סרטון זה יראה את טכניקת הניתוח ואת ציוני הדרך האנטומיים הרלוונטיים עבור גנגליון האגן העיקרי והעצבים האוטונומיים הקשורים בחולדה הזכרית והנקבה. הניתוח הראשון מוצג בצד שמאל של חולדה זכר מיד לאחר המוות. לגשת לבטן ולאגן דרך חתך קו האמצע הגחוי.
מעבירים בעדינות את איברי הבטן לצד אחד באמצעות מטליעות או מקלעות כותנה. שים לב למיקום האונות הגחונות של בלוטת הערמונית ושלפוחית השתן. הזז את הווסיל המכונן לצד ההפוך.
חותכים את האגרטלים כדי לספק גישה טובה יותר לאזור הגנגליון. מנקודה זו של הניתוח, הרקמה לא חייבת להתייבש ולכן לשמור על הרקמה לחה עם מלוחים פיזיולוגיים. כדי לדמיין את הגנגליון, נקה בזהירות רקמות ליד הגנגליון והתגבר עליו יתר על כן.
במידת הצורך, השתמש במפיגה כדי לשמור על שדה הניתוח נקי. הסר צבירה סמוכה של רקמת שומן ולפתוח את fascia מעברי של האגן. זהה את עצב האגן על ידי הדמיה של וריד ה- iliac הפנימי וזה ענף דק המקרין לכיוון גנגליון האגן הגדול ושלפוחית השתן.
ענף זה פועל במקביל ולעיתים מוטבע בתוך עצב האגן ואז חוצה את הגנגליון. מניחים בעדינות מדפים זוויתיים עדין מתחת לעצב האגן ומחלקים את המדפים יחד כדי לשחרר אותו מהרקמות שמסביב. ייתכן גם שניתן יהיה לבודד את עצב האגן מהחללית הקטנה הפועלת במקביל אליו.
זהה את העצב המערתי על ידי ביצוע עצב האגן לצומת שלו עם הגנגליון ואז בצע את העצב המערתי כפי שהוא נוסע על פני הערמונית ולאחר מכן caudally לכיוון הגופים המערתיים של הפין. זהה היכן העצב ההיפוגזטרי מצטרף לגנגליון בקצה הגולגולתי הזה לאחר שנסע לצד השופך. לזהות את גנגליון האגן הגדול ולאשר את המיקום של כל עצב גדול.
זהה את עצבי האביזר בקצה הגחוני של הגנגליון המקרין לכיוון דרכי השתן והרבייה. כדי להסיר את גנגליון האגן העיקרי עם העצבים הקשורים אליו, בעדינות להחליק מלקחים בין הגנגליון ואת בלוטת הערמונית הבסיסית נזהר לא לנקב את הקפסולה הדקה של הערמונית. לנקות את כל הקשרים הסופיים עם הרקמות שמסביב ואז לחתוך כל עצב.
להזיז את הגנגליון עם העצבים שלה לפתרון המתאים לניסוי שלך ולאשר כי כל העצבים העיקריים שלמים. הניתוח השני מוצג בצד שמאל של חולדה מיד לאחר המוות. בעדינות להעביר את איברי הבטן לצד אחד וצוין את המיקום של קרן הרחם, שלפוחית השתן ופי הטבעת.
חותכים את כלי השחלות והרחם ומסוגים את קרן הרחם. הזן את החלל הצפק בעדינות לנקות צבירה של רקמת שומן הממוקם ליד צוואר הרחם. זהה את הקיר האחורי של צוואר הרחם רק caudal לצומת שלה עם קרני הרחם.
אזור זה הוא ציון הדרך העיקרי להגדרת מיקום גנגליון האגן העיקרי על ציר rostrocaudal של החיה. בזהירות להסיר כל רקמה הממנעת תצוגה מלאה של המבנים העצביים תוך הימנעות נזק לכלי הדם העיקריים. זהה את עצב האגן על ידי מציאת וריד האיליקון הפנימי ואת הענף המשובח שלו מקרין לכיוון גנגליון האגן הגדול ושלפוחית השתן.
ענף זה פועל במקביל ולעיתים מוטבע בתוך עצב האגן ואז חוצה את הגנגליון. זהה את העצב ההיפוגזטרי שבו הוא מצטרף לגנגליון בקצה הגולגולת שלו לאחר שנסע לצד השופכה. זהה את העצב המערתי על ידי ביצוע עצב האגן לצומת שלו עם הגנגליון ואז בצע את העצב המערתי כפי שהוא נוסע באופן סיבתי לאורך הקיר האחורי של צוואר הרחם לכיוון הנרתיק.
קשה לראות את עצבי האביזר, אך מקרינים מההיבט המדיאלי של גנגליון האגן העיקרי. לבסוף, לזהות את גנגליון האגן הגדול ולאשר את המיקום של כל עצב גדול. כדי להסיר את גנגליון האגן העיקרי עם העצבים הקשורים אליו, להחליק בעדינות מדפים בין הגנגליון לצוואר הרחם הבסיסי ולשבש כל קשר בין הגנגליון לצוואר הרחם.
לנקות את כל הקשרים הסופיים עם הרקמות שמסביב עבור אורכי העצבים הנדרשים לניסוי ואז לחתוך כל עצב. להזיז את הגנגליון עם העצבים שלה לפתרון המתאים לניסוי שלך ולאשר כי כל העצבים העיקריים שלמים. דוגמה למבנה גנגליון האגן העיקרי מאויר כאן מראה כמה תכונות של פורמלדהיד קבוע גנגליה באמצעות אימונוהיסטוכימיה קונבנציונלית.
תמונה זו מציגה את כל גנגליון האגן הגדול עם העצבים הקשורים אליו דמיינו כמו הרכבה שלמה עובי מלא. תמונה זו מראה אימונולאז cryosection כדי להדגים נוירונים noradrenergic על ידי הביטוי שלהם של טירוסין hydroxylase. תמונה זו מראה נוירונים כולין דמיינו על ידי הביטוי שלהם של תחמוצת החנקן העצבי סינתאז.
לסיכום, פרוטוקול זה ושרטוטים קשורים מספקים לחוקרים המעוניינים בתפקוד הקרביים באגן את הכלים לזהות ול לנתח את גנגליון האגן העיקרי בחולדות זכר ונקבה. מיומנויות אלה ניתן ליישם על סוגים רבים של מניפולציה ניסיונית במבחנה in vivo.
