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* Estos autores han contribuido por igual
Un equipo dedicado puede ofrecer a las pacientes de Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser la opción de realizar estimulación ovárica controlada y criopreservación de ovocitos en el momento de la vaginoplastia laparoscópica.
En pacientes con síndrome de Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser (MRKHS) que están programadas para vaginoplastia laparoscópica y tienen un deseo de maternidad biológica, proponemos que se realice una recuperación laparoscópica concomitante de ovocitos para criopreservación. La recuperación de ovocitos se persigue al comienzo de la laparoscopia. Se colocan trócares de 5 mm derecho e izquierdo, a través del cual se utiliza una aguja de aspiración de óvulo de 17 G para la punción de los ovarios derecho e izquierdo, respectivamente. Para facilitar la exposición de los folículos, los ovarios se movilizan y se sostienen con fórceps laparoscópicos.
Al aspirar múltiples folículos cerca uno del otro, la punta de la aguja se retiene en el ovario para reducir el número de veces que la corteza ovárica está paralizada y debido al riesgo inherente de sangrado. Los pasos posteriores no cambian en comparación con la técnica modificada laparoscópica de Davydov para la vaginoplastia. Antes de la cirugía, la estimulación ovárica controlada se realiza con un protocolo antagonista de la hormona liberadora de hormona gonadotropina (Gn-RH), y el procedimiento concomitante de recuperación de ovocitos y vaginoplastia se programa 36 h después del desencadenante final de la maduración folicular. El líquido folicular se recoge en los mismos tubos estériles de 10 ml utilizados durante la recuperación transvaginal de ovocitos y se transfiere en un bloque de calentamiento (37 °C) al laboratorio de reproducción asistida, donde se vitrifican ovocitos maduros (metafase II).
En este caso, una serie de 23 mujeres con MRKH, ovocitos fueron recuperados con éxito y criopreservados en todas las pacientes; La vaginoplastia se realizó posteriormente sin modificaciones, y la atención postoperatoria para pacientes hospitalizados y ambulatorios (día de la retirada del catéter urinario, día del alta hospitalaria, uso del dilatador y comodidad en el seguimiento) no se vio afectada. Una complicación postoperatoria ocurrió en un paciente (fiebre que se desarrolló el día 5 después de la cirugía y detección de líquido intraperitoneal en la ecografía transabdominal) y se resolvió después del tratamiento conservador. En lugar de realizar vaginoplastia quirúrgica y retrasar la recuperación de ovocitos en pacientes con MRKH, este enfoque combina ambos procedimientos en una sola laparoscopia, minimizando así la invasividad quirúrgica y los riesgos anestésicosicos.
Con una incidencia de aproximadamente 1 de cada 4-10.000 mujeres, MRKHS es la causa del 15% de los casos de amenorrea primaria. MRKHS se caracteriza por la ausencia congénita del segmento superior de la vagina y el útero, mientras que las anomalías del tracto urinario y esquelético se asocian de manera variable. Más específicamente, una bóveda vaginal con una profundidad de 1-2 cm suele estar presente, y se pueden encontrar dos cuernos uterinos rudimentarios1.
En el pasado, el interés médico primario en MRKHS era permitir las relaciones sexuales normales, que generalmente requieren la construcción de una neovagina por abordajes no quirúrgicos o quirúrgicos2. Sin embargo, los avances en medicina reproductiva actualmente permiten la maternidad genética en pacientes con MRKHS, ya sea por subrogación3,4 o, más recientemente, por trasplante de útero5. Si bien el trasplante de útero es todavía un procedimiento experimental, la subrogación está disponible en muchos países del mundo6, y los resultados obstétricos y psicosociales informados son comparables a los de la fertilización in vitro estándar y la donación de ovocitos7.
Tanto la gestación subrogada como el trasplante de útero requieren la recuperación de ovocitos y la fertilización in vitro, pero no existe consenso sobre cómo realizar la recolección de óvulos en pacientes con MRKHS. El abordaje transvaginal puede ser inviable debido a la elasticidad vaginal insuficiente8 incluso después de la vaginoplastia, la localización atípica de los ovarios9 o la distancia excesiva entre los ovarios y el manguito vaginal 4,10. En estos casos, la recuperación laparoscópica de ovocitos representa el enfoque óptimo en términos de acceso quirúrgico. Sin embargo, como la mayoría de las pacientes con MRKHS actualmente se someten a neovaginoplastia laparoscópica, sugerimos realizar una recuperación laparoscópica de ovocitos en el momento de la cirugía para la vaginoplastia11, seguida de la criopreservación de ovocitos para uso futuro, minimizando así la invasividad y combinando el tratamiento de la función sexual y reproductiva de las pacientes con MRKHS.
Datos demográficos de los pacientes
Veintitrés pacientes con MRKH se sometieron a tratamiento con este protocolo hasta el momento. Los hallazgos anamnésicos, instrumentales y de laboratorio de los pacientes se resumen en la Tabla 1. A menos que se especifique en la Tabla 1, no se encontraron anomalías congénitas asociadas.
El comité ético local en el centro de referencia terciaria para MRKHS (IRCCS San Raffaele University Hospital, Milán, Italia) fue notificado y aprobó el protocolo antes de su implementación en julio de 2017. Todos los pacientes o tutores dieron su consentimiento informado firmado para la recuperación laparoscópica de ovocitos y la criopreservación durante la vaginoplastia y para el uso de datos clínicos/de laboratorio anónimos con fines científicos.
1. Composición del equipo
2. Análisis diagnóstico y asesoramiento
3. Programación del procedimiento quirúrgico y de la estimulación ovárica controlada
4. Estimulación ovárica controlada: dosis inicial, ajustes de dosis y seguimiento, activación de la maduración final de los ovocitos
5. Procedimiento clínico (laparoscopia): recuperación de ovocitos
6. Procedimiento clínico (laparoscopia): vaginoplastia
NOTA: Los pasos de la vaginoplastia permanecen sin cambios en comparación con la técnica modificada laparoscópica de Davydov12.
7. Laboratorio de FIV: el día antes de la recuperación de ovocitos
8. Laboratorio de FIV: procedimiento de recuperación de ovocitos
9. Denudación de ovocitos
10. Vitrificación de ovocitos
11. Atención postoperatoria para pacientes hospitalizados
12. Atención postoperatoria ambulatoria
13. Seguimiento
La Tabla 2 incluye los datos de estimulación ovárica de las pacientes, mientras que los principales resultados quirúrgicos y funcionales se describen en la Tabla 3. Los procedimientos laparoscópicos concomitantes de recuperación de ovocitos y vaginoplastia se combinaron con éxito en todas las pacientes. Se recuperaron un promedio de 11,4 ± 5,4 ovocitos (media ± DE) y 9,6 ± 4,3 ovocitos MII fueron criopreservados (Tabla 3). En nuestra experiencia con la criopreservación de ovocitos en pacientes sometidas a TRA, la tasa de supervivencia de ovocitos postcalentamiento siguiendo este protocolo de vitrificación, definida como la proporción de ovocitos morfológicamente intactos en el momento de la inyección intracitoplasmática de espermatozoides, fue de 84,5 ± 19,3. El tiempo operatorio promedio total fue de 114 ± 17 min, la pérdida de sangre intraoperatoria fue insignificante (<50 ml) en todos los pacientes y no se observaron eventos adversos intraoperatorios. El catéter urinario y la gasa vaginal se retiraron el día 2 después de la cirugía en todas las pacientes. En el día 3 después de la cirugía, los pacientes comenzaron el uso diario del dilatador y fueron dados de alta en el día 6,0 ± 1,0. Una complicación postoperatoria ocurrió en un paciente (fiebre que se desarrolló el día 5 después de la cirugía y detección de líquido intraperitoneal en la ecografía transabdominal). El paciente fue tratado con éxito con antibióticos administrados por vía oral y dado de alta el día 9 después de la cirugía. El seguimiento después de la cirugía confirmó el éxito anatómico y funcional del procedimiento. Ninguno de los pacientes informó ninguna limitación a sus actividades de la vida diaria, ningún dolor o síntoma urinario.
Figura 1: Protocolo de vitrificación ovocitos. Esquema que muestra los diversos pasos del flujo de trabajo de vitrificación de los ovocitos. Los ovocitos se colocan primero en una gota de WS1 (A) y luego en una gota de WS2 (B). Mezcle la gota de ES1 en WS2 y después de 2 minutos de incubación, combine la gota de ES2 con las gotas previamente fusionadas (B). Después de 2 minutos, una tercera gota de ES3 se fusiona (B). Después de 1 min, colocar los ovocitos en una gota de ES4 incubando durante 10 min (C). Luego, los ovocitos se mueven secuencialmente en las tres gotas de VS durante 60 s (D). Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Característica | Media ± DE o n (%) | |
Edad en el momento del diagnóstico, años | 13,8 ± 1,5 | |
Cariotipo 46 XX | 23 | |
Edad en el momento de la cirugía, años | 20,3 ± 3,4 | |
Recuento de folículos antrales (AFC), n | 13.2 ± 4.1 | |
Hallazgos relevantes (instrumentales/de laboratorio) | ||
Riñón en herradura | 2 (8.7) | |
Ovario/ovarios pélvicos adicionales | 3 (13.0) | |
Agenesia renal unilateral | 2 (8.7) | |
Miocardiopatía dilatativa | 1 (4.3) | |
Mesocardia | 1 (4.3) | |
Síndrome de Vater | 1 (4.3) | |
Pérdida auditiva neurosensorial | 1 (4.3) | |
Pie zambo congénito | 1 (4.3) | |
Escoliosis | 1 (4.3) | |
Enfermedad celíaca | 1 (4.3) | |
Diabetes tipo 1 | 1 (4.3) | |
Hipotiroidismo autoinmune | 1 (4.3) |
Tabla 1: Datos demográficos, anamnésicos y clínicos de los 23 pacientes tratados hasta el momento.
Media ± SD | |
Dosis inicial de FSH, UI | 196 ± 44 |
Dosis total de FSH, UI | 2.174 ± 506 |
Días de estimulación, n | 12,1 ± 0,4 |
Niveles de E2 en el momento de la activación, pg/mL | 4.330 ± 2.007 |
Niveles de p en el momento de la activación, ng/mL | 1,06 ± 0,95 |
Tabla 2: Datos de estimulación ovárica controlada de las 23 pacientes tratadas hasta el momento. Abreviaturas: FSH = hormona foliculoestimulante; E2 = estradiol; P = progesterona.
Media ± DE o n (%) | |
Tiempo operatorio, min | 114 ± 17 |
Estancia hospitalaria, días | 6.0 ± 1.0 |
Pérdida de sangre, mL | insignificante |
Ovocitos recuperados, n | 11,4 ± 5,4 |
Ovocitos maduros (vitrificados), n | 9.6 ± 4.3 |
Complicaciones | |
Ninguno | 22 (95.6) |
Fiebre postoperatoria y detección de líquido intraperitoneal | 1 (4.3) |
Tabla 3: Resultados del procedimiento laparoscópico combinado de recuperación de ovocitos y vaginoplastia en las 23 pacientes tratadas hasta el momento.
Este protocolo reduce la invasividad en el tratamiento de MRKHS al combinar los procedimientos de vaginoplastia y recuperación de ovocitos. Para este propósito, es crucial que se designe un equipo dedicado para garantizar que el momento del COS, el procedimiento quirúrgico y la vitrificación de ovocitos se programen de manera eficiente.
Los pacientes con MRKHS para quienes se espera que este método laparoscópico combinado sea más beneficioso son aquellos en quienes una recuperación transvaginal se consideraría técnicamente desafiante o inviable debido a los ovarios extrapélvicos ubicados lateralmente a lo largo de las paredes pélvicas14 o en las proximidades de órganos como el hígado y la vesícula biliar9, o debido a la presencia de riñones pélvicos. En estas pacientes, se podría hipotetizar un abordaje transabdominal y ha sido reportado en la literatura: sin embargo, se recolectó un número medio de 4,92 ± 1,7 ovocitos15, lo que sugiere una recuperación subóptima debido a limitaciones técnicas. Además, un abordaje transabdominal puede ser difícil o imposible en algunos casos, como en pacientes con marcado grosor de la pared abdominal o mala visibilidad de los ovarios debido a asas suprayacentes del intestino16.
La seguridad es una fortaleza notable de este enfoque. Además de las ventajas de visualización y acceso óptimos descritos anteriormente, la combinación de dos procedimientos en uno solo reduce los riesgos anestésicosicos. Cabe destacar que se mantiene un tiempo operatorio similar en comparación con el de la vaginoplastia laparoscópica de Davydov sola, para la cual se informó una duración media de 125 min en la literatura12. Además, el hecho de que las pacientes se sometan a COS a una edad muy temprana en lugar de más tarde en la vida no implica un mayor riesgo de síndrome de hiperestimulación ovárica para ellas, ya que esta complicación se evita de manera eficiente al desencadenar la maduración folicular final con un análogo de Gn-RH.
Las guías actuales para MRKHS requieren que los médicos aborden las opciones futuras para tener hijos con pacientes y padres en el momento del diagnóstico como un medio para ayudarlos a enfrentar la enfermedad y sus implicaciones1. La adopción, la gestación subrogada o el trasplante uterino son las soluciones disponibles, con ambas opciones para la maternidad biológica que requieren recuperación de ovocitos17. Por lo tanto, este enfoque laparoscópico combinado también podría ser particularmente beneficioso en aquellos pacientes con MRKHS que expresan una gran angustia por su diagnóstico de infertilidad18. De hecho, las encuestas han demostrado que la infertilidad puede ser una de las condiciones más difíciles de aceptar para los pacientes que reciben el diagnóstico de MRKHS19. La criopreservación temprana de ovocitos en pacientes con un deseo de descendencia genética futura podría aliviar su angustia psicológica, en comparación con retrasar esta intervención invasiva necesaria a una fecha indefinida en el futuro.
Sin embargo, como la principal limitación de este enfoque, no todas las pacientes que optan por la criopreservación de ovocitos tan pronto como en el momento de la vaginoplastia eventualmente perseguirán su deseo de maternidad genética en sus últimos años de edad adulta. Por esta razón, el equipo también debe obtener y registrar la decisión de la paciente con respecto al uso de sus ovocitos en caso de que deje de renovar la criopreservación (es decir, eliminación, donación con fines de investigación, donación o venta para reproducción heteróloga cuando sea legal).
Como posible modificación de esta técnica, prevemos el uso de sondas de ultrasonido laparoscópico, que podrían ayudar al experto en infertilidad a perforar los folículos que se encuentran lejos de la superficie ovárica. Por último, prevemos que la adquisición de experiencia en la recuperación laparoscópica de ovocitos para la preservación de la fertilidad en el momento de otros procedimientos podría permitir la disponibilidad de esta opción. Como ejemplo, los pacientes sometidos a otros procedimientos laparoscópicos como la miomectomía y que muestran una indicación para la preservación de la fertilidad podrían beneficiarse de este enfoque.
Los autores no tienen ningún conflicto de intereses que revelar.
No se recibió financiación específica para este trabajo.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Oocyte retrieval procedure | |||
Equipment | |||
CO2 O2 Incubator | Sanyo | ||
Incubator | Thermo Scientific | ||
Laminar Flow Hood | Cooper Surgical | ||
Portable incubator | Cooper Surgical | ||
Stereomicroscope | Nikon | ||
Consumables | |||
14 mL Polystyrene Round-Bottom Tube | Falcon | 352057 | |
4-well dish | Nunc | 144444 | |
60 mm Petri dish | Nunc | FA9150270 | |
90 mm Petri dish | Nunc | FA9150360 | |
Human Serum Albumin 100 mg/ml in Normal Saline (5%) | Origio | 3001 | |
Mineral oil for embryo culture | Origio | 4008 | |
One Well Dish | Oosafe | OOPW-CW05 | |
Quinn’s Advantage Fertilization medium SAGE | Origio | 1020 | |
Quinn’s Advantage medium with HEPES | Origio | 1024 | |
Sterile glass pasteur pipettes | |||
Oocyte denudation | |||
Equipment | |||
CO2 O2 Incubator | Sanyo | ||
Flexipet adjustable handle set | Cook | G18674 | |
Incubator | Thermo Scientific | ||
Laminar Flow Hood | Cooper Surgical | ||
Stereomicroscope | Nikon | ||
Consumables | |||
4-well dish | Nunc | 144444 | |
CSCM (Continuos single culture) medium | Fujifilm irvine Scientific | 90165 | |
Human Albumin 100 mg/mL in Normal Saline (5%) | Origio | 3001 | |
Hyaluronidase | Fujifilm Irvine Scientific | 90101 | |
IVF culture 60 mm petri dish | Nunc | FA9150270 | |
Mineral oil for embryo culture | Origio | 4008 | |
One Well Dish | Oosafe | OOPW-CW05 | |
Quinn’s Advantage medium with HEPES | Origio | 1024 | |
Serum Substitute Supplement | Fujifilm irvine Scientific | 99193 | |
Sterile glass pasteur pipettes | |||
Stripping pipette tips (140 μm) | Cook | K-FPIP-1140-10BS-5 | |
Stripping pipette tips (170 μm) | Cook | K-FPIP-1170-10BS-5 | |
Oocyte vitrification | |||
35 mm Petri dish | NUNC | 150255 | |
60 mm Petri dish | NUNC | 150270 | |
90 mm Petri dish | NUNC | 150360 | |
Container for Cooling rack | Kitazato | ||
Cryodevice/cryotop | Kitazato | 81111 | |
Electronic timer | |||
Flexipet | COOK | K- 1000 | |
Gilson Pipetman | Gilson | F123601 | |
Lab Printer LabXpert | Brady | XSL-86-461 | |
Tips 20-200 µL | Thermo Scientific | 2160G | |
Tips 2-20 µL | Thermo Scientific | 2139-HR | |
Visotubes | Cryo Bio System | 20 | |
Vitrification Freeze Kit | Fujifilm Irvine Scientific | 90133-SO | |
Vitrification Thaw kit | Fujifilm Irvine Scientific | 90137-SO |
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