Sıçan Ex Vivo Akciğer Perfüzyon Modelinin Tasarımı ve Uygulanması

Sıfırdan bir ex vivo akciğer kurulumu oluşturmak ve uygulamak için basit bir yöntem gösteriyoruz. Bu, çeşitli kurulumlar için uygulanabilen uygun fiyatlı ve modüler bir kuruluma izin verir. Burada sunulan teknik uygun maliyetlidir, modülerdir ve protokolü oluşturan laboratuvarlara uyarlanabilir.

Ex vivo operasyon, yeni mekanizmaların aydınlatılmasına yardımcı olmak için in vivo modelleri tamamlamak için kullanılabilir. Bu DIY kurulumu, akciğerleri kontrollü bir ortamda incelemek için tasarlanmıştır. CPR sonrası sonucu iyileştirmek için çeşitli yaklaşımları araştırmak olan laboratuvarımızın ana araştırma odağı ile uyumludur.

Bununla birlikte, kurulum farklı araştırma amaçlarına uyacak şekilde uyarlanabilir, bu da onu çok yönlü hale getirir, Cerrahi, temel bir solunum anatomisi ve fizyolojisi bilgisi gerektirir ve protokolü takip ederek hızlı bir şekilde ustalaşılabilir. Bununla birlikte, protokolümüzde açıklanan adımları özenle takip etmek ve hepsinden önemlisi, özellikle kaburgaları çıkarırken akciğerleri korumak çok önemlidir. Trakeostomi yapmak için, anestezi uygulanmış bir sıçanın derisini trakeanın üzerine forseps ile sıkıştırın ve cildi kesin.

Trakeaya ulaşmak için kas ve dokuyu kör bir şekilde inceleyin ve kanama olmamasını sağlayın. Daha sonra soluk borusunun altından kavisli forsepslerden geçirin ve alttan 3-0 dikiş atmak için yer açmak için açın. Daha sonra dikişleri bir kutu düğümüne önceden bağlayın.

Trakeanın kıkırdak halkaları arasında küçük bir kesi yapın ve trakeal kanülü yerleştirin. Trakeal insizyondan havanın kaçmasını önlemek ve kanülün trakeaya baskı yapmadığından emin olmak için dikişi bağlayın. Trakeal kanül sabitlendikten sonra, fareyi havalandırmaya başlayın.

Büyük cerrahi makas ve forseps kullanarak, farenin karnındaki kürkü çıkarın. Ksifoid sürecini forseps ile kavrayın ve diyaframı sağlam tutmaya özen göstererek kaburgaların altında küçük bir yatay kesi yapın. Tüm diyaframı ortaya çıkarmak için yatay kesimi genişletin.

22 gauge şırınga ile, akciğerleri delmemeye dikkat ederek inferior vena kava içine heparin enjekte edin. Ksifoid sürecini forseps ile kavrayın ve sternum boyunca kraniyal olarak kesin, akciğerleri kesmeyi önlemek için sürekli olarak görselleştirin. İki büyük forseps kullanarak göğüs kafesini ayırın ve kan kaybı yaparak sıçanı ötenazi yapmak için inferior vena kava'yı kesin.

Pulmoner vaskülatür daha kolay görüntülenmesini sağlamak için fazla timusu kesin. Pulmoner arteri bulun ve altından küçük kavisli forsepslerden geçirin. Yine, altına 3-0'lık bir dikiş atın ve bir kutu düğümüne önceden bağlayın.

Daha sonra kalbin sağ ventrikülüne küçük bir kesi yapın ve PA kanülünü yerleştirin. Sütürü kullanarak kanülü sabitleyin ve dakikada 1,5 mililitre perfüze etmeye başlayın. Akciğerlerde basınç oluşmasını önlemek için kalbin tepesini hemen çıkarın.

Küçük kavisli forseps kullanarak mitral kapağı yırtın ve forsepslerin sol atriyuma tıkanıklık olmadan girebildiğini görsel olarak onaylayın. Atriyumun altındaki kalbin etrafına 3-0'lık bir sütürü sıkıca sarın ve PV kanülünü sol atriyuma yerleştirin, böylece sütürü bağlamadan önce tamponun dışarı akabileceğinden emin olun. Ardından, künt uçlu makas kullanarak, trakeaya zarar vermemek için göğüs boşluğu ile trakeostomi kesisi arasındaki fazla dokuyu kesin.

Trakeal kanülün altındaki trakeanın ve tüm kalp-akciğer bloğunun görünür olduğundan emin olun. Kalp-akciğer bloğunu ve trakeayı çıkarmak için trakeal kanülü tutun ve trakeanın arkasındaki bağ dokusunu çıkarmak için kavisli künt uçlu makas kullanın. İskemi ve reperfüzyon sonrası akciğer canlılığı sunulmuştur.

150 dakikalık reperfüzyona izin veren en uzun iskemi süresi sekiz dakikaydı. İzole edilmiş akciğerlerin deney boyunca canlı kalabilmesi için damar sistemini uygun şekilde kanüle etmek çok önemlidir. İşlemden sonra akciğerler sağlam kalır ve deney sonrası ıslak veya kuru ağırlık veya histoloji gibi temel ölçümlerin yapılmasına izin verir.