Method Article
* 이 저자들은 동등하게 기여했습니다
이 논문은 CsChrimson 및 GtACR2를 활용하여 특정 뉴런을 활성화하고 침묵시키는 Drosophila melanogaster의 광유전학적 조작 방법을 제시합니다. 광유전학을 활용하여 열택 및 미각 행동을 탐구하고 이러한 과정을 제어하는 기본 신경 메커니즘에 대한 통찰력을 제공하는 네 가지 실험이 설명됩니다.
광유전학은 신경 과학의 기본 기술이 되었으며, 빛 자극을 통해 신경 세포 활동을 정밀하게 제어할 수 있습니다. 이 연구는 Drosophila melanogaster에 광유전학적 방법을 적용하기 위한 구현하기 쉬운 설정을 소개합니다. 두 가지 광유전학 도구인 CsChrimson, 적색광 활성화 양이온 채널, 청색광 활성화 음이온 채널인 GtACR2가 4가지 실험적 접근 방식에 사용되었습니다. 이러한 접근 방식 중 세 가지는 단일 파리 실험을 포함합니다 : (1) 온도에 민감한 가열 세포를 표적으로 하는 청색광 광유전학 열tactic 위치 선호 분석, (2) 쓴 감지 뉴런을 활성화하는 적색광 광유전학 위치 선호 분석, (3) 단맛 감지 뉴런을 활성화하는 확장 반응 분석. 네 번째 접근 방식(4)은 여러 파리를 사용하여 회피 행동을 평가하기 위한 파리 미로 설정입니다. 신경 활동을 시간적, 공간적으로 조작할 수 있는 능력은 감각 처리 및 의사 결정에 대한 강력한 통찰력을 제공하며, 신경 기능에 대한 지식을 발전시킬 수 있는 광유전학의 잠재력을 강조합니다. 이러한 방법은 특정 신경 경로와 행동 결과에 대한 이해를 향상시키기 위해 신경 과학의 향후 연구를 위한 접근 가능하고 강력한 프레임워크를 제공합니다.
광유전학은 신경 과학에서 광학과 유전학을 결합한 강력한 기술로 부상했으며, 광 자극1을 통해 신경 활동에 대한 정확하고 비침습적인 제어를 제공합니다. 널리 사용되는 모델 유기체인 Drosophila melanogaster에서 광유전학 도구는 특정 뉴런의 활성화 및 억제를 가능하게 하여 연구자들이 신경 회로를 조절할 수 있도록 합니다. 사용된 도구 중 CsChrimson 및 GtACR(Guillardia theta 음이온 채널 로돕신)은 신경 세포 표적화를 위한 상호 보완적인 접근 방식을 제공합니다. 녹조류의 적색광에 민감한 양이온 채널인 CsChrimson 채널로돕신은 적색광에 노출될 때 탈분극을 통해 뉴런 활성화를 촉진하며 약 590nm에서 피크 활성화를 촉진합니다2. CsChrimson은 이전의 채널로돕신보다 더 나은 조직 침투를 제공하고 초파리 연구에서 빛에 의한 행동 인공물을 감소시킵니다2. 대조적으로, GtACR2와 같은 변형을 포함하는 GtACR은 과분극(hyperpolarization)을 통해 뉴런을 침묵시키는 광의존성 염화물 채널입니다 3,4. GtACR2는 음이온을 전도하고 약 470nm4의 피크 활성화와 함께 청색광에 의해 활성화됩니다. CsChrimson과 GtACR2는 뚜렷한 빛의 파장에 의해 활성화되어 교차 활성화 없이 신경 세포 활동을 정확하고 독립적으로 제어할 수 있습니다5.
초파리는 비용 효율성, 사육 용이성, 매력 및 회피 행동을 포함한 환경 자극에 대한 강력한 행동 반응으로 인해 신경 과학 연구에 효과적인 모델입니다6. 작은 크기와 반투명 큐티클은 빛, 특히 장파장 적색광의 투과를 향상시켜 효율적인 광유전학적 조작을 가능하게 합니다 7,8. 초파리 세포는 채널로돕신의 기능에 중요한 보조인자인 망막을 충분히 생산할 수 없지만, 식단에 망막을 추가하면 이러한 한계를 보상하여 광유전학적 도구의 효과적인 활성화를 보장할 수 있습니다9.
초파리에서 광유전학적 조작의 효과를 탐구하기 위해 서로 다른 신경 회로와 행동을 대상으로 하는 4가지 실험에 대해 설명하며, 각 실험은 단일 비행 분석에서 그룹 기반 평가에 이르기까지 회피 또는 매력적인 반응을 평가하기 위해 고유한 양식을 사용합니다. 초파리의 가열 세포(HC)는 아리스타에 위치한 열감각 뉴런으로 온도 상승에 반응합니다10. 이 뉴런은 회피 행동을 유발하는 열에 민감한 이온 채널을 발현하여 파리를 열원으로부터 멀어지게 합니다10,11. 접근 방식 1에서는 HC 뉴런을 조작하기 위해 단일 비행 청색광 광유전학 열전술 위치 선호 분석을 사용했습니다. 이 뉴런에서 GtACR2를 발현함으로써 청색광 노출 시 뉴런의 활성을 억제했습니다. 파리는 25°C와 31°C의 두 가지 온도 옵션에 노출되었습니다. 실내 조명 아래에서 파리는 31°C 쪽을 피하여 전형적인 열전술 반응을 보여주었습니다. 그러나 GtACR2의 청색광 활성화는 HC 뉴런을 침묵시켰습니다. 그 결과, 파리는 유의미한 온도 선호도를 보이지 않았으며, 이는 성공적인 광유전학적 억제를 시사합니다. 감각 뉴런의 기능을 평가하는 것 외에도 다운스트림 감각 뉴런에서 GtACR2의 발현은 특정 감각 양식에 필요한 신경 회로를 연구하기 위한 유사한 광유전학적 조작을 가능하게 합니다5.
초파리(Drosophila)의 미각 수용체(gustatory receptor) GR66a는 주둥이의 말단부와 다리의 순손바닥(labial palps)에서 발현되어 쓴 맛 감지를 매개합니다12,13. 이 뉴런은 쓴 물질에 대한 반응으로 회피 행동을 유발합니다. 접근법 2에서는 GR66a 발현 뉴런을 조작하기 위해 단일 비행 적색광 광유전학 위치 선호 분석을 사용했습니다. 이 뉴런에서 CsChrimson을 발현함으로써, 우리는 적색광 노출 시 활성화시켰습니다. 파리는 한쪽 반은 붉은 빛에 노출되고 다른 반은 붉은 빛에 노출되는 경기장에 배치되었습니다. 빨간불이 없을 때는 파리가 선호하지 않았습니다. 그러나 CsChrimson의 적색광 활성화는 쓴 감지 뉴런을 자극하여 조명 영역을 크게 피하게 하여 GR66a 뉴런의 성공적인 광유전학적 활성화를 확인했습니다. 회피 거동5에 충분한 가열 셀의 다운스트림 회로를 식별하기 위해 유사한 접근 방식이 사용되었습니다.
우리는 접근법 3에서 식욕 행동의 광유전학적 활성화에 초점을 맞췄습니다. 라벨럼과 다리의 미각 센실라에 위치한 GR5a 발현 뉴런은 당을 감지하고 섭식 행동을 유도합니다. 이러한 뉴런의 활성화는 확장 반응(PER)14을 유발합니다. GR5a 뉴런을 활성화하기 위해 적색광 광유전학 확장 반응 분석을 사용했습니다. 이 뉴런에서 CsChrimson을 발현함으로써 우리는 붉은 빛으로 그들을 자극했습니다. 파리는 실내 조명 조건에서 주둥이를 확장하지 않았습니다. 그러나 CsChrimson의 적색광 활성화는 달콤한 자극 없이 확장을 유도하여 GR5a 뉴런의 성공적인 광유전학적 활성화를 입증했습니다. 이 접근법은 미각 감각 뉴런, 미각 투영 뉴런 및 운동 뉴런을 포함한 신경 회로를 조사하는 데 사용되었습니다15,16.
접근법 4에서는 GR66a 뉴런을 표적으로 하는 적색광 광유전학 파리 미로 분석을 사용하여 파리 그룹에서 회피 행동의 광유전학적 활성화를 조사했습니다. 파리는 두 튜브의 교차점에 배치되었습니다 : 하나는 붉은 빛으로 조명되고 다른 하나는 음영 처리되었습니다. GR66a 뉴런에서 CsChrimson 발현은 회피를 유발했습니다. 적색광이 없을 때는 파리가 선호하지 않았지만, 적색광 활성화는 GR66a가 적색광을 피하기 위해 파리를 발현하도록 유도하여 경로의 성공적인 활성화를 시사했습니다. Fly maze assay는 온도, 습도 및 후각을 포함한 다양한 감각 양식을 연구하는 데 널리 사용되었습니다. 광유전학과 결합할 때, 이 접근법은 매력 행동과 회피 행동을 모두 조사하는 데 강력합니다 17,18,19.
이러한 방법은 초파리 신경 회로의 광유전학적 활성화 및 억제를 연구하기 위한 재현 가능한 프레임워크를 제공합니다. 다양한 채널로돕신과 접근 가능한 행동 분석법의 조합을 활용함으로써 이 개념 증명 연구는 광유전학적 조작의 효과를 입증하여 신경 과학 연구에서 잠재적으로 더 광범위한 응용 프로그램을 통해 신경 회로 기능을 조작하는 간단한 방법을 제공합니다.
1. 스트레인, 플라이 사육 및 플라이 흡입기
2. 단일 플라이 블루 라이트 광유전학 열전술 위치 선호도 분석
3. 단일 비행 적색광 광유전학 위치 선호도 분석
4. 적색광 광유전학 확장 반응
5. 적색광 광유전학 파리 미로 분석
Single-fly blue-light optogenetic thermotactic positional preference assay(단일 비행 청색광 광유전학 열전술 위치 선호 분석)
ATR 보충이 없는 실내 조명(실내 조명, ATR -), ATR 보충이 있는 실내 조명(실내 조명, ATR +), ATR 보충이 없는 청색광(파란색, ATR -), ATR 보충이 있는 청색광(파란색, ATR +)의 4가지 조건을 테스트했습니다. 처음 세 가지 조건은 컨트롤 역할을 했습니다. 대조군 실험에서 파리는 31°C 쪽을 피했습니다. ATR 보충제가 있는 청색광에서 파리는 25°C와 31°C 사이에서 선호도를 나타내지 않았으며, 이는 GtACR2 활성화에 의한 HC 뉴런의 성공적인 억제를 나타냅니다(그림 2A).
Single-fly red-light optogenetic positional preference assay(단일 비행 적색광 광유전학 위치 선호 분석)
ATR 보충이 없는 실내 조명(실내 조명, ATR -), ATR 보충이 있는 실내 조명(실내 조명, ATR +), ATR 보충이 없는 적색광(빨간색, ATR -), ATR 보충이 있는 적색광(빨간색, ATR +)의 4가지 조건을 테스트했습니다. 처음 세 가지 조건은 컨트롤 역할을 했습니다. 통제 조건에서의 파리는 선호도를 나타내지 않았으며, 양쪽 간에 유사한 분포를 보였다. ATR 보충(빨간색, ATR +)을 통한 적색광 활성화는 적색 광선 영역을 피하기 위해 유도 파리를 유도하며, 이는 쓴 감지 뉴런이 CsChrimson에 의해 활성화되어 회피 행동을 유도한다는 것을 시사합니다(그림 2B). 우리는 수컷과 암컷 사이에 미미하지만 유의미한 차이를 관찰했는데(보충 그림 2), 이는 알을 낳는 유인(egg-laying attraction)을 매개하는 인두 GR66a 양성 미각 세포의 역할 때문일 수 있다26.
적색광 광유전학 확장 반응
ATR 보충이 없는 실내 조명(실내 조명, ATR -), ATR 보충이 있는 실내 조명(실내 조명, ATR +), ATR 보충이 없는 적색광(빨간색, ATR -), ATR 보충이 있는 적색광(빨간색, ATR +)의 4가지 조건을 테스트했습니다. 처음 세 가지 조건은 컨트롤 역할을 했습니다. 통제 조건 하의 파리는 식욕 자극의 부재와 일치하는 최소한의 PER을 보였다. 그러나 ATR 보충(빨간색, ATR +)으로 적색광이 활성화된 파리에서 상당한 PER이 관찰되었으며, 이는 CsChrimson에 의한 감미료 감지 뉴런의 활성화를 나타냅니다(그림 2C).
Red-light optogenetic fly maze assay (적색광 광유전학 파리 미로 분석)
ATR 보충이 없는 실내 조명(실내 조명, ATR -), ATR 보충이 있는 실내 조명(실내 조명, ATR +), ATR 보충이 없는 적색광(빨간색, ATR -), ATR 보충이 있는 적색광(빨간색, ATR +)의 4가지 조건을 테스트했습니다. 처음 세 그룹은 대조군 역할을 했습니다. 대조군에서 파리는 호일로 덮인 튜브와 덮이지 않은 튜브 사이에서 선호를 보이지 않았습니다. 적색광 아래에서 ATR 보충으로 Gr66a>CsChrimson 파리는 적색광에 노출된 덮개가 없는 튜브를 피했는데, 이는 쓴 감지 뉴런의 활성화가 회피 행동을 유발한다는 것을 나타냅니다(그림 2D).
그림 1: 파리 사육, 실험적 준비 및 행동 분석에 대한 개요. (A) 플라이 사육 및 준비. (B) 플라이 흡인기 구조. (C) single-fly blue-light optogenetic thermotactic positional preference assay를 위한 설정. (D) 단일 비행 적색광 광유전학적 위치 선호도 분석을 위한 설정. (E) 적색광 광유전학 확장 반응 분석 설정. (F) 적색광 광유전학 파리 미로 분석을 위한 설정. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 2: 광유전학 실험 결과. (A) single-fly blue-light optogenetic thermotactic positional preference assay에서 HC>GtACR2 의 선호 지수(PI). n = 26-31, 데이터는 평균 ± SEM을 나타냅니다. * p < 0.05, ** p < 0.01, *** p < 0.001, Mann-Whitney 검정. (B) 단일 비행 적색광 광유전학적 위치 선호 분석에서 Gr66a>CsChrimson 의 PI. n = 20-21, 데이터는 평균 ± S.E.M.을 나타냅니다. p < 0.0001, Mann-Whitney 검정. (C) 적색광 광유전학 확장 반응에서 Gr5a>CsChrimson 의 PI. n = 36-44, 데이터는 평균 ± S.E.M.을 나타냅니다. p < 0.0001, Mann-Whitney 검정. (D) 적색광 광유전학 파리 미로 분석에서 Gr66a>CsChrimson 의 PI. n = 10, 데이터는 평균 ± S.E.M.을 나타냅니다. * p < 0.05, ** p < 0.01, Mann-Whitney 검정. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
보충 그림 1. single-fly blue-light optogenetic thermotactic positional preference assay의 온도 변화. 25°C 측에서 덮개를 배치한 후 31°C 측의 온도가 변합니다. 이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.
보충 그림 2: 수컷과 암컷 Gr66a>CsChrimson 파리는 단일 비행 적색광 광유전학적 위치 선호 분석에서 다르게 행동합니다. n = 10, 데이터는 평균 ± S.E.M.을 나타냅니다. * p < 0.05, Mann-Whitney 검정. 이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.
광유전학적 조작은 시공간 정확도로 신경 회로를 정밀하게 제어할 수 있게 함으로써 신경과학 분야를 변화시켰다27. 신경 회로는 시냅스에 의해 상호 연결된 뉴런 집단을 포함하며, 활성화 시 특정 기능을 수행합니다. 초파리 전뇌 커넥톰(Drosophila whole-brain connectome)이 완성되어 초파리 뇌 내 시냅스 경로에 대한 포괄적인 통찰력을 제공합니다28,29. 커넥톰은 특정 행동의 기저에 있는 잠재적인 회로 메커니즘을 예측할 수 있지만, 추가적인 실험적 검증이 필요합니다. 유전 도구와 행동 분석을 결합함으로써 광유전학 조작은 행동 기능에서 신경 회로의 역할을 탐구하는 강력한 접근 방식을 제공합니다. 예를 들어, 트랜스 탱고(trans-Tango)를 광유전학 기술과 통합하면 다운스트림 뉴런을 활성화하거나 침묵시킬 수 있으므로 연구자들은 개별 시냅스후 뉴런의 행동적 중요성을 결정할 수 있습니다 5,30.
이 연구는 Drosophila melanogaster의 행동 분석을 위한 간단하고 접근 가능하며 재현 가능한 광유전학 프로토콜을 확립했습니다. 서로 다른 신경 회로를 표적으로 하는 4가지 실험적 접근 방식을 설계함으로써 뉴런의 활성화와 억제를 모두 효율적으로 달성할 수 있는 방법을 보여줍니다. 이 결과는 열택시 및 미각 반응과 같은 다양한 행동을 조사하는 데 CsChrimson 및 GtACR2의 사용을 입증하여 초파리 연구에서 광유전학 기술의 다양성을 보여줍니다.
ATR 그룹은 단일 비행 적색광 광유전학적 위치 선호 분석에서 ATR + 그룹과 유사한 경향을 보였습니다(그림 2B). 이러한 결과는 내인성 ATR이 낮은 수준의 CsChrimson 단백질을 활성화하기에 충분할 수 있음을 나타냅니다. 야생형, Gal4 및 UAS 통제와 같은 유전자 통제는 이러한 문제를 완화하는 데 도움이 될 수 있지만 자체적인 문제가 있습니다. 예를 들어, UAS 대조군은 누출 발현을 나타낼 수 있으며 유전적 배경이 행동에 영향을 미칠 수 있습니다. 따라서 유전자 및 ATR 대조군을 포함한 포괄적인 대조군 세트를 통합하는 것은 가장 강력하고 설득력 있는 결과를 보장하는 데 필수적입니다. 확장 반응을 평가하기 위한 전통적인 방법은 피펫 팁(31)을 통해 파리를 밀어 넣는 것입니다. 우리는 접착제를 사용하여 파리를 움직이지 못하게 하여 처리량을 크게 향상시키고 기술적 문제를 줄입니다. 회피 행동 외에도 적색광 광유전학 파리 미로 분석법은 예를 들어 식욕 행동을 유도하는 뉴런을 활성화하여 매력적인 행동을 테스트하는 데 사용할 수도 있습니다. 두 조건 사이의 비행 선택 거동을 추적해야 하는 경우 호일 대신 780nm 적외선 장역 통과 필터를 사용하여 테스트 튜브를 덮을 수 있습니다.
광유전학적 조작의 성공을 보장하려면 적절한 광원을 선택하는 것이 필수적입니다. 이 선택을 할 때 다음 요소를 고려해야 합니다: (1) 다른 채널로돕신은 빛의 특정 파장에 의해 활성화됩니다. 예를 들면, CsChrimson는 590 nm에 첨단을 가진 적색광에 의해 활성화되고, GtACR1는 515 nm에 첨단을 가진 녹색 빛에 의해 활성화되고, GtACR2는 470 nm 2,3,4에 첨단을 가진 파란 빛에 의해 활성화됩니다. 동일한 뉴런을 활성화하고 침묵시키기 위해 CsChrimson과 GtACR2를 함께 사용하여 교차 활성화를 피할 수 있습니다5 GtACR1은 CsChrimson과 동시에 사용하기에 적합하지 않습니다. (2) 적색광은 파리 조직을 더 효과적으로 투과하고 파리 포토택시7에 미치는 영향이 적습니다. 가능하면 CsChrimson과 같은 적색 편이 채널로돕신을 사용하는 것이 좋습니다. (3) 빛의 강도는 성공에 매우 중요합니다. 낮은 강도는 뉴런을 활성화하지 못할 수 있으며, 과도한 강도는 광전술 행동을 변화시키거나 조직을 손상시킬 수 있습니다. 상대적으로 높은 광도로 실험을 시작하고 필요한 최소 시간 동안 파리를 노출시키는 것이 좋습니다. 원하는 동작이 관찰되면 최적의 강도가 식별될 때까지 광원과 파리 사이의 거리를 늘리면 쉽게 달성할 수 있는 광 강도를 점진적으로 줄입니다.
이 작업의 중요한 목표는 대부분의 초파리 실험실에서 쉽게 구현할 수 있는 프로토콜을 개발하는 것입니다. 각 설정은 일반적으로 사용 가능한 재료와 장비를 사용하므로 리소스가 제한된 실험실에 적합합니다. 설명된 분석은 비용 효율적이고 사용자 친화적이며 기술적 문제를 최소화하고 재현성을 보장합니다. 각 설정에 대한 비용은 적색광 광유전학 확장 반응 분석(해부 현미경 제외)의 경우 $10 미만에서 적색광 광유전학 파리 미로 분석 및 단일 비행 적색광 광유전학 위치 선호도 분석의 경우 약 $100, 표면 온도 프로브가 필요한 단일 비행 청색광 광유전학 열tactic 위치 선호도 분석의 경우 수백 달러에 이르기까지 다양합니다. 호환 가능한 온도계 및 2개의 핫플레이트(녹음 장비는 비용이 매우 다양하고 많은 실험실에서 이미 보유하고 있을 수 있으므로 이러한 추정치에 포함되지 않습니다.). 이러한 단순성은 교육 환경에서 광유전학 도구의 채택을 지원합니다. 여러 보고서에서 학부생이 광유전학의 원리를 탐구하고 감각 뉴런과 다운스트림 신경 회로가 행동을 조절하는 방법을 이해할 수 있도록 교육 실험실에서 초파리 광유전학의 적용을 입증했습니다 25,32,33.
결론적으로, 당사는 따라하기 쉽고 자원 친화적인 광유전학 프로토콜을 제공합니다. 이 연구는 명확한 방법론과 재현 가능한 결과에 초점을 맞춤으로써 광유전학을 신경과학의 표준 도구로 홍보하고 쉽게 구현할 수 있는 기술을 통해 신경 기능에 대한 이해를 높입니다.
저자는 이 기사의 출판과 관련하여 이해 상충이 없음을 선언합니다. 모든 저자는 잠재적인 갈등을 공개했으며 이 연구에서 제시된 연구에 영향을 미칠 수 있는 재정적 또는 개인적 관계가 없음을 확인합니다.
모든 그림에 대한 개략도는 Biorender.com 로 생성되었습니다. 이 작업은 NIH R01GM140130(https://www.nigms.nih.gov/)에서 L.N.에 지원했습니다. 자금 제공자는 연구 설계, 데이터 수집 및 분석, 출판 결정 또는 원고 준비에 아무런 역할도 하지 않았습니다.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
1000 mA LED driver | Luxeon Star | 3021-D-E-1000 | |
5 mL VWR Culture Tubes, Plastic, with Dual-Position Caps | VWR | 60818-664 | |
780 Longpass Filter / IR 780 nm 100 mm x 100 mm | Lee Filters | BH #LE8744 | Cut to approximately 47 x 100 fit the plastic cover |
Agfabric 6.5 ft. x 15 ft. Insect Bug Netting Garden Net for Protecting Plants Vegetables Flowers Fruits | The Home Depot | EIBNW6515 | |
All trans retinal | Sigma-Aldrich | 116-31-4 | |
Aluminum Plate (30.5 cm x 30.5 cm x 0.6 cm) | Amazon | purchased from Amazon | |
Black Plastic Box | LI-COR | 929-97101 | |
CALCIUM CHLORIDE ANHYDRO 25GR | Thermo Fisher Scientific | AC297150250 | |
CX405 Handycam with Exmor R CMOS sensor | SONY | HDR-CX405 | |
Elmer’s “School Glue” | Elmer | ||
Ethyl alcohol, Pure (200 Proof) | Sigma-Aldrich | E7023 | |
Fisherbrand Isotemp Hot Plate Stirrer | Fisher Scientific | SP88850200 | |
Fly line: Gr5a-Gal4 | Bloomington Drosophila Stock Center | 57592 | |
Fly line: Gr66a-Gal4 | Bloomington Drosophila Stock Center | 57670 | |
Fly line: HC-Gal4 (II) | Dr. Marco Gallio Lab | A kind gift | |
Fly line: UAS-CsChrimson | Bloomington Drosophila Stock Center | 55136 | |
Fly line: UAS-GtACR2/TM6B | Dr. Quentin Gaudry Lab | A kind gift | |
Flystuff 62-101 Yellow Cornmeal (11.3 Kg), Yellow, 11.3 Kg/Unit | Genesee Scientific | 62-101 | |
Flystuff 62-107 Inactive Dry Yeast, 10 Kg, Nutritional Flake, 10 Kg/Unit | Genesee Scientific | 62-107 | |
Flystuff 66-103 Nutri-Fly Drosophila Agar, Gelidium, 100 Mesh, 5 Kg (11.02 lbs)/Unit | Genesee Scientific | 66-103 | |
FreeMascot OD 8+ 190 nm–420 nm / 600 nm–1100 nm Wavelength Violet/Red/Infrared Laser Safety Glasses | FreeMascot | B08LGMQ65S | purchased from Amazon |
GoPro Hero8 Black | GoPro | 6365359 | |
LEE Filters 100×100 mm Infra Red #87 Infrared Polyester Filter | B&H Photo | LE8744 | |
Longpass Filter, Colored Glass, 50.8 x 50.8 mm, 830 nm Cut-on, RG830 | Newport | FSQ-RG830 | |
Methyl 4-hydroxybenzoate, 99%, Thermo Scientific Chemicals | Thermo Fisher Scientific | 126960025 | |
MicroWell Mini Tray 60 Well, Low Profile NS PS | Thermal Scientific | NUNC 439225 | The lids are used as the "plastic cover" |
Olympus Plastics 24-160RS, 1000 µL Olympus Ergonomic Pipet Tips Low Binding, Racked, Sterile, 8 Racks of 96 Tips/Unit | Eppendorf | 24-160RS | |
Parafilm M Sealing Film | Heathrow Scientific | HS234526B | 4 in x 125 feet |
Potassium chloride, ACS, 99.0-100.5%, | Thermo Fisher Scientific | AA1159530 | |
Prism | GraphPad | Version 9 | data analysis software |
Samco Graduated Transfer Pipettes | Thermo Fisher Scientific | 225 | 3 mL |
Slides | Fisher Scientific | 12-544-2 | 5 mm x 75 mm x 1.0 mm |
Stereo microscope | OLYMPUS | CZ61 | |
Styrofoam box (27 cm height × 22 cm width × 16 cm length) | |||
Sucrose | Fisher Scientific | 225911 | |
Surface temperature probe | Fluke | 80PK-3A | |
Syringe | BD Integra | 305270 | |
Tate & Lyle 457 Dextrose, Tate & Lyle, Pow, Tate & Lyle 457 Dextrose, Tate & Lyle, Powder, 50 lbs/Unit | Genesee Scientific | 62-113 | |
Traceable Calibrated Big-Digit Thermocouple Thermometer | Traceable by cple-parmer | UX-91210-07 | Fisherbrand Traceable BigDigit Type K Thermometer |
Triple blue LED starboard | LEDSupply | 07007-PB000-D | 470 nm |
Triple red LED starboard | LEDSupply | 07007-PD000-F | 627 nm |
Tygon PVC Clear Tubing 1/4" ID, 3/8" OD, 5 ft. Length | McMaster Carr Supply Company | 6516T21 | |
Univivi IR Illuminator, 850nm 12 LEDs Wide Angle IR Illuminator for Night Vision | Univivi | 4331910725 | |
Wakefield Thermal 25.4 mm Round Heatsink Star LED Board - 882-100AB | Wakefield-Vette | 882-100AB | |
Wireless Presenter | DinoFire Store | B01410YNAM | purchased from Amazon |
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