تركز هذه الدراسة على تحسين تقنيات أخذ عينات الحليب في أبحاث الرضاعة ، وخاصة في الفئران. نقدم طريقة تتغلب على التحديات مثل فقدان العينة ، والحجم المحدود ، والعمليات كثيفة العمالة ، ونقدم حلا مبسطا لجمع حليب القوارض وأداة قيمة للباحثين في هذا المجال. أحد أكبر التحديات في إجراء الأبحاث على الفئران هو صغر حجمها ، خاصة عندما يتعلق الأمر بأخذ عينات من السوائل الحيوية مثل الحليب.
من الصعب الحصول على حجم كاف دون تجميع العينات أو قيام شخصين بجمعها يدويا ، مما يجعل العملية أقل عملية في كثير من الحالات. يبسط بروتوكولنا جمع الحليب من خلال السماح لشخص واحد بجمع كمية كافية في أقل من 10 دقائق باستخدام أدوات المختبر المتاحة بسهولة. على عكس الطرق الأخرى ، فإنه يقلل من فقدان العينة من خلال الشفط المستمر ، ويسحب الحليب مباشرة إلى أنابيب التجميع ، ويوفر الوقت ، ويحافظ على حجم التحليل.
للبدء ، قم بتوصيل أحد طرفي الأنابيب البلاستيكية ذات القطر الداخلي 5/32 بوصة بمضخة التفريغ ، وقم بتأمين المرفق بشريط. باستخدام موصل مستقيم شائك ، قم بتوصيل الطرف الآخر من الأنابيب البلاستيكية ذات القطر الداخلي 5/32 بوصة بأنبوب PVC بقطر داخلي 1/8 بوصة. بعد ذلك ، استخدم موصلا لتوصيل الطرف الآخر من أنبوب PVC ذو القطر الداخلي 1/8 بوصة بإبرة تحت الجلد قياس 18.
باستخدام المقص ، قم بقص طرف ماصة P200 ، حوالي 0.2 سم ، لإنشاء فتحة أكبر. أدخل طرف الماصة P200 المعدل من خلال فتحة سدادة الحاجز بحيث يشير الطرف إلى الأعلى، وقم بتوصيل سدادة الحاجز بأنبوب تجميع معقم. باستخدام الإبرة تحت الجلد قياس 18 ، قم بثقب سدادة الحاجز.
الآن ، قم بتشغيل مضخة التفريغ للتحقق من ضغط الشفط عن طريق وضع إصبع مرتديا قفازا فوق فتحة طرف الماصة في يوم الحلب ، افصل السد عن صغارها للسماح بتراكم الحليب في الغدد. حافظ على دفء الجراء في العش. بعد تخدير السد ، اضغط على قدم من السد بقوة لتقييم إدراك للإحساس والألم.
ثم ضع مرهم العيون البيطري على عيون السد لمنع الجفاف أثناء التخدير. ضع السد المخدر على ظهرها على سطح عمل صلب. نظف المنطقة الثديية من السد برفق بمنديل معقم للكحول.
يجب تطبيق وحدة أو وحدتين من الأوكسيتوسين داخل الصفاق بين الزوج الرابع والخامس من الحلمات على جانب التجويف البريتوني الذي لم يتلق أي حقنة. قم بتقطيع منطقة عنق السد برفق باليد غير المهيمنة. ثم اضغط على الأنسجة الثديية من القاعدة إلى طرف الحلمة حتى تظهر حبة حليب.
قم بتشغيل جهاز المكنسة الكهربائية بالضغط على زر الطاقة. لبدء الحلب، ضع طرف الماصة P200 المقلوب برفق على الحلمة واستخدم حركة سحب لطيفة لسحب الحليب. حليب جميع الحلمات حتى يتم جمع كمية كافية من الحليب.
بعد ذلك ، أعد السد المخدر إلى القفص وتأكد من إبقائه دافئا خلال فترة التعافي من التخدير. يمكن جمع 0.1 إلى 0.5 مل من الحليب بشكل مريح من كل سد في أقل من 10 دقائق. زاد تركيز دهون الحليب بشكل ملحوظ من 174.4 جراما لكل لتر في اليوم الثاني بعد الولادة إلى 224.4 جراما لكل لتر في يوم ما بعد الولادة 10.
لم تظهر تركيزات اللاكتوز والبروتين الكلي فروقا يعتد بها بين اليوم الثاني بعد الولادة واليوم 10 بعد الولادة. كانت الوفرة النسبية لألفا-S1-كازين وبروتين مصل اللبن الحمضي أعلى في حليب ما بعد الولادة 10 مقارنة بحليب اليوم الثاني بعد الولادة ، بينما كان بيتا كازين أكثر وفرة في حليب اليوم الثاني بعد الولادة منه في حليب اليوم 10 بعد الولادة. أكدت شدة نطاق البروتين على هلام الرحلان الكهربائي بصريا الاختلافات في الوفرة النسبية لبروتينات الحليب الفردية.
