Mark Smith radyografik görüntüleme ile yaptığı yardım için teşekkür etmek istiyorum. Bu eser kardiyovasküler hastalığı (BOA), Amerikan Kalp Derneği (SMC) ve NIH R35 Grant (DKS) disiplinlerarası araştırma NIH T32 Grant tarafından desteklenir.

İşleme hayvan protokollerde kurumsal hayvan bakım ve Maryland Üniversitesi, Baltimore (hayvan iletişim kuralı numarası 0116024) kullanım Komitesi tarafından onaylanmış ve AAALAC uluslararası standartlara göre yapılmıştır.
1. hazırlanması reaktifler
<ol><li>
Heparin
	<ol>
<li>1000 250 µL seyreltik U/mL heparin sülfat 50 ml fosfat tamponlu tuz 5 U/mL nihai bir konsantrasyon yapmak.</li>
		<li>Heparinized (5 U/mL) sıcak fosfat tamponlu tuz, 37 ° C'ye ayarla bir su banyosunda damarlara kan yerini alacak</li>
		<li>Gerekli tüp bağlanarak basınç kontrollü pompa hazırlamak ve 10 mL şırınga, heparinized-serum arabellek için 1 ve 1 kontrast Aracısı için 2 boş.</li>
		<li>Boru sıcak heparinized fosfat tamponlu tuz ile doldurun ve hava kabarcıkları basınç pompası boru üzerinden kaldırın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Karşıtlık aracı Not: Lütfen kontrast Ajan kit bileşenlerinin için Malzemeler tablo için bakın.<ol>
<li>Pigmentli bir bileşik bir 1:6 boya Dilüent oranı elde etmek için bir eritici karıştırın.</li>
		<li>Kullanımdan hemen önce (adım 2.3.12), 200 µL seyreltilmiş pigmentli bahçedeki her 5 mL aliquot kür bir ajana onları (Hacmen % 4) iyi ekleyip karıştırın. Not: Üretici 40 dk çalışma zamanı olduğunu bildirdi. Silikon kauçuk kontrast Ajan kür Ajan eklenmesinden sonra 20 dk polimerize başlar gibi çözüm hemen önce onun infüzyon hazırlamak önemlidir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
BAPN içme suyu
	<ol>
<li>β-aminopropionitrile (BAPN) 3 g/L (daha önce açıklanan literatürde protokolleri uyarlanmıştır)9,16,17son bir toplama oluşturmak için içme suyunda geçiyoruz.</li>
		<li>Sonra onları 4 hafta-in yaş perfüzyon zaman mikro-CT için kadar fareler bir gruba BAPN içeren içme suyu yönetmek</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. cerrahi müdahale
<ol><li>
Hayvan hazırlık
	<ol>
<li>Fareler 3 haftalıkken sütten, onları bir 12 h ışık/12 s karanlık döngüsü korumak ve standart kemirgen chow besledin. BAPN tedavi grubu için taze hazırlanmış BAPN içme suyu için 16-26 hafta ad libitumyönetmek. Standart içme ile denetim hayvanlar ad libitumsu sağlar.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Anestezik tekniği Not: 24 h CT analizi, aşağıdaki yordamı önce gerçekleştirilir. Cerrahi işlemler örnek bir ölüm sonrası intrakardiyak perfüzyon için hazırlamak için geçerli duruma geldiğinden.<ol>
<li>Bir anestezi indüksiyon tank ile % 100 O2 ve %3 isoflurane hassas Buharlaştırıcı teslim yoluyla teşvik. Anestezi indüksiyon sonra isoflurane durdurma ve odası O2ile yıkayın. 2-%2,5 isoflurane ve 1 L/dk O2 burun konisi ile anestezi korumak.</li>
		<li>İndüksiyon odası ve sağlamlılık personel korumak için bir kömür tutucu için atık gaz adsorpsiyon için ekleyin. Yeterli bir anestezik uçak zararlı uyaranlara (ayak tutam) yanıt olduğunu göstererek sağlamak.</li>
		<li>Cerrahi bir tepsi ve gerekli cerrahi aletler oluşan bir operatif alanı hazırlamak.</li>
		<li>Hayvan cerrahi alanına aktarın ve dorsal recumbency içinde konumlandırın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Operatif Teknik
	<ol>
<li>Makas kullanarak, bir ensizyon deri ve yumuşak doku deri ve yumuşak doku göğüs kemiği örten aracılığıyla genişletme sternal çentik için kasık symphysis arasında orta dan olun.</li>
		<li>Makas kullanarak, göğüs boşluğuna girmek için xiphoid işleminde diyafram bir delik oluşturun.</li>
		<li>Makas ventral göğüs duvarı diyafram bilateral incelemek için kullanın.</li>
		<li>Göğüs kemiğinin hemen sternal sınırda kaburga ayırmak için nodern kıkırdak kesti.</li>
		<li>Göğüs kemiği (yakınındaki xiphoid işlemi) ucu iyi bir kan durdurucu sargı kelepçe uygulamak ve fare başının üzerine konumlandırılmış hemostat cranially taşıyın. Bu timus ve uzak kalp ve daha fazla manipülasyon için büyük damarlarının açığa kalp, göğüs kemiği geri çek.</li>
		<li>Keskin kalp ve göğüs duvarı arasında herhangi bir ek parçalara.</li>
		<li>10 mL heparinized fosfat tamponlu tuz (5 U/mL) ile önceden yüklenmiş bir şırınga 27'lik IV kateter iğne bağlanabilir ve hava kabarcıkları basınç pompası tüpler kaldırmak için arabellek ile tüm boru doldurunuz.</li>
		<li>Kabarcıklar sıvı doğrultusunda küçük gemi dolum engelleyebilir gibi sıvı hazırlarken dikkatli olun. Bu tam bir doldurma ve eserler için son görüntüleme tanıtımı için gerekli ses düzeyini değiştirme kesik damarları dışarı sızmaya kontrast Ajan neden olur gibi hayvan hazırlık sırasında hasar damarlarının sayısını sınırlayın.</li>
		<li>Bir dik açılı mengene ile stabilize 27 lik bir iğne ile sol ventrikül delik. Hemen sağ ventrikül veya heparin çözüm ve kan boşaltmak için inferior vena kava deşmek. Not: Heparin bir antikoagülan olarak hayvanın ölümünden sonra damarlarının pıhtı kan önlemek için kullanılır.</li>
		<li>Hayvan 2 mL/dakika tek şırınga pompa kullanarak sabit bir hızda sıvı. Görünür organlarının sarararak dikkat edin. Venöz dolaşım boşaltma perfusate kan (yaklaşık 5-6 mL) boşalana kadar perfüzyon devam. Pompa kes.</li>
		<li>IV kateter boru iğne pozisyonu sol ventrikül bozmaya değil dikkat çekici 10 mL şırıngadan çıkarın.</li>
		<li>Hemen sonra tam kan kaybı, kontrast Ajan çözüm 5 mL aliquots ayırabilir ve kür ajan şu anda ekleyebilirsiniz (bkz. Adım 1.2). Onları iyice karıştırın. 5 mL kadar kontrast Ajan karışımı bir 10 mL şırınga çizmek ve o hayvanla sıvı.</li>
		<li>Venöz çözüm çıkmadan görülebilir ne zaman gemiler (atar ve toplar damarlardaki) tam doldurmak için infüzyon noktası geçmiş devam. Koroner arterler, pulmoner arterler, bağırsak ve karaciğer damarlara döküm ajan görselleştirme dahil olmak üzere başarılı bir perfüzyon belirtileri arayın.</li>
		<li>Kontrast Ajan oda sıcaklığında yaklaşık 20 dk sonra tedavi edecek. Kür, üzerine gerektiği gibi bireysel organları, hasat ve % 10 tarafsız tampon formalin içinde düzeltmek. Örnekleri için mikro-CT ertesi gün tarama kullanılmazsa tüm leşleri düzeltmek. Mürekkep sonraki gün kullanılacaksa, onları metal bir tepsi üzerinde konumlandırın ve 4 ° C'de gecede tedavi için bir buzdolabında koyun.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. mikro-CT tarama ve parametreleri
Not: Belirli görüntü edinme parametreleri kullanma içinde belgili tanımlık makine bağımlı olacaktır.
<ol><li>X-ışını bilgisayarlı tomografi görüntüleri her fare bir x-ışını tüpü gerilim 55 kVp, 150 μA mevcut, 2.19 sistem yakınlaştırma faktörü ve bir CCD kamera piksel binning faktör 2 kullanarak bir mikro-CT tarayıcı kullanarak perfüzyon ertesi günü elde etmek. Bu 29 µm etkili piksel boyutunu verir.<ol>
<li>Fare leşi sırtüstü mikro-CT tarayıcı açayım ve bir izci X-ray tarama elde edilir.</li>
		<li>Dedektör görüş alanı 57.4 mm 37.1 mm (transaxial) x (Aksiyel) aort tam boy görüntü için gövde üzerinde odaklanın.</li>
		<li>2 derece ve projeksiyon 2800 MS başına bir kez bir rotasyon artışı ile 180 resim projeksiyonları elde etmek.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Değiştirilmiş bir Feldkamp algoritma kullanarak görüntüleri yeniden; 29 29 µm3 x 29 x yeniden oluşturulan Voksel boyutudur (dilim kalınlığı = 29 µm) Multimodal 3D görselleştirme eklenti burada kullanılan yazılımı kullanarak.</li>
</ol>4. son işlem ve işleme
<ol><li>CT veri uygun yazılımı kullanarak bir DICOM biçimine dönüştürün.</li>
	<li>Anevrizma mevcut olup olmadığını belirlemek için görüntüleri analiz. Torasik aort, azalan aort en geniş noktada küçük eksen çapı ölçmek ve abdominal aort daha önce18 (Şekil 1) açıklandığı gibi. Not: bizim çalışmada, iki bağımsız gözlemciler tarafından (bir kör) görüntüleri analiz edildi anevrizma mevcut olup olmadığını belirlemek için bir DICOM görüntüleyici kullanarak. İkincil eksen çapı Torasik aort ve abdominal aort yukarıda açıklanan19 (Şekil 1) azalan aort en geniş noktada ölçüldü. BAPN tedavi edilmezse farelerin aneurysmal arteryel kesimleri yaş eşlemeli denetim değerleri olarak hizmet veren normal gemi çapları kurulan demek.</li>
	<li>Anevrizma aort parçaların çapları başvuru çapının % 50 daha fazla için yerelleştirilmiş veya diffüz genişleme olarak tanımlanır. Bunlar üzerinde yukarıdaki ölçümler dayalı bulun.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Meszaros, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+and+clinicopathology+of+aortic+dissection.">Epidemiology and clinicopathology of aortic dissection.</a> CHEST. 117 (5), 1271-1278 (2000).</li><li>Kochanek, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deaths:+final+data+for+2009.">Deaths: final data for 2009.</a> National Vital Statistics Reports. 60 (3), 1-116 (2011).</li><li>Li, J. S., Li, H. Y., Wang, L., Zhang, L., Jing, Z. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+beta-aminopropionitrile-induced+aortic+dissection+model+in+rats+by+different+administration+and+dosage.">Comparison of beta-aminopropionitrile-induced aortic dissection model in rats by different administration and dosage.</a> Vascular. 21 (5), 287-292 (2013).</li><li>Huffman, M. D., Curci, J. A., Moore, G., Kerns, D. B., Starcher, B. C., Thompson, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+importance+of+connective+tissue+repair+during+the+development+of+experimental+abdominal+aortic+aneurysms.">Functional importance of connective tissue repair during the development of experimental abdominal aortic aneurysms.</a> Surgery. 128 (3), 429-438 (2000).</li><li>Wu, D., Shen, Y. H., Russel, L., Coselii, J. S., LeMaire, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+of+thoracic+aortic+dissection.">Molecular mechanisms of thoracic aortic dissection.</a> Journal of Surgical Research. 184 (2), 907-924 (2013).</li><li>Bruel, A., Ortoft, G., Oxlund, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+cross-links+in+collagen+is+associated+with+reduced+stiffness+of+the+aorta+in+young+rats.">Inhibition of cross-links in collagen is associated with reduced stiffness of the aorta in young rats.</a> Atherosclerosis. 140 (1), 135-145 (1998).</li><li>Martinez-Revelles, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lysyl+oxidase+induces+vascular+oxidative+stress+and+contributes+to+arterial+stiffness+and+abnormal+elastin+structure+in+hypertension:+Role+of+p38MAPK.">Lysyl oxidase induces vascular oxidative stress and contributes to arterial stiffness and abnormal elastin structure in hypertension: Role of p38MAPK.</a> Antioxidants &amp; Redox Signaling. 27 (7), 379-397 (2017).</li><li>Kumar, D., Trent, M. B., Boor, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allylamine+and+beta-aminopropionitrile+induced+aortic+medial+necrosis:+Mechanisms+of+synergism.">Allylamine and beta-aminopropionitrile induced aortic medial necrosis: Mechanisms of synergism.</a> Toxicology. 125 (2-3), 107-115 (1998).</li><li>Ren, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=&#946;-Aminopropionitrile+monofumarate+induces+thoracic+aortic+dissection+in+C57BL/6+mice.">&#946;-Aminopropionitrile monofumarate induces thoracic aortic dissection in C57BL/6 mice.</a> Scientific Reports. 6, 28149 (2016).</li><li>Kanematsu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacologically-induced+thoracic+and+abdominal+aortic+aneurysms+in+mice.">Pharmacologically-induced thoracic and abdominal aortic aneurysms in mice.</a> Hypertension. 55 (5), 1267-1274 (2010).</li><li>Weyers, J. J., Carlson, D. D., Murry, C. E., Schwartz, S. M., Mahoney, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retrograde+Perfusion+and+Filling+of+Mouse+Coronary+Vasculature+as+Preparation+for+Micro+Computed+Tomography+Imaging.">Retrograde Perfusion and Filling of Mouse Coronary Vasculature as Preparation for Micro Computed Tomography Imaging.</a> J Vis Exp. (60), e3740 (2012).</li><li>Cortell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silicone+rubber+for+renal+tubular+injection.">Silicone rubber for renal tubular injection.</a> Journal of Applied Physics. 26 (1), 158-159 (1969).</li><li>Bentley, M. D., Ortiz, M. C., Ritman, E. L., Romero, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+microcomputed+tomography+to+study+microvasculature+in+small+rodents.">The use of microcomputed tomography to study microvasculature in small rodents.</a> American Journal of Physiology - Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 282 (5), R1267-R1279 (2002).</li><li>Marxen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroCT+scanner+performance+and+considerations+for+vascular+specimen+imaging.">MicroCT scanner performance and considerations for vascular specimen imaging.</a> Medical Physics. 31 (2), 305-313 (2004).</li><li>Yang, J., Yu, L. X., Rennie, M. Y., Sled, J. G., Henkelman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+structural+and+hemodynamic+analysis+of+vascular+trees.">Comparative structural and hemodynamic analysis of vascular trees.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 298 (4), H1249-H1259 (2010).</li><li>Jia, L. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+stretch-induced+endoplasmic+reticulum+stress,+apoptosis,+and+inflammation+contribute+to+thoracic+aortic+aneurysm+and+dissection.">Mechanical stretch-induced endoplasmic reticulum stress, apoptosis, and inflammation contribute to thoracic aortic aneurysm and dissection.</a> The Journal of Pathology. 236 (3), 373-383 (2015).</li><li>Kurihara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil-derived+matrix+metalloproteinase+9+triggers+acute+aortic+dissection.">Neutrophil-derived matrix metalloproteinase 9 triggers acute aortic dissection.</a> Circulation. 126 (25), 3070-3080 (2012).</li><li>Dillavou, E. D., Buck, D. G., Muluk, S. C., Makaroun, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-dimensional+versus+three-dimensional+CT+scan+for+aortic+measurement.">Two-dimensional versus three-dimensional CT scan for aortic measurement.</a> Journal of Endovascular Therapy. 10 (3), 531-538 (2003).</li><li>Muratoglu, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LRP1+protects+the+vasculature+by+regulating+levels+of+connective+tissue+growth+factor+and+HtrA1.">LRP1 protects the vasculature by regulating levels of connective tissue growth factor and HtrA1.</a> Arterioclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 33, 2137-2146 (2013).</li><li>Badea, C. T., Dragova, M., Holdsworth, D. W., Johnson, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+small+animal+imaging+using+micro-CT+and+digital+subtraction+angiography.">In vivo small animal imaging using micro-CT and digital subtraction angiography.</a> Phys Med Biol. 53 (19), R319-R350 (2008).</li><li>Zhou, Y. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasound-guided+left-ventricular+catheterization:+A+novel+method+of+whole+mouse+perfusion+for+microimaging.">Ultrasound-guided left-ventricular catheterization: A novel method of whole mouse perfusion for microimaging.</a> Laboratory Investigation. 84, 385-389 (2004).</li></ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Mikro-CT görüntüleme son derece detaylı ve üç boyutlu rekonstrüksiyon hayvan modellerinde vasküler patoloji sağlamak için kullanılabilir. İntravasküler kontrast-artırılmış medya aracılığıyla, bir kan damarı lümen gibi sigara gelişmiş yumuşak doku artırılması insanlardan farklı. Lazer Doppler, microangiography, manyetik rezonans anjiyografi, sırasında Histoloji confocal veya iki fotonlu mikroskobu ile vasküler yatak değerlendirmek için kullanılan, onlar genellikle çalışma sınırlı bir alan üzerinde odaklanmak ve/veya iki boyutlu değerlendirmeler için sınırlıdır. Mikro-CT temel anjiogenez ve vasküler biyoloji bir anlayış kazanıyor yardımcı olabilecek vasküler yapıların detaylı görüntüleme elde etme düşük maliyetli bir yol sağlar. Küçük hayvanlar görüntüleme ek yöntemleri vivo içinde mikro-CT ve dijital çıkarma anjiyografi içerir. Benzer şekilde burada açıklanan tekniği, VIVO mikro-CT çözünürlüğünü artırmak için eksojen kontrast ajanı dayanır. Fenestra VC ve Isovue-370 mikro-CT Fenestra VC kullanılmıştır ve aort 20 takip enjeksiyon20dk ~ 620 Hounsfield birimlerinin maksimum ortalama donanım için rapor için kullanılabilir olan 2 böyle kan gölü kontrast ajanlar. Diğer nanoparçacık tabanlı kontrast ajanlar da CT ve Mr potansiyel göstermiştir. Göğsü açmadan sol ventrikül kateterizasyon tüm fare perfüzyon açıklanan21oldu microimaging için başka bir yöntemdir. Ultrason görüntüleme bir damar çapı boyuna ölçümleri için hayatta kalma çalışmalarda kullanılan son bir yöntemdir.
Bu yordam sırasında yeterli perfüzyon detaylara büyük ölçüde gerektirir. Damarlara tamamen bir kontrast maddesi ile perfüzyon önce öldüğü için önemlidir. Karaciğer değil beyazlatmak ve koyu kırmızı rengi kalır, ek bir heparinized tuzlu çözüm kızarma perfüzyon ile bir kontrast önce gerekli olabilir. Damarlara, eksik kan kaybı damarlara kusurları doldurarak olarak veya manipülasyonun distal vasküler occlusions olarak görülen nihai görüntü kalitesini etkileyebilir. Ayrıca, sol ventrikül içine iğne ekleme ventrikül duvar gözyaşı veya sağ ventrikül kesti hassas bir işlemdir. İğne sağ ventrikül eklediyseniz, akciğerler hızlı bir şekilde derin ve erken perfüzyon için eksik bir vasküler perfüzyon leading sırasında sarı dönecek. Bir gemi kopma eksik bir perfüzyon için yol son bir komplikasyondur. Yeterli drenaj gelen arteriyel ağaç üzerinden perfüzyon başlatılıyor önce venöz dolaşım sağlayarak bir gemi kopma ihtimali en aza indirilebilir. Retrograd enjeksiyon daha önce koroner damarlara11görüntüye tanımlanmıştır bir vasküler yatağın ventriküler için alternatif bir yöntemdir. Daha doğrusu torasik ve abdominal aort fizyolojik kan akımı temsil eder gibi bir perfüzyon antegrade yöntemi seçtik. Mikro-CT ile elde edilen görüntü kalitesi yeteneği intramural trombüsü veya hematom aort değerlendirmek için sınırı yok. Ancak, yumuşak doku çok iyi nasıl CT Protokolü formüle edilmiştir bağlı olarak görüntülenmeyecektir. Çalışmalarımız için kusurları stenoses intraluminal trombus olgusu üzerinden muhtemelen nedeniyle doldurma ile aort parçalarını fark ettim. Teknik olarak açıklanan intravasküler alanı değerlendirmek için en iyisi.
Özet olarak, bu iletişim kuralı bir fare modeli diseksiyon ve aort anevrizması damarlara yüksek çözünürlüklü sınav için güvenli bir teknik sağlar. Kantitatif analizleri kolayca damarlara kesin bir döküm sağlamak mümkün mikro-CT görüntüleri kullanılarak elde edilebilir. Bu yayında resimli deney amacıyla, aort anevrizmalarının klinik pratikte ölçülmesi taklit etmek için büyük aort çapı ölçmek seçtik. Anatomik yerler ve dilim konumu mesafeler uygunsa aort belirli kesimleri ölçmek için yararlı olabilir. Bu da perfused hayvan damarlara görüntüsü ve dijital olarak ayrılmış iskelet kökenli büyük kan damarları ve daha küçük distal dalları üç boyutlu bir gösterimini oluşturmak için istediğiniz miktarı gösterilir. Bu iletişim kuralı parafin içinde gömülü ve histolojik daha fazla inceleme için kesit için kullanılan vade farkı, Vaskular dokuları korur.
Mikro-CT vasküler biyoloji çalışma için umut verici bir görüntüleme yöntemidir çünkü. Onun yüksek uzaysal çözünürlük ile yapısı, organizasyonu ve patoloji kan damarlarının değerlendirmek için bir fırsat sunuyor. Bu el yazması açıklanan yordam birden çok beceri ve teknikleri hayvan işleme ve hazırlık, resim alma ve miktar sonuçları da dahil olmak üzere gerektirir. Bu makalede başarıyla vasküler perfüzyon aortopathies farelerde tanımlamak için bir uygulama göstermiştir. Daha fazla çalışmalar onun uygulanabilirliği diğer hayvan modelleri ve hastalık işlemleri değerlendirmek için ihtiyaç vardır.

Aort diseksiyonu insidansı başına 100.000 yıl13 vaka var. Aort diseksiyonu aneurysmal hastalıklar 10.000'den fazla kişinin ölümünden Amerika Birleşik Devletleri'nde her yıl, Batı ülkelerinde2' deki tüm ölümlerin % 1-2 için muhasebe hesap ve. Aort diseksiyonu damar intimal tabaka kan aort duvar fizyolojik baskılar altında katmanları yayılması ile bir yırtık tarafından başlatılır. Yükseltilmiş hasta nabız basınçları artmış insidansı diseksiyon ve komplikasyonlar ile ilişkilidir. Artan duvar kesme stres bir anevrizma oluşumu3,4' e lider aort duvar genişleme ile ilişkilidir. Aort diseksiyonu sonuçlarını tıkanıklığı kan akımı uzak organlara beyin, böbrek, bağırsakları ve bacaklarda, kronik anevrizma rüptürü veya Ölüm5,6,7oluşumu da dahil olmak üzere içerir.
Şu anda, hala kötü biyokimyasal ve hücresel işlemleri başlatma ve aort anevrizmalarının ve diseksiyonu dahil anlaşılır. Aort anevrizması ve diseksiyon tekrarlanabilir hayvan modelleri onların patofizyolojisi anlama anahtarıdır. Β-aminopropionitrile (BAPN) kolajen ve elastin cross-linking engeller ve önemli ölçüde damar duvar hücre dışı matriks ve onun biyomekanik bütünlüğü6yapısını değiştirmek için gösterilen bir lysyl oksidaz inhibitörü olduğunu, 8. BAPN ile tedavi kemirgenler aort anevrizması ve diseksiyon9,10ortak hayvan modeli olarak kullanılmıştır.
Vasküler görüntüleme yöntemleri vasküler patoloji belirlenmesi, gemi a_ılabilinirse teyit ve organ perfüzyon değerlendirilmesi instrumental vardır. Son zamanlarda, mikro bilgisayarlı tomografi (mikro-CT) damarlara fareler ve benzer şekilde ölçekli hayvanlar eğitim için kullanılmıştır. Kemik, intraluminal kan doğal olarak nispeten x olduğu gibi bilgisayarlı tomografi tarafından kan damarlarının Aksiyel görüntüleme sınırlıdır. Ancak, intravasküler kontrast ajanlar ile birleştirildiğinde, mikro-CT makro-anatomik vasküler patoloji11incelenmesi için hayvan vasculatures detaylı üç boyutlu rekonstrüksiyon sağlar.
Seçili kontrast ( Tablo reçetesigörmek) kurşun kromat ve Kurşun sülfat içeren bir radyoopak silikon kauçuk ajandır. Bir katalizör varlığında perfüzyon bunu hızlı bir şekilde damarlara damarlara arka plan doku aksine son derece radyoopak yapma gemiler, makro-anatomik mimarisinde minimal değişiklikler ile bir döküm oluşturmak üzere sertleşir zaman röntgenlerle inceledi. Bu kontrast Ajan avantajlı çünkü işlemek kolay ve doku bozulması ve gemi kaybı genellikle vasküler döküm korozyon ile ilgili kırılması nedeniyle önler. En az büzülme12ile tedavileri, damarları kandan temizlenir patent kalır ve hayatta kalma sigara deneylerde hayvan makro-damarlara doğru bir değerlendirme için izin. Önceki iş başarıyla radyoopak silikon kauçuk-kontrast hayvan çalışmaları çeşitli kullandı. Özellikle, koroner, glomerular, plasenta ve beyin dolaşımları11,12,13,14,15 görselleştirme içinde uygulanabilirliği gösterilmiştir. Bu yazıda, biz kurşun tabanlı radyoopak silikon kauçuk kantitatif aort patoloji BAPN kaynaklı bir fare modeli mikro-CT tarafından karakterize damar içi perfüzyon için açık sol ventriküler ponksiyon metodolojisi detay

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Microfil</td>
			<td>Flow Tech, Inc</td>
			<td>MV-122</td>
			<td>We use yellow, a different color can be ordered as desired. Kit includes MV-Compound, MV-Diluent, and MV-Curing Agent.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin (1000 U/mL)</td>
			<td>Sagent Pharmaceuticals</td>
			<td>25021-400-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline</td>
			<td>Corning</td>
			<td>21-031-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Vet One, MWI</td>
			<td>502017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-Aminopropionitrile fumarate salt</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A3134</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single syringe pump</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-831-200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27-gauge scalp vein set needle</td>
			<td>Exel Int</td>
			<td>26709</td>
			<td>27G x 3/4&#34;, 12&#34; tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inveon Micro-CT scanner</td>
			<td>Siemens Medical Solutions</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osirix MD</td>
			<td>Pimxmeo SARL</td>
			<td></td>
			<td>Version 8.0.2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inveon Research Workplace</td>
			<td>Siemens Medical Solutions</td>
			<td></td>
			<td>Version 4.2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Chow</td>
			<td>Harlan Teklad</td>
			<td>2018sx</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantitative micro-ct analysis of aortopathy in a mouse model of &#946;-aminopropionitrile-induced aortic aneurysm and dissection

Aort anevrizması ve diseksiyon önemli morbidite ve mortalite nüfus ile ilişkilidir ve son derece öldürücü olabilir. Aort hastalığı hayvan modelleri mevcut iken, damarlara in vivo görüntüleme sınırlı olmuştur. Son yıllarda, mikro bilgisayarlı tomografi (mikro-CT) büyük ve küçük damarları görüntüleme için tercih edilen bir yöntemi olarak ortaya çıkmıştır in vivo ve ex vivo. Vasküler döküm yöntemi ile birlikte, biz başarıyla frekans ve β-aminopropionitrile-tedavi C57/Bl6 farelerde aort patoloji dağılımı ayırdetmek için mikro-CT kullanmıştır. Bu yöntemin teknik sınırlamalar zavallı hayvan hazırlık, gemi boyutu miktar için uygun yöntemleri uygulanması ve sigara-Beka Bu yordam tarafından perfüzyon kalitesini varyasyonları içerecek. Bu makalede anevrizması ve diseksiyon, fare modeli aortopathy nicel karakterizasyonu için bir kurşun tabanlı radyoopak silikon kauçuk intravasküler perfüzyon için bir metodoloji ayrıntıları. Aort patoloji görselleştirme ek olarak, bu yöntem diğer vasküler yatak vivo içinde veya vasküler yatak kaldırıldı öldükten sonra incelenmesi için kullanılabilir.

Bu iletişim kuralı değerlendirmek için 20 erkek yetişkin fareler, karışık arka plan olarak yukarıda açıklanan19 ve 20-30 hafta-in yaş, ile ya da ezelî BAPN tedavi, bir kurşun tabanlı radyoopak silikon kauçuk ile derin (bkz: malzemeler tablo ) yukarıda ayrıntılı iletişim kuralını kullanarak. Ertesi gün mikro-CT tarama yapıldı (resim 1 ve Şekil 2). Fareyi herhangi bir göre gruplar arasında yaş hiç önemli farklılıklar vardı.
İkincil eksen çapı sonra bu farelerde sayısal. BAPN tedavi edilen farelerde artan aort ortalama çapı önemli ölçüde tedavi edilmezse yaş eşlemeli denetimleri daha büyük (1.43 ± 0,56 mm vs 0.93 ± 0,11 mm; p = 0.023, unpaired öğrenci t-test). Lysyl oksidaz BAPN ile inhibisyonu göğüs veya abdominal aort çapları yaş eşlemeli kontrollere göre azalan demek üzerinde önemli bir etkisi yoktu (p > 0.082, unpaired öğrenci t-testi, Şekil 3).
Anevrizma 1.5 x tedavi edilmezse grubunun ortalama çapı olarak tanımlanmıştır. BAPN tedavi edilen BAPN tedavi edilmezse denetimleriyle (%50 %0 BAPN tedavi fareler vs tedavi edilmezse farelerin; karşılaştırıldığında içinde anevrizma ile fareler sayısında önemli bir artış yapıldı. P 0.042 =) Fisher'ın tam test tarafından. BAPN tedavi edilen farelerde anevrizma sadece aort, Torasik aort (8 10 anevrizma tespit dışında) tanımlanan çoğunluğu ile tespit edilmiştir. 4 fareler BAPN-tedavi (Tablo 1) ile daha--dan 1 anevrizma geliştirdi.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57589/57589fig1.jpg"> Şekil 1: temsilcisi kesitsel mikro-CT görüntüler. A. BAPN tedavi edilmezse farelerin kesitsel bir görüntü bu. B. BAPN tedavi farelerin kesitsel bir görüntü bu. İkincil eksen çapı ölçümleri aort düzeyinde yapılır.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57589/57589fig2.jpg"> Şekil 2: fare aort anevrizması ve mikro-CT tarafından tanımlanan diseksiyon üç boyutlu rekonstrüksiyon A. saccular abdominal aort anevrizması ve aort anevrizma BAPN tedavi fareyle temsilcisi bir 3-b yeniden inşası bu. B. Torasik aort diseksiyonu BAPN tedavi Mouse azalan bir temsilci bu panel gösterir. True ve false lümen intimal flep tarafından birbirinden ayrılır. Gerçek lümen (TL) kan normal geçit ve yanlış lümen (FL) yeni oluşturulan geçit.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57589/57589fig3.jpg"> Şekil 3: aort çapları üzerinde BAPN tedavisinin etkisi. Bu paneller, mikro-CT BAPN tedavi edilmezse ve BAPN tedavi erkek farelerde tarafından ölçülen gemi çapları ortalama küçük ekseni göster. Anevrizma için belirlenen bu fareler kırmızıyla vurgulanır. Tedavi edilmemiş grup ortalaması her panelinde noktalı bir çizgi olarak gösterilir. bir. bu artan Aort/kemer (AAo/kemer); 0,93 ± 0,11 vs 1.43 ± 0,56 mm; p = 0.023. b. bu inen torasik aort (DTA); 0,82 ± 0,04 vs 1.11 ± 0.43 mm; p 0.0817 =. c. karın aortu; bu 0,66 ± 0,11 vs 0.89 ± 0,58 mm; p 0.296 =. Tüm veriler ortalama ± standart sapma sunulmaktadır. <a href="/files/ftp_upload/57589/57589fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td>Yok BAPN (n = 8)</td>
			<td>BAPN (n = 12)</td>
		</tr>
<tr>
<td>Anevrizma ile toplam hayvanlar</td>
			<td>0</td>
			<td>6 *</td>
		</tr>
<tr>
<td>Anevrizma toplam sayısı</td>
			<td>0</td>
			<td>10</td>
		</tr>
<tr>
<td>AAO/KEMER</td>
			<td>0</td>
			<td>5</td>
		</tr>
<tr>
<td>DTA</td>
			<td>0</td>
			<td>3</td>
		</tr>
<tr>
<td>ABD AORT</td>
			<td>0</td>
			<td>2</td>
		</tr>
</tbody></table>Tablo 1. Erkek farelerde ve BAPN tedavi olmadan tanımlanan anevrizmalarının anatomik dağıtım. Bu tablo anevrizma insidansı mikro-CT tarafından tanımlandığı şekilde gösterir (n = 20). AAO artan aort; = DTA azalan torasik aortada; = ABD aort abdominal aort =. p < 0,05.

Watch this Scientific Journal Video about Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of ÃŽÂ²-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection at JoVE.com

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of &#946;-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Bu makalede ayrıntılı bir metodoloji radyoopak .Kurşun bazlı silikon kauçuk fare damarlara aort çapı miktar aort anevrizması ve diseksiyon, bir fare modeli için sıvı için kullanma.

Aortopathy aort anevrizması β-aminopropionitrile-indüklenen ve diseksiyon, fare modeli nicel mikro-CT Analizi

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of ...

quantitative-micro-ct-analysis-aortopathy-mouse-model

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

9.5K Görüntüleme.  University of Maryland School of Medicine. Bu makalede ayrıntılı bir metodoloji radyoopak .Kurşun bazlı silikon kauçuk fare damarlara aort çapı miktar aort anevrizması ve diseksiyon, bir fare modeli için sıvı için kullanma.

Video: Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of β-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Quantitative Analysis of Cancer Metastasis using an Avian Embryo Model

During metastasis cancer cells disseminate from the primary tumor, invade into surrounding tissues, and spread to distant organs. Metastasis is a complex process that can involve many tissue types, span variable time periods, and often occur deep within organs, making it difficult to investigate and quantify. In addition, the efficacy of the metastatic process is influenced by multiple steps in the metastatic cascade making it difficult to evaluate the contribution of a single aspect of tumor cell behavior. As a consequence, metastasis assays are frequently performed in experimental animals to provide a necessarily realistic context in which to study metastasis. Unfortunately, these models are further complicated by their complex physiology. The chick embryo is a unique in vivo model that overcomes many limitations to studying metastasis, due to the accessibility of the chorioallantoic membrane (CAM), a well-vascularized extra-embryonic tissue located underneath the eggshell that is receptive to the xenografting of tumor cells (figure 1). Moreover, since the chick embryo is naturally immunodeficient, the CAM readily supports the engraftment of both normal and tumor tissues. Most importantly, the avian CAM successfully supports most cancer cell characteristics including growth, invasion, angiogenesis, and remodeling of the microenvironment. This makes the model exceptionally useful for the investigation of the pathways that lead to cancer metastasis and to predict the response of metastatic cancer to new potential therapeutics. The detection of disseminated cells by species-specific Alu PCR makes it possible to quantitatively assess metastasis in organs that are colonized by as few as 25 cells. Using the Human Epidermoid Carcinoma cell line (HEp3) we use this model to analyze spontaneous metastasis of cancer cells to distant organs, including the chick liver and lung. Furthermore, using the Alu-PCR protocol we demonstrate the sensitivity and reproducibility of the assay as a tool to analyze and quantitate intravasation, arrest, extravasation, and colonization as individual elements of metastasis.

Using quantitative PCR, we demonstrate how the well-established chick CAM model can be used to quantitatively analyze the metastasis of human tumor cells to distant organs.

Kuş Embriyo Model kullanarak Kanser metastaz Kantitatif Analiz

During metastasis cancer cells disseminate from the primary tumor, invade into surrounding tissues, and spread to distant organs. Metastasis is a complex ...

Tıp

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of Abdominal aortic aneurysm (AAA) pathophysiology. There is no abdominal aortic aneurysm endograft exclusion model cheap and reproducible, which would allow deep investigations of AAA before and after treatment. We hereby describe how to induce, and then to exclude with a covered coronary stentgraft an abdominal aortic aneurysm in a rat. The well known elastase induced AAA model was first reported in 19901 in a rat, then described in mice2. Elastin degradation leads to dilation of the aorta with inflammatory infiltration of the abdominal wall and intra luminal thrombus, matching with human AAA. Endovascular exclusion with small covered stentgraft is then performed, excluding any interactions between circulating blood and the aneurysm thrombus. Appropriate exclusion and stentgraft patency is confirmed before euthanasia by an angiography thought the left carotid artery. Partial control of elastase diffusion makes aneurysm shape different for each animal. It is difficult to create an aneurysm, which will allow an appropriate length of aorta below the aneurysm for an easy stentgraft introduction, and with adequate proximal and distal neck to prevent endoleaks. Lots of failure can result to stentgraft introduction which sometimes lead to aorta tear with pain and troubles to stitch it, and endothelial damage with post op aorta thrombosis. Giving aspirin to rats before stentgraft implantation decreases failure rate without major hemorrhage. Clamping time activates neutrophils, endothelium and platelets, and may interfere with biological analysis.

Histological and biochemical modifications after aneurysm endograft exclusion are still unclear. We describe a new model of endograft implantation on a murine aneurysm. Through thrombus analysis with and without persistant circulating blood stream interface, and new endovascular biomaterials evaluation, this model will help to better understand endovascular aneurysm exclusion pathobiology.

Endovasküler Aort Anevrizma Onarımı Yeni Bir murin Modeli

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Quantitative Analysis and Characterization of Atherosclerotic Lesions in the Murine Aortic Sinus

Atherosclerosis is a disease of the large arteries and a major underlying cause of myocardial infarction and stroke. Several different mouse models have been developed to facilitate the study of the molecular and cellular pathophysiology of this disease. In this manuscript we describe specific techniques for the quantification and characterization of atherosclerotic lesions in the murine aortic sinus and ascending aorta. The advantage of this procedure is that it provides an accurate measurement of the cross-sectional area and total volume of the lesion, which can be used to compare atherosclerotic progression across different treatment groups. This is possible through the use of the valve leaflets as an anatomical landmark, together with careful adjustment of the sectioning angle. We also describe basic staining methods that can be used to begin to characterize atherosclerotic progression. These can be further modified to investigate antigens of specific interest to the researcher. The described techniques are generally applicable to a wide variety of existing and newly created dietary and genetically-induced models of atherogenesis.

We describe procedures to quantify and characterize atherosclerotic lesions in mouse models using precision sectioning of the aortic sinus and ascending aorta combined with histochemical and immunohistochemical analysis.

Atherosclerosis is a disease of the large arteries and a major underlying cause of myocardial infarction and stroke. Several different mouse models have ...

Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the aorta in mice using the sleeve method was short and easy averaging 20 min, permitting studies of iso/allo grafts. The following article describes the aortic transplantation procedure used in our laboratory. The mice were anesthetized with a mixture of 1.5% volume isoflurane and 100% oxygen through a face mask. At this point, the segment of the aorta between the renal arteries and its bifurcation was separated from the vena cava, freely prepared and clampedat the proximal and distal segments with a single silk suture. Prior to the removal of the aorta, a saline solution containing heparin was injected into the inferior vena cava. Then the aorta was cut between the clamps and a saline heparin solution was used to flush the lumen. The sleeve technique with monofilament sutures was used in order to transplant the abdominal aorta in the orthotopic position.

We present an orthotopic aortic transplantation model using the sleeve technique in mice. It is a very rapid anastomosis method, which can be employed in studies of vascular disease.

Kol tekniği aort transplantasyonu - eğitici bir Video bir fare Model kullanma

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the ...

Dissection of the Mouse Pancreas for Histological Analysis and Metabolic Profiling

We have been investigating the pancreas specific transcription factor, 1a cre-recombinase; lox-stop-lox- Kristen rat sarcoma, glycine to aspartic acid at the 12 codon (Ptf1acre/+;LSL-KrasG12D/+) mouse strain as a model of human pancreatic cancer. The goal of our current studies is to identify novel metabolic biomarkers of pancreatic cancer progression. We have performed metabolic profiling of urine, feces, blood, and pancreas tissue extracts, as well as histological analyses of the pancreas to stage the cancer progression. The mouse pancreas is not a well-defined solid organ like in humans, but rather is a diffusely distributed soft tissue that is not easily identified by individuals unfamiliar with mouse internal anatomy or by individuals that have little or no experience performing mouse organ dissections. The purpose of this article is to provide a detailed step-wise visual demonstration to guide novices in the removal of the mouse pancreas by dissection. This article should be especially valuable to students and investigators new to research that requires harvesting of the mouse pancreas by dissection for metabolic profiling or histological analyses.

This video article provides a detailed demonstration of the procedures required to successfully remove the pancreas from a mouse by dissection for histological analysis and metabolic profiling.

Fare pankreas diseksiyon histolojik analiz ve metabolik profil oluşturma

We have been investigating the pancreas specific transcription factor, 1a cre-recombinase; lox-stop-lox- Kristen rat sarcoma, glycine to aspartic acid at ...

Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

The adventitial vasa vasorum (VV) provides oxygen and nourishment to the aortic wall. Hypoxia in the aortic wall can cause enlarged abdominal aortic aneurysms (AAAs). This article introduces and describes a standard protocol used to induce AAAs through adventitial VV hypoperfusion created with a combination of polyurethane catheter insertion into the aortic lumen and suture ligation of the infrarenal abdominal aorta.
The protocol involves the use of male rats weighing 300-400 g, which are provided food and water ad libitum. After laparotomy with a ventral midline abdominal incision, exfoliation of the aorta is performed, which blocks blood flow from the perivascular tissue. Aortotomy involving a small incision adjacent to the renal artery branches is performed, and a polyurethane catheter is inserted using an 18-gauge indwelling needle. After repairing the incision, tight ligation of the aorta over the catheter blocks VV blood flow from the proximal direction through the aortic wall without disturbing the aortic blood flow. This technique can induce an AAA with progressive aortic dilatation.
The greatest benefit of this model is that VV hypoperfusion causes tissue hypoxia and the development of an infrarenal AAA, which has morphological and pathological characteristics similar to those of a human AAA.

Polyurethane catheter insertion into the aortic lumen and suture ligation of the aorta induce chronic hypoxia due to hypoperfusion of the adventitial vasa vasorum. This article describes a novel animal model of abdominal aortic aneurysm (AAA) with characteristics similar to those of AAA in humans.

Abdominal aort anevrizması Adventitial Vasa Vasorum perfüzyon engelleyerek kemirgen bir Model oluşturulması

The adventitial vasa vasorum (VV) provides oxygen and nourishment to the aortic wall. Hypoxia in the aortic wall can cause enlarged abdominal aortic ...

Induction and Micro-CT Imaging of Cerebral Cavernous Malformations in Mouse Model

Mutations in the CCM1 (aka KRIT1), CCM2, or CCM3 (aka PDCD10) gene cause cerebral cavernous malformation (CCM) in humans. Mouse models of CCM disease have been established by tamoxifen induced deletion of Ccm genes in postnatal animals. These mouse models provide invaluable tools to investigate molecular mechanism and therapeutic approaches for CCM disease. An accurate and quantitative method to assess lesion burden and progression is essential to harness the full value of these animal models. Here, we demonstrate the induction of CCM disease in a mouse model and the use of the contrast enhanced X-ray micro computed tomography (micro-CT) method to measure CCM lesion burden in mouse brains. At postnatal day 1 (P1), we used 4-hydroxytamoxifen (4HT) to activate Cre recombinase activity from the Cdh5-CreErt2 transgene to cleave the floxed allele of Ccm2. CCM lesions in mouse brains were analyzed at P8. For micro-CT, iodine based Lugol&#39;s solution was used to enhance contrast in brain tissue. We have optimized the scan parameters and utilized a voxel dimension of 9.5 &#181;m, which lead to a minimum feature size of approximately 25 &#181;m. This resolution is sufficient to measure CCM lesion volume and number globally and accurately, and provide high-quality 3-D mapping of CCM lesions in mouse brains. This method enhances the value of the established mouse models to study the molecular basis and potential therapies for CCM and other cerebrovascular diseases.

This protocol demonstrates the induction of cerebral cavernous malformation disease in a mouse model and uses contrast enhanced micro computed tomography to measure lesion burden. This method enhances the value of established mouse models to study the molecular basis and potential therapies for cerebral cavernous malformation and other cerebrovascular diseases.

İndüksiyon ve fare modeli serebral derin malformasyon mikro-CT görüntüleme

Mutations in the CCM1 (aka KRIT1), CCM2, or CCM3 (aka PDCD10) gene cause cerebral cavernous malformation (CCM) in humans. Mouse models of CCM disease have ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

İzometrik Contractility ölçüm tel Myography kullanarak fare mezenterik arter

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. An aneurysm forms as a result of progressive weakening and eventual dilation of the aorta, which can rupture or tear once it reaches a critical diameter. Aneurysms of the descending aorta in the chest, called descending thoracic aortic aneurysms (dTAA), make up a large proportion of aneurysm cases in the United States. Uncontained dTAA rupture is almost universally lethal, and elective repair has a high rate of morbidity and mortality. The purpose of our model is to study dTAA specifically, to elucidate the pathophysiology of dTAA and to search for molecular targets to halt the growth or reduce the size of dTAA. By having a murine model to study thoracic pathology precisely, targeted therapies can be developed to specifically test dTAA. The method is based on the placement of porcine pancreatic elastase (PPE) directly on the outer murine aortic wall after surgical exposure. This creates a destructive and inflammatory reaction, which weakens the aortic wall and allows for aneurysm formation over weeks to months. Though murine models possess limitations, our dTAA model produces robust aneurysms of predictable size. Furthermore, this model can be used to test genetic and pharmaceutical targets which may arrest dTAA growth or prevent rupture. In human patients, interventions such as these could help avoid aneurysm rupture, and difficult surgical intervention.

We describe a surgical protocol to consistently induce robust descending thoracic aortic aneurysms in mice. The procedure involves left thoracotomy, thoracic aorta exposure, and placement of a sponge soaked in porcine pancreatic elastase on the aortic wall.

Topikal Elastaz Indüklenen İndüklenen Torasik Aort Anevrizması Murine Cerrahi Modeli

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. ...

Porcine Model of Infrarenal Abdominal Aortic Aneurysm

Large animal models to study abdominal aortic aneurysms are sparse. The purpose of this model is to create reproducible, clinically significant infrarenal abdominal aortic aneurysms (AAA) in swine. To achieve this, we use a combination of balloon angioplasty, elastase and collagenase, and a lysyl oxidase inhibitor, called &#946;-aminopropionitrile (BAPN), to create clinically significant infrarenal aortic aneurysms, analogous to human disease.
Noncastrated male swine are fed BAPN for 7 days prior to surgery to achieve a steady state in the blood. A midline laparotomy is performed and the infrarenal aorta is circumferentially dissected. An initial measurement is recorded prior to aneurysm induction with a combination of balloon angioplasty, elastase (500 units)/collagenase (8000 units) perfusion, and topical elastase application. Swine are fed BAPN daily until terminal procedure on either postoperative day 7, 14, or 28, at which time the aneurysm is measured, and tissue procured. BAPN + surgery pigs are compared to pigs that underwent surgery alone.
Swine treated with BAPN and surgery had a mean aortic dilation of 89.9% &#177; 47.4% at day 7, 105.4% &#177; 58.1% at day 14, and 113.5% &#177; 30.2% at day 28. Pigs treated with surgery alone had significantly smaller aneurysms compared to BAPN + surgery animals at day 28 (p &#60; 0.0003). The BAPN + surgery group had macroscopic and immunohistochemical evidence of end stage aneurysmal disease.
Clinically significant infrarenal AAA can be induced using balloon angioplasty, elastase/collagenase perfusion and topical application, supplemented with oral BAPN. This model creates large, clinically significant AAA with hallmarks of human disease. This has important implications for the elucidation of AAA pathogenesis and testing of novel therapies and devices for the treatment of AAA. Limitations of the model include variation in BAPN ingested by swine, quality of elastase perfusion, and cost of BAPN.&#160;

This novel model creates robust infrarenal abdominal aortic aneurysms in swine using a combination of balloon angioplasty, elastase/collagenase perfusion, topical elastase application, and oral compound &#946;-aminopropionitrile administration, which interferes with collagen cross-linking.

İnfrarenal Abdominal Aort Anevrizması Porcine Modeli

Large animal models to study abdominal aortic aneurysms are sparse. The purpose of this model is to create reproducible, clinically significant infrarenal ...