The authors would like to acknowledge the support of NIH/NIDDK K12 DK100014 (Lan Lu), the Case Comprehensive Cancer Center (NIH/NCI P30 CA43703), and the Clinical and Translation Science Collaborative of Cleveland (NIH/NCATS UL1 TR000439).

Tüm hayvan çalışmaları, Case Western Reserve Üniversitesi&#39;nde onaylanmış Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) protokollerine göre gerçekleştirildi. Aşağıda tarif edilen cerrahi işlemin süresi yaklaşık 45-60 dk&#39;dır. MR işlemi her zaman noktası için yaklaşık 15 dakika sürer. 1. Anestezi <ol><li> İntra-peritoneal enjekte edilebilir anestezi uygulamadan önce hayvanın taşınmasını ve kısıtlanmasını kolaylaştırmak için oksijen ile karıştırılmış% 2 izofluran seti olan izofluran bölmesindeki sıçana anestezi uygulayın. </li><li> İzofluran&#39;a maruz bırakıldıktan 3-5 dakika sonra, hayvanın anestezi altında olup olmadığını kontrol edin ve parmak sıkışmasına tepki göstermeyin. </li><li> İntra peritoneal bir ksilazin ve ketamin karışımı ile sedat sıçanı: 75 mg / kg ketamin / 10 mg / kg xylazin. İntra peritoneal enjeksiyon yaparken, bağırsağın veya diğer hayati organların parçalarının delinmediğinden emin olmak için iğneyi geri çekin. </li><li> benTopikal ağrı kesici sağlamak için insizyon alanına subkutanöz olarak 2 mg / kg bupivakain konulmalıdır. </li></ol> 2. Cerrahi Alanın Hazırlanması <ol><li> Ameliyat için kullanılmadan önce cerrahi aletleri ve malzemeleri sterilize edin ve sterilite için cerrahi yastığa yerleştirin. Çoğu araç ve gereç otoklavlanabilir ve tekrar kullanılabilir. </li><li> Tüm cerrahi işlemler için steril eldiven kullanın. </li><li> Hayvanın sağ tarafındaki kürkü tıraş etmek için elektrikli tıraş bıçağı kullanın. Hayvanı kaburga kafesinin altından arka bacağın üst kısmına traş için büyük saçsız alan sağlayacak şekilde tıraş edin. </li><li> Hayvanı, steril bir cerrahi yastığa yerleştirerek dezenfekte edilen bölgeyi çevredeki alanlardan ayırın. </li><li> Cildinizi povidon iyot veya betadin gibi bir dezenfektan ile ovun. Cerrahi alanın merkezinde ovma işlemine başlayın ve dairesel bir şekilde dışarıya doğru hareket ettirin. Yeni bir povidon iyot veya betadin silinerek en az üç kez tekrarlayın. </li&gt; <li> İyot emilirse toksik olabilir, cilt berrak oluncaya kadar cerrahi alanı% 70 alkollü çubuk ile ovun. </li></ol> 3. Cerrahi İşlem <ol><li> Bu işlemi aseptik koşullar altında koruyun. </li><li> Anestezi altındaki hayvanı sağ yan yüzü yukarı bakacak şekilde sol yanal dekübitüs pozisyonunda sıcak bir ısıtma yatağına yerleştirin. NOT: Hipotermiyi önlemek için hayvanın çekirdek vücut ısısını 35-37 ° C&#39;de tutmak için özen gösterilmelidir. Bu ısıtma yatağı, aseptik koşulları korumak için gerektiğinde sterilize edilmelidir. </li><li> Kaburga kafesini hissedin ve kaburga kafesinin altından başlayan steril bir boy 10 kestane bıçağı kullanarak küçük 2-3 cm sağ dorsal retroperitoneal kesi yapın. </li><li> İnsizyonun her iki yanında uzunlamasına steril gazlı bez koyun. </li><li> Karın boşluğunu görselleştirmek ve erişmek için subkutanöz dokuyu, yağ ve kasları parçalayın. Daha derinlere nüfuz edebilmek için kıvrımlı bıçaklı Mayo makas kullanınRasyonunu yara haline getirin ve kalın dokuları kesin. </li><li> Karaciğer açıkça görünür ve erişilebilir olduğunda, karaciğeri yukarıya doğru geri çekmek için künt forseps kullanın. </li><li> Öte yandan başka bir çift künt forseps kullanmak, sağ böbrekleri ortaya çıkararak karın boşluğunun hemen dışına oturur. </li><li> Böbrek yerlerine tutturmak için işaretçisiyle parmağınızı ve sol elinizin başparmağını kullanın. Sağ elle, steril bir şırınga ile böbrek leğene (beyaz bir kabarcık olarak görülen) 15 ° C&#39;de 0.1 ml UTI89 E. coli solüsyonu (1 x 10 8 -1 x 10 9 arasında konsantrasyon) enjekte edin 15 . NOT: Bakteriyel titreyi referans 15&#39;de açıklandığı gibi hazırlayın. </li><li> İnokulumun periton içerisine akmasını önlemek için iğne üzerine emilebilir bir hemostat şerit yerleştirin. İğneyi yavaşça böbrek pelvisinden çekin. NOT: Çevredeki dokuları delmemeye veya enfekte etmemeye özen gösterilmeli ve bu da hedef dışı enfeksiyona neden olmaktadır.Ons ve / veya komplikasyonlar. </li><li> Karın boşluğuna geri koymadan önce böbrekleri normal tuzlu su ile iyice durulamak için daha büyük bir şırınga kullanın. </li></ol> 4. Sütürler Not: Dokularda gömülecek sütür, absorpsiyon yapılmayan 4-0 örgülü dikiş olmalıdır. Emilebilir veya monofilament sütürler vücut yüzeyleri için kullanılabilir. <ol><li> Kan akışının engellenmesini önlemek için dikişleri eşit ve doku kenarına mümkün olduğunca yakın yerleştirin; Tipik olarak kenardan en fazla 0,3 cm uzaklıkta olmalıdır. </li><li> Deriyi tutun ve bir çift güzel dişli forseps kullanarak hafifçe döndürün ve cildi delmek için hazırlıklı olarak iğne tutucusunu öne eğik bir konuma çevirin. </li><li> İğneyi döndürmek ve deriden geçirmek için bilekleri sarkıtarak iğneyi cildin tam kalınlığına doğru itin. </li><li> İşlemi yapan kişiye en yakın cilt kenarı için bu işlemi tekrarlayın. </li><li> sıkmakDoku kenarlarına karşı koyacak kadar sütürler. Herhangi bir sıkılaştırma kan dolaşımını engelleyecek, yavaş yara iyileşmesi ve çatlamaya neden olabilir. </li><li> Dikdörtgen düğümleri kullanarak sütürü sanki basit bir kesilen dikişmiş gibi sıkın, ancak kısa şerit kesilir, yaklaşık 3-4 mm&#39;lik bir kuyruk bırakılır. </li><li> İlk dikiş bağlandıktan sonra, ilk dikiş yaklaşık 3 mm uzaklıkta ikinci bir dikiş yerleştirmeye hazırlanın ve devam eden dikişe devam edin. </li><li> İnsizyonun sonuna gelindiğinde, son dikişi tamamen içeri doğru çekmeyin. Bunun yerine, dikiş kapağının distal ucunu birbirine bağlamak için iğne tutacağı ile burada tutulan ilmek kısa şerit olarak kullanın. </li><li> Bağlama kravatlarını kullanarak dikiş ipliğini kare düğümlerle birbirine bağlayın. Bu, 3 ucun tamamlanmış düğümden uzak uca yapışmasına neden olur. </li></ol> 5. Hayvan Kurtarma <ol><li> Anestezi tersine çevirmek için ameliyattan sonra intra-peritoneal olarak 2.1 mg / kg Yohimbine enjekte edin. bir3-5 saat sonra nimalslerin cerrahi prosedürden tamamen iyileşmesi bekleniyor. </li><li> Hayvanı ısıtma yastığı (hipotermiden kaçınmak için) ve ameliyat sonrası emici yumuşak yatak takımı üzerinde tutun. </li><li> Normal beslemeye geri dönene kadar oral veya parenteral sıvılar ile rehidrasyon sağlayın (24 saat içinde). Dehidrasyon etkilerini sınırlandırmak için ameliyattan hemen sonra yaklaşık 0.6 ml normal salin solüsyonunu peritoneal olarak enjekte edin. </li><li> IACUC tarafından onaylanmış Hayvan Bakımı ve Kullanım Protokolünde tarif edildiği gibi analjezi sağlayın. Ağrı tedavisi için subkütan 5 mg / kg karprofen enjekte edin. </li><li> İnsizyonları düzenli olarak şişlik, eksüda, ağrı veya delinme için izleyin. </li></ol> Manyetik Rezonans Görüntüleme yoluyla 6. Doğrulama <ol><li> Yüksek alanlı küçük hayvan MRI tarayıcılarında i n vivo MRI deneyleri yapın. </li><li> Oksijen içinde% 3 izofluran ile anestezi indükleyin ve izobasöre doğru böbrek ile yerleştirin.Radyofrekans bobini yedi. Bir nosekondan görüntüleme prosedürü boyunca sürekli olarak% 1-2 izofluran anestezi uygulanan hayvanlara sağlayın. NOT: Şekil l&#39;de gösterilen in vivo MR görüntüleri için sıçan boyutunda hacim bobini (iç çap = 72 mm) kullanıldı. </li><li> Her hayvanın solunum hızını (40-60 nefes / dakika) ve çekirdek vücut sıcaklığını (35 ± 1 ° C) korumak için bir hayvan izleme ve kontrol sistemi kullanın. </li><li> Hem enfekte hem de kontrol böbreklerinin yüksek çözünürlüklü, eksenel T2 ağırlıklı görüntüleri elde etmek için çok dilimli, çok eko-spinli bir eko MR görüntü alımı kullanın. Tipik MR görüntüleme parametreleri, tekrar süresi = 5.000 ms, eko süresi = 40 ms, dilim kalınlığı = 2.0 mm, düzlemsel uzaysal çözünürlük = 200 μm, 3 sinyal ortalamaları ve 8 dakikalık bir edinme zamanıdır. </li></ol>

<ol>
	<li>Saliba, W., Barnett-Griness, O., Rennert, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+association+between+obesity+and+urinary+tract+infection.">The association between obesity and urinary tract infection.</a> Eur J Intern Med. 24 (2), 27-31 (2012).</li><li>Semins, M., Shore, A., Makary, M., Weiner, J., Matlaga, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+obesity+on+urinary+tract+infection+risk.">The impact of obesity on urinary tract infection risk.</a> Urology. 79 (2), 266-269 (2011).</li><li>Zilberberg, M., Shorr, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secular+trends+in+gram-negative+resistance+among+urinary+tract+infection+hospitalizations+in+the+United+States,+2000-2009.">Secular trends in gram-negative resistance among urinary tract infection hospitalizations in the United States, 2000-2009.</a> Infect Control Hosp Epidemiol. 34 (9), 940-946 (2013).</li><li>Whiting, D., Guariguata, L., Weil, C., Shaw, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IDF+diabetes+atlas:+global+estimates+of+the+prevalence+of+diabetes+for+2011+and+2030.">IDF diabetes atlas: global estimates of the prevalence of diabetes for 2011 and 2030.</a> Diabetes Res Clin Pract. 94 (3), 311-321 (2011).</li><li>Wild, S., Roglic, G., Green, A., Sicree, R., King, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+prevalence+of+diabetes:+estimates+for+the+year+2000+and+projections+for+2030.">Global prevalence of diabetes: estimates for the year 2000 and projections for 2030.</a> Diabetes Care. 27 (5), 1047-1053 (2004).</li><li>Ma, D., Gulani, V., Seiberlich, N., Liu, K., Sunshine, J., Duerk, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+resonance+fingerprinting.">Magnetic resonance fingerprinting.</a> Nature. 495 (7440), 187-192 (2013).</li><li>Lu, L., Sedor, J., Gulani, V., Schelling, J., O'Brien, A., Flask, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+diffusion+tensor+MRI+to+identify+early+changes+in+diabetic+nephropathy.">Use of diffusion tensor MRI to identify early changes in diabetic nephropathy.</a> Am J Nephrol. 34 (5), 476-482 (2011).</li><li>Rosen, D., Hooton, T., Stamm, W., Humphrey, P., Hultgren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+intracellular+bacterial+communities+in+human+urinary+tract+infection.">Detection of intracellular bacterial communities in human urinary tract infection.</a> PLoS Med. 4 (12), e329 (2007).</li><li>Torine, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Urinary+tract+infection:+diabetic+women's+strategies+for+prevention.">Urinary tract infection: diabetic women's strategies for prevention.</a> Br J Nurs. 20 (13), 791-792 (2011).</li><li>Rosen, D., Hung, C., Kline, K., Hultgren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Streptozocin-induced+diabetic+mouse+model+of+urinary+tract+infection.">Streptozocin-induced diabetic mouse model of urinary tract infection.</a> Infect Immun. 76 (9), 4290-4298 (2008).</li><li>Larsson, P., Kaijser, B., Mattsby-Baltzer, I., Olling, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+experimental+model+for+ascending+acute+pyelonephritis+caused+by+Escherichia+coli+or+proteus+in+rats.">An experimental model for ascending acute pyelonephritis caused by Escherichia coli or proteus in rats.</a> J Clin Pathol. 33 (4), 408-412 (1980).</li><li>Gupta, R., Ganguly, N., Ahuja, V., Joshi, K., Sharma, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+ascending+non-obstructive+model+for+chronic+pyelonephritis+in+BALB/c+mice.">An ascending non-obstructive model for chronic pyelonephritis in BALB/c mice.</a> J. Med. Microbiol. 43 (1), 33-36 (1995).</li><li>Fernandes, P., Shipkowitz, N., Bower, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+models+for+studying+the+pathogenesis+and+treatment+of+pyelonephritis.">Murine models for studying the pathogenesis and treatment of pyelonephritis.</a> Adv. Exp. Med. Biol. 224, 35-51 (1987).</li><li>Kaye, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+water+diuresis+on+spread+of+bacteria+through+the+urinary+tract.">The effect of water diuresis on spread of bacteria through the urinary tract.</a> J. Infect. Dis. 124 (3), 297-305 (1971).</li><li>Fierer, J., Tainer, L., Braude, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacteremia+in+the+pathogenesis+of+retrograde+E.+coli+pyelonephritis+in+the+rat.">Bacteremia in the pathogenesis of retrograde E. coli pyelonephritis in the rat.</a> Am. J. Pathol. 64 (2), 443-456 (1971).</li><li>Nickel, J., Olson, M., Costerton, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+model+of+experimental+bacterial+prostatitis.">Rat model of experimental bacterial prostatitis.</a> Infection. 19 (3), S126-S130 (1991).</li><li>Hagberg, L., Engberg, I., Freter, R., Olling, S., Eden, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ascending,+unobstructed+urinary+tract+infection+in+mice+caused+by+pyelonephritogenic+Escherichia+coli+of+human+origin.">Ascending, unobstructed urinary tract infection in mice caused by pyelonephritogenic Escherichia coli of human origin.</a> Am Soc Microbiol. 40 (1), 273-283 (1983).</li><li>Kurosaka, Y., Ishida, Y., Yamamura, E., Takase, H., Otani, T., Kumon, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+non-surgical+rat+model+of+foreign+body-associated+urinary+tract+infection+with+Pseudomonas+aeruginosa.">A non-surgical rat model of foreign body-associated urinary tract infection with Pseudomonas aeruginosa.</a> Microbiol. Immunol. 45 (1), 9-15 (2001).</li><li>Anderson, B., Jackson, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pyelitis,+an+important+factor+in+the+pathogenesis+of+retrograde+pyelonephritis.">Pyelitis, an important factor in the pathogenesis of retrograde pyelonephritis.</a> J Exp Med. 114 (3), 375-384 (1961).</li><li>Anderson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vesico-ureteric+reflux.">Vesico-ureteric reflux.</a> J R Soc Med. 55 (6), 419-426 (1962).</li></ol>

The authors have no other disclosures.

Kemirgenlerde artan akut pyelonefrit (örn. Fare ve sıçanlar) transüretral kateterizasyon ile üretilebilir. 16 , 17 , 18 Bu transüretral enfeksiyon yöntemi, invazif olmadığı ve artan enfeksiyonun insan patofizyolojisini taklit ettiği için avantajlıdır. 17 , 18 , 19 , 20 Bununla birlikte, bu yöntem düzensiz enfeksiyon oranları ve işeme ve anatomik varyasyon gibi fizyolojik sınırlamalar nedeniyle böbrek için değişen E. coli dozajlarına maruz kalabilir. 11 Fierer ve ark. (1971), E. coli&#39;nin mesaneye infüzyonundan sonra piyelonefrit bulgusu gösteren 40 (% 15) fare böbreğinin 6&#39;sını bildirmiştir. 15 Ayrıca, E. coli tekrar infüzyon gerekiyordu birkaç kez Reli haftadaPiyelonefrit üretirler. 15 , 19 Bu raporda, alternatif bir kemirgen pyelonefrit modeli cerrahi olarak E.coli&#39;yi renal pelvise doğrudan sokmaktadır. Pyelonefrit tekniğinin cerrahi modelinin birincil yararı, her biri için aynı anatomik bölgede (sağ renal pelvis) bakterilerin enjekte edilmesinin yanı sıra, tutarlı bir E. coli konsantrasyonunun 1 x 10 8 - 1 x 10 9 konsantrasyonunda uygulanmasını içermektedir hayvan. 15 Bu doğrudan enjeksiyon, bir daha güvenilir bir enfeksiyon olarak enjekte edilen dozun daha hassas bir tespitini sağlayan geri akış için gereksinimi ortadan kaldırır. Genel olarak, bu cerrahi pyelonefrit modeli, üretral reflünün minimal etkisi ile tutarlı, tekrarlanabilir enfeksiyon gerektiren çalışmalar için alternatif bir seçenek sunmaktadır. Bu cerrahi tekniğin başarısını optimize etmek arasında şunlar bulunur:1) solunum hareketini sınırlamak ve yeterli çalışma süresine izin vermek için derin anestezi sağlanması; 2) hazırlanmamış alanlardan bulaşmayı önlemek için cerrahi insizyon alanını traş etmek; 3) kontaminasyonun önlenmesi için sterilizasyon; 4) bilinen bir dozda E. coli&#39;nin fare böbrek pelvisine dikkatli bir şekilde enjekte edilmesi; 5) enjeksiyon sonrası böbreklerin iyice salin yıkaması; 6) dikişler yoluyla yara kenarlarının yakınlaştırılması; Ve 7) hipotermi ve sistemik yan etkiler gibi intraoperatif ve post-operatif komplikasyonların izlenmesi. Hayvanların konforunu arttırmak için bir ısıtma yastığı kullanılmasına rağmen, bu protokol, çekirdek vücut sıcaklığını korumak için rektal sıcaklık sensörü kullanarak daha da optimize edilebilir. Başarılı bir sağkalım ameliyatına ulaşmada önemli bir adım, uygun anestezi ve hayvanın solunumunun izlenmesidir. Bunu yapmakta başarısızlık, hayvanın anestezi seviyesini stabilize etmek için aşırı cerrahi sürelere neden olur ve aşırıhareket. İş bölgesinin zayıflatılmış sterilitesi ve / veya E. coli bakterileri ile istenmeyen periton enfeksiyonu, cerrahi modele bağlı olarak görülen yaygın komplikasyonlardır. Bu nedenle, cerrahi aletleri otoklavlamak için yeterli preparat hazırlamak, tüm çalışma alanını sterilize etmek ve ek E. coli enfeksiyonlarını sınırlamak için yapılan usûl çabaları, hayvan ölümlerini ve aynı zamanda hatalı enfeksiyon sonuçlarını en aza indirgemeye yardımcı olur. E. coli&#39;nin böbrek içine doğrudan enjekte edilmesinin faydalarına rağmen, piyelonefritin bu cerrahi modeli de transüretral doğum yöntemine kıyasla çok sayıda sınırlamaya sahiptir. Direkt cerrahi enjeksiyon yaklaşımını kullanmanın en büyük dezavantajı, tekniğin doğal olarak invaziv olmasıdır. Bununla birlikte, uygun steril bir teknik uygulanması ve yeterli ağrı yönetimi, ısıtma yastıkları ile sıcaklık kontrolü ve ameliyat sonrası yumuşak, emici yatak konularında mortalite oldukça düşüktür.Hızlı iyileşmeyi sağlayın. Ek olarak, sterilizasyon için otoklavlama cerrahi aletleri, sterilizasyon için son derece güvenilir ve uygun maliyetli bir yöntemdir. Genel cerrahi süresi taahhüdü genellikle 1 saatten azdır. Ayrıca anestezi uygulaması, ayrıca vücut ağırlığına göre kalibre edilmiş ağrı kesicilerinin lokal ve sistemik olarak verilmesi doğru dozaj iletimi ve hasta güvenliği sağlar. Cerrahi modeldeki diğer bir potansiyel sınırlama, daha küçük anatomik boyutlar nedeniyle cerrahi tekniklerin farelerde daha zor olmasından kaynaklanmaktadır. Hem sıçanlarda hem de farelerde uygulanabilen transüretral yöntemin aksine, cerrahi model için sıçan modelleri kullanma gereksinimi, araştırmanın toplam maliyetini arttırır ve daha kolay elde edilebilir çeşitli genetik değişikliklerin incelenmesine kısıtlamalar koyabilir Ve fare modellerinde düşük maliyetli. Yukarıda belirtildiği gibi, cerrahi yöntemin önemli bir başka kısıtlılığı insan pyelonefritini temsil etmemesidirTransüretral yöntem olarak yakından takip eder. Burada, renal enfeksiyonları izlemek için MRI teknikleri kullandık. Şekil 1&#39;de gösterildiği gibi, MRI taraması böbrek infeksiyonlarını zaman içinde invaziv olmayan bir şekilde izleyebilme olanağı sağlar. E. coli enfeksiyonlarının izlenmesine alternatif bir yaklaşım, bakterilerin flüoresanla etiketlenmesidir. 11 , 18 Bununla birlikte, floresan görüntüleme, bu fare modelinde (fare modellerine karşıt olarak) doku tarafından ışık emilimine bağlı olarak daha az etkilidir; bu, bulgulama hassasiyetinin büyük ölçüde azalmasına neden olur. Bu nedenle, MR, en erken evrelerinde E. coli enfeksiyonlarını izlemek ve enfeksiyonun üç boyutlu boyutları hakkında bölgesel bilgi sağlamak için daha hassas araçlar sağlar. İYE / akut pyelonefrit patofizyolojisinin mekanizmaları ve böbrek fibrozisine ilerleme iyi bilinmemektedir. Enfeksiyon yapan ajanlar, alttaYalan immünolojik konak tepkisi ve inflamatuar reaksiyonlar ayrılmaz bir rol oynamaktadır, ancak her birinin önemi bilinmemektedir. Bu doğrudan enjeksiyon prosedürünü kullanarak bakteri hedefli böbrek nakline verilen iyileştirme, kemirgen modellerde akut pyelonefritin tekrarlanabilirliğini arttırma ve belki de ĐYE tedavisi için erken aşamadaki terapötik müdahaleleri daha doğru bir şekilde değerlendirmek için potansiyele sahiptir. Bu yöntem başlangıçta, bakterilerin böbreklere verilmesini optimize etmek için bir yaklaşım olarak geliştirildi, ancak aynı zamanda diğer reaktiflerin ve patojenlerin verilmesine yönelik bir uygulama geliştirdi. Bu yöntem benzer şekilde sistit, pyelonefrit, İYE ve diyabetik böbrek hastalığının araştırmalarına fayda sağlayabilir.

Kemirgen modelleri, piyelonefrit ve idrar yolu enfeksiyonları (UYE) de dahil olmak üzere çok sayıda insan hastalık bulgusu üzerinde çalışmak için kullanılmıştır. İYE&#39;ler küresel bir sağlık sorunudur ve her yaştan çocukları, erkekleri ve kadınları etkileyebilir. 1 , 2 , 3 ĐYE&#39;lerin başlangıç ​​tezahürü sistit içerir ve infüzyon üretere yükselirse böbrek enfeksiyonu (pyelonefrit) izlenebilir. Aynı zamanda, diyabet prevalansı dünya çapında 400 milyon kişiye yaklaşıyor. 4 , 5 Obezite olan veya tip 2 diabetes mellitus olan hastalarda İYE insidansı, 4 kez daha yüksek olabilir ve bu da tekrarlayan İYE enfeksiyonu (rUTI), sepsis, piyelonefritten renal fibrozis ve mesane disfonksiyonu riskinde artışa neden olur. 6 , 7 , 8 KemirgenModeller, ĐYE&#39;lerin incelenmesinde önemlidir, çünkü mevcut antibiyotik terapileri sadece ĐY &lt;hasta alt kümesinde kalıcı, önleyici bir yanıt üretmektedir. Klinik İYE bakımını iyileştirmek için anahtar adımlar akut enfeksiyondan inflamasyona, fibroza yol açan rUTI mekanizması ve patofizyolojik süreçlerinin yanı sıra tip 2 diabetes mellitusun etkisini anlamaktır. Hayvan modellerini geliştirmenin amacı, hastalık ilerlemesinin ve terapötik müdahalelerin daha doğru bir şekilde değerlendirilmesini sağlayan teknikler geliştirmektir. Sıçanlarda ve / veya farelerde böbrek hasarının patofizyolojisini, antibiyotik tedavisinin etkilerini ve diğer ĐYE&#39;lerin doğal seyrini incelemek için pyelonefriti indüklemek için çeşitli farklı yaklaşımlar kullanılmıştır. Retrograd İYE&#39;nin kurulması için ortak bir yaklaşım, transüretral kateterizasyondur. 10 , 11 , 12 , 13 &lt;/ Sup&gt; Bu yöntem, bakterileri üretra yoluyla anestezi altındaki hayvanlardaki idrar torbasına sokar. Bu teknik insan pyelonefritini yakından taklit ederken, pyelonefrit enfeksiyonunun asıl insidansı ve büyüklüğü, aşılama sırasında veya hemen sonrasında spontan üreterik reflü eksikliği veya üriner boşalma dahil olmak üzere çok faktör nedeniyle aşırı değişkenlik gösterebilir. 11 Sonuç olarak, yükselen pyelonefrit enfeksiyonunu indüklemedeki deneysel değişkenlik böbrek enfeksiyonlarını ve terapötik stratejileri incelemek için bu modelin faydasını kısıtlayabilir. Bu rapor, E. coli&#39;nin sıçan böbreğine doğrudan enjekte edildiği cerrahi bir pyelonefrit fare modelini tanımlamaktadır. Bu sıçan modelinin invaziv olmasına rağmen, böbreklere verilen E. coli miktarı, etkili bir şekilde kontrol edilerek sağlam bir böbrek enfeksiyonu ve enflamasyon sağlar. 14 Bu prosedür dahilinde ayrıca,In vivo Manyetik Rezonans Görüntüleme (MRI) ile bu indüklenen renal enfeksiyonların boylamsal olarak izlenebileceği.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="745">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Absorbing Pad</td>
			<td style="width:195px;">Fisher</td>
			<td style="width:168px;">14-127-47</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sterile Cotton Gauze Pad</td>
			<td style="width:195px;">Fisher</td>
			<td style="width:168px;">22-415-469</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Latex Surgical Gloves</td>
			<td>Henry Schein Animal Health</td>
			<td>21540</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Curved Mayo Scissors</td>
			<td style="width:195px;">Fisher</td>
			<td style="width:168px;">S17341</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Straight Blunt Foreceps</td>
			<td style="width:195px;">Fisher</td>
			<td style="width:168px;">08-895</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Scalpel Handle&#160;</td>
			<td style="width:195px;">Fisher</td>
			<td style="width:168px;">08-913-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sterile Scalpel Blades</td>
			<td style="width:195px;">Fisher</td>
			<td style="width:168px;">53220</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">1mL Luer-Lok Syringe</td>
			<td style="width:195px;">BD Biosciences</td>
			<td>309628</td>
			<td>For bacterial injections</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">20mL Luer-Lok Syringe&#160;</td>
			<td style="width:195px;">BD Biosciences</td>
			<td>301031</td>
			<td>For saline wash</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Hemostat</td>
			<td style="width:195px;">Seneca Medical</td>
			<td style="width:168px;">240267</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">23 G 3/4 in. Needle&#160;</td>
			<td style="width:195px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:168px;">305143</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">30 G 1 in. Needle&#160;</td>
			<td style="width:195px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:168px;">305128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">U-100 Insulin Syringe</td>
			<td>Exel International&#160;</td>
			<td style="width:168px;">25846</td>
			<td>For medication injections</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isoflurane</td>
			<td>Henry Schein Animal Health</td>
			<td>050033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Xylazine</td>
			<td>Henry Schein Animal Health</td>
			<td>33197</td>
			<td>Inject IP</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ketamine</td>
			<td>Patterson Vetrinary&#160;</td>
			<td>07-881-9413</td>
			<td>Inject IP</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Yohimbine (Atipamezole)</td>
			<td style="width:195px;">Patterson Vetrinary&#160;</td>
			<td>07-867-7097</td>
			<td>Inject IP after surgery</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Bupivacaine (Marcaine)</td>
			<td style="width:195px;">Patterson Vetrinary&#160;</td>
			<td>07-890-4584</td>
			<td>Inject SQ at site of incision&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Carprofen (Rimadyl)</td>
			<td style="width:195px;">Patterson Vetrinary&#160;</td>
			<td>07-844-7425</td>
			<td>Should be kept at 4 &#7506;C</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">4-0 Chromic Gut Suture</td>
			<td style="width:195px;">Ethicon Inc.</td>
			<td>U203H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">4-0 Braided Vicryl Suture</td>
			<td>Ethicon Inc.</td>
			<td>J304H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">1mL SubQ Syringe</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>309597</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">E. coli&#160; UTI89 or CFT073</td>
			<td style="width:195px;">ATCC</td>
			<td style="width:168px;">700928</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Surgicel Absorbable Hemostat</td>
			<td style="width:195px;">Ethicon Inc.</td>
			<td>ETH1951CS&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Biospec 9.4T MRI&#160;</td>
			<td style="width:195px;">Bruker&#160;</td>
			<td style="width:168px;">94/20 USR</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

intrarenal injection of escherichia coli in a rat model of pyelonephritis

Pyelonephritis is a bacterial infection of the kidney and is most commonly caused by Escherichia coli. Recurrent infections can cause significant renal inflammation and fibrosis ultimately resulting in declining kidney function. Before improved clinical management and prevention of pyelonephritis can be instituted, a reliable animal model must be established in order to study the mechanisms of progression, recurrence, and therapeutic efficacy. The transurethral infection model closely mimics human pyelonephritis but exhibits considerable variation due to its reliance on urethral reflux to transport the bacteria to the kidney. Herein, a detailed surgical protocol for performing bacterial injections into the rat renal pelvis is provided and confirmed by non-invasive Magnetic Resonance Imaging (MRI). Using this protocol, animals receive direct exposure to a desired concentration of E. coli bacteria and can fully recover from the surgical procedure with adequate post-operative care. This facilitates subsequent longitudinal MRI assessments of the experimental animal models for comparison with saline (sham) controls. Using this direct delivery approach, the severity of infection is controllable and applicable for mechanistic studies of progression as well as development of novel treatment strategies.

Tıbbi görüntüleme teknikleri, İYE&#39;yi ve terapötik etkinliği invaziv olmayan bir şekilde değerlendirme fırsatı sunar. Bu nedenle, MR 1-2 x 10 7 UTI89 E. coli&#39;nin enjeksiyonundan sonra akut enfeksiyon uyarılmasını doğrulamak için ve ameliyat öncesi ve sonrası böbrek değişiklikleri görselleştirmek için kullanılmıştır. Şekil 1a-b , giderek artan böbrek enfeksiyonu bölgesini gösterir (sarı oklar). Enfeksiyon sonrası postoperatif 1. ve 4. günlerde her bir hayvan için elde edilen MR görüntüleri akut pyelonefrit enfeksiyonunun büyümesini karakterize etmektedir. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/54649/54649fig1.jpg" /> Şekil 1: ( a ) 1. Gün ve ( b ) 4. Enfeksiyon sonrası (sarı oklar) Pyelonefritin E. coli kaynaklı Kemirgen Modelinden Eksenel T1 Ağırlıklı MR görüntüleri.

Watch this Scientific Journal Video about Intrarenal Injection of Escherichia coli in a Rat Model of Pyelonephritis at JoVE.com

Intrarenal Injection of Escherichia coli in a Rat Model of Pyelonephritis

This manuscript describes a rat surgical model of pyelonephritis using direct intra-renal infection by Escherichia coli into the renal pelvis. The experimental procedure can be utilized to study the pathogenesis of pyelonephritis as well as the associated inflammation and fibrosis.

Intrarenal enjeksiyon<em&gt; Escherichia coli</em&gt; Piyelonefritli Sıçan Modelinde

Pyelonephritis is a bacterial infection of the kidney and is most commonly caused by Escherichia coli. Recurrent infections can cause significant renal ...

intrarenal-injection-escherichia-coli-rat-model

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

Intrarenal Injection of Escherichia coli in a Rat Model of Pyelonephritis

7.9K Görüntüleme.  Case Western Reserve University. This manuscript describes a rat surgical model of pyelonephritis using direct intra-renal infection by Escherichia coli into the renal pelvis. The experimental procedure can be utilized to study the pathogenesis of pyelonephritis as well as the associated inflammation and fibrosis.

Video: Intrarenal Injection of Escherichia coli in a Rat Model of Pyelonephritis

Coronary Artery Ligation and Intramyocardial Injection in a Murine Model of Infarction

Mouse models are a valuable tool for studying acute injury and chronic remodeling of the myocardium in vivo. With the advent of genetic modifications to the whole organism or the myocardium and an array of biological and/or synthetic materials, there is great potential for any combination of these to assuage the extent of acute ischemic injury and impede the onset of heart failure pursuant to myocardial remodeling. 
Here we present the methods and materials used to reliably perform this microsurgery and the modifications involved for temporary (with reperfusion) or permanent coronary artery occlusion studies as well as intramyocardial injections. The effects on the heart that can be seen during the procedure and at the termination of the experiment in addition to histological evaluation will verify efficacy. 
Briefly, surgical preparation involves anesthetizing the mice, removing the fur on the chest, and then disinfecting the surgical area. Intratracheal intubation is achieved by transesophageal illumination using a fiber optic light. The tubing is then connected to a ventilator. An incision made on the chest exposes the pectoral muscles which will be cut to view the ribs. For ischemia/reperfusion studies, a 1 cm piece of PE tubing placed over the heart is used to tie the ligature to so that occlusion/reperfusion can be customized. For intramyocardial injections, a Hamilton syringe with sterile 30gauge beveled needle is used. When the myocardial manipulations are complete, the rib cage, the pectoral muscles, and the skin are closed sequentially. Line block analgesia is effected by 0.25% marcaine in sterile saline which is applied to muscle layer prior to closure of the skin. The mice are given a subcutaneous injection of saline and placed in a warming chamber until they are sternally recumbent. They are then returned to the vivarium and housed under standard conditions until the time of tissue collection. At the time of sacrifice, the mice are anesthetized, the heart is arrested in diastole with KCl or BDM, rinsed with saline, and immersed in fixative. Subsequently, routine procedures for processing, embedding, sectioning, and histological staining are performed. 
Nonsurgical intubation of a mouse and the microsurgical manipulations described make this a technically challenging model to learn and achieve reproducibility. These procedures, combined with the difficulty in performing consistent manipulations of the ligature for timed occlusion(s) and reperfusion or intramyocardial injections, can also affect the survival rate so optimization and consistency are critical.

Numerous genetic manipulations and/or intramyocardial injections of genes, proteins, cells, and/or biomaterials are superimposed upon the dimension of time in studies of acute ischemia/ reperfusion injury and chronic remodeling in mice. This video illustrates the microsurgical procedures for ischemia/reperfusion, permanent coronary artery ligation, and intramyocardial injection studies.

Enfarktüsü bir murin Model Koroner Arter ligasyon ve intramiyokardiyal Enjeksiyon

Mouse models are a valuable tool for studying acute injury and chronic remodeling of the myocardium in vivo.  With the advent of genetic modifications to ...

Tıp

Multi-modal Imaging of Angiogenesis in a Nude Rat Model of Breast Cancer Bone Metastasis Using Magnetic Resonance Imaging, Volumetric Computed Tomography and Ultrasound

Angiogenesis is an essential feature of cancer growth and metastasis formation. In bone metastasis, angiogenic factors are pivotal for tumor cell proliferation in the bone marrow cavity as well as for interaction of tumor and bone cells resulting in local bone destruction. Our aim was to develop a model of experimental bone metastasis that allows in vivo assessment of angiogenesis in skeletal lesions using non-invasive imaging techniques.
For this purpose, we injected 105 MDA-MB-231 human breast cancer cells into the superficial epigastric artery, which precludes the growth of metastases in body areas other than the respective hind leg1. Following 25-30 days after tumor cell inoculation, site-specific bone metastases develop, restricted to the distal femur, proximal tibia and proximal fibula1. Morphological and functional aspects of angiogenesis can be investigated longitudinally in bone metastases using magnetic resonance imaging (MRI), volumetric computed tomography (VCT) and ultrasound (US).
MRI displays morphologic information on the soft tissue part of bone metastases that is initially confined to the bone marrow cavity and subsequently exceeds cortical bone while progressing. Using dynamic contrast-enhanced MRI (DCE-MRI) functional data including regional blood volume, perfusion and vessel permeability can be obtained and quantified2-4. Bone destruction is captured in high resolution using morphological VCT imaging. Complementary to MRI findings, osteolytic lesions can be located adjacent to sites of intramedullary tumor growth. After contrast agent application, VCT angiography reveals the macrovessel architecture in bone metastases in high resolution, and DCE-VCT enables insight in the microcirculation of these lesions5,6. US is applicable to assess morphological and functional features from skeletal lesions due to local osteolysis of cortical bone. Using B-mode and Doppler techniques, structure and perfusion of the soft tissue metastases can be evaluated, respectively. DCE-US allows for real-time imaging of vascularization in bone metastases after injection of microbubbles7.
In conclusion, in a model of site-specific breast cancer bone metastases multi-modal imaging techniques including MRI, VCT and US offer complementary information on morphology and functional parameters of angiogenesis in these skeletal lesions.

In the pathogenesis of bone metastasis, angiogenesis is a crucial process and therefore represents a target for imaging and therapy. Here, we present a rat model of site-specific breast cancer bone metastasis and describe strategies to non-invasively image angiogenesis in vivo using magnetic resonance imaging, volumetric computed tomography and ultrasound.

Manyetik Rezonans Görüntüleme, Volumetrik Bilgisayarlı Tomografi ve Ultrason Kullanımı Meme Kanseri Kemik metastazı bir Nude Rat Model Angiogenezis Multi-modal Görüntüleme

Angiogenesis is an essential feature of cancer growth and metastasis formation. In bone metastasis, angiogenic factors are pivotal for tumor cell ...

Rat Model of Blood-brain Barrier Disruption to Allow Targeted Neurovascular Therapeutics

Endothelial cells with tight junctions along with the basement membrane and astrocyte end feet surround cerebral blood vessels to form the blood-brain barrier1. The barrier selectively excludes molecules from crossing between the blood and the brain based upon their size and charge. This function can impede the delivery of therapeutics for neurological disorders. A number of chemotherapeutic drugs, for example, will not effectively cross the blood-brain barrier to reach tumor cells2. Thus, improving the delivery of drugs across the blood-brain barrier is an area of interest.
The most prevalent methods for enhancing the delivery of drugs to the brain are direct cerebral infusion and blood-brain barrier disruption3. Direct intracerebral infusion guarantees that therapies reach the brain; however, this method has a limited ability to disperse the drug4. Blood-brain barrier disruption (BBBD) allows drugs to flow directly from the circulatory system into the brain and thus more effectively reach dispersed tumor cells. Three methods of barrier disruption include osmotic barrier disruption, pharmacological barrier disruption, and focused ultrasound with microbubbles. Osmotic disruption, pioneered by Neuwelt, uses a hypertonic solution of 25% mannitol that dehydrates the cells of the blood-brain barrier causing them to shrink and disrupt their tight junctions. Barrier disruption can also be accomplished pharmacologically with vasoactive compounds such as histamine5 and bradykinin6. This method, however, is selective primarily for the brain-tumor barrier7. Additionally, RMP-7, an analog of the peptide bradykinin, was found to be inferior when compared head-to-head with osmotic BBBD with 25% mannitol8. Another method, focused ultrasound (FUS) in conjunction with microbubble ultrasound contrast agents, has also been shown to reversibly open the blood-brain barrier9. In comparison to FUS, though, 25% mannitol has a longer history of safety in human patients that makes it a proven tool for translational research10-12.
In order to accomplish BBBD, mannitol must be delivered at a high rate directly into the brain's arterial circulation. In humans, an endovascular catheter is guided to the brain where rapid, direct flow can be accomplished. This protocol models human BBBD as closely as possible. Following a cut-down to the bifurcation of the common carotid artery, a catheter is inserted retrograde into the ECA and used to deliver mannitol directly into the internal carotid artery (ICA) circulation. Propofol and N2O anesthesia are used for their ability to maximize the effectiveness of barrier disruption13. If executed properly, this procedure has the ability to safely, effectively, and reversibly open the blood-brain barrier and improve the delivery of drugs that do not ordinarily reach the brain 8,13,14.

Blood-brain barrier disruption aids the delivery of certain drugs to the brain. Mannitol delivered intra-arterially shrinks cells surrounding blood vessels in order to physically disrupt the barrier.

Kan-beyin bariyer bozulması arasında Rat Modeli Nörovasküler Therapeutics Hedefli izin ver için

Endothelial cells with tight junctions along with the basement membrane and astrocyte end feet surround cerebral blood vessels to form the blood-brain ...

A Model of Chronic Nutrient Infusion in the Rat

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to affect the function of several organs and tissues and to contribute to the development of the many complications associated with obesity and the metabolic syndrome, including type 2 diabetes. To study the mechanisms by which excessive levels of glucose and fatty acids affect the pancreatic beta-cell and the secretion of insulin, we have established a chronic nutrient infusion model in the rat. The procedure consists of catheterizing the right jugular vein and left carotid artery under general anesthesia; allowing a 7-day recuperation period; connecting the catheters to the pumps using a swivel and counterweight system that enables the animal to move freely in the cage; and infusing glucose and/or Intralipid (a soybean oil emulsion which generates a mixture of approximately 80% unsaturated/20% saturated fatty acids when infused with heparin) for 72 hr. This model offers several advantages, including the possibility to finely modulate the target levels of circulating glucose and fatty acids; the option to co-infuse pharmacological compounds; and the relatively short time frame as opposed to dietary models. It can be used to examine the mechanisms of nutrient-induced dysfunction in a variety of organs and to test the effectiveness of drugs in this context.

A protocol for chronic infusions of glucose and Intralipid in rats is described. This model can be used to study the impact of nutrient excess on organ function and physiological parameters.

Sıçan Kronik Besin İnfüzyon Bir Model

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to  affect the function of several organs and tissues and to contribute to the  ...

Development of an Alpha-synuclein Based Rat Model for Parkinson's Disease via Stereotactic Injection of a Recombinant Adeno-associated Viral Vector

In order to study the molecular pathways of Parkinson&#39;s disease (PD) and to develop novel therapeutic strategies, scientific investigators rely on animal models. The identification of PD-associated genes has led to the development of genetic PD models. Most transgenic &#945;-SYN mouse models develop gradual &#945;-SYN pathology but fail to display clear dopaminergic cell loss and dopamine-dependent behavioral deficits. This hurdle was overcome by direct targeting of the substantia nigra with viral vectors overexpressing PD-associated genes. Local gene delivery using viral vectors provides an attractive way to express transgenes in the central nervous system. Specific brain regions can be targeted (e.g. the substantia nigra), expression can be induced in the adult setting and high expression levels can be achieved. Further, different vector systems based on various viruses can be used. The protocol outlines all crucial steps to perform a viral vector injection in the substantia nigra of the rat to develop a viral vector-based alpha-synuclein animal model for Parkinson&#39;s disease.

This manuscript describes how viral vector-mediated local gene delivery provides an attractive way to express transgenes in the central nervous system. The protocol outlines all crucial steps to perform a viral vector injection in the substantia nigra of the rat to develop a viral vector-based animal model for Parkinson's disease.

Bir rekombinant adeno-ilişkili viral vektörün stereotaktik enjeksiyon yoluyla Parkinson Hastalığı için bir alfa-sinüklein Bazlı Fare Modeli Geliştirme

In order to study the molecular pathways of Parkinson&#39;s disease (PD) and to develop novel therapeutic strategies, scientific investigators rely on ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

İzometrik Contractility ölçüm tel Myography kullanarak fare mezenterik arter

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Acupuncture in a Rat Model of Asthma

A high platform can fix rats without restriction and completely expose the acupoints on the back during acupuncture manipulation. This article describes methods for the fabrication of the high platform, establishes a rat model of asthma and measures changes in respiratory function using a noninvasive and real-time whole-body plethysmography (WBP) system.

Astımın Sıçan Modelinde Akupunktur

A high platform can fix rats without restriction and completely expose the acupoints on the back during acupuncture manipulation. This article describes ...

Retinal Pathophysiological Evaluation in a Rat Model

A posterior segment eye disease like diabetic retinopathy alters the physiology of the retina. Diabetic retinopathy is characterized by a retinal detachment, breakdown of the blood-retinal barrier (BRB), and retinal angiogenesis. An in vivo rat model is a valuable experimental tool to examine the changes in the structure and function of the retina. We propose three different experimental techniques in the rat model to identify morphological changes of retinal cells, retinal vasculature, and compromised BRB. Retinal histology is used to study the morphology of various retinal cells. Also, quantitative measurement is performed by retinal cell count and thickness measurement of different retinal layers. A BRB breakdown assay is used to determine the leakage of extraocular proteins from the plasma to vitreous tissue due to the breakdown of BRB. Fluorescence angiography is used to study angiogenesis and leakage of blood vessels by visualizing retinal vasculature using FITC-dextran dye.

Diabetic retinopathy is one of the leading causes of blindness. Histology, blood-retinal barrier breakdown assay, and fluorescence angiography are valuable techniques to understand the pathophysiology of the retina, which could further enhance the efficient drug screening against diabetic retinopathy.

Sıçan Modelinde Retinal Patofizyolojik Değerlendirme

A posterior segment eye disease like diabetic retinopathy alters the physiology of the retina. Diabetic retinopathy is characterized by a retinal ...

Development of a Uterosacral Ligament Suspension Rat Model

Pelvic organ prolapse (POP) is a common pelvic floor disorder (PFD) with the potential to significantly impact a woman's quality of life. Approximately 10%-20% of women undergo pelvic floor repair surgery to treat prolapse in the United States. PFD cases result in an overall $26.3 billion annual cost in the United States alone. This multifactorial condition has a negative impact on the quality of life and yet the treatment options have only dwindled in the recent past. One common surgical option is uterosacral ligament suspension (USLS), which is typically performed by affixing the vaginal vault to the uterosacral ligament in the pelvis. This repair has a lower incidence of complications compared to those with mesh augmentation, but is notable for a relatively high failure rate of up to 40%. Considering the lack of standard animal models to study pelvic floor dysfunction, there is an urgent clinical need for innovation in this field with a focus on developing cost-effective and accessible animal models. In this manuscript, we describe a rat model of USLS involving a complete hysterectomy followed by fixation of the remaining vaginal vault to the uterosacral ligament. The goal of this model is to mimic the procedure performed on women to be able to use the model to then investigate reparative strategies that improve the mechanical integrity of the ligament attachment. Importantly, we also describe the development of an in situ tensile testing procedure to characterize interface integrity at chosen time points following surgical intervention. Overall, this model will be a useful tool for future studies that investigate treatment options for POP repair via USLS.

Pelvic organ prolapse affects millions of women worldwide and yet some common surgical interventions have failure rates as high as 40%. The lack of standard animal models to investigate this condition impedes progress. We propose the following protocol as a model for uterosacral ligament suspension and in vivo tensile testing.

Uterosakral Ligament Süspansiyon Sıçan Modelinin Geliştirilmesi

Pelvic organ prolapse (POP) is a common pelvic floor disorder (PFD) with the potential to significantly impact a woman's quality of life. Approximately ...

A Model of Long-Term Ventricular Fibrillation in Isolated Rat Hearts

Ventricular fibrillation (VF) is a fatal arrhythmia with a high incidence in cardiac patients, but VF arrest under perfusion is a neglected method of intraoperative arrest in the field of cardiac surgery. With recent advances in cardiac surgery, the demand for prolonged VF studies under perfusion has increased. However, the field lacks simple, reliable, and reproducible animal models of chronic ventricular fibrillation. This protocol induces long-term VF through alternating current (AC) electrical stimulation of the epicardium. Different conditions were used to induce VF, including continuous stimulation with a low or high voltage to induce long-term VF and stimulation for 5 min with a low or high voltage to induce spontaneous long-term VF. The success rates of the different conditions, as well as the rates of myocardial injury and recovery of cardiac function, were compared. The results showed that continuous low-voltage stimulation induced long-term VF and that 5 min of low-voltage stimulation induced spontaneous long-term VF with mild myocardial injury and a high rate of recovery of cardiac function. However, the low-voltage, continuously stimulated long-term VF model had a higher success rate. High-voltage stimulation provided a higher rate of VF induction but showed a low defibrillation success rate, poor recovery of cardiac function, and severe myocardial injury. On the basis of these results, continuous low-voltage epicardial AC stimulation is recommended for its high success rate, stability, reliability, reproducibility, low impact on cardiac function, and mild myocardial injury.

This protocol presents a model of long-term ventricular fibrillation in rat hearts induced by continuous stimulation with low-voltage alternating current. This model has a high success rate, is stable, reliable, and reproducible, has a low impact on cardiac function, and causes only mild myocardial injury.

İzole Sıçan Kalplerinde Uzun Süreli Ventriküler Fibrilasyon Modeli

Ventricular fibrillation (VF) is a fatal arrhythmia with a high incidence in cardiac patients, but VF arrest under perfusion is a neglected method of ...