We thank Dr. John Chang (Radiation Oncology, LSU Health Science Center) for assistance with radiation dose measurements. The study was supported by the American Cancer Society (Grant number: 116945-RSG-09-038-01-CCE), National Institute of Health (Grant number: R21CA173162) and the Feist-Weiller Cancer Center.

Tüm işlemler LSU Sağlık, Shreveport, Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylanmış ve bakım ve laboratuvar hayvanlarının kullanımı için NIH kurallarına uygun olarak idi. Sıçan Submandibuler Tükürük Bezlerinin 1. kanülasyonu <ol><li> Şırınga-Boru Meclisi Hazırlanması <ol><li> bir neşter ile PE10 polietilen boru 10 cm uzunluğunda kesilir. işaret parmağı ve başparmak arasında boru iki ucunu tutun. nazik bir alev üzerinde boru orta bölümünü ısıtın ve yavaşça her iki tarafı çekerek uzunluğunu iki katına yumuşatılmış boru germek. </li><li> Konik bir ucu ile, her 2 - kanüller için 45 o lik bir açıda bir neşter ile orta hortumu kesilir. 0.5 cc İnsülin şırınga 29 G iğne üzerine takarak kanül olmayan konik ucunu genişletin. </li><li> kanül çıkarın ve enjektöre tuzlu su çözeltisi 220 ul çizin. Hava kabarcıklarını çıkarmak için hafifçe vurun. cannul Fitiğne üzerinde ve havayı dışarı atmak ve kanül yoluyla çözümün serbest akışını sağlamak için şırınga pistonu itin. 200 ul ses seviyesini ayarlayın. </li></ol></li><li> Submandibular Bez Duct içi Ağız kanülasyonu NOT: Otoklav araçlar prosedür öncesi ve sıcak bir boncuk sterilizatör prosedürlere arasında sterilize. <ol><li> Sprague Dawley sıçan tartılır ve bir hipodermik şırınga hesaplanan ketamin hacmi (42 mg / kg) / ksilazin (8 mg / kg) / asepromazin (1.4 mg / kg) karışımı dağıtın. </li><li> işaret parmağı ve bir elin başparmak arasındaki kuyruk tabanı tutup onu kavramak vücut üzerinde diğer yandan kaydırarak hayvan dizginlemek. Başparmak ve kalan parmakları ile gövde tutarken baş tarafı boyunca indeksi ve orta parmaklarınızı dinlenmek. </li><li> arka bacak kas anestezik enjekte edilir. ayak tutam ve palpebral refleks anestezi derinliği onaylayın. kuruluk süre önlemek için göz yağ sürünhayvan anestezi altında olduğunu. </li><li> Özel tasarlanmış bir platform (Şekil 1) hayvan koyun ve çapraz çubuk üst kesici dişlerin meşgul. alt ön dişlerin etrafına bir lastik bant döngü ve platform için demirleme ile alt çene aşağı çekin. </li><li> dil aracılığıyla steril dikiş geçmek ve ağız tabanını yükseltmek için yukarı kaldırın. Bir hemostatla sütürler Kelepçe ve çapraz çubuk üzerine geçirin. </li><li> Bir özel inşa edilmiş yanak yayıcı (Şekil 1) ile yanakları genişletin ve bir mikroskop altında ağız katta dilaltı papilla bulun. </li><li> hassas bir forseps kullanarak önceden PI10 boru konik ucunu tutun. Yavaşça dilaltı papilla üzerinde duktal deliğinin içine kanül ucu manipüle. o 3 geçirilerek kanül yerleştirme onaylamak - kanal içine 5 mm; herhangi bir engel olmadan geçer emin olun. </li></ol></li><li> Submandibuler Bezi Instillation <ol><li> Boynun ense deri altına atropin (0.5 mg / kg) enjekte edilir, ve tükürük salgılarında azaltılması için 10 dakika bekleyin. </li><li> siyanoakrilat (yapıştırıcı) bir damla kanal ağzına kanül Güvenli ve kurumasını bekleyin. yavaş 50 ml / dk&#39;lık bir oranda şırınga pistonunun basarak bezi (200 ul / bezi) &#39;de çözelti aşılamak. </li><li> Bir hemostatla boru Crush ve dikkatle şırınga çıkarın. Hayvan bilinç kavuşur kadar 60 dakika - 30 kanalda boru saklayın. dilini tutan dikiş çıkarın. </li><li> Ayrı bir kafesine hayvan aktarın ve kurtarma sırasında sıcak tutmak için bir ısı lambası kullanın. sternal recumbence korumak için kendine geldi kadar sahipsiz hayvan bırakmayın. </li><li> Hayvan tamamen ayaktan sonra, yiyecek ve su sınırsız erişim ile vivari adresinden ev. </li></ol></li></ol> 2. Lokalize fraksiyonlara IşınlamaTükürük Bezlerinin <ol><li> daha önce tarif edildiği gibi bir hayvan dizginlemek ve arka bacak kas içine ketamin (33 mg / kg) / ksilazin (6 mg / kg) / asepromazin (1 mg / kg) karışımı ile anestezi. anestezi derinliği onaylayın ve gözlere gres sürülmesi. </li><li> lineer hızlandırıcı masa üzerine hayvan sırtüstü yerleştirin ve kafa eğerek boynunu uzatmak. sternum üstüne mandibula alt sınırından bölgeyi kapsayacak şekilde radyasyon alanı (3 cm yarık genişliği) .birleştirecek. </li><li> bölge üzerinde 1 cm&#39;lik bir doku eşdeğer bolus yerleştirin ve radyasyon kaynağı ve 100 cm bolus tepesi arasındaki mesafeyi ayarlamak. </li><li> Bir lineer hızlandırıcı bir 6 MV foton ışını kullanarak hayvan (2.5 Gy) ışın tedavisi. pozlama süresini dikte edecek yüzeyi bolus radyasyon kaynağından oranı, alan büyüklüğü ve mesafesini Doz. ayarlamak akım hayvanlar, ~ 1 Gy / dak doz oranında ışınlanmıştır. </li><li> pozlama tekrarlayın; Toplam 8 2.5 Gy / güngün; 4 gün / arasında 2 gün ara ile bir hafta. kurtarma sırasında hayvan sıcak tutun. tamamen ayaktan sonra vivari hayvan aktarın. </li><li> Bezi fonksiyon 14 ölçmek için radyasyon sonrası uyarılan submandibuler bez tükürük 8 hafta toplayın. Soğuk% 4 paraformaldehid / fosfat tamponlu tuzlu su, pH 7.2, kardiyak perfüzyon ile anestezi altında hayvanlara öldürülür. Histolojik ve immünohistokimyasal 14 analizleri için submandibuler bezleri kökünü kazımak. </li></ol>

<ol>
	<li>Delporte, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+fluid+secretion+after+adenoviral-mediated+transfer+of+the+aquaporin-1+cDNA+to+irradiated+rat+salivary+glands.">Increased fluid secretion after adenoviral-mediated transfer of the aquaporin-1 cDNA to irradiated rat salivary glands.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 94 (7), 3268-3273 (1997).</li><li>Chambers, M. S., Rosenthal, D. I., Weber, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiation-induced+xerostomia.">Radiation-induced xerostomia.</a> Head Neck. 29 (1), 58-63 (2007).</li><li>Sciubba, J. J., Goldenberg, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oral+complications+of+radiotherapy.">Oral complications of radiotherapy.</a> Lancet Oncol. 7 (2), 175-183 (2006).</li><li>Rodrigues, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+prospective+study+of+salivary+gland+function+in+lymphoma+patients+receiving+head+and+neck+irradiation.">A prospective study of salivary gland function in lymphoma patients receiving head and neck irradiation.</a> Int J Radiat Oncol Biol Phys. 75 (4), 1079-1083 (2009).</li><li>Coracin, F. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Major+salivary+gland+damage+in+allogeneic+hematopoietic+progenitor+cell+transplantation+assessed+by+scintigraphic+methods.">Major salivary gland damage in allogeneic hematopoietic progenitor cell transplantation assessed by scintigraphic methods.</a> Bone Marrow Transplant. 37 (10), 955-959 (2006).</li><li>Jensen, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+systematic+review+of+salivary+gland+hypofunction+and+xerostomia+induced+by+cancer+therapies:+management+strategies+and+economic+impact.">A systematic review of salivary gland hypofunction and xerostomia induced by cancer therapies: management strategies and economic impact.</a> Support Care Cancer. 18 (8), 1061-1079 (2010).</li><li>de Castro, G., Federico, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation,+prevention+and+management+of+radiotherapy-induced+xerostomia+in+head+and+neck+cancer+patients.">Evaluation, prevention and management of radiotherapy-induced xerostomia in head and neck cancer patients.</a> Curr Opin Oncol. 18 (3), 266-270 (2006).</li><li>Epperly, M. W., Carpenter, M., Agarwal, A., Mitra, P., Nie, S., Greenberger, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraoral+manganese+superoxide+dismutase-plasmid/liposome+(MnSOD-PL)+radioprotective+gene+therapy+decreases+ionizing+irradiation-induced+murine+mucosal+cell+cycling+and+apoptosis.">Intraoral manganese superoxide dismutase-plasmid/liposome (MnSOD-PL) radioprotective gene therapy decreases ionizing irradiation-induced murine mucosal cell cycling and apoptosis.</a> In Vivo. 18 (4), 401-410 (2004).</li><li>Cotrim, A. P., Sowers, A., Mitchell, J. B., Baum, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+irradiation-induced+salivary+hypofunction+by+microvessel+protection+in+mouse+salivary+glands.">Prevention of irradiation-induced salivary hypofunction by microvessel protection in mouse salivary glands.</a> Mol Ther. 15 (12), 2101-2106 (2007).</li><li>Zheng, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+radiation-induced+salivary+hypofunction+following+hKGF+gene+delivery+to+murine+submandibular+glands.">Prevention of radiation-induced salivary hypofunction following hKGF gene delivery to murine submandibular glands.</a> Clin Cancer Res. 17 (9), 2842-2851 (2011).</li><li>Palaniyandi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenoviral+delivery+of+Tousled+kinase+for+the+protection+salivary+glands+against+ionizing+radiation+damage.">Adenoviral delivery of Tousled kinase for the protection salivary glands against ionizing radiation damage.</a> Gene Ther. 18 (3), 275-282 (2011).</li><li>Baum, B. J., Voutetakis, A., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salivary+glands:+novel+target+sites+for+gene+therapeutics.">Salivary glands: novel target sites for gene therapeutics.</a> Trends Mol Med. 10 (12), 585-590 (2004).</li><li>Limesand, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin-like+growth+factor-1+preserves+salivary+gland+function+after+fractionated+radiation.">Insulin-like growth factor-1 preserves salivary gland function after fractionated radiation.</a> Int J Radiat Oncol Biol Phys. 78 (2), 579-586 (2010).</li><li>Timiri Shanmugam, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recombinant+AAV9-TLK1B+administration+ameliorates+fractionated+radiation-induced+xerostomia.">Recombinant AAV9-TLK1B administration ameliorates fractionated radiation-induced xerostomia.</a> Hum Gene Ther. 24 (6), 604-612 (2013).</li><li>Coppes, R. P., Vissink, A., Konings, A. W. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+radiosensitivity+of+rat+parotid+and+submandibular+glands+after+different+radiation+schedules.">Comparison of radiosensitivity of rat parotid and submandibular glands after different radiation schedules.</a> Radiother Oncol. 63 (3), 321-328 (2002).</li><li>Sunavala-Dossabhoy, G., Palaniyandi, S., Richardson, C., De Benedetti, A., Schrott, L., Caldito, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TAT-mediated+delivery+of+Tousled+protein+to+salivary+glands+protects+against+radiation-induced+hypofunction.">TAT-mediated delivery of Tousled protein to salivary glands protects against radiation-induced hypofunction.</a> Int J Radiat Oncol Biol Phys. 84 (1), 257-265 (2012).</li><li>Baum, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transfer+of+the+AQP1+cDNA+for+the+correction+of+radiation-induced+salivary+hypofunction.">Transfer of the AQP1 cDNA for the correction of radiation-induced salivary hypofunction.</a> Biochim Biophys Acta. 1758 (8), 1071-1077 (2006).</li><li>Tran, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paracrine+effects+of+bone+marrow+soup+restore+organ+function,+regeneration,+and+repair+in+salivary+glands+damaged+by+irradiation.">Paracrine effects of bone marrow soup restore organ function, regeneration, and repair in salivary glands damaged by irradiation.</a> PLoS One. 8 (4), e61632 (2013).</li><li>Nanduri, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salisphere+derived+c-Kit++cell+transplantation+restores+tissue+homeostasis+in+irradiated+salivary+gland.">Salisphere derived c-Kit+ cell transplantation restores tissue homeostasis in irradiated salivary gland.</a> Radiother Oncol. 108 (3), 458-463 (2013).</li><li>Arany, S., Benoit, D. S., Dewhurst, S., Ovitt, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoparticle-mediated+gene+silencing+confers+radioprotection+to+salivary+glands+in+vivo.">Nanoparticle-mediated gene silencing confers radioprotection to salivary glands in vivo.</a> Mol Ther. 21 (6), 1182-1194 (2013).</li><li>Voutetakis, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reengineered+salivary+glands+are+stable+endogenous+bioreactors+for+systemic+gene+therapeutics.">Reengineered salivary glands are stable endogenous bioreactors for systemic gene therapeutics.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 101 (9), 3053-3058 (2004).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Tükürük bezleri sık sık baş boyun kanseri, boyun düğüm seçmeli ablasyon veya bölgesel hematolojik maligniteler için radyoterapi uygulanan hastalarda doku iyileşme eşiğin ötesinde radyasyon dozları alırsınız. bezinin sıvı salgılayan asinüs hücrelerinde terminal olarak farklılaşmış olsa da, paradoksal radyasyona hassas olan. salgı işlevi kronik düşük tükürük çıktı radyasyon ve geri dönüşümsüz bezi hasarı sonuçlarının ilk hafta içinde düşer. yoksul bezi fonksiyon ve ensues ağız kuruluğu ile mücadele etmek için, koruma ya da salgı fonksiyonu restorasyonu büyük önem taşımaktadır. Radyasyon hasarı karşı koruma ya da onarmak için yeni tedaviler, 16-20, 1 8-11 araştırılmaktadır. Tedavi edici bir maddenin Sistemik uygulama hedefli olmayan dokularda istenmeyen etkilerin riskine sebep olur. tükürük bezlerinin amaçlanmıştır teslim bu riski azaltır. Retroductal gen tedavisi önlenmesi veya etkilidirRadyasyon ilişkili tükürük bezi ızdırap 1, 9-, 11, 16,17,20 giderilmesi. Ancak, aynı tekniği kullanarak, tükürük bezleri de ektopik ifade ve proteinler salgılar için yeniden yapılandırılmış olabilir. Tükürük hücrelerde bazolateral endokrin salgılama yoluna istismar kana transgen ekspresyonu ve hormon sekresyonu 21 elde edilebilir. tükürük bezleri gen transferi, bu nedenle etkin bir şekilde belirli bir endokrin bozukluklarının düzeltilmesi için uzatılabilir. Küçük hayvanlarda tükürük bezi kanallarının kanülasyon yanıltıcı olabilir rağmen, uygulama tekniği honlama merkezindedir. kanüller konik uç yerleştirilmesi sırasında kolayca bükülmesine ve infüzyon zorlaştırabilir. çözümü kovma tüp bir viraj uyarmalıdır ise geri basıncı artmış ve gerekliliği yeniden cannulate kanalı. ağız sınırlayan patolojiler ile birlikte bu tür anormal kanal menfezi veya artmış kanal kıvrımlarında gibi anatomik varyasyonlar,trismus veya submukoz fibrozis gibi açılış submandibuler bez teslim bir meydan okuma yapabilir. geçirgen olmayan boyanın İnfüzyon tekniğini uygulayan kesin teslimat yararlı bir göstergesi olabilir zaman. kanüller ve nazik, direnç içermeyen infüzyon Uygun yerleşim prosedürün başarısı için önemli faktörlerdir. Kanser hastaları genellikle lineer hızlandırıcı tarafından üretilen megavoltaj fotonlar ile tedavi edilir. Radyasyon hafta boyunca küçük dozlarda günlük teslim edilir. radyasyonlar sağlıklı dokular üzerindeki toksisitesini azaltmak ve tümörler duyarlı arasındaki doz fraksiyon kurtarma süreleri sağlar. lineer hızlandırıcının yüksek nüfuz enerji ışınları derin tümörlerin tedavisi için de faydalıdır. Ve cilde yakın tümörlerin tedavisi için, bir doku eşdeğer bir bolus foton penetrasyonunun derinliğini azaltmak için kullanılır. yerel subma ışına maruz bırakmak için klinik uygulamaya benzer şekilde, lineer hızlandırıcı verilen kısımlara ayrılmış radyasyon kullanılabilirküçük hayvanların ndibular bezleri. Ancak, hemen derinin altındaki bezlerin pozisyonlar bolus yerleştirme bezlerinin içinde&gt;% 90 radyasyon dozunu elde etmek için zorunlu kılmaktadır. bolus kalınlığı fotonların cinsi ve enerjisiyle ve doku istenilen nüfuz derinliği bağlı olarak hesaplanır. Bu yazıda, retroductal submandibuler bez instilasyon ve sıçan submandibuler bezlerde yerel fraksiyonlara ışınlama yapmak için deneysel yönergeler sağlamak. Vurgulanan yöntemler tükürük bezi radyotoksitliğini alanına cesaretini araştırmacılar için deney düzeneği yardım edeceği umut ediyoruz.

Sağlıklı dokularda kollateral yok kanser tedavilerinin zararlı yan etkilerin bir dizi oluşturur. radyasyon alanları ile yalan önemli tükürük bezlerinin bir kısmı veya tamamı kaçınılmaz imha edilir. Bu nedenle, kemik iliği transplantasyonu öncesinde baş ve boyun kanseri, servikal lenfoma, ya da tam vücut radyasyonu için radyoterapi uygulanan hastaların çoğunda radyasyon, tükürük bezi hipofonksiyon 2-6 en yaygın ve inatçı olumsuz etkileri birini çeker. tükürük bezlerinin sıvı üreten asiner hücreleri radyasyona akut duyarlıdır. tükürük bezlerinin hasar tükürük akışı gibi tükürük hipofonksiyonu ifade edilen bir durumun ciddi azalmasını neden olur. Tükürük akışındaki azalma kronik gibi çiğneme, yutma, konuşma ve tat, ama şiddetli ağrı, mukozal yırtık, yutma güçlüğü, fırsatçı enfeksiyonların hastalıklı sekel gibi temel sözlü faaliyetlerini bozar ve diş çürükleri bir kötüleşirHastanın refahı ve fonksiyon 2,3. radyoterapi ile ilişkili tükürük hücre kaybı geri döndürülemez olduğundan, ağız kuruluğu hiçbir düzeltici bir tedavisi yoktur. Yapay tükürük ikame ve prosecretory ilaçlarla belirtileri yatıştırılması odaklanan güncel tedavi uzun süreli rahatlama 6 etkisizdir. Geliştirilmiş Radyasyon uygulama teknikleri durumun şiddetini azaltma yardımcı olmasına rağmen, normal doku toksisitesi ve komplikasyonları, kanser tedavisinde 6,7 sınırlayıcı bir faktördür kalır. radyoterapi ile ilişkili komplikasyonları önlemek için önleyici tedbirler, bu nedenle norm haline gelmektedir. DNA onarımı serbest oksijen radikallerinin, bakıcı hücreleri oluşumunu temizlemek ya da geliştirmek Radyo koruyucu maddeler tükürük hipofonksiyona 8-11 önlemek için araştırılmaktadır. ekzokrin tükürük bezlerinin salgıları ana boşaltım kanalları yoluyla ağzına süzün. th Intra-Oral kanülasyonkontrast maddelerin enjeksiyonu için e boşaltım kanalları ayaktan prosedür olarak rutin olarak yapılır. Benzer bir yaklaşım kullanarak, tükürük bezleri doğrudan lokalize tedavi 12 hedeflenebilir. Dışında sistemik yan etki riskini azaltarak, retroductal bezi damlatma faydaları ekledi. duktal ağacının etrafında tükürük hücrelerin tek tabakalı düzenlemesi tüm tükürük epitel hücreleri hedef sağlar, ve bir engel olarak bezi eylemlerinin lifli kapsülleme istenmeyen terapötik yayılmasını azaltmak için. Özünde, tükürük bezleri gibi radyasyona bağlı tükürük hipofonksiyon olarak bezi rahatsızlıkları hedeflenen tedavi için optimal uygundur. haftalık bir süre için - (2.5 Gy / fraksiyon / gün, haftada beş gün 1.8), kanser tedavisi için geleneksel radyasyon küçük dozlarda verilir. Bu nedenle, deneysel modellerde uzun süren radyasyon düzeni karşı etkinliğini gösteren bir radyo-koruyucu tedavi daha klinik bir etkiye sahiptir. Comprofraksiyonlara radyasyondan sonra mised tükürük fonksiyonu küçük hayvanlar kaydedildi, ancak radyasyon kaynağı, doz fraksiyonu ve kullanılan protokoller çeşitli 9,10,13 vardır edilmiştir. Bu rapor retroductal teslimat ve hasta ilgili radyasyon kaynağı ve doz fraksiyonu kullanarak sıçan submandibuler bezleri lokalize radyasyon yöntemlerini belirler.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="573">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Intramedic Polyethylene tubing (PE10)</td>
			<td style="width:71px;">Becton Dickson</td>
			<td align="right" style="width:119px;">427401</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">1/2 cc Insulin Syringe U-100</td>
			<td style="width:71px;">Becton Dickson</td>
			<td align="right" style="width:119px;">309306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Artificial Tears</td>
			<td style="width:71px;">Miller Vet Supply&#160;</td>
			<td style="width:119px;">5098-9840-64</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Hot Bead Sterilizer</td>
			<td style="width:71px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">18000-45</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Perma-Hand silk suture</td>
			<td style="width:71px;">Ethicon</td>
			<td style="width:119px;">K833H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Graefe forcep</td>
			<td style="width:71px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">11051-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">Olympus SZX16 Stereo Microscope</td>
			<td style="width:71px;">Hunt Optics and Imaging</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">6MV Linear Accelerator</td>
			<td style="width:71px;">Elekta</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Bolus - Skinless&#160;</td>
			<td style="width:71px;">Civco</td>
			<td style="width:119px;">MTCB410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Heat Lamp</td>
			<td style="width:71px;">Braintree Scientific</td>
			<td style="width:119px;">HL-1&#160;110V</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

retroductal submandibular gland instillation and localized fractionated irradiation in a rat model of salivary hypofunction

Normal tissues that lie within the portals of radiation are inadvertently damaged. Salivary glands are often injured during head and neck radiotherapy. Irreparable cell damage results in a chronic loss of salivary function that impairs basic oral activities, and increases the risk of oral infections and dental caries. Salivary hypofunction and its complications gravely impact a patient's comfort. Current symptomatic management of the condition is ineffective, and newer therapies to assuage the condition are needed. 
Salivary glands are exocrine glands, which expel their secretions into the mouth via excretory ducts. Cannulation of these ducts provides direct access to the glands. Retroductal delivery of a contrast agent to major salivary glands is a routine out-patient procedure for diagnostic imaging. Using a similar procedure, localized treatment of the glands is feasible. However, performing this technique in preclinical studies with small animals poses unique challenges. In this study we describe the technique of retroductal administration in rat submandibular glands, a procedure that was refined in Dr. Bruce Baum's laboratory (NIH)1, and lay out a procedure for local gland irradiation.

minimal invaziv sialografi tekniklerle, büyük tükürük bezlerinin lokal tedavi uygulanabilir. Sıçan submandibular tükürük bezlerinde Retroductal yönetim Wharton kanallarının ağız içi kanülasyon (Şekil 2) tarafından denendi. ağız katta bulunan dil-altı papilla açık Wharton tükürük kanalları, ancak orifisleri kolayca görünür değildir. Kateterin takıldığı, bu nedenle, yumuşak tarama yapıldı. kanül yerleştirerek şanssız kanama veya kanal perforasyonu önlemek için, hiçbir kuvvet kullanıldı. kanal içinde kanülün düzgün bir direnç-serbest geçiş borusunun yumuşak ileri ve geri hareketi ile teyit edilmiştir. İlk deneyler sırasında kanülasyonu (Şekil 3) hematoksilin ve tripan mavisi çözeltisi ile bezi beslerken ve ötenazi hayvanlarda bezi boyama değerlendirilmesiyle teyit edilmiştir. glve hacim ekstirpe bezlerde duktal ağacının boyama görselleştirerek tespit edilmiştir doldurun. 150 ağırlığındaki hayvanlar için - çözeltisi 250 ul - 250 g, bezin komple dolgu 200 ile elde edilmiştir. Hızlı infüzyon bezi basıncını arttırmak ve yaralanma ve biospread riskini yükseltmiş olabilir. Doku hasarının önlemek için, çözelti, ~ 50 ul / dakikalık bir oranda yavaş yavaş uygulanmıştır Sıçan submandibular bezler radyasyona 15 kendi duyarlılığında parotis bezleri karşılaştırılabilir. Onlar seçici şiddetli hedef dışı etkilere (Şekil 4) ödemeden ışınlanmış olabilir çünkü Tükürük bezleri çalışıldı. oral kavite ve oral mukozit ve hayvan sağlığı ve deneysel sonuçlar üzerindeki akut ağız kuruluğu etkisini minimize parotis bezleri büyük bir hacmi koruyucu. Sıçanlarda Bizim daha önceki çalışmalarda tek büyük radyasyon 11,16 dozlarda, ancak frac ile yapıldıtionated doz klinik uygulamaya daha uygun olduğunu. hayvanın boyun bölgesi bu nedenle, radyasyon küçük dozlarda günlük olarak ortaya çıkmıştır. deri yüzeyinin yakınında bulunan submandibuler bezlerinden olan radyasyon dozunun tek tip bir oluşumunu elde etmek için, 1.03 g / cc bir yoğunluğa sahip bir homojen jel yapılmış bir yumuşak doku eşdeğer bir bolus ışınlama sırasında boyun üzerine yerleştirilmiştir. 8 hafta 2.5 Gy artışlarla günlük maruziyet dik tükürük akışını azalttı sonrası radyasyon gösterisi belirlenen tükürük akışı üzerinde fraksiyone radyasyon düzeni etkisi. 14 tükürük üretimi bir yakın 10 kat azalma ışınlanmamış hayvanlarda (Şekil 5 2 taraflı Student t-testi, p &lt;0.01) aksine ışınlanmış hayvanlarda gerçekleşmiştir. Sonuçlar hayvanlarda radyasyona bağlı tükürük hipofonksiyonunun kurulmasını onayladı. Şekil Özelleştirilmiş Platformu 1. İnşaat ve Yanak-Yayıcı. Sert bir 4 mm tel gösterildiği gibi 3 taraflı dikdörtgen (11 cm yükseklik x 13 cm genişlik) eğilmiş, ve çapraz çubuk merkezinde eğdi. tel uçları ilmeklere bükülmüş edildi ve vida plastik levhasının (25 cm uzunluk x 15 cm genişliğinde x 0.8 cm derinlik) ile montaj güvence altına almak geçirildi. Merkezi bir vida tel montaj 5 cm posterior takıldı. Alevlendi uçları &quot;U şekli&quot; bir tek kullanımlık 1 mm kalınlığında tel bükülmüş yapılmış bir özel inşa edilmiş yanak-serpme. Bu alt çene Ankastre açık çekti lastik bant çapa görev yaptı. Plastik borular, tel yanak mukozasında hasar görmesini önlemek için biter üzerine geçirilmiştir. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53785/53785fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> : Keep-together.within-page = &quot;1&quot;&gt; <img alt="şekil 2" src="/files/ftp_upload/53785/53785fig2.jpg" /> Şekil 2. Sıçan Submandibuler Bezi Boşaltım Kanallarının kanülasyonu. Dil ağız tabanını yükseltmek yükseltilir ve polietilen kanül ağız katında bulunan submandibuler kanal deliklerinin içine yerleştirildi. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53785/53785fig2large.jpg" target="_blank">Büyük halini görmek için tıklayınız bu figür.</a> <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/53785/53785fig3.jpg" /> Submandibuler Bezinde Hematoksilen Çözümü Şekil 3. İnfüzyon Tekniği Onay için. Bezi boyama submandibuler bezde çözümün başarılı yönetiminin kanıtlıyor. Sol üst köşedeki sublingual bez lekeli unutmayın. Olmayan bir infüzyon kontrol bezi solda gösterilir.e.com/files/ftp_upload/53785/53785fig3large.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız. <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/53785/53785fig4.jpg" /> Işınlama için Animal Şekil 4. Yerleştirme. Hayvan lineer hızlandırıcı masaya sırtüstü yatırılır ve baş boyun uzatmak için geri başlıklı. Collimated yarık genişliği 3 cm idi. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53785/53785fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/53785/53785fig5.jpg" /> Submandibuler Bezi Fonksiyonu. Saline üzerinde fraksiyonlara Radyasyonun Şekil 5. etkisi radyasyon önce submandibuler bezlerde damlatıldı. hayvanın boynuna 8 gün 2.5 Gy / gün fraksiyonlarda ışınlandı. datgösterilen bir 8 hafta radyasyon şemasının tamamlanmasından sonra uyarılmış submandibuler tükürük akış hızının ± SEM. Şekil İnsan Gen Terapisi, Mary Ann Liebert, Inc. yayıncı 15 telif hakkı izni ile çoğaltılabilir. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53785/53785fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Retroductal Submandibular Gland Instillation and Localized Fractionated Irradiation in a Rat Model of Salivary Hypofunction at JoVE.com

Retroductal Submandibular Gland Instillation and Localized Fractionated Irradiation in a Rat Model of Salivary Hypofunction

Salivary gland hypofunction, a major adverse effect of head and neck radiotherapy diminishes a patient's quality of life. The demonstration of efficacy of new therapies in animal models is a prerequisite before clinical transition. This protocol describes retroductal administration and local irradiation of rat submandibular glands.

Tükürük hipofonksiyonunun bir Sıçan Modelinde Retroductal Submandibuler Bezi damlatma ve yerelleştirilmiş fraksiyonlara Işınlama

Normal tissues that lie within the portals of radiation are inadvertently damaged. Salivary glands are often injured during head and neck radiotherapy. ...

retroductal-submandibular-gland-instillation-localized-fractionated

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

11.3K Görüntüleme.  Louisiana State University Health Sciences Center. Salivary gland hypofunction, a major adverse effect of head and neck radiotherapy diminishes a patient's quality of life. The demonstration of efficacy of new therapies in animal models is a prerequisite before clinical transition. This protocol describes retroductal administration and local irradiation of rat submandibular glands.

Video: Retroductal Submandibular Gland Instillation and Localized Fractionated Irradiation in a Rat Model of Salivary Hypofunction

Cannulation of the Mouse Submandibular Salivary Gland via the Wharton's Duct

Severe salivary gland hypofunction is frequently found in patients with Sj&ouml;gren's syndrome and those who receiving therapeutic 
irradiation in their head and neck regions for cancer treatment. Both groups of patients experience symptoms such as xerostomia (dry mouth), dysphagia 
(impaired chewing and swallowing), severe dental caries, altered taste, oro-pharyngeal infections (candidiasis), mucositis, pain and discomfort.
One innovative approach of regenerative medicine for the treatment of salivary gland hypo-function is speculated in RS Redman, E Mezey 
et al. 2009: stem cells can be directly deposited by cannulation into the gland as a potent method in reviving the functions of the impaired organ. Presumably, 
the migrated foreign stem cells will differentiate into glandular cells to function as part of the host salivary gland. Also, this cannulation technique is an 
expedient and effective delivery method for clinical gene transfer application.
Here we illustrate the steps involved in performing the cannulation procedure on the mouse submandibular salivary gland via the Wharton's duct 
(Fig 1). C3H mice (Charles River, Montreal, QC, Canada) are used for this experiment, which have been kept under clean conventional conditions at 
the McGill University animal resource center. All experiments have been approved by the University Animal Care Committee and were in accordance with the 
guidelines of the Canadian Council on Animal Care.
For this experiment, a trypan blue solution is infused into the gland through the opening of the Wharton's duct using a 
insulin syringe with a 29-gauge needle encased inside a polyethylene tube. Subsequently, the mouse is dissected to show that the infusions migrated 
into the gland successfully.

A protocol for the cannulation of the mouse submandibular salivary gland via the Wharton's duct is described. For this experiment, the trypan blue solution is used as a dyer to demonstrate how this technique effectively delivers infusions into the targeted gland, and to suggest the reliability of this new approach as a potential clinical drug/cell therapy for the regeneration of salivary glands.

Wharton Kanalı üzerinden Fare Submandibular Tükürük Bezi kanülasyonu

Severe salivary gland hypofunction is frequently found in patients with Sj&ouml;gren's syndrome and those who receiving therapeutic 
irradiation in their ...

Tıp

A Model of Chronic Nutrient Infusion in the Rat

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to affect the function of several organs and tissues and to contribute to the development of the many complications associated with obesity and the metabolic syndrome, including type 2 diabetes. To study the mechanisms by which excessive levels of glucose and fatty acids affect the pancreatic beta-cell and the secretion of insulin, we have established a chronic nutrient infusion model in the rat. The procedure consists of catheterizing the right jugular vein and left carotid artery under general anesthesia; allowing a 7-day recuperation period; connecting the catheters to the pumps using a swivel and counterweight system that enables the animal to move freely in the cage; and infusing glucose and/or Intralipid (a soybean oil emulsion which generates a mixture of approximately 80% unsaturated/20% saturated fatty acids when infused with heparin) for 72 hr. This model offers several advantages, including the possibility to finely modulate the target levels of circulating glucose and fatty acids; the option to co-infuse pharmacological compounds; and the relatively short time frame as opposed to dietary models. It can be used to examine the mechanisms of nutrient-induced dysfunction in a variety of organs and to test the effectiveness of drugs in this context.

A protocol for chronic infusions of glucose and Intralipid in rats is described. This model can be used to study the impact of nutrient excess on organ function and physiological parameters.

Sıçan Kronik Besin İnfüzyon Bir Model

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to  affect the function of several organs and tissues and to contribute to the  ...

Collecting Saliva and Measuring Salivary Cortisol and Alpha-amylase in Frail Community Residing Older Adults via Family Caregivers

Salivary measures have emerged in bio-behavioral research that are easy-to-collect, minimally invasive, and relatively inexpensive biologic markers of stress. This article we present the steps for collection and analysis of two salivary assays in research with frail, community residing older adults-salivary cortisol and salivary alpha amylase. The field of salivary bioscience is rapidly advancing and the purpose of this presentation is to provide an update on the developments for investigators interested in integrating these measures into research on aging. Strategies are presented for instructing family caregivers in collecting saliva in the home, and for conducting laboratory analyses of salivary analytes that have demonstrated feasibility, high compliance, and yield quality specimens. The protocol for sample collection includes: (1) consistent use of collection materials; (2) standardized methods that promote adherence and minimize subject burden; and (3) procedures for controlling certain confounding agents. We also provide strategies for laboratory analyses include: (1) saliva handling and processing; (2) salivary cortisol and salivary alpha amylase assay procedures; and (3) analytic considerations.

We demonstrate: (1) procedures for collection of salivary samples in cognitive impaired older adults by family caregivers in the home setting, (2) procedures for measuring stress activity via salivary cortisol and alpha amylase, and (3) representative profiles. Protocols that allow researchers to study stress-linked processes advance our understanding of biological sensitivity and susceptibility.

Salivary measures have emerged in bio-behavioral research  that are easy-to-collect, minimally invasive, and relatively inexpensive  biologic markers of ...

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoma is a disease of the central nervous system affecting retinal ganglion cells (RGCs). RGC axons making up the optic nerve carry visual input to the brain for visual perception. Damage to RGCs and their axons leads to vision loss and/or blindness. Although the specific cause of glaucoma is unknown, the primary risk factor for the disease is an elevated intraocular pressure. Glaucoma-inducing procedures in animal models are a valuable tool to researchers studying the mechanism of RGC death. Such information can lead to the development of effective neuroprotective treatments that could aid in the prevention of vision loss. The protocol in this paper describes a method of inducing glaucoma - like conditions in an in vivo rat model where 50 &#181;l of 2 M hypertonic saline is injected into the episcleral venous plexus. Blanching of the vessels indicates successful injection. This procedure causes loss of RGCs to simulate glaucoma. One month following injection, animals are sacrificed and eyes are removed. Next, the cornea, lens, and vitreous are removed to make an eyecup. The retina is then peeled from the back of the eye and pinned onto sylgard dishes using cactus needles. At this point, neurons in the retina can be stained for analysis. Results from this lab show that approximately 25% of RGCs are lost within one month of the procedure when compared to internal controls. This procedure allows for quantitative analysis of retinal ganglion cell death in an in vivo rat glaucoma model.

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoma is characterized by damage to retinal ganglion cells. Inducing glaucoma in animal models can provide insight into the study of this disease. Here, we outline a procedure that induces loss of RGCs in an in vivo rat model and demonstrates the preparation of whole-mount retinas for analysis.

Glokom uyaran bir de Prosedürü<em&gt; İn Vivo</em&gt; Rat Modeli ve Tüm montaj Retina Hazırlık

Glaucoma is a disease of the central nervous system affecting retinal ganglion cells (RGCs). RGC axons making up the optic nerve carry visual input to the ...

Murine Salivary Functional Assessment via Pilocarpine Stimulation Following Fractionated Radiation

Hyposalivation is commonly observed in the autoimmune reaction of Sj&#246;gren's syndrome or following radiation injury to the major salivary glands. In these cases, questions remain regarding disease pathogenesis and effective interventions. An optimized technique that allows functional assessment of the salivary glands is invaluable for investigating exocrine gland biology, dysfunction, and therapeutics. Here, we present a step by step approach to performing pilocarpine stimulated saliva secretion, including tracheostomy and the dissection of the three major murine salivary glands. We also detail the appropriate murine head and neck anatomy accessed during these techniques. This approach is scalable, allowing for multiple mice to be processed simultaneously, thus improving the efficiency of the work flow. We aim to improve the reproducibility of these methods, each of which has further applications within the field. In addition to saliva collection, we discuss metrics for quantifying and normalizing functional capacity of these tissues. Representative data are included from submandibular glands with depressed salivary gland function 2 weeks following fractionated radiation (4 doses of 6.85 Gy).

We present a detailed approach to performing saliva collection, including murine tracheostomy and the isolation of three major salivary glands.

Fare tükürük işlevsel değerlendirme Pilokarpin stimülasyon aşağıdaki yolu ile radyasyon şeker

Hyposalivation is commonly observed in the autoimmune reaction of Sj&#246;gren's syndrome or following radiation injury to the major salivary glands. In ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

İzometrik Contractility ölçüm tel Myography kullanarak fare mezenterik arter

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

A Pleural Effusion Model in Rats by Intratracheal Instillation of Polyacrylate/Nanosilica

Pleural effusion is a prevalent clinical finding of many pulmonary diseases. Having a useful animal pleural effusion model is very important to study these pulmonary diseases. Previous pleural effusion models paid more attention to biological factors rather than nanoparticles in the environment. Here, we introduce a model to make pleural effusion in rats by intratracheal instillation of polyacrylate/nanosilica, and a method of nanoparticle isolation in the pleural effusion. By intratracheal instillation of polyacrylate/nanosilica with concentrations of 3.125, 6.25 and 12.5 mg/kg&#8729;mL, the pleural effusion in rats presented on day 3, peaked at days 7-10 in 6.25 and 12.5 mg/kg&#8729;mL groups, then slowly decreased and disappeared on day 14. When the concentration of polyacrylate/nanosilica increased, the pleural effusion is produced more and faster. This pleural fluid was detected by ultrasound examination or CT chest scanning and confirmed by dissection of rats. Silica nanoparticles were observed in the rats' pleural effusion by transmission electron microscope. These results showed that the exposure to polyacrylate/nanosilica leads to the induction of pleural effusion, which was consistent with our previous report in humans. Additionally, this model is beneficial for the further study of nanotoxicology and the pleural effusion diseases.

Here, we present a protocol to construct a pleural effusion model in rats by intratracheal instillation of polyacrylate/nanosilica.

Plevral efüzyon manken poliakrilat/Nanosilica boğaza korumak tarafından Sıçanlarda

Pleural effusion is a prevalent clinical finding of many pulmonary diseases. Having a useful animal pleural effusion model is very important to study ...

Radiation Treatment of Organotypic Cultures from Submandibular and Parotid Salivary Glands Models Key In Vivo Characteristics

Hyposalivation and xerostomia create chronic oral complications that decrease the quality of life in head and neck cancer patients who are treated with radiotherapy. Experimental approaches to understanding mechanisms of salivary gland dysfunction and restoration have focused on in vivo models, which are handicapped by an inability to systematically screen therapeutic candidates and efficiencies in transfection capability to manipulate specific genes. The purpose of this salivary gland organotypic culture protocol is to evaluate maximal time of culture viability and characterize cellular changes following ex vivo radiation treatment. We utilized immunofluorescent staining and confocal microscopy to determine when specific cell populations and markers are present during a 30-day culture period. In addition, cellular markers previously reported in in vivo radiation models are evaluated in cultures that are irradiated ex vivo. Moving forward, this method is an attractive platform for rapid ex vivo assessment of murine and human salivary gland tissue responses to therapeutic agents that improve salivary function.

Using three-dimensional organotypic cultures to visualize morphology and functional markers of salivary glands may provide novel insights into the mechanisms of tissue damage following radiation. Described here is a protocol to section, culture, irradiate, stain, and image 50&#8211;90 &#956;m thick salivary gland sections prior to and following exposure to ionizing radiation.

Submandibular ve parotis tükürük bezlerinden Organotipik kültürlerin radyasyon tedavisi anahtar In vivo özellikleri

Hyposalivation and xerostomia create chronic oral complications that decrease the quality of life in head and neck cancer patients who are treated with ...

Acupuncture in a Rat Model of Asthma

A high platform can fix rats without restriction and completely expose the acupoints on the back during acupuncture manipulation. This article describes methods for the fabrication of the high platform, establishes a rat model of asthma and measures changes in respiratory function using a noninvasive and real-time whole-body plethysmography (WBP) system.

Astımın Sıçan Modelinde Akupunktur

A high platform can fix rats without restriction and completely expose the acupoints on the back during acupuncture manipulation. This article describes ...

Retinal Pathophysiological Evaluation in a Rat Model

A posterior segment eye disease like diabetic retinopathy alters the physiology of the retina. Diabetic retinopathy is characterized by a retinal detachment, breakdown of the blood-retinal barrier (BRB), and retinal angiogenesis. An in vivo rat model is a valuable experimental tool to examine the changes in the structure and function of the retina. We propose three different experimental techniques in the rat model to identify morphological changes of retinal cells, retinal vasculature, and compromised BRB. Retinal histology is used to study the morphology of various retinal cells. Also, quantitative measurement is performed by retinal cell count and thickness measurement of different retinal layers. A BRB breakdown assay is used to determine the leakage of extraocular proteins from the plasma to vitreous tissue due to the breakdown of BRB. Fluorescence angiography is used to study angiogenesis and leakage of blood vessels by visualizing retinal vasculature using FITC-dextran dye.

Diabetic retinopathy is one of the leading causes of blindness. Histology, blood-retinal barrier breakdown assay, and fluorescence angiography are valuable techniques to understand the pathophysiology of the retina, which could further enhance the efficient drug screening against diabetic retinopathy.