JoVE Journal

Biochemistry

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Suivi des particules sensibles à la masse pour caractériser la dynamique des macromolécules associées à la membrane

Transcription

Ce protocole décrit une approche de traitement d’image et de suivi d’une seule particule basée sur iSCAT qui permet d’étudier simultanément la masse moléculaire et le comportement diffusif des macromolécules interagissant avec les membranes lipidiques. Des instructions étape par étape pour la préparation des échantillons, la conversion masse-contraste, l’acquisition de films et le post-traitement sont fournies ainsi que des instructions pour éviter les pièges potentiels.

Chapitres dans cette vidéo

0:05

Introduction

0:43

Cleaning of Microscope Slides

1:48

Assembly of Flow Chambers

2:41

Supported Lipid Bilayer (SLB) Formation

3:31

Imaging

4:31

Data Analysis

10:25

Results: Native and Ratiometric View of Exemplary Surfaces

11:01

Results: Calibration of the Mass-to-Contrast Relation for MSPT Measurements

12:15

Results: Deciphering Oligomer States of Membrane-Associated Proteins

12:57

Conclusion

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