בידוד ואפיון רצועות הרחם ואיברי רצפת האגן

פרוטוקול זה ירחיב את הנגישות של מחקר על הרצועה הרחם ותנאי רצפת האגן, כמו צניחת איברי האגן, או POP, ויקל על דיסקציה של רקמת רצפת האגן המשוקפת. טכניקה זו מאפשרת בידוד של שתי רצועות הרחם מעכבר תוך שמירה על חיבורים אנטומיים ושליפת איברי רצפת האגן שמסביב. השיטה שלנו קובעת מודל פרה-קליני המאפשר מחקר זה של האופן שבו הריון או מחלה משפיעים על ההתנהגות המכנית של הרקמות.

שיטה זו יוצרת כלי חדש למחקר הקשור לבריאות האישה. המאבק העיקרי הוא זיהוי וטיפול ברצועה הרחם. העצה שלי היא לקחת מספיק זמן וטיפול כי רקמות אלה קטנות ושבריריות.

התחילו בהנחת עכבר שעבר המתת חסד על פד והצמדת ארבעת הגפיים כלפי מטה. בצע חתך באורך של 1 עד 1.5 ס"מ על הבטן עם מספריים. יש להפריד בעדינות את העור בצד הגולגולתי, הקאודלי והצידי של החתך.

הפוך את העכבר כך שיפנה לצד הגבי כלפי מעלה וקילף בעדינות את העור בחזרה לכיוון הגפיים האחוריות. הצמידו את הגפיים ובצעו חתך באורך סנטימטר לתוך הבטן מבית החזה לאגן. דחפו בעדינות את האיברים לכיוון בית החזה לקבלת מבט ברור.

לאחר השקיה עם PBS באמצעות זוג מלקחיים, למשוך ולנקות את רקמת שומן האגן. לזהות את קרני הרחם ולאחר מכן לחתוך אותם מן השחלות. עכשיו, לשלוף אותם משדה הראייה ולנתק את הקשר הצווארי.

נתקו את השופכנים מחיבור שלפוחית השתן. חותכים את המעי הגס קרוב ככל האפשר לצוואר הרחם. מקם את העכבר עם הפד תחת טווח ניתוח כדי לדמיין את הרצועות הרחם.

השתמש במלקחיים כדי לנקות בעדינות את כל השומן שמסביב מרצועות הרחם. קשרו תפר 5-0 סביב הקצה הצווארי של שתי הרצועות. חותכים את הקצה הצווארי של הרצועה הרחם, ומשאירים חתיכה מצוואר הרחם מחוברת.

עכשיו, לחתוך חתיכת שריר מתחתית הרצועה. הניחו את הרקמה המנותחת באמבטיה המכילה PBS כדי לשמור על לחות הרקמות. חותכים את הקצה הצווארי של הרקמה הנותרת, ומשאירים חתיכת צוואר הרחם מחוברת לבדיקה מכנית והדמיה.

לאחר פינוי השומן, החזיקו את שלפוחית השתן במלקחיים והרימו אותה בעדינות בזווית של כ-40 מעלות. השתמש במספריים כדי לחתוך את שלפוחית השתן בצד הדיסטלי ממש מעל צוואר הרחם. הניחו את שלפוחית השתן באמבטיה עם PBS כדי לשמור על הידרציה.

כעת, השתמש במלקחיים כדי להרים את צוואר הרחם בזווית משוערת של 40 מעלות. לזהות את הפאשיה הרקטובגינלית המחברת בין פי הטבעת לצוואר הרחם ולנתק את הקשר עם האזמל. השתמש מספריים לחתוך את עצם הערווה בסינתזה הערווה.

הרחיבו בעדינות את רצפת האגן כדי להגביר את הנראות של החדרות הרקמות. החזיקו את צוואר הרחם במלקחיים וחתכו אותו קרוב ככל האפשר לפות. הניחו את הרקמה ב-PBS כדי לשמור על הידרציה.

השתמש במלקחיים כדי למשוך בעדינות את פי הטבעת לכיוון בית החזה. זהה את פי הטבעת וחתך אותו בפי הטבעת. מקם את פי הטבעת ב- PBS כדי לשמור על הידרציה.

לאחר שכל הרקמות המעניינות נקצרות, נקעו את עצם הירך מהאגן. חותכים את עצם האגן מהקצוות הדיסטליים והפרוקסימליים. הניחו את הרקמה המנותחת ב-PBS.

נראה כי הטיפול באנזים הפחית את השיא הצירי הממוצע ואת גורמי הלחץ המרגיעים שהרצועה הרחם חווה בתזוזות גלובליות שנקבעו, מה שמצביע על כך שקולגן וגליקוזאמינוגליקנים תרמו לנוקשות צירית של הרצועות. הזנים הציריים הממוצעים עבור כל דגימה שנבדקה מכנית מצביעים על כך שהזן הצירי העולמי בדגימות שטופלו באנזים היה דומה או גדול יותר מהמדגם המבוקר, דבר המצביע על כך שהירידה בעקה המקרוסקופית נבעה מטיפול באנזימים, ולא מזנים קטנים יותר. ספקטרוסקופיית ראמאן של קטע הביניים של הרצועה הרחם מצביעה על כך שטיפולי אנזימים שינו את ההרכב הביוכימי של רצועות הרחם של מורין.

ברצועות הרחם שטופלו בקולגנאז נרשמה ירידה בתכולת הקולגן, כמו גם ירידה במים ובחומצה היאלורונית. ברצועות הרחם שטופלו בכונדרוטינאז הייתה פחות חומצה היאלורונית, כמו גם תכולת מים וקולגן נמוכה יותר. תשומת לב לפרטים חשובה מאוד, במיוחד כאשר מנקים את העובדה שיש צורך במשקעים סביב USL ואיברי האגן כאן כדי למנוע פגיעה ב- USL וברקמות הסובבות אותו.

מחקר נוסף יכול להתבצע על USL ורקמות רצפת אגן אחרות באמצעות עכברים שיש להם וריאציות גנטיות ששיערו להשפיע על POP. הפרוטוקול שלנו כבר מאפשר מגוון מחקרים חדשים, כולל חקירה כיצד ההתנהגות המכנית של USL משנה תפקוד של הריון, שהוא גורם סיכון מרכזי ל- POP.