ثقافة مجمعة غير مجزأة لعضلات الهيكل العظمي للفأر لتلخيص هدوء الخلايا الجذعية المتخصصة

يتضمن بحثنا دراسة العضلات الهيكلية السليمة والمريضة مع التركيز بشكل خاص على الخلايا الفضائية. أحد الجوانب الأساسية التي نستكشفها هو تحديد معززات النسخ التي تنسق التعبير الجيني الخاص بالخلية. يسمح لنا هذا البروتوكول بإجراء اختبارات سريعة لتحديد الخصوصية.

في مجال أبحاث العضلات الهيكلية ، كثيرا ما تستخدم أساليب تسلسل الحمض النووي الريبي أحادية الخلية والنواة المفردة لدراسة مجموعات الخلايا المختلفة في التوازن والتجديد والمرض. أيضا ، يمكن عزل الخلايا الساتلية عن طريق فرز الخلايا المنشطة بالفلورة ، أو FACS ، وزراعتها لاختبار الفرضيات والتحقق من صحة نتائج التسلسل. تشكل دراسة الخلايا الساتلية في المختبر تحديا كبيرا.

أبرزت الدراسات الحديثة دور مكانة الخلايا الساتلية في فسيولوجيتها. في حين أنه من الشائع زراعة الخلايا الساتلية المعزولة FACS ، إلا أن تكرار مكانة الخلايا الساتلية في المختبر لم يتحقق بعد. يوفر بروتوكولنا طريقة فعالة وعملية لزراعة الأنسجة العضلية الكاملة ، بما في ذلك الخلايا غير العضلية ، مثل الخلايا البطانية والأسلاف الليفية الجينية.

أظهرنا أن الخلايا الشبيهة بالهدوء تظهر في غضون أسبوع واحد من الثقافة. يمكن أيضا استخدام هذا البروتوكول لدراسة تأثير الخلايا الأخرى على إعادة إنشاء هذا التجمع الشبيه بالهادئ.