다. LPS는 자손을 보호하기 위해 잠재적 인 치료 개입으로 주어졌다 산모의 염증과 브로콜리 콩나물을 모방하는 데 사용되었다. 새끼는 (E23에 자연적으로 태어난 <em&gt; 즉, PD1) 출생 무게 (표 1)을 기록 하였다. PD3 일부터 새끼 반사 신경 발달의 배터리를 시행하고 반사 취득은 반사 등장 일 (도 3, 표 1)로 정의 하였다. 더 세부 사항에 대한 참조 문서를 참조하십시오. (30) 출생 무게 출생 무게의 분석은 주요 치료의 효과 (F (1,23) = 18.5, 0.0003)을 공개, 다이어트 (F (1,23) = 6.5, P = 0.02), 및 상호 작용 효과 (F (1,23) = 7.4, p = 0.01). LPS는 모체 염증의 반사로 식염수 새끼에 비해 훨씬 작다 (6.3 ± 0.2 g, Tukey에의 p &lt;0.001), 식염수 + 브로콜리 콩나물 새끼 (6.2 ± 0.2 g, Tukey에의 P 태어난 새끼 (5.1 ± 0.2 g)였다 &lt;0.001), 및 LPS + 브로콜리 콩나물 새끼 (6.0 ± 0.1 g, Tukey에의 p &lt;0.01). LPS + 브로콜리 콩나물 새끼의 출생 무게는 브로콜리 콩나물 성장이 제한되는 것을 LPS 새끼를 아끼지 것을 제안, 컨트롤에서 차이가 없었다. 신경 발달 반사 테스트 파악하는 반사 치료 또는 다이어트의 어떠한 효과는 앞다리와 뒷다리을 잡는 모두 관찰되지 않았다. 모든 새끼는 이러한 작업을 수행 할 수 있었다. 뒷다리 걸기 치료의 주요 효과 (F (1,23) = 6.8, p는 = 0.02) 뒷다리 배치하는 검출되었다. 염에 비해 (4.3 ± 0.1 일의 Tukey에 p &lt;0.05)과 식염수 + 브로콜리 콩나물 (4.3 ± 0.0 일의 Tukey에 p &lt;0.05), LPS 새끼 크게 (5.1 ± 0.3 지연된했다일). LPS + 브로콜리 콩나물 새끼의 성능이 LPS 새끼 다르지 않았지만, 더 이상 LPS없이 치료를 받고 그 새끼에서이 반사 작업의 개선을 제안, 컨트롤에서 차이가 없습니다. 클리프 회피 치료의 주요 효과 (F (1,25) = 6.0, p = 0.02) 벼랑 회피 분석 다음 검출되었다. LPS 새끼 (5.8 ± 0.4 일)에 비해 크게 염이 반사 (4.4 ± 0.2 일의 Tukey에 p &lt;0.05)를 획득 손상되었다. LPS + 브로콜리 콩나물 새끼 성능의 개선을 제안, 그룹의 다르게 수행하지 않았다. 보조 상당한 치료 효과 (F (1.24) = 15.1, p = 0.0007), 다이어트 (F (1.24) = 6.3, p = 0.02) 및 인터치료식이 요법과 행동 (F (1.24) = 9.5, p = 0.005) 다음 보용 분석 발견되었다. 보용의 지연 취득 염에 비해 LPS 새끼 (9.7 ± 0.4 일)에서 검출 하였다 (7.5 ± 0.3 일 Tukey에의 p &lt;0.001), 식염수 + 브로콜리 콩나물 (7.7 ± 0.3 일 Tukey에의 p &lt;0.001), 및 LPS + 브로콜리 콩나물 새끼 (7.9 ± 0.2 일의 Tukey에 p &lt;0.01). 청각 놀람 차이는 관찰되지 않았다. 바로 잡고 성 효과가 발견되었다 (F (1,43) = 16.3, p = 0.0002)는 바로 잡고 들어 따라서, 암수 새끼 별도로 조사 하였다. 차이는 남성이 감지되지 않았다. 암컷, 다이어트 (F (1,21) = 11.8, p = 0.002)의 주요 효과 및 상호 작용 효과 (F (1,21) = 15.6,p = 0.0007)이 발견되었다. LPS + 브로콜리 콩나물 새끼 (4.9 ± 0.4 일) LPS 새끼 (6.7 ± 0.6 일, Tukey에의 P &lt;0.05)에 비해 권리 이전을 할 수 있었다. 가속 바로 잡고 가속 바로 잡고 시험이 치료의 중요한 주요 효과를 밝혀 (F (1,25) = 4.51, P = 0.04). LPS (17.4 ± 0.6 일)과 LPS + 브로콜리 콩나물 새끼 (16.9 ± 0.2 일)를 수행하는 지연되었다 가속 염 (16.0 ± 0.4 일)과 식염수 + 브로콜리 콩나물 (16.4 ± 0.5 일)에 비해 바로 잡고. 자세 처리 및식이의 유의 한 상호 작용 효과 (F (1.24) = 5.8, p = 0.02)의 자세 분석 다음 검출되었다. LPS + 브로콜리 콩나물 새끼 (14.9 ± 0.4 일) LP보다 일찍 성숙한 자세를 가지고 있었다S (17.0 ± 0.4 일, Tukey에의 P &lt;0.05). 눈 열기 다이어트의 중요한 주요 효과 (F (1,23) = 4.71는 P는 0.04) 아이 오프닝에 관해서 관찰되었다. 두 식염수 + BrSp (15.9 ± 0.1 일)과 LPS + 브로콜리 콩나물 새끼 (15.4 ± 0.2 일) 염 (16.0 ± 0.2 일)과 LPS 새끼 (16.0 ± 0.1 일)에 비해 일찍 반사를 획득. 전반적으로, 임신 후기와 preweaning 기간 동안 브로콜리 새싹 소비 조사한 반사 신경의 여러에 LPS 유발 발달 지연에 대한 보호를 감당할 수 있었다. 더 세부 사항에 대한 참조 문서를 참조하십시오. (30) <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/55261/55261fig1.jpg" /> 그림 1. 포질 얼룩을 sitive. 질 스미어의 예는 광학 현미경으로 10 개 배의 대물 렌즈로 이미지화. 이 슬라이드는 정자 (화살표)의 존재로 나타낸 양의 슬라이드를 나타낸다. 질 스미어를 수행 할 때 쥐의 발정주기는 하나 발정, 발정, metestrus 또는 diestrus으로 평가 될 수있다. 이것은 정확하게 높은 임신 성공률에 대한 번식 타이밍에 도움이됩니다. <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/55261/55261fig2.jpg" /> 2. 실험 디자인 타임 라인을 그림. LPS의 복강 내 주사 주어진 댐 태어난 자손을 평가하기위한 실험 타임 라인. 브로콜리 콩나물식이 보충 PD21까지 E14에 시작됩니다. 댐 E19 및 E20 (노란 화살표로 표시) 매 12 시간에 주입된다. 산모 가중치 윤활제로 덮여 직장 온도 프로브 체중 규모 체온으로 기록된다. 새끼는 naturall을 탄생E23에 Y (검은 화살표로 표시됨). PD3 일부터 새끼는 여러 반응 시험을받을. PD21에, 새끼는 행동 반응을 평가하기 오픈 필드 테스트를 받아야. <img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/55261/55261fig3.jpg" /> 그림 신경 발달 반사 신경의 평가를위한 타임 라인] 3. 예. 반사 신경이 반사의 인수 시험 전에 몇 일을 시작해야 캡처, 따라서 개발의 여러 단계에 나타납니다. 따라서 예비 실험은 일반적인 가이드로이 날짜를 사용하여 수행해야한다,이 연구는 긴 에반스 쥐 새끼를 사용하지만 변종과 종 사이의 차이가 존재한다. 앞다리 파악, 뒷다리 파악하고 바로 잡기는 PD3, PD6에 뒷다리 배치와 절벽 회피 PD4에, 그리고 보행으로 평가된다. 청각 깜짝 놀라는 PD12에 PD10, 자세와 눈 구멍에 평가하고, PD14에 바로 잡고 가속. 발달 반사 신경 4. 이미지를 그림. 반응 시험의 이미지는 긴 에반스 쥐 새끼에 PD3에서 수행. 앞다리 파 (A), 뒷다리 파 (B)을 바로 잡고 (C) 검사 PD3에 시작된다. 절벽 회피 (D) 및 사지 배치 (E) 테스트 PD4 시작됩니다. (F)는 분석 보행는 PD6 시작됩니다. 가속 바로 잡기위한 장치 (G)에 도시된다. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55261/55261fig4large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> 시험 매개 변수 </td><td> 그룹 (± SEM을 의미) </td><td></td><td></td><td></td><td> 주요 효과 (p 값) </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 쓰레기 크기와 무게 </td><td> 식염 </td><td> 생리 식염수 + 브로콜리 콩나물 </td><td> LPS </td><td> LPS + 브로콜리 콩나물 </td><td> 치료 </td><td> 다이어트 </td><td> 상호 작용 </td></tr><tr><td> 쓰레기 크기 (새끼의 수) </td><td> 13.3 ± 1.0 </td><td> 13.1 ± 1.0 </td><td> 10.3 ± 1.5 </td><td> 11 ± 1.2 </td><td> 0.03 </td><td> 0.8 </td><td> 0.7 </td></tr><tr><td> 출생 무게 * # D </td><td> 6.3 ± 0.2 </td><td> 6.2 ± 0.2 </td><td> 5.1 ± 0.2 </td><td> 6.0 ± 0.1 </td><td> 0.0003 </td><td> 0.02 </td><td> 0.01 </td></tr><tr><td> PD7 가중치 * D </td><td> 15.0 ± 0.5 </td><td> 15.5 ± 0.4 </td><td> 11.4 ± 1.1 </td><td> 13.6 ± 0.3</td><td> 0.0006 </td><td> 0.09 </td><td> 0.2 </td></tr><tr><td> PD21 가중치 거라고 </td><td> 50.0 ± 1.4 </td><td> 48.7 ± 1.6 </td><td> 46.4 ± 1.2 </td><td> 48.2 ± 1.4 </td><td> 0.2 </td><td> 0.9 </td><td> 0.3 </td></tr><tr><td> Neurodevelop- 정신 반사 신경 </td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 앞다리를 잡고 A를 </td><td> 3.0 ± 0.0 </td><td> 3.0 ± 0.0 </td><td> 3.0 ± 0.0 </td><td> 3.0 ± 0.0 </td><td> N / A </td><td> N / A </td><td> N / A </td></tr><tr><td> 뒷다리를 잡고 A를 </td><td> 3.6 ± 0.3 </td><td> 3.5 ± 0.3 </td><td> 4.6 ± 0.6 </td><td> 3.3 ± 0.1 </td><td> 0.3 </td><td> 0.1 </td><td> 0.1 </td></tr><tr><td> 뒷다리 걸기 *는 </td><td> 4.3 ± 0.1 </td><td> 4.3 ± 0.0 </td><td> 5.1 ± 0.3 </td><td> 4.5 ± 0.2 </tD&gt; <td> 0.02 </td><td> 0.07 </td><td> 0.2 </td></tr><tr><td> 절벽 회피 *는 </td><td> 4.4 ± 0.2 </td><td> 4.7 ± 0.2 </td><td> 5.8 ± 0.4 </td><td> 5.0 ± 0.4 </td><td> 0.02 </td><td> 0.4 </td><td> 0.1 </td></tr><tr><td> 보행 * # a를 </td><td> 7.5 ± 0.3 </td><td> 7.7 ± 0.3 </td><td> 9.7 ± 0.4 </td><td> 7.9 ± 0.2 </td><td> 0.0007 </td><td> 0.02 </td><td> 0.005 </td></tr><tr><td> 청각 놀라게 a를 </td><td> 11.5 ± 0.3 </td><td> 11.5 ± 0.1 </td><td> 12.0 ± 0.5 </td><td> 11.8 ± 0.2 </td><td> 0.2 </td><td> 0.8 </td><td> 0.9 </td></tr><tr><td> 자세 #A </td><td> 15.6 ± 0.5 </td><td> 15.9 ± 0.6 </td><td> 17.0 ± 0.4 </td><td> 14.9 ± 0.4 </td><td> 0.8 </td><td> 0.08 </td><td> 0.02 </td></tr><tr><td> 눈 개구부 </td><td> 16.0 ± 0.2 </td><td> 15.9 ± 0.1 </td><td> 16.0 ± 0.1 </td><td> 15.4 ± 0.2 </td><td> 0.08 </td><td> 0.04 </td><td> 0.2 </td></tr><tr><td> 가속 바로 잡고 </td><td> 16.0 ± 0.4 </td><td> 16.4 ± 0.5 </td><td> 17.4 ± 0.6 </td><td> 16.9 ± 0.2 </td><td> 0.04 </td><td> 1 </td><td> 0.3 </td></tr><tr><td> #A (여성)을 바로 잡고 </td><td> 4.9 ± 0.5 </td><td> 5.1 ± 0.4 </td><td> 6.7 ± 0.6 </td><td> 4.6 ± 0.4 </td><td> 0.09 </td><td> 0.003 </td><td> 0.0007 </td></tr><tr><td> A (수컷)를 바로 잡고 </td><td> 3.9 ± 0.2 </td><td> 4.6 ± 0.3 </td><td> 5.9 ± 1.9 </td><td> 4.2 ± 0.6 </td><td> 0.4 </td><td> 0.6 </td><td> 0.2 </td></tr><tr><td> 외관의 날 </td><td colspan="2"> LPS와 식염수 사이에서 유의 한 차이 * </td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 시간 활동 B 번호 하였다 </td><td colspan=LPS 및 LPS + BrSp 사이에 &quot;3&quot;&gt; # 큰 차이 </td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> C (초) </td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> D 그램 </td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table> 표 1. 중량 및 신경 발달 반사 성과. 자궁 염증 및 / 또는식이 브로콜리 콩나물 보충에 노출 자손에서 얻은 결과. 여기에 제시된 30 가중치는 출생, PD7 및 PD21에서입니다. 시간 포인트는 조산, 용어, 1-2 세의 유아를 표현하기 위해 선택되었다. 데이터는 SEM ± 평균으로 표시하고 있습니다. 통계는 연구에 Tukey에의 포스트 특별 검사에 이어 양방향 ANOVA를 사용 하였다 분석.외관 A = 일 경우, b = 활동이 수행 된 시간, 및 (C)의 수 = 시간 (들)이 활성 * = 하였다 LPS 및 제어 # = LPS 및 LPS + 브로콜리 콩나물 사이에 유의 한 차이들 사이에 유의 한 차이. N = 5 - 그룹당 7 리터의 (a 쓰레기 새끼 내의 네 개의 수컷 개의 암컷의 값은 쓰레기를 나타내는 평균 하였다).

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Neurodevelopmental Reflex Testing in Neonatal Rat Pups

행동 검사는 뇌 손상 다음과 같은 결과를 결정하기위한 황금 표준이며, 유아와 아동의 발달 장애의 존재를 식별 할 수 있습니다. 신경 발달 반사 신경이 이상의 초기 지표입니다. 신생아 설치류에서 쉽게 달성 발달 반사 검사의 호스트가 개발하고 여기에 설명했다.

신생아 쥐 새끼들까지 잔치에서 신경 발달 반사 테스트

Neurodevelopmental reflex testing is commonly used in clinical practice to assess the maturation of the nervous system. Neurodevelopmental reflexes are ...

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Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Behavior

19.7K 조회수.  University of Alberta.  행동 검사는 뇌 손상 다음과 같은 결과를 결정하기위한 황금 표준이며, 유아와 아동의 발달 장애의 존재를 식별 할 수 있습니다. 신경 발달 반사 신경이 이상의 초기 지표입니다. 신생아 설치류에서 쉽게 달성 발달 반사 검사의 호스트가 개발하고 여기에 설명했다. 

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Barnes Maze Testing Strategies with Small and Large Rodent Models

Spatial learning and memory of laboratory rodents is often assessed via navigational ability in mazes, most popular of which are the water and dry-land (Barnes) mazes. Improved performance over sessions or trials is thought to reflect learning and memory of the escape cage/platform location. Considered less stressful than water mazes, the Barnes maze is a relatively simple design of a circular platform top with several holes equally spaced around the perimeter edge. All but one of the holes are false-bottomed or blind-ending, while one leads to an escape cage. Mildly aversive stimuli (e.g.&#160;bright overhead lights) provide motivation to locate the escape cage. Latency to locate the escape cage can be measured during the session; however, additional endpoints typically require video recording. From those video recordings, use of automated tracking software can generate a variety of endpoints that are similar to those produced in water mazes (e.g.&#160;distance traveled, velocity/speed, time spent in the correct quadrant, time spent moving/resting, and confirmation of latency). Type of search strategy (i.e.&#160;random, serial, or direct) can be categorized as well. Barnes maze construction and testing methodologies can differ for small rodents, such as mice, and large rodents, such as rats. For example, while extra-maze cues are effective for rats, smaller wild rodents may require intra-maze cues with a visual barrier around the maze. Appropriate stimuli must be identified which motivate the rodent to locate the escape cage. Both Barnes and water mazes can be time consuming as 4-7 test trials are typically required to detect improved learning and memory performance (e.g.&#160;shorter latencies or path lengths to locate the escape platform or cage) and/or differences between experimental groups. Even so, the Barnes maze is a widely employed behavioral assessment measuring spatial navigational abilities and their potential disruption by genetic, neurobehavioral manipulations, or drug/ toxicant exposure.

The dry-land Barnes maze is widely used to measure spatial navigation ability in response to mildly aversive stimuli. Over consecutive days, performance (e.g.&#160;latency to locate escape cage) of control subjects improves, indicative of normal learning and memory. Differences between rats and mice necessitate apparatus and methodology changes that are detailed here.

크고 작은 설치류 모델 바네스 미로 테스트 전략

Spatial learning and memory of laboratory rodents is often assessed via navigational ability in mazes, most popular of which are the water and dry-land ...

연구

행동분석학

Testing for Odor Discrimination and Habituation in Mice

This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the mouse can discriminate between non-social odors and social odors, whether the mouse habituates to a repeatedly presented odor, and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented with a novel odor. Since many social behavior tests measure the experimental animal&#8217;s response to a familiar or novel mouse, false positives can be avoided by establishing that the animals can detect and discriminate between social odors. There are similar considerations in learning tests such as fear conditioning that use odor to create a novel environment or olfactory cues as an associative stimulus. Deficits in the olfactory system would impair the ability to distinguish between contexts and to form an association with an olfactory cue during fear conditioning. 
In the odor habitation/dishabituation test, the mouse is repeatedly presented with several odors. Each odor is presented three times for two minutes. The investigator records the sniffing time directed towards the odor as the measurement of olfactory responsiveness. A typical mouse shows a decrease in response to the odor over repeated presentations (habituation). The experimenter then presents a novel odor that elicits increased sniffing towards the new odor (dishabituation). After repeated presentation of the novel odor the animal again shows habituation. This protocol involves the presentation of water, two or more non-social odors, and two social odors. In addition to reducing experimental confounds, this test can provide information on the function of the olfactory systems of new knockout, knock-in, and conditional knockout mouse lines.

This manuscript describes a protocol to examine the olfactory system of rodents. The olfactory habituation/dishabituation test will allow investigators to determine whether a mouse habituates to a repeatedly presented odor and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented a novel odor.

마우스에서 냄새 차별과 요법 이니에 대한 테스트

This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the ...

Testing Sensory and Multisensory Function in Children with Autism Spectrum Disorder

In addition to impairments in social communication and the presence of restricted interests and repetitive behaviors, deficits in sensory processing are now recognized as a core symptom in autism spectrum disorder (ASD). Our ability to perceive and interact with the external world is rooted in sensory processing. For example, listening to a conversation entails processing the auditory cues coming from the speaker (speech content, prosody, syntax) as well as the associated visual information (facial expressions, gestures). Collectively, the &#8220;integration&#8221; of these multisensory (i.e., combined audiovisual) pieces of information results in better comprehension. Such multisensory integration has been shown to be strongly dependent upon the temporal relationship of the paired stimuli. Thus, stimuli that occur in close temporal proximity are highly likely to result in behavioral and perceptual benefits &#8211; gains believed to be reflective of the perceptual system&#39;s judgment of the likelihood that these two stimuli came from the same source. Changes in this temporal integration are expected to strongly alter perceptual processes, and are likely to diminish the ability to accurately perceive and interact with our world. Here, a battery of tasks designed to characterize various aspects of sensory and multisensory temporal processing in children with ASD is described. In addition to its utility in autism, this battery has great potential for characterizing changes in sensory function in other clinical populations, as well as being used to examine changes in these processes across the lifespan.

We describe how to implement a battery of behavioral tasks to examine the processing and integration of sensory stimuli in children with ASD. The goal is to characterize individual differences in temporal processing of simple auditory and visual stimuli and relate these to higher order perceptual skills like speech perception.

자폐증 스펙트럼 장애와 아동의 감각과 감각적 기능 테스트

In addition to impairments in social communication and the presence of restricted interests and repetitive behaviors, deficits in sensory processing are ...

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, including neurocognitive disorders such as Alzheimer&#8217;s disease. However, the background strain of the mouse model used can have a substantial effect on the observed behavioral phenotype, with some strains exhibiting superior learning ability relative to others. To ensure differences between transgene negative and transgene positive mice can be detected, identification of a training procedure sensitive to the background strain is essential. Failure to tailor the MWM protocol to the background strain of the mouse model may lead to under- or over- training, thereby masking group differences in probe trials. Here, a MWM protocol tailored for use with the F1 FVB/N x 129S6 background is described. This is a frequently used background strain to study the age-dependent effects of mutant P301L tau (rTg(TauP301L)4510 mice) on the memory deficits associated with Alzheimer&#8217;s disease. Also described is a strategy to re-optimize, as dictated by the particular testing environment utilized.

This manuscript describes a Morris water maze (MWM) protocol tailored for use with a commonly used mouse model of Alzheimer's disease. The MWM is widely used in transgenic mouse models. Implementation of a procedure sensitive to the background strain of the mouse model is essential for detecting group differences.

모리스 물 미로 테스트 : 마우스 스트레인 및 테스트 환경을위한 최적화

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

Simple and Computer-assisted Olfactory Testing for Mice

Olfaction is highly conserved among species and is required for reproduction and survival.
In humans, olfaction is also one of the senses that is affected with aging and is a strong predictor of neurodegenerative diseases. Thus, olfaction testing is used as a non-invasive diagnostic method to detect neurological deficits early on. In order to understand the mechanisms underlying olfactory network susceptibility, olfactory research in rodents has gained momentum in the past decade.
Here, we present a very simple, time efficient and reproducible olfactory testing method of innate odor perception and sensitivity in mice without the need of any prior food or water restriction. The tests are performed in a familiar environment to the mice, require only the scents and a 2 min session of odorant exposure. The analysis is performed, post-hoc, using computer-assisted commands on ImageJ and can be, therefore, carried out from start to end by one researcher.
This protocol does not require any special hardware or setup and is indicated for any laboratory interested in testing olfactory perception and sensitivity.

We present a simple and unbiased olfactory test in mice. With this protocol olfactory discrimination, preference, avoidance and sensitivity to a novel odor as compared to water can be assessed in single behavioral sessions. This method is indicated for a single experimenter and analysis is based on computer-assisted video processing.

간단하고 컴퓨터 지원 마우스에 대한 후각 테스트를

Olfaction is highly conserved among species and is required for reproduction and survival.
In humans, olfaction is also one of the senses that is affected ...

Testing Tactile Masking between the Forearms

Masking, in which one stimulus affects the detection of another, is a classic technique that has been used in visual, auditory, and tactile research, usually using stimuli that are close together to reveal local interactions. Masking effects have also been demonstrated in which a tactile stimulus alters the perception of a touch at a distant location. Such effects can provide insight into how components of the body's representations in the brain may be linked. Occasional reports have indicated that touches on one hand or forearm can affect tactile sensitivity at corresponding contralateral locations. To explore the matching of corresponding points across the body, we can measure the spatial tuning and effect of posture on contralateral masking. Careful controls are required to rule out direct effects of the remote stimulus, for example by mechanical transmission, and also attention effects in which thresholds may be altered by the participant's attention being drawn away from the stimulus of interest. The use of this technique is beneficial as a behavioural measure for exploring which parts of the body are functionally connected and whether the two sides of the body interact in a somatotopic representation. This manuscript describes a behavioural protocol that can be used for studying contralateral tactile masking.

Here we explore contralateral tactile masking between the forearms in which tactile detection thresholds are modulated by vibration applied to a remote site. The details of which remote sites have an effect can tell us about how the body is represented in the brain.

팔뚝 사이의 테스트 촉각 마스킹

Masking, in which one stimulus affects the detection of another, is a classic technique that has been used in visual, auditory, and tactile research, ...

New Variations for Strategy Set-shifting in the Rat

Behavioral flexibility is crucial for survival in changing environments. Broadly defined, behavioral flexibility requires a shift of behavioral strategy based on a change in governing rules. We describe a strategy set-shifting task that requires an attentional shift from one stimulus dimension to another. The paradigm is often used for testing cognitive flexibility in primates. However, the rodent version has not been as extensively developed. We have recently extended an established set-shifting task in the rat1 by requiring attention to different stimuli according to context. All the experimental conditions required animals to choose either a left or right lever. Initially, all animals had to choose on the basis of the location of the lever. Subsequently, a change in the rule occurred, which required a shift in set from location-based rule to a rule in which the correct lever was indicated by a light cue. We compared performance on three different versions of the task, in which the light stimulus was either novel, previously relevant, or previously irrelevant. We found that specific neurochemical lesions selectively impaired the ability to make particular types of set shift as measured by the performance on the different versions of the task.

Set-shifting, a form of behavioral flexibility, requires an attentional shift from one stimulus dimension to another. We extended an established rodent set-shifting task1 by requiring attention to different stimuli according to context. The task was combined with specific lesions to identify neuron subtypes underlying a successful shift.

전략의 새로운 변형 쥐에 세트-이동

Behavioral flexibility is crucial for survival in changing environments. Broadly defined, behavioral flexibility requires a shift of behavioral strategy ...

Testing for Metacognitive Responding Using an Odor-based Delayed Match-to-Sample Test in Rats

Metamemory involves the cognitive ability to assess the strength of one&#39;s memories. To explore the possibility of metamemory in non-human animals, numerous behavioral tasks have been created, many of which utilize an option to decline memory tests. To assess metamemory in rats, we utilized this decline-test option paradigm by adapting previous visual delayed-match-to-sample tests (DMTS)1,2 developed for primate species to an odor-based test suitable for rodents. First,&#160;rats are given a sample to remember by digging in a cup of scented sand. After a delay, the rat is presented with four distinctly scented cups, one of which contains the identical scent experienced during the sample; if this matching cup is selected, then the rat obtains a preferred, larger reward. Selection of any of the other three non-matching sand-filled scented cups results in no reward. Retention intervals are individually titrated such that subjects perform between 40 and 70% correct, therefore ensuring rats sometimes remember and sometimes forget the sample. Here, the operational definition of metamemory is the ability to distinguish between the presence and absence of memory through behavioral responding. Towards this end, on two-thirds of trials, a decline option is presented in addition to the four choice cups (choice trials). If the decline-test option- an unscented colored sand cup, is selected, the subject receives a smaller less-preferred reward and avoids the memory test. On the remaining third of trials, the decline-test option is not available (forced trials), causing subjects to guess the correct cup when the sample is forgotten. On choice tests, subjects that know when they remember should select the decline option when memory is weak rather than take the test and choose incorrectly. Therefore, significantly higher performance on chosen tests as compared to forced memory tests is indicative of the adaptive use of the decline-test response and metacognitive responding.

This protocol describes a method for investigating the possibility of metamemory, or memory awareness, in rodents. The odor-based delayed-matching-to-sample paradigm is a novel, ecologically-relevant behavioral test useful for determining the extent to which rodents can adaptively respond based on cognitively monitoring the strength of their memory states.

쥐에 일치 샘플 테스트 지연 Metacognitive 냄새 기반을 사용 하 여 응답에 대 한 테스트

Metamemory involves the cognitive ability to assess the strength of one&#39;s memories. To explore the possibility of metamemory in non-human animals, ...

Computerized Adaptive Testing System of Functional Assessment of Stroke

The computerized adaptive testing system of the functional assessment of stroke (CAT-FAS) can simultaneously assess four functions (motor functions of the upper and lower extremities, postural control, and basic activities of daily living) with sufficient reliability and administrative efficiency. CAT, a modern measurement method, aims to provide a reliable estimate of the examinee's level of function rapidly. CAT administers only a few items whose item difficulties match an examinee's level of function and, thus, the administered items of CAT can provide sufficient information to reliably estimate the examinee's level of function in a short time. The CAT-FAS was developed through four steps: (1) determining the item bank, (2) determining the stopping rules, (3) validating the CAT-FAS, and (4) establishing a platform of online administration. The results of this study indicate that the CAT-FAS has sufficient administrative efficiency (average number of items = 8.5) and reliability (group-level Rasch reliability: 0.88 - 0.93; individual-level Rasch reliability: &#8805;70% of patients had Rasch reliability score &#8805;0.90) to simultaneously assess four functions in patients with stroke. In addition, because the CAT-FAS is a computer-based test, the CAT-FAS has three additional advantages: the automatic calculation of scores, the immediate storage of data, and the easy exporting of data. These advantages of the CAT-FAS will be beneficial to data management for clinicians and researchers.

Here, we present a protocol to develop the computerized adaptive testing system of the functional assessment of stroke (CAT-FAS). The CAT-FAS can simultaneously assess four functions (two motor functions [upper and lower extremities], postural control, and basic activities of daily living) with sufficient reliability and administrative efficiency.

뇌졸중의 기능 평가의 전산화 적응 테스트 시스템

The computerized adaptive testing system of the functional assessment of stroke (CAT-FAS) can simultaneously assess four functions (motor functions of the ...

Chronic Sleep Deprivation in Mouse Pups by Means of Gentle Handling

Sleep is critical for proper development and neural plasticity. Moreover, abnormal sleep patterns are characteristic of many neurodevelopmental disorders. Studying how chronic sleep restriction during development can affect adult behavior may add to our understanding of the emergence of behavioral symptoms of neurodevelopmental disorders. While there are many methods that can be used to restrict sleep in rodents including forced locomotion, constant disruption, presentation of an aversive stimulus, or electric shock, many of these methods are very stressful and cannot be used in neonatal mice. Here, we describe gentle handling, a sleep deprivation technique that can be used chronically throughout development and into adulthood to achieve sleep restriction. Gentle handling involves close observation of the mice throughout the sleep deprivation period and requires the researcher to gently prod the animals whenever they are inactive or display behaviors associated with sleep. Coupled with EEG recordings, gentle handling could be used to selectively disrupt a specific phase of sleep such as rapid eye movement (REM) sleep. The technique of gentle handling is a powerful tool for the study of the effects of chronic sleep restriction even in neonatal mice that circumvents many of the more stressful procedures used for sleep deprivation.

We describe a sleep deprivation technique known as gentle handling where investigators gently prod mice any time sleep behavior is observed. This method is a powerful tool that allows researchers to study the effects that chronic sleep restriction throughout development can have on future brain physiology and behavior.

마우스에 만성 수 면 부족 통해 부드러운 새끼 처리

Sleep is critical for proper development and neural plasticity. Moreover, abnormal sleep patterns are characteristic of many neurodevelopmental disorders. ...