Method Article
* Ces auteurs ont contribué à parts égales
Une équipe dédiée peut offrir aux patientes Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser la possibilité d’effectuer une stimulation ovarienne contrôlée et une cryoconservation ovocytaire au moment de la vaginoplastie laparoscopique.
Chez les patientes atteintes du syndrome de Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser (MRKHS) qui doivent subir une vaginoplastie laparoscopique et qui souhaitent une maternité biologique, nous proposons qu’un prélèvement concomitant d’ovocytes par laparoscopie pour la cryoconservation soit effectué. Le prélèvement d’ovocytes est poursuivi au début de la laparoscopie. Des trocarts droit et gauche de 5 mm sont positionnés, à travers lesquels une aiguille d’aspiration d’ovule de 17 G est utilisée pour la ponction des ovaires droit et gauche, respectivement. Pour faciliter l’exposition des follicules, les ovaires sont mobilisés et maintenus avec des pinces laparoscopiques.
Lors de l’aspiration de plusieurs follicules proches les uns des autres, la pointe de l’aiguille est retenue dans l’ovaire pour réduire le nombre de fois que le cortex ovarien est transpercé et en raison du risque inhérent de saignement. Les étapes suivantes sont inchangées par rapport à la technique modifiée laparoscopique de Davydov pour la vaginoplastie. Avant la chirurgie, une stimulation ovarienne contrôlée est réalisée avec un protocole d’antagoniste de l’hormone de libération de l’hormone gonadotrophine (Gn-RH), et la procédure concomitante de prélèvement d’ovocytes et de vaginoplastie est prévue 36 heures après le déclencheur final de la maturation folliculaire. Le liquide folliculaire est recueilli dans les mêmes tubes stériles de 10 ml utilisés lors du prélèvement transvaginal d’ovocytes et transféré dans un bloc chauffant (37 °C) au laboratoire de reproduction assistée, où les ovocytes matures (métaphase II) sont vitrifiés.
Dans ce cas, une série de 23 femmes atteintes de MRKH, les ovocytes ont été prélevés avec succès et cryoconservés chez tous les patients; La vaginoplastie a ensuite été réalisée sans modifications, et les soins postopératoires hospitaliers et ambulatoires (jour du retrait du cathéter urinaire, jour de sortie de l’hôpital, utilisation du dilatateur et confort lors du suivi) n’ont pas été affectés. Une complication postopératoire est survenue chez un patient (fièvre se développant le jour 5 après la chirurgie et détection de liquide intrapéritonéal à l’échographie transabdominale) et résolue après un traitement conservateur. Plutôt que d’effectuer une vaginoplastie chirurgicale et de retarder le prélèvement d’ovocytes chez les patientes atteintes de MRKH, cette approche combine les deux procédures en une seule laparoscopie, minimisant ainsi le caractère invasif chirurgical et les risques anesthésiques.
Avec une incidence d’environ 1 femme sur 4 à 10 000, MRKHS est la cause de 15% des cas d’aménorrhée primaire. MRKHS se caractérise par l’absence congénitale du segment supérieur du vagin et de l’utérus, tandis que les anomalies des voies urinaires et du squelette sont associées de manière variable. Plus précisément, une voûte vaginale d’une profondeur de 1 à 2 cm est généralement présente et deux cornes utérines rudimentaires peuvent être trouvées1.
Dans le passé, l’intérêt médical principal de MRKHS était de permettre des rapports sexuels normaux, ce qui nécessite généralement la construction d’un néovagin par des approches non chirurgicales ou chirurgicales2. Cependant, les progrès de la médecine de la reproduction permettent actuellement la maternité génétique chez les patientes MRKHS, soit par maternité de substitution3,4 ou, plus récemment, par transplantation utérine5. Bien que la transplantation d’utérus soit encore une procédure expérimentale, la maternité de substitution est disponible dans de nombreux pays du monde6, et les résultats obstétricaux et psychosociaux rapportés sont comparables à ceux de la fécondation in vitro standard et du don d’ovocytes7.
La maternité de substitution et la transplantation d’utérus nécessitent la récupération d’ovocytes et la fécondation in vitro, mais il n’existe aucun consensus sur la façon d’effectuer la collecte d’ovules chez les patientes atteintes de MRKHS. Une approche transvaginale peut être irréalisable en raison d’une élasticité vaginale insuffisante8 même après une vaginoplastie, d’une localisation atypique des ovaires9, ou d’une distance excessive entre les ovaires et la coiffe vaginale 4,10. Dans ces cas, le prélèvement d’ovocytes par laparoscopie représente l’approche optimale en termes d’accès chirurgical. Cependant, comme la plupart des patients atteints de MRKHS subissent actuellement une néovaginoplastie laparoscopique, nous suggérons d’effectuer un prélèvement d’ovocytes par laparoscopie au moment de la chirurgie pour la vaginoplastie11, suivi d’une cryoconservation des ovocytes pour une utilisation future, minimisant ainsi le caractère invasif tout en combinant le traitement de la fonction sexuelle et reproductive des patients MRKHS.
Données démographiques des patients
Vingt-trois patients atteints de MRKH ont subi un traitement avec ce protocole jusqu’à présent. Les résultats anamnestiques, instrumentaux et de laboratoire des patients sont résumés dans le tableau 1. À moins d’indication contraire dans le tableau 1, aucune anomalie congénitale associée n’a été observée.
Le comité d’éthique local du centre de référence tertiaire pour MRKHS (IRCCS San Raffaele University Hospital, Milan, Italie) a été informé et approuvé le protocole avant sa mise en œuvre en juillet 2017. Tous les patients ou tuteurs ont donné leur consentement éclairé signé pour le prélèvement et la cryoconservation des ovocytes par laparoscopie pendant la vaginoplastie et pour l’utilisation de données cliniques / de laboratoire anonymisées à des fins scientifiques.
1. Composition de l’équipe
2. Bilan diagnostique et conseils
3. Planification de l’intervention chirurgicale et de la stimulation ovarienne contrôlée
4. Stimulation ovarienne contrôlée : dose initiale, ajustements posologiques et surveillance, déclenchement de la maturation ovocytaire finale
5. Procédure clinique (laparoscopie): prélèvement d’ovocytes
6. Procédure clinique (laparoscopie): vaginoplastie
NOTE: Les étapes de vaginoplastie restent inchangées par rapport à la technique modifiée laparoscopique de Davydov12.
7. Laboratoire de FIV : la veille du prélèvement d’ovocytes
8. Laboratoire de FIV: procédure de prélèvement d’ovocytes
9. Dénudation des ovocytes
10. Vitrification ovocytaire
11. Soins postopératoires aux patients hospitalisés
12. Soins postopératoires ambulatoires
13. Suivi
Le tableau 2 comprend les données de stimulation ovarienne des patientes, tandis que les principaux résultats chirurgicaux et fonctionnels sont décrits dans le tableau 3. Les procédures laparoscopiques concomitantes de prélèvement d’ovocytes et de vaginoplastie ont été combinées avec succès chez toutes les patientes. En moyenne, 11,4 ± 5,4 ovocytes (moyenne ± écart-type) ont été prélevés et 9,6 ± 4,3 ovocytes MII ont été cryoconservés (tableau 3). Dans notre expérience de la cryoconservation des ovocytes chez les patientes subissant un TAR, le taux de survie des ovocytes post-réchauffement suivant ce protocole de vitrification - défini comme la proportion d’ovocytes morphologiquement intacts au moment de l’injection intracytoplasmique de spermatozoïdes - était de 84,5 ± 19,3. La durée opératoire moyenne totale était de 114 ± 17 minutes, la perte de sang peropératoire était insignifiante (<50 ml) chez tous les patients et aucun événement indésirable peropératoire n’a été observé. Le cathéter urinaire et la gaze vaginale ont été retirés le jour 2 après la chirurgie chez tous les patients. Le jour 3 après la chirurgie, les patients ont commencé à utiliser quotidiennement des dilatateurs et ont reçu leur congé le jour 6,0 ± 1,0. Une complication postopératoire est survenue chez un patient (fièvre se développant le jour 5 après la chirurgie et détection de liquide intrapéritonéal à l’échographie transabdominale). Le patient a été traité avec succès avec des antibiotiques administrés par voie orale et a reçu son congé le jour 9 après l’opération. Le suivi après la chirurgie a confirmé le succès anatomique et fonctionnel de la procédure. Aucun des patients n’a signalé de limitation de ses activités quotidiennes, de douleur ou de symptôme urinaire.
Figure 1 : Protocole de vitrification des ovocytes. Schéma montrant les différentes étapes du flux de travail de vitrification des ovocytes. Les ovocytes sont d’abord placés dans une goutte de WS1 (A), puis dans une goutte de WS2 (B). Mélanger la goutte d’ES1 dans WS2 et après 2 minutes d’incubation, fusionner la goutte de ES2 avec les gouttes précédemment fusionnées (B). Après 2 min, une troisième goutte d’ES3 est fusionnée (B). Après 1 min, placer les ovocytes dans une goutte d’ES4 en incubant pendant 10 min (C). Ensuite, les ovocytes sont déplacés séquentiellement dans les trois gouttes de VS pendant 60 s (D). Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
Caractéristique | Moyenne ± écart-type ou n (%) | |
Âge au moment du diagnostic, années | 13,8 ± 1,5 | |
46 XX caryotype | 23 | |
Âge au moment de la chirurgie, années | 20,3 ± 3,4 | |
Nombre de follicules antraux (AFC), n | 13,2 ± 4,1 | |
Résultats pertinents (instrumentaux/laboratoires) | ||
Rein en fer à cheval | 2 (8.7) | |
Ovaire/ovaires pelviens extra | 3 (13.0) | |
Agénésie rénale unilatérale | 2 (8.7) | |
Cardiomyopathie dilative | 1 (4.3) | |
Mésocardie | 1 (4.3) | |
Vater Syndrome | 1 (4.3) | |
Perte auditive neurosensorielle | 1 (4.3) | |
Pied bot congénital | 1 (4.3) | |
Scoliose | 1 (4.3) | |
Maladie cœliaque | 1 (4.3) | |
Diabète de type 1 | 1 (4.3) | |
Hypothyroïdie auto-immune | 1 (4.3) |
Tableau 1 : Données démographiques, anamnestiques et cliniques des 23 patients traités jusqu’à présent.
Moyenne ± ET | |
Dose initiale de FSH, UI | 196 ± 44 |
Dose totale de FSH, UI | 2 174 ± 506 |
Jours de stimulation, n | 12,1 ± 0,4 |
E2 niveaux au déclenchement, pg/mL | 4 330 ± 2 007 |
Taux de P au moment du déclenchement, ng/mL | 1,06 ± 0,95 |
Tableau 2 : Données de stimulation ovarienne contrôlée des 23 patientes traitées jusqu’à présent. Abréviations : FSH = hormone folliculo-stimulante; E2 = œstradiol; P = progestérone.
Moyenne ± écart-type ou n (%) | |
Temps opératoire, min | 114 ± 17 |
Séjour à l’hôpital, jours | 6,0 ± 1,0 |
Perte de sang, ml | insignifiant |
Ovocytes récupérés, n | 11,4 ± 5,4 |
Ovocytes matures (vitrifiés), n | 9,6 ± 4,3 |
Complications | |
Aucun | 22 (95.6) |
Fièvre postopératoire et détection du liquide intrapéritonéal | 1 (4.3) |
Tableau 3 : Résultats de la procédure laparoscopique combinée de prélèvement d’ovocytes et de vaginoplastie chez les 23 patientes traitées jusqu’à présent.
Ce protocole réduit le caractère invasif dans le traitement du MRKHS en combinant les procédures de vaginoplastie et de prélèvement d’ovocytes. À cette fin, il est essentiel qu’une équipe dédiée soit désignée pour s’assurer que le moment de la COS, de l’intervention chirurgicale et de la vitrification ovocytaire est planifié efficacement.
Les patients atteints de MRKHS pour lesquels cette méthode laparoscopique combinée devrait être la plus bénéfique sont ceux chez qui un prélèvement transvaginal serait considéré comme techniquement difficile ou irréalisable en raison d’ovaires extrapelviens situés latéralement le long des parois pelviennes14 ou à proximité d’organes tels que le foie et la vésicule biliaire9, ou en raison de la présence de reins pelviens. Chez ces patients, une approche transabdominale pourrait être hypothétique et a été rapportée dans la littérature: néanmoins, un nombre moyen de 4,92 ± 1,7 ovocytes a été recueilli15, suggérant un prélèvement sous-optimal en raison de limitations techniques. En outre, une approche transabdominale peut être difficile ou impossible dans certains cas, comme chez les patientes présentant une épaisseur de paroi abdominale marquée ou une mauvaise visibilité des ovaires en raison des anses sus-jacentes de l’intestin16.
La sécurité est une force remarquable de cette approche. En plus des avantages d’une visualisation et d’un accès optimaux décrits ci-dessus, la combinaison de deux procédures en une seule réduit les risques anesthésiques. Il convient de noter qu’un temps opératoire similaire est maintenu par rapport à celui de la vaginoplastie laparoscopique de Davydov seule, pour laquelle une durée moyenne de 125 minutes a été rapportée dans la littérature12. De plus, le fait que les patientes subissent le COS à un très jeune âge plutôt que plus tard dans la vie n’implique pas un risque accru de syndrome d’hyperstimulation ovarienne pour elles, car cette complication est efficacement évitée en déclenchant la maturation folliculaire finale avec un analogue de la Gn-RH.
Les lignes directrices actuelles pour les MRKHS exigent que les cliniciens examinent les options futures pour avoir des enfants avec des patients et des parents au moment du diagnostic afin de les aider à faire face à la maladie et à ses implications1. L’adoption, la maternité de substitution ou la greffe utérine sont les solutions disponibles, les deux options pour la maternité biologique nécessitant le prélèvement d’ovocytes17. Cette approche laparoscopique combinée pourrait donc également être particulièrement bénéfique chez les patients atteints de MRKHS exprimant une détresse majeure à propos de leur diagnostic d’infertilité18. En fait, des enquêtes ont montré que l’infertilité peut être l’une des conditions les plus difficiles à accepter pour les patients recevant le diagnostic de MRKHS19. La cryoconservation précoce des ovocytes chez les patientes désireuses d’une future progéniture génétique pourrait atténuer leur détresse psychologique, par rapport au report de cette intervention invasive nécessaire à une date indéfinie dans le futur.
Cependant, comme principale limite à cette approche, toutes les patientes qui optent pour la cryoconservation des ovocytes dès le moment de la vaginoplastie ne poursuivront pas leur désir de maternité génétique dans leurs dernières années d’âge adulte. Pour cette raison, l’équipe devrait également obtenir et consigner la décision de la patiente concernant l’utilisation de ses ovocytes dans le cas où elle cesserait de rénover la cryoconservation (c.-à-d. élimination, don à des fins de recherche, don ou vente pour reproduction hétérologue lorsque cela est légal).
Comme modification possible de cette technique, nous prévoyons l’utilisation de sondes échographiques laparoscopiques, qui pourraient aider l’expert en infertilité à perforer les follicules situés loin de la surface ovarienne. Enfin, nous envisageons que le renforcement de l’expertise dans le prélèvement d’ovocytes laparoscopiques pour la préservation de la fertilité à l’occasion d’autres procédures pourrait permettre la disponibilité de cette option. À titre d’exemple, les patients subissant d’autres procédures laparoscopiques telles que la myomectomie et présentant une indication de préservation de la fertilité pourraient bénéficier de cette approche.
Les auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts à divulguer.
Aucun financement spécifique n’a été reçu pour ce travail.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Oocyte retrieval procedure | |||
Equipment | |||
CO2 O2 Incubator | Sanyo | ||
Incubator | Thermo Scientific | ||
Laminar Flow Hood | Cooper Surgical | ||
Portable incubator | Cooper Surgical | ||
Stereomicroscope | Nikon | ||
Consumables | |||
14 mL Polystyrene Round-Bottom Tube | Falcon | 352057 | |
4-well dish | Nunc | 144444 | |
60 mm Petri dish | Nunc | FA9150270 | |
90 mm Petri dish | Nunc | FA9150360 | |
Human Serum Albumin 100 mg/ml in Normal Saline (5%) | Origio | 3001 | |
Mineral oil for embryo culture | Origio | 4008 | |
One Well Dish | Oosafe | OOPW-CW05 | |
Quinn’s Advantage Fertilization medium SAGE | Origio | 1020 | |
Quinn’s Advantage medium with HEPES | Origio | 1024 | |
Sterile glass pasteur pipettes | |||
Oocyte denudation | |||
Equipment | |||
CO2 O2 Incubator | Sanyo | ||
Flexipet adjustable handle set | Cook | G18674 | |
Incubator | Thermo Scientific | ||
Laminar Flow Hood | Cooper Surgical | ||
Stereomicroscope | Nikon | ||
Consumables | |||
4-well dish | Nunc | 144444 | |
CSCM (Continuos single culture) medium | Fujifilm irvine Scientific | 90165 | |
Human Albumin 100 mg/mL in Normal Saline (5%) | Origio | 3001 | |
Hyaluronidase | Fujifilm Irvine Scientific | 90101 | |
IVF culture 60 mm petri dish | Nunc | FA9150270 | |
Mineral oil for embryo culture | Origio | 4008 | |
One Well Dish | Oosafe | OOPW-CW05 | |
Quinn’s Advantage medium with HEPES | Origio | 1024 | |
Serum Substitute Supplement | Fujifilm irvine Scientific | 99193 | |
Sterile glass pasteur pipettes | |||
Stripping pipette tips (140 μm) | Cook | K-FPIP-1140-10BS-5 | |
Stripping pipette tips (170 μm) | Cook | K-FPIP-1170-10BS-5 | |
Oocyte vitrification | |||
35 mm Petri dish | NUNC | 150255 | |
60 mm Petri dish | NUNC | 150270 | |
90 mm Petri dish | NUNC | 150360 | |
Container for Cooling rack | Kitazato | ||
Cryodevice/cryotop | Kitazato | 81111 | |
Electronic timer | |||
Flexipet | COOK | K- 1000 | |
Gilson Pipetman | Gilson | F123601 | |
Lab Printer LabXpert | Brady | XSL-86-461 | |
Tips 20-200 µL | Thermo Scientific | 2160G | |
Tips 2-20 µL | Thermo Scientific | 2139-HR | |
Visotubes | Cryo Bio System | 20 | |
Vitrification Freeze Kit | Fujifilm Irvine Scientific | 90133-SO | |
Vitrification Thaw kit | Fujifilm Irvine Scientific | 90137-SO |
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