JoVE Journal

Biochemistry

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Nanyang Technological University

Einzelschritt-Reinigung der makromolekularen komplexe mit RNA an Biotin und ein Foto-spaltbaren Linker befestigt

Transkript

RNA/Proteinkomplexe gereinigt mit Botin Streptavidin-Strategie sind Lösung unter denaturierenden Bedingungen in einer Form ungeeignet für die weitere Reinigung und Funktionsanalyse eluiert. Hier beschreiben wir eine Änderung dieser Strategie, die einen Foto-spaltbaren Linker in RNA und einem sanften UV-Elution Schritt nachgeben native und voll funktionsfähige RNA/Proteinkomplexe nutzt.

Kapitel in diesem Video

0:04

Title

0:51

Substrate Preparation

1:28

Complex Assembly

2:14

Immobilization of the RNA/protein Complexes on Streptavidin Beads

4:00

UV-Elution

5:08

Sample Analysis by Silver Staining Followed by Mass Spectrometry

5:59

Results: Analysis of UV-eluted Complexes

7:36

Conclusion

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