מחקר זה מתמקד בשיפור טכניקות דגימת חלב במחקר הנקה, במיוחד בעכברים. אנו מציגים שיטה המתגברת על אתגרים כמו אובדן דגימות, נפח מוגבל ותהליכים עתירי עבודה, ומציעה פתרון יעיל לאיסוף חלב מכרסמים וכלי רב ערך לחוקרים בתחום. אחד האתגרים הגדולים ביותר בביצוע מחקר בעכברים הוא גודלם הקטן, במיוחד כשמדובר בדגימת נוזלים ביולוגיים כמו חלב.
קשה להשיג נפח מספיק מבלי לאסוף דגימות או ששני אנשים יאספו אותו ידנית, מה שהופך את התהליך לפחות מעשי במקרים רבים. הפרוטוקול שלנו מפשט את איסוף החלב בכך שהוא מאפשר לאדם אחד לאסוף נפח מספיק תוך פחות מ-10 דקות באמצעות כלי מעבדה זמינים. בניגוד לשיטות אחרות, הוא ממזער את אובדן הדגימה עם שאיבה רציפה, משיכת חלב ישירות לצינורות איסוף, חוסך זמן ושומר על נפח לניתוח.
כדי להתחיל, חבר קצה אחד של צינור ה-PVC בקוטר פנימי בגודל 5/32 אינץ' למשאבת הוואקום, ואבטח את החיבור באמצעות סרט. בעזרת מחבר ישר דוקרני, חבר את הקצה השני של צינורות ה-PVC בקוטר פנימי בגודל 5/32 אינץ' לצינורות ה-PVC בקוטר הפנימי בגודל 1/8 אינץ'. לאחר מכן, השתמש במחבר כדי לחבר את הקצה השני של צינור ה- PVC בקוטר פנימי בגודל 1/8 אינץ' למחט היפודרמית בגודל 18.
בעזרת מספריים, חותכים את קצה קצה הפיפטה P200, כ- 0.2 סנטימטרים, ליצירת פתח גדול יותר. הכנס את קצה הפיפטה P200 שהשתנה דרך פתח פקק המחיצה כך שהקצה יצביע כלפי מעלה, והצמד את פקק המחיצה לצינור איסוף סטרילי. בעזרת המחט ההיפודרמית בגודל 18, נקב את פקק המחיצה.
כעת, הפעל את משאבת הוואקום כדי לבדוק את לחץ היניקה על ידי הנחת אצבע עטויה כפפה על פתח קצה הפיפטה ביום החליבה, הפרד את הסכר מהגורים שלה כדי לאפשר הצטברות חלב בבלוטות. שמור על חום הגורים בקן. לאחר הרדמת הסכר, לחץ בחוזקה על רגל מהסכר כדי להעריך את תפיסת התחושה והכאב של בעל החיים.
לאחר מכן, מרחו משחת עיניים וטרינרית על עיני הסכר כדי למנוע יובש בזמן ההרדמה. הניחו את הסכר המרדים על גבה על משטח עבודה מוצק. נקו בעדינות את אזור החלב של הסכר בעזרת מגבון סטרילי להכנת אלכוהול.
יש לתת יחידה אחת עד שתיים של אוקסיטוצין תוך צפקית בין זוג הפטמות הרביעי והחמישי בצד חלל הצפק שלא קיבל זריקה. שפשפו בעדינות את אזור הצוואר של הסכר ביד הלא דומיננטית. לאחר מכן, סחטו את רקמת החלב מהבסיס לקצה הפטמה עד שנראה חרוז חלב.
הפעל את מכשיר הוואקום על ידי לחיצה על לחצן ההפעלה. כדי להתחיל לחלוב, מרחו בעדינות את קצה הפיפטה ההפוך P200 על פטמה והשתמשו בתנועת משיכה עדינה כדי לשאוב חלב. חלב את כל הפטמות עד לאיסוף נפח מספיק של חלב.
לאחר מכן, החזירו את הסכר המורדם לכלוב וודאו שהיא נשמרת חמה במהלך תקופת ההתאוששות מההרדמה. ניתן לאסוף בנוחות 0.1 עד 0.5 מיליליטר חלב מכל סכר תוך פחות מ -10 דקות. ריכוז שומן החלב עלה משמעותית מ-174.4 גרם לליטר ביום השני לאחר הלידה ל-224.4 גרם לליטר ביום ה-10 לאחר הלידה.
ריכוזי הלקטוז והחלבון הכולל לא הראו הבדלים משמעותיים בין היום השני לאחר הלידה ליום ה-10 שלאחר הלידה. השכיחות היחסית של אלפא-S1-קזאין וחלבון חומצי מי גבינה הייתה גבוהה יותר בחלב שלאחר הלידה ביום ה-10 בהשוואה לחלב שלאחר הלידה ביום השני, בעוד שבטא-קזאין היה נפוץ יותר בחלב שלאחר הלידה ביום ה-10. עוצמות רצועת החלבון על ג'ל האלקטרופורזה אישרו חזותית הבדלים בשפע היחסי של חלבוני חלב בודדים.
