登录

啮齿动物的处理和克制技术

Overview

来源: 凯斯图尔特, RVT, RLATG, CMAR;瓦莱丽. 施罗德, RVT, RLATG。圣母大学, #160;

已经证明, 即使是最小的老鼠和老鼠的处理对动物也有压力。处理笼子改变和其他无创程序导致心率、血压和其他生理参数, 如血清皮质酮水平的增加。波动可持续数小时。注射和采血所需的克制方法也会导致可能影响科学数据的生理变化。需要对老鼠和老鼠进行适当的训练, 以尽量减少对动物的影响。 1 小鼠和大鼠可以用约束装置或化学试剂手动约束。本手稿涵盖了手动方法和约束装置的使用。所有的限制方法包括把动物从笼子里抬起来的过程.

Principles

从笼子里取出老鼠或老鼠的常用方法包括用钳子将动物的尾巴抬起, 用管子或其他浓缩装置抓住尾巴的颈背或底部, 2 抓住周围的身体, 或舀入手掌的动物。 34

当用尾巴抬起一只老鼠或老鼠时, 必须把尾巴抓在靠近动物臀部的底部。如果动物从尾巴末端被举, 尾巴的皮肤能剥脱和被拉扯由身体重量的重音;脱的损伤会导致尾部被截肢。 3 将动物从一个笼子移到另一笼中, 或移动到工作表面, 应该迅速而稳定地进行。将动物悬挂在空气中的任何时间, 不仅会引起窘迫, 而且还会使动物扭动或挣扎, 可能造成对尾部的伤害。处理者不应该把他们的手放在动物下面, 因为它是由它的尾巴解除的--它是本能的动物试图抓住手为安全, 造成叮咬.

在许多鼠标生产设备中, 钳子被用来把动物从笼子里移走。这是为生物安全, 因为它被认为有较少的机会, 从动物到动物的交叉污染。在处理个别动物或动物群之间, 应将镊子的尖端储存在酒精中。有各种各样的钳子用来抓老鼠。最常用的包括长敷料钳与创伤提示-或与橡胶, 塑料, 或硅胶管放置在镊子的两端, 以提供一个垫或舌钳橡胶夹具。 4

钳可以在颈部的颈背或尾部的底部抓住鼠标。大多数小鼠很快就习惯了这种方法, 并没有挣扎。然而, 耐心和实践是必要的变得熟练捉住动物。初学者将需要训练如何紧紧抓住老鼠, 特别是在颈背, 因为这可能会干扰呼吸。在尾巴上使用镊子时, 必须小心把钳子放在尾巴底部附近, 以避免受伤.

对于焦虑或陈列影响的动物, 把管子放进笼子可能会降低搬运难度, 减少对日常畜牧业的飞行/惊吓反应。由孔材料制成的管子可以加成浓缩物, 作为动物避难或寻求安全避难所的场所。这样的管子可以是开放式的或一端封顶的。大多数老鼠或老鼠会心甘情愿地进入管子, 当他们的笼子打开, 或者他们可以很容易地引导到管。一旦动物在试管内, 开放的一端被覆盖, 运送动物到新的位置。当放置在一个新鲜的笼子, 管可以轻轻地向上倾斜, 以鼓励动物离开它。动物很容易适应这种笼子的改变方法, 并会立即进入管, 使这种方法作为其他动物从一个地方移动到另一个快速和容易。虽然管不必须存在于家庭笼中是有效的, 有一个管在主机箱增加了对一个熟悉的安全站点的识别, 以及提供笼丰富。 2

一些机构更喜欢将动物举起来进行例行处理, 特别是处理老鼠。动物必须从小就习惯于这种方法。2-4 周龄的小鼠倾向于直跳。把一只手放在老鼠身上, #39 的背部会使它跳入处理程序的手掌, 让它被抓住。在把老鼠放进另一个笼子之前, 可能需要另一只手来防止它的蠕动。成年大鼠被轻轻地抓住胸腔周围, 举起, 并迅速放置到另一个笼子, 或在表面上.

当用小鼠或老鼠来改变笼子时, 经常需要在保持巢完好无损的情况下去除它们。使用两只手舀巢和新生儿从笼底, 完整的巢被移动到一个新的笼子。然而, 为了避免掉落幼崽, 每只手的手指必须紧紧地放在一起。一旦移动到一个新的笼子, 很重要的是要验证幼崽都存在。在移动它们之前和之后对幼崽进行计数是可取的。可以用塑料勺代替手。如果使用此方法, 应将手放在勺顶部, 以防止新生儿摆动或跳出勺。这种转移幼崽的方法, 与幼崽的个体处理相比, 对幼崽和大坝都不那么痛苦.

技术规程的限制要求有信心和坚定, 但温柔, 触摸。试探性的方法可能导致处理程序叮咬。如果处理反冲作为动物的尖叫, 该动物很快学会如何避免克制。然而, 攻击性的处理可能导致啮齿动物的受伤或死亡。一个自信而温和的方法的平衡是啮齿动物处理的目标.

老鼠和小老鼠可以通过抓住颈部颈背的皮肤来抑制, 称为 scruffing。这一方法的预防措施包括既抓皮肤太紧或过于松散。如果皮肤抓得太紧, 气道就会变得狭窄, 这会导致死亡。如果抓得太松, 动物将能够转动它的头并且可能咬住处理程序.

被搅动或极度恐惧的动物更容易叮咬。最好在处理之前先让动物平静下来。有各种各样的平静的技术尝试了以不同的成功。最可靠的方法是使用某种化学抑制, 通常是吸入麻醉剂。异氟醚或七氟醚是短效吸入麻醉药, 只有处理需要将动物从笼中转移到诱导室。一旦动物被麻醉 , 它们就可以纵或被人为地限制在手术过程中 .

使老鼠镇定的方法是把它裹在厚实的毛巾上, 让它藏在毛巾下面。把它放在实验室的外套袖子, 使他们可以埋葬他们的头在肘部的褶皱也可以提供一种安全的安全感的动物。同样的结果也可以通过把动物放在一个黑暗的区域里几分钟来实现.

Procedure

1. Scruffing

小鼠最常使用 Scruffing 技术进行限制, 但幼鼠也可以用这种方法加以抑制。成年大鼠更难以抑制这种技术, 因为更肌肉颈部, 减少了松散的皮肤数量, 并反感这种方法.

  1. one-handed 约束方法通常在非常平静的小鼠菌株中使用, 如裸裸、无缺陷和一些宝石菌株。然而, 有更大的风险被咬了这种方法。在尝试 one-handed 方法之前, 新手动物操作人员应该对 two-handed 约束技术感到舒适。
    1. 将动物放在它们可以抓取的表面上, 如电线条笼顶或垫子.
    2. 握住 nondominant 手的第三和第四手指之间的尾巴, 并采用柔和的向后牵引。这使动物保持在表面上, 并导致身体被拉长和拉长.
    3. 转动手, 使手掌朝向动物的身体.
    4. 用食指和拇指将啮齿动物钉在肩上.
    5. 轻轻地将拇指和食指向前滑动, 并将其定位在头骨的底部。抓住颈部松弛的皮肤, 抬起动物.
    6. 使用中指通过将背部皮肤固定在拇指的底部来稳定背部的动物.
  2. 双手约束
    1. 将动物置于它们可以抓取的表面上.
    2. 将尾巴放在底座 (在身体的1-2 厘米以内), 用占主导地位的手, 轻轻向后牵引。这使动物保持在表面上, 并导致身体被拉长和拉长.
    3. 用食指和拇指的另一只手, 针在肩上的啮齿动物.
    4. 轻轻地将拇指和食指向前滑动, 并将其定位在头骨的底部。抓住颈部松弛的皮肤, 抬起动物.
    5. 使用剩余的手指通过将背部皮肤固定在拇指底部来稳定背部的动物.
    6. 通过用第四根手指将尾巴固定在手掌上, 或者通过允许后肢在固体表面上休息来保护后腿.

Figure 1
图 1: 鼠标的单手和 two-handed 约束方法

2. 手套

有各种手套可供处理者穿戴以防止老鼠叮咬。由于失去了灵巧, 它们通常不适合与老鼠一起工作。经常, 许多手套类型的缺点胜过好处.

  1. 棉帆布工作手套不咬人, 但提供少量保护从牙和钉子。他们不提供良好的抓地力, 因为他们轻轻地滑过毛皮.
  2. 优质皮革手套是抗咬性的。然而, 他们的僵硬导致了灵巧度的降低。皮革的厚度, 虽然保护, 减少触觉敏锐度和手移动性.
  3. 链邮件手套为动物处理员提供了一种心理安全感。然而, 他们是沉重和大多数老鼠和 #39; 牙齿可以穿透之间的联系。此外, 这些手套减少手动灵巧, 如果使用不当是更危险的动物和处理者.
  4. 通常用于洗碗的家庭使用的橡皮绝缘手套提供了一个有质感的手掌表面, 并允许对啮齿类动物的毛发进行安全的控制。弹性乳胶表面厚到足以抵御啮齿动物的门牙穿刺, 而且足够薄, 能够感觉和控制动物。主要的缺点是, 它们是乳胶制成的, 这是一个关注的人与乳胶过敏。此外, 这些手套的光线恶化, 需要定期更换.

3。身体约束

  1. #34; 雷克斯抓地力和 #34; 是一种 two-handed 的大鼠抑制方法。
    1. 将一只老鼠放在可以被抓住的表面上.
    2. 用一只手握住尾部的底座, 将另一只手向上和向后, 然后用食指和中指分开.
    3. 将手放在肩上, 食指放在头部一侧, 中指在另一侧。头部两侧的手指限制头部的侧向运动.
    4. 用第三个手指、第四根手指和拇指环绕前腿后面的身体。必须注意避免压缩胸部和损害呼吸。这种抓地力防止老鼠向前或向后地移动从手.
    5. 通过抓住尾部的底座或不抱上后腿来稳定尾部和后腿.
    6. 这种限制对较大的老鼠很有效, 当需要访问头部时.
  2. 前肢交错方法是一种 two-handed 约束方法。
    1. 将动物放在它们可以抓取的表面上.
    2. 将尾巴放在底座 (在身体的1-2 厘米以内), 用占优势的手, 轻轻向后牵引。这会使动物抓在表面上, 并导致身体被拉长和拉长.
    3. 将另一只手从背后带到后面.
    4. 将老鼠直接抓在肩膀后面, 手指放在一侧, 拇指放在胸部的另一侧, 然后把手向前滑动, 从而迫使前腿向前.
    5. 前肢将在鼠和 #39 的下巴下交叉, 形成一个物理屏障, 防止老鼠把头向下移向手指.
    6. 小心避免压缩胸部和损害呼吸.

Figure 2
图 2: 霸王龙抓地力和前肢交错法抑制大鼠

4。约束设备

Figure 3
图 3: 布鲁姆式抑制设备

Figure 4
图 4: 平底啮齿动物抑制剂

  1. 刚性设备有多种类型, 一般由孔材料制成, 易于消毒。
    1. 布鲁姆式的限制旨在提供对静脉注射的尾巴的访问。它是由一个插槽, 运行沿全长的设备, 这使得动物被拉入抑制剂后躯第一。一个塑料鼻甲插入, 以保持动物到位。
      1. 松开螺钉, 从约束管的主体中卸下鼻甲.
      2. <抓住尾巴底部的动物, 将约束管定位, 使管长的狭缝朝上。先将动物轻轻拉入克制装置后躯.
      3. 在平滑的表面放置动物通常是有利的, 以利于将其放置到试管中.
      4. 一旦动物完全进入试管, 并被拉到闭合的末端-滑动塑料鼻甲进入管咬合开口.
      5. 放置鼻甲组件, 使动物和 #39 的鼻子处于中心开口。不要把鼻甲放得太紧, 以至于动物不能呼吸.
    2. flat-bottomed 啮齿动物抑制剂是一个具有开口的半圆筒, 允许从约束装置的顶部和底部进行访问。一个刚性塑料门入到几个毕业的插槽之一 , 以容纳动物在设备。
      1. 将该动物由尾部的底部与主手在平滑的表面上, 或保持在笼顶.
      2. 在另一只手按住 flat-bottomed 约束管, 并角度它, 以便开放的结束是在动物和 #39; s 头在45和 #176; 角度到表/笼顶部表面.
      3. 有些动物会立即进入试管, 而另一些则不情愿, 并要求处理者引导它们进入试管.
      4. 把管子放在动物和 #39 的头上。立即点击动物和 #39 的臀部, 并保持压力, 以防止动物的备份.
      5. 一旦动物处于约束装置中, 将塑料门滑动到适当的插槽中, 以便在约束装置中容纳动物.
    3. 管约束是一个封闭端的有机玻璃气缸, 其中包含用于空气循环的孔或狭缝。有些是修改了宽 slothalf 的长度, cylinderto 容纳后肢体的肌肉注射, 大隐和股血收集, 或进入背部表面皮下注射。
      1. 在平滑的表面上, 或在笼子顶部, 用主要的手抓住动物的尾巴底部.
      2. 在另一只手保持克制管和角度它, 以便开放末端在动物和 #39; s 头在45和 #176; 角度到表/保持架顶部表面.
      3. 一些动物会立即进入试管。其他动物不情愿, 并要求处理者引导他们进入试管.
      4. 把管子放在动物和 #39 的头上。立即点击动物和 #39 的臀部, 并保持压力, 以防止动物的备份.
      5. 颈背和手动引导难以控制的动物进入试管, 让皮肤被举行滑动通过管缝.
      6. 一旦动物处于约束装置中, 就必须咬合开口, 以防止动物的后退.
      7. 根据过程, 将几个手指放在整个开口上.
      8. 将一个胶手套放进开口。手套通常是纹理, 并会抓住有机玻璃表面.
      9. 某些约束管将具有特定于该样式或大小的闭包.

Figure 5
图 5: 管状抑制设备

  1. 柔性位是一次性的柔性塑料锥。它们可以用透明或不透明的塑料。这种塑料很薄, 可以让针头穿透, 而不用从约束装置中取出动物来完成注射。它们的大小不同, 适合于成年和断奶的老鼠和老鼠。
    1. 用剪刀将塑料切开, 以允许进入四肢、尾部和其他注射部位.
    2. 选择适合于该动物的圆锥大小。圆锥应该长到足以延伸2-3 英寸以外的动物和 #39 的臀部.
    3. 将动物插入锥中
      1. 打开圆锥并在上半部分抓住它.
      2. 用占优势的手抓住动物的尾巴底部, 把它放在光滑的表面或笼顶.
      3. 将约束锥放在另一只手上, 并将其角度倾斜, 以便打开的一端位于动物和 #39; s 头在45和 #176; 角度到表/保持架顶部表面.
      4. 一些动物会立即进入锥体。其他动物是不情愿的, 并要求处理者引导他们进入克制锥.
      5. 将圆锥置于动物和 #39 的头部。立即点击动物和 #39 的臀部, 并保持压力, 以防止动物的备份。由于锥孔直径较大, 动物更有可能转过身来退出锥体.
      6. 只要动物进入锥体, 抓住开放末端并且封印它迫使动物到末端.
      7. 通过将塑料折叠到尾部的一侧并将粘合剂夹应用到折叠的塑料上来确保开口的安全, 小心避免夹紧尾部或皮肤。或者, 在尾部均匀地收集塑料, 并将捻栓尽可能靠近身体以确保开口.

Figure 6
图 6: 灵活的抑制剂

5。特定技术过程的约束方法

  1. 腹腔注射需要腹部接触。
    1. Scruffing
      1. 将该动物背在手上, 并将其翻转, 以使腹部暴露。
      2. 倾斜的动物, 使头部指向向下30和 #176; 角度.
      3. 用第四根手指将尾巴固定在手掌上以确保后躯的安全.
      4. 或者, 后躯可以通过将多余的皮肤固定在手指的背部和拇指的底部.
    2. T. 雷克斯抓地力和前肢交错约束方法
      1. 使用上述技术中的任何一种来抓住动物 (只用老鼠).
      2. 用自由的手, 抓住两条后腿以上的典当, 并延长他们尾.
      3. 支持动物的重量, 手掌放在背上.
      4. 倾斜的动物, 使头部指向向下30和 #176; 角度.
      5. 第二个人执行注入.
    3. 刚性抑制剂
      1. 大多数刚性约束装置不能防止动物本能地滚动保持直立。
      2. 如果使用刚性抑制剂, 则将该动物的头部指向下方并与桌面垂直.
    4. 灵活的抑制剂
      1. 当正确放置在一个灵活的塑料锥, 动物无法翻转或左右.
      2. 必须注意定位该动物, 使后肢的四肢足够分离, 以便能够进入腹部.
      3. 当动物被压缩时, 必须在腹面上注射足够低, 以避免脾脏、肝脏、肾脏或胃的穿刺.
  2. 背侧暴露是注射入皮下间隙所必需的。
    1. Scruffing
      1. 使该动物背上并允许它的后腿在一个坚实的平坦的表面上休息.
      2. 抬起颈背, 在颈部和肩部创建一个皮篷.
      3. 将手的重量放在注射小鼠时的表。将重量放在鼠标上会导致窒息.
      4. 将老鼠的体重放在后腿上, 而不是胸部.
      5. 将物质注入到手指下方的空间中的动物身上.
    2. 刚性位
      1. 将动物放在具有足够大的开口的约束装置中, 以使皮肤向上拉。
      2. 可能需要使用镊子来抓皮肤.
      3. 大多数动物保持适当的姿势, 除非约束被旋转.
      4. 当注入完成后, 不要插入防止皮肤从开口中后退的音量.
  3. 后肢的限制对于肌肉注射是必要的; 从隐静脉、股静脉或股动脉取出血; 注入脚。
    1. Scruffing 鼠和小鼠 (200 克以下)
      1. 将动物背上并转动手, 使腹部暴露。
      2. 通过将脚放在手指之间来进入后脚.
      3. 此方法最好仅用于脚注射.
    2. T. rex 手柄或前肢交错
      1. 此方法需要两个人: 一个用于约束身体, 一个用于限制肢体和注射的性能.
      2. 通过抓脚进入大隐静脉、股静脉或动脉, 或注射肌肉来延长鼠和 #39 的后腿.
      3. 将脚的腿放在典当的上方.
    3. 刚性位
      1. 首先将动物置于约束管头中.
      2. 通过将尾部和后躯轻轻地从试管中向后拉来露出尾巴和后腿.
      3. 通过抓住侧面的皮肤并将膝盖伸直, 使腿部固定。这提供了对注射在老鼠或大鼠股四头肌的访问, 并防止动物退出约束装置.
      4. 在具有较大插槽的设备中, 将腿部放置在管外, 以获取用于取样或脚注射的血管.
      5. 那些带有扁平端片的约束管允许管子在桌子上休息并在过程中稳定设备.
      6. 因为这种动物是以这种方式固定的, 所以有可能由一名技术员进行注射或血液取样.
    4. 灵活的约束
      1. 灵活的塑料约束可以通过切口开口来修改, 以适应四肢的暴露.
      2. 所做的开口可以为每种动物量身定做, 或者用于特定的程序.
      3. 由于这种动物是以这种方式获得保护的, 因此单个技术员可以进行注射或对老鼠进行血液取样.

Application and Summary

对笼子的改变和技术程序进行例行处理是实验动物应激的原因。虽然这种压力不是对动物整体福祉的威胁, 但它可以引起生理参数的波动, 从而对研究数据产生不利影响。使用熟练的人员, 适当的技术和设备可以减轻一些压力.

References

  1. Balcombe, J.P., Barnard, N.D., and Sandusky, C. 2004. Laboratory routines cause animal stress. Contemporary Topics. 43:6. 42-51
  2. Gouveia, K. and Hurst, J.L. 2013. Reducing mouse anxiety during handling: effect of experience with handling tubes.
  3. AALAS Learning Library*. Animal handling and restraint in: Working with the laboratory rat. https://www.aalaslearninglibrary.org/Pages/Courses/CourseAllPages.aspx?intLessonID=27691
  4. AALAS Learning Library*. Animal handling and restraint in: Working with the laboratory mouse. https://www.aalaslearninglibrary.org/Pages/Courses/course.aspx?intCourseID=2451&intPageID=94993

*A membership or trial sign up is required to view the material. 

Tags

Rodent HandlingRestraint TechniquesStress In RodentsPhysiological ChangesTraining For Handling RodentsManual Restraint TechniquesRestraining DevicesBasics Of Rodent HandlingLifting Rodents By The TailInjury PreventionMoving Rodents Quickly And Steadily

跳至...

0:00

Overview

1:13

Basics of Rodent Handling

5:09

Manual Restraining Methods

8:37

Rodent Restraint Devices

11:55

Applications

13:02

Summary

此集合中的视频:

article

Now Playing

啮齿动物的处理和克制技术

Lab Animal Research

173.2K Views

article

基本护理程序

Lab Animal Research

27.6K Views

article

育种和断奶的基本原理

Lab Animal Research

35.5K Views

article

啮齿动物识别 I

Lab Animal Research

54.4K Views

article

啮齿动物鉴定 (2)

Lab Animal Research

25.5K Views

article

药物注射 I

Lab Animal Research

99.9K Views

article

药物注射 II

Lab Animal Research

34.6K Views

article

药物注射 III

Lab Animal Research

31.2K Views

article

药物注射 IV

Lab Animal Research

51.2K Views

article

血液采集 I

Lab Animal Research

170.7K Views

article

血液采集 II

Lab Animal Research

72.7K Views

article

麻醉诱导与维护

Lab Animal Research

50.0K Views

article

啮齿动物手术的考虑事项

Lab Animal Research

22.3K Views

article

诊断尸检和组织采集

Lab Animal Research

57.8K Views

article

无菌组织采集

Lab Animal Research

34.7K Views

JoVE Logo

政策

使用条款

隐私

科研

教育

关于 JoVE

版权所属 © 2025 MyJoVE 公司版权所有,本公司不涉及任何医疗业务和医疗服务。