We thank Dr. John Chang (Radiation Oncology, LSU Health Science Center) for assistance with radiation dose measurements. The study was supported by the American Cancer Society (Grant number: 116945-RSG-09-038-01-CCE), National Institute of Health (Grant number: R21CA173162) and the Feist-Weiller Cancer Center.

כל ההליכים אושרו על ידי בריאות LSU, Shreveport, טיפול בבעלי חיים ועדת השתמש היו בהתאם להנחיות NIH לטיפול ולשימוש בחיות מעבדה. 1. Cannulation של בלוטות הרוק עכברוש submandibular <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנת מזרק-Tubing האסיפה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים באורך 10 ס&quot;מ של צינורות פוליאתילן PE10 עם אזמל. החזק את שני הקצוות של הצינור בין האצבע המורה לאגודל. מחממים את החלק האמצעי של הצינור מעל להבה עדינה, בעדינות למתוח את צינורות מרוככת להכפיל אורכו על ידי משיכת שני הצדדים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותך את הצינורות באמצע עם אזמל בזווית של 45 o לקבל cannulae 2 - כל אחד עם לקצה חד. הרחב את הקצה שאינו מחודד של הצינורית ידי הולם אותו על מחט 29 G של מזרק אינסולין 0.5 סמ&quot;ק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הצינורית, ולצייר 220 μl של תמיסת מלח לתוך המזרק. הקש כדי לסלק בועות אוויר. התאימו את cannulעל המחט, לדחוף את הבוכנה במזרק כדי לפלוט את האוויר ולהבטיח זרימה חופשית של פתרון באמצעות צינורית. כוון את עוצמת הקול עד 200 μl. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Intra-Oral Cannulation של submandibular בלוטת Duct הערה: חיטוי מכשירים לפני ההליך, לעקר ב-בין ההליכים מעקרים חרוז חם. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשקול את העכברוש ספראג Dawley, ולחלק את נפח מחושב של קטמין (42 מ&quot;ג / ק&quot;ג) / xylazine (8 מ&quot;ג / ק&quot;ג) / acepromazine (1.4 מ&quot;ג / ק&quot;ג) לערבב בתוך מזרק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לרסן את החיה ידי אחיזה בבסיס הזנב בין האצבע המורה ואת האגודל של יד אחת זזה מצד שני על הגוף לקלוט את זה. הנח את האצבע והאמה לאורך צידי הראש בזמן להחזיק את הגוף עם האגודל האצבעות הנותרות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזריק את חומר ההרדמה בשרירי הגפיים האחוריים. אשר עומק ההרדמה על ידי צביטת בוהן רפלקס palpebral. החל סיכת עין כדי למנוע בעוד יובשחיה היא בהרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את החיה על פלטפורמה-ומעוצבת (איור 1), ולעסוק הוא שן החותך העליון בסרגל הרוחבי. משוך את הלסת התחתונה על ידי looping גומייה סביב התחתונות ועיגון אותו הרציף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעבור תפר סטרילי דרך הלשון והרם אותו להעלות את רצפת הפה. הצמד את התפרים עם hemostat, ולהעביר מעל המשקוף הרוחבי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרחב את הלחיים עם מפזר לחי שהותקן (איור 1), ותחת מיקרוסקופ לנתח לאתר את הגבשושיות תת הלשוניות על רצפת הפה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחוז לקצה החד של הצינורות מתבצעים PE10 באמצעות מלקחיים עדינים. בעדינות לתפעל את הקצה של הצינורית לתוך פתח ductal על הגבשושיות תת הלשוניות. אשר מיקום של הצינורית ידי שחלה זה 3 - 5 מ&quot;מ לתוך הצינור; לוודא שהוא עובר ללא כל מכשול. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Submandibular בלוטת חינוך קדםllation <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזריק אטרופין (0.5 מ&quot;ג / ק&quot;ג) תת עורי בתוך בעורפו, ולהמתין 10 דקות עבור הפחתה בהפרשות הרוק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אבטח את הצינורית אל פתח צינור עם טיפת cyanoacrylate (דבק), ולאפשר לו להתייבש. להנחיל הפתרון בבלוטה (200 μl / הבלוטה) על ידי בוכנת לחיצה על המזרק לאט בקצב של ~ 50 μl / min. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מרסק את הצינורות עם hemostat, ובזהירות להסיר את המזרק. שמור את הצינורות בצינור עבור 30 - 60 דקות עד שהחיה להכרתו. הסר תפר שמחזיק את הלשון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעבירים את החיה לכלוב נפרד, ולהשתמש מנורת חום כדי לשמור אותו חם במהלך ההתאוששות. אין להשאיר את החיה ללא השגחה עד שהוא שב להכרתו לשמור recumbence sternal. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחרי החיה היא אמבולטורי מלא, לשכן אותו בבית הביבר עם גישה חופשית למזון ומים. </li></ol></li></ol> 2. בהתאמה לשפת הקרנה מופרדתשל בלוטות submandibular <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לרסן את החיה כפי שתואר קודם לכן, להרדים עם הממשל תוך שרירית של קטמין (33 מ&quot;ג / ק&quot;ג) / xylazine (6 מ&quot;ג / ק&quot;ג) / acepromazine (1 מ&quot;ג / ק&quot;ג) תערובת של הגפיים האחוריות. אשר עומק ההרדמה, ולהחיל סיכה לעיניים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את פרקדן חיה על השולחן מאיץ ליניארי, ולהרחיב הצוואר שלה על ידי הטיית הראש. Collimate בתחום הקרינה (רוחב חריץ 3 סנטימטרים) כדי להקיף את האזור מהגבול התחתון של הלסת התחתונה לחלק העליון של עצם החזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים בולוס 1 ס&quot;מ שווה-רקמה על האזור, ולהתאים את המרחק בין מקור קרינה העליון של בולוס ל -100 ס&quot;מ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקרינים את החיה (2.5 Gy) באמצעות קרן פוטונים 6 MV של מאיץ ליניארי. מנת שיעור, גודל שדה, ומרחק ממקור קרינת בולוס משטח יכתיב את זמן החשיפה. ב הנוכחי להגדיר, חיות הוקרנו בשיעור מנה של ~ 1 Gy / min. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על חשיפה; 2.5 Gy / יום עבור סכום כולל של 8ימים; 4 ימים / שבוע עם מרווח 2 ימים שביניהם. שמור על חמי החיה במהלך התאוששות. מעבירים את החיה כדי ביבר אחרי זה אמבולטורי מלא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אסוף רוק הבלוטה submandibular מגורה 8 שבועות לאחר קרינה כדי למדוד את תפקוד בלוטת 14. להרדים בעלי חיים תחת הרדמה על ידי זלוף הלב של pH בופר paraformaldehyde קר 4% / פוספט 7.2. לעקור בלוטות submandibular עבור היסטולוגית ו immunohistochemical מנתח 14. </li></ol>

<ol>
	<li>Delporte, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+fluid+secretion+after+adenoviral-mediated+transfer+of+the+aquaporin-1+cDNA+to+irradiated+rat+salivary+glands.">Increased fluid secretion after adenoviral-mediated transfer of the aquaporin-1 cDNA to irradiated rat salivary glands.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 94 (7), 3268-3273 (1997).</li><li>Chambers, M. S., Rosenthal, D. I., Weber, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiation-induced+xerostomia.">Radiation-induced xerostomia.</a> Head Neck. 29 (1), 58-63 (2007).</li><li>Sciubba, J. J., Goldenberg, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oral+complications+of+radiotherapy.">Oral complications of radiotherapy.</a> Lancet Oncol. 7 (2), 175-183 (2006).</li><li>Rodrigues, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+prospective+study+of+salivary+gland+function+in+lymphoma+patients+receiving+head+and+neck+irradiation.">A prospective study of salivary gland function in lymphoma patients receiving head and neck irradiation.</a> Int J Radiat Oncol Biol Phys. 75 (4), 1079-1083 (2009).</li><li>Coracin, F. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Major+salivary+gland+damage+in+allogeneic+hematopoietic+progenitor+cell+transplantation+assessed+by+scintigraphic+methods.">Major salivary gland damage in allogeneic hematopoietic progenitor cell transplantation assessed by scintigraphic methods.</a> Bone Marrow Transplant. 37 (10), 955-959 (2006).</li><li>Jensen, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+systematic+review+of+salivary+gland+hypofunction+and+xerostomia+induced+by+cancer+therapies:+management+strategies+and+economic+impact.">A systematic review of salivary gland hypofunction and xerostomia induced by cancer therapies: management strategies and economic impact.</a> Support Care Cancer. 18 (8), 1061-1079 (2010).</li><li>de Castro, G., Federico, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation,+prevention+and+management+of+radiotherapy-induced+xerostomia+in+head+and+neck+cancer+patients.">Evaluation, prevention and management of radiotherapy-induced xerostomia in head and neck cancer patients.</a> Curr Opin Oncol. 18 (3), 266-270 (2006).</li><li>Epperly, M. W., Carpenter, M., Agarwal, A., Mitra, P., Nie, S., Greenberger, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraoral+manganese+superoxide+dismutase-plasmid/liposome+(MnSOD-PL)+radioprotective+gene+therapy+decreases+ionizing+irradiation-induced+murine+mucosal+cell+cycling+and+apoptosis.">Intraoral manganese superoxide dismutase-plasmid/liposome (MnSOD-PL) radioprotective gene therapy decreases ionizing irradiation-induced murine mucosal cell cycling and apoptosis.</a> In Vivo. 18 (4), 401-410 (2004).</li><li>Cotrim, A. P., Sowers, A., Mitchell, J. B., Baum, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+irradiation-induced+salivary+hypofunction+by+microvessel+protection+in+mouse+salivary+glands.">Prevention of irradiation-induced salivary hypofunction by microvessel protection in mouse salivary glands.</a> Mol Ther. 15 (12), 2101-2106 (2007).</li><li>Zheng, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+radiation-induced+salivary+hypofunction+following+hKGF+gene+delivery+to+murine+submandibular+glands.">Prevention of radiation-induced salivary hypofunction following hKGF gene delivery to murine submandibular glands.</a> Clin Cancer Res. 17 (9), 2842-2851 (2011).</li><li>Palaniyandi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenoviral+delivery+of+Tousled+kinase+for+the+protection+salivary+glands+against+ionizing+radiation+damage.">Adenoviral delivery of Tousled kinase for the protection salivary glands against ionizing radiation damage.</a> Gene Ther. 18 (3), 275-282 (2011).</li><li>Baum, B. J., Voutetakis, A., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salivary+glands:+novel+target+sites+for+gene+therapeutics.">Salivary glands: novel target sites for gene therapeutics.</a> Trends Mol Med. 10 (12), 585-590 (2004).</li><li>Limesand, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin-like+growth+factor-1+preserves+salivary+gland+function+after+fractionated+radiation.">Insulin-like growth factor-1 preserves salivary gland function after fractionated radiation.</a> Int J Radiat Oncol Biol Phys. 78 (2), 579-586 (2010).</li><li>Timiri Shanmugam, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recombinant+AAV9-TLK1B+administration+ameliorates+fractionated+radiation-induced+xerostomia.">Recombinant AAV9-TLK1B administration ameliorates fractionated radiation-induced xerostomia.</a> Hum Gene Ther. 24 (6), 604-612 (2013).</li><li>Coppes, R. P., Vissink, A., Konings, A. W. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+radiosensitivity+of+rat+parotid+and+submandibular+glands+after+different+radiation+schedules.">Comparison of radiosensitivity of rat parotid and submandibular glands after different radiation schedules.</a> Radiother Oncol. 63 (3), 321-328 (2002).</li><li>Sunavala-Dossabhoy, G., Palaniyandi, S., Richardson, C., De Benedetti, A., Schrott, L., Caldito, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TAT-mediated+delivery+of+Tousled+protein+to+salivary+glands+protects+against+radiation-induced+hypofunction.">TAT-mediated delivery of Tousled protein to salivary glands protects against radiation-induced hypofunction.</a> Int J Radiat Oncol Biol Phys. 84 (1), 257-265 (2012).</li><li>Baum, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transfer+of+the+AQP1+cDNA+for+the+correction+of+radiation-induced+salivary+hypofunction.">Transfer of the AQP1 cDNA for the correction of radiation-induced salivary hypofunction.</a> Biochim Biophys Acta. 1758 (8), 1071-1077 (2006).</li><li>Tran, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paracrine+effects+of+bone+marrow+soup+restore+organ+function,+regeneration,+and+repair+in+salivary+glands+damaged+by+irradiation.">Paracrine effects of bone marrow soup restore organ function, regeneration, and repair in salivary glands damaged by irradiation.</a> PLoS One. 8 (4), e61632 (2013).</li><li>Nanduri, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salisphere+derived+c-Kit++cell+transplantation+restores+tissue+homeostasis+in+irradiated+salivary+gland.">Salisphere derived c-Kit+ cell transplantation restores tissue homeostasis in irradiated salivary gland.</a> Radiother Oncol. 108 (3), 458-463 (2013).</li><li>Arany, S., Benoit, D. S., Dewhurst, S., Ovitt, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoparticle-mediated+gene+silencing+confers+radioprotection+to+salivary+glands+in+vivo.">Nanoparticle-mediated gene silencing confers radioprotection to salivary glands in vivo.</a> Mol Ther. 21 (6), 1182-1194 (2013).</li><li>Voutetakis, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reengineered+salivary+glands+are+stable+endogenous+bioreactors+for+systemic+gene+therapeutics.">Reengineered salivary glands are stable endogenous bioreactors for systemic gene therapeutics.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 101 (9), 3053-3058 (2004).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

בלוטות רוק לעתים קרובות לקבל מינון קרינה מעבר לסף של התאוששות רקמה בחולים עובר טיפול הקרנות לסרטן צוואר הראש, אבלציה בחירה של בלוטות צוואר, או ממאירויות המטולוגיות אזוריות. למרות תאי acinar מפריש נוזל של הבלוטה הם מובחנים סופנים, הם באופן פרדוקסלי רגישים לקרינה. פונקצית הפרשת טיפות בתוך השבועות הראשונים של קרינה, ותוצאות ניזק בלתי הפיכות בלוטות פלט רוק תחתון כרוני. כדי להתמודד עם תפקוד בלוטת עניים יובש הפה הזה מתפתח, שימור או שיקום של תפקוד הפרשה הוא קריטי. טיפולים חדשניים כדי להגן מפני או לתקן את הנזק קרינה נחקרות 1, 8-11, 16-20. ממשל מערכתי של טיפולים נושא את הסיכון הגלום של תופעות לוואי ברקמות הלא ממוקד. משלוח מכוון אל בלוטות הרוק פוחת סיכון זה. ריפוי גנטי Retroductal הוא יעיל במניעת או1 remedying נגע בלוטת הרוק קשור קרינה, 9-, 11, 16,17,20. עם זאת, תוך שימוש באותה טכניקה, בלוטות הרוק ניתן גם reengineered להביע ומפרישים חלבונים, ectopically. ניצול מסלול הפרשה האנדוקרינית basolateral בתאי רוק, ביטוי transgene ואת הפרשת הורמון לדם יכולים להיות מושגת 21. החדרת גנים לשם בלוטות רוק, יכולה אם כן, תוארך ביעילות התיקון להפרעות אנדוקריניות מסוימות. למרות cannulation של צינוריות הרוק בלוטה חיות קטנות יכול להיות מסובך, בפועל היא מרכזית השחזה הטכניקה. לקצה החד של cannulae יכול שריטה בקלות במהלך החדרה, ולעשות עירוי קשה. הגברת חזרה בלחץ תוך גירוש הפתרון צריך להזהיר מראש של עיקול בצינור, לבין ההכרח מחדש cannulate צינור. וריאציות אנטומיות כגון פתח צינור סוטה או tortuosity צינור גדל, יחד עם פתולוגיות מגבילי פהפתיחה כמו צְבִיתַת הַלְסָתוֹת או סיסטיק submucous יכול לעשות משלוח בלוטת submandibular אתגר. עירוי של צבע impermeant בעת תרגול הטכניקה יכולה להיות אינדיקציה שימושית משלוח מדויק. מיקום נכון של cannulae עירוי עדין, ללא התנגדות הם גורמים חשובים להצלחת ההליך. חולי סרטן מטופלים לעתים קרובות עם פוטוני megavoltage שנוצרו על ידי מאיץ ליניארי. קרינה מחולקת מדי בוקר במנות קטנות יותר במהלך שבועות. חלוקה מנה מעניק תקופות של התאוששות בין קרינה להפחית רעילות על בתאים בריאים לרגש גידולים. מאוד קורות אנרגיה חודרות של מאיץ ליניארי שימושיות לטיפול בגידולים עמוקים. וגם, לטיפול בגידולים קרובים יותר לעור, בולוס שווה-רקמות משמש כדי להפחית את עומק חדירת פוטון. בדומה בקליניקה, מאיץ ליניארי נמסר קרינה מופרד יכול לשמש מקומית להקרין submaבלוטות ndibular של חיות קטנות. עם זאת, העמדה של בלוטות מיד מתחת לעור מחייבת את המיקום של בולוס להשיג&gt; מינון קרינה 90% בתוך בלוטות. העובי של בולוס מחושב בהתאם האנרגיה של פוטונים ואת העומק הרצוי של חדירה לרקמות. במאמר זה, אנו מספקים הנחיות ניסיון לביצוע החדרת בלוטת submandibular retroductal הקרנת מופרדים מקומית של בלוטות submandibular חולדה. תקוותנו היא כי השיטות הדגישו תסייענה התקנה ניסיונית החוקר להעז לתחום radiotoxicity בלוטת רוק.

הרס בטחונות של רקמות בריאות חשבונות במשך מספר תופעות לוואי מזיקות של טיפולים בסרטן. חלק או שלם של בלוטות הרוק הגדולות שעומדות עם שדות הקרינה נהרס באופן בלתי נמנע. לכן, רוב החולים שעברו הקרנות לחולי סרטן הראש והצוואר, לימפומה צוואר הרחם, או קרינה גוף מלא לפני השתלת מח עצם סובלים אחת מתופעות הלוואי הנפוצות ביותר ומתמשך של קרינה, בלוטת הרוק hypofunction 2-6. תאי acinar מייצר הנוזל של בלוטות הרוק הם רגישים לקרינה. פגיעה בבלוטות הרוק גורמת פוחתת דרסטי של זרימת רוק, מצב המכונה hypofunction רוק כמו. ההפחתה הכרונית בזרימת רוק פוגעת בפעילות אוראלית מפתח כגון לעיסה, בליעה, דיבור, וטעם, אך מהתוצאות החולניות של כאבים עזים, דמעות ריריות, בליעה, זיהומים אופורטוניסטיים, ועששת שיניים מחמירההחולה של רווחה 2,3 לתפקד. מאז אובדן תא הרוק הקשורים הקרנות הוא בלתי הפיך, אין טיפול מתקנת של יובש בפה. טיפול שוטף המתמקד להרגיע סימפטומים עם תחליפי רוק מלאכותיים וסמי prosecretory אינו יעיל להקלה ארוך טווח 6. למרות ששיטות משלוח קרינת שיפור לסייע בהפחתת חומרת המצב, רעילות רקמות בריאות וסיבוכיה להישאר גורם מגביל בטיפול בסרטן 6,7. צעדים מנעו כדי למנוע סיבוכים הקשורים הקרנות הם, אם כן, הופכים לנורמה. רדיו-מגן סוכני scavenge מיני חמצן רדיקלים חופשיים, ואכלוס תא אומנת, או להגביר תיקון DNA הם נבדקים כדי למנוע hypofunction רוק 8-11. הפרשות של בלוטות הרוק אקסוקרינית לנקז לתוך הפה דרך צינורות ההפרשה העיקרית. cannulation פנים הפה של הצינוריות דואר הפרשה להזרקה של חומר ניגוד נעשתה דרך שגרה כמו הליך אשפוז. ניצול בגישה דומה, בלוטות רוק יכולות להיות ממוקדות ישירות לטיפול מקומי 12. מלבד הפחתת הסיכון של תופעות לוואי מערכתיות, החדרת בלוטת retroductal הוסיפה הטבות. ההסדר בשכבה של תאי רוק סביב עץ ductal מאפשר מיקוד של כל תאי אפיתל הרוק, ואת אנקפסולציה סיב המעשים בלוטת כמחסום להפחית התפשטות טיפולית רצויה. בעיקרו של דבר, בלוטות רוק מתאימות באופן אופטימלי לטיפול ממוקד של תחלואים בלוטה כגון hypofunction רוק-induced קרינה. קרינה קונבנציונלית לטיפול בסרטן מועברת במנות קטנות (1.8 - 2.5 Gy / שבריר / יום, חמישה ימים בשבוע) לתקופה של שבועות. לכן, טיפולי רדיו-מגן שמראים יעיל נגד תכנית קרינה ממושכת במודלים ניסיוניים יש השלכה קלינית יותר. Comproפונקצית רוק mised לאחר קרינה מופרדת נרשמה חיות קטנות, אבל מקור קרינה, במינון קטן, ופרוטוקולים בם נעשו שימוש הם 9,10,13 מגוונות. דו&quot;ח זה מקובע שיטות למסירת retroductal כדי וקרינה מקומית של בלוטות submandibular עכברוש באמצעות מקור קרינה חולה-רלוונטי שבריר מנה.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="573">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Intramedic Polyethylene tubing (PE10)</td>
			<td style="width:71px;">Becton Dickson</td>
			<td align="right" style="width:119px;">427401</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">1/2 cc Insulin Syringe U-100</td>
			<td style="width:71px;">Becton Dickson</td>
			<td align="right" style="width:119px;">309306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Artificial Tears</td>
			<td style="width:71px;">Miller Vet Supply&#160;</td>
			<td style="width:119px;">5098-9840-64</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Hot Bead Sterilizer</td>
			<td style="width:71px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">18000-45</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Perma-Hand silk suture</td>
			<td style="width:71px;">Ethicon</td>
			<td style="width:119px;">K833H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Graefe forcep</td>
			<td style="width:71px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">11051-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">Olympus SZX16 Stereo Microscope</td>
			<td style="width:71px;">Hunt Optics and Imaging</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">6MV Linear Accelerator</td>
			<td style="width:71px;">Elekta</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Bolus - Skinless&#160;</td>
			<td style="width:71px;">Civco</td>
			<td style="width:119px;">MTCB410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Heat Lamp</td>
			<td style="width:71px;">Braintree Scientific</td>
			<td style="width:119px;">HL-1&#160;110V</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

retroductal submandibular gland instillation and localized fractionated irradiation in a rat model of salivary hypofunction

Normal tissues that lie within the portals of radiation are inadvertently damaged. Salivary glands are often injured during head and neck radiotherapy. Irreparable cell damage results in a chronic loss of salivary function that impairs basic oral activities, and increases the risk of oral infections and dental caries. Salivary hypofunction and its complications gravely impact a patient's comfort. Current symptomatic management of the condition is ineffective, and newer therapies to assuage the condition are needed. 
Salivary glands are exocrine glands, which expel their secretions into the mouth via excretory ducts. Cannulation of these ducts provides direct access to the glands. Retroductal delivery of a contrast agent to major salivary glands is a routine out-patient procedure for diagnostic imaging. Using a similar procedure, localized treatment of the glands is feasible. However, performing this technique in preclinical studies with small animals poses unique challenges. In this study we describe the technique of retroductal administration in rat submandibular glands, a procedure that was refined in Dr. Bruce Baum's laboratory (NIH)1, and lay out a procedure for local gland irradiation.

התאמת טכניקת sialography פולשנית, טיפול המקומי של בלוטות רוק גדולות אינו ריאלי. ממשל Retroductal בבלוטות רוק עכברוש submandibular נוסה על ידי cannulation פנים פה של הצינוריות של וורטון (איור 2). צינוריות הרוק של וורטון הפתוחות על הגבשושיות תת-לשוניים ממוקמות על רצפת הפה, אבל הפתחים אינן גלויות בקלות. החדרת הצינורית הייתה, אם כן, נעשתה על ידי חיטוט עדין. כדי למנוע דימום לא נעים או ניקוב צינור, שום כוח ששימש בעת הצבת הצינורית. מעבר התנגדות ללא חלקות של הצינורית בצינור אושר על ידי חזרה עדינות ושוב תנועה של הצינור. Cannulation במהלך ניסויים ראשוניים אושר על ידי יציקת הבלוטה עם hematoxylin או פתרון trypan הכחול, והערכת מכתים בלוטה בחיות מורדמות (איור 3). Glנפח ולמלא הוברר על ידי הדמית ההכתמה של עץ ductal בבלוטות משורש. עבור בעלי חיים במשקל 150 - 250 גרם, מילוי מלא של הבלוטה הושג עם 200 - 250 μl של פתרון. עירוי ראפיד יכול להגביר את לחץ הבלוטה להגביר את הסיכון לפציעה biospread. כדי למנוע הרס רקמות, הפתרון היה מנוהל בהדרגה בשיעור של ~ 50 μl / min בלוטות submandibular עכברוש ניתנים להשוואה בלוטות הפרוטיד ברגישות שלהם לקרינה 15. בלוטות submandibular נחקרו כי הם יכולים להיות מוקרנים באופן סלקטיבי מבלי שייגרם השפעות חוץ-היעד חמורים (איור 4). חוסך של חלל הפה ואת נפח גדול של בלוטות הפרוטיד למזער את ההשפעה של דלקת בפה ו יובש בפה חריפה על בריאותם של חיות התוצאה הניסיונית. המחקרים הקודמים שלנו בחולדות בוצעו עם מינונים יחידים, גבוהים של קרינת 11,16, אבל frac<html> מינון tionated הוא יותר רלוונטי בקליניקה. באזור הצוואר של בעל החיים, ולכן, חשוף מדי יום במנות קטנות של קרינה. כדי להשיג הצטברות אחידה של מינון הקרינה בתוך בלוטות submandibular הממוקם ליד פני העור, בולוס רקמות רכות-שווה עשוי ג&#39;ל הומוגנית עם צפיפות של סמ&quot;ק 1.03 g / הונחה על הצוואר בזמן הקרנות. השפעת תכנית קרינה מופרדת על זרימת רוק כפי שנקבע ב -8 שבועות לאחר הקרינה מראה כי חשיפה יומיומית במרווחים של 2.5 Gy מופחתת זרימת רוק בתלילות. ירידה של פי 10 ליד בתפוקת רוק נרשמה חיות מוקרנות בניגוד לבעלי חיים שאינם מוקרן (מבחן T- של סטודנטי 2-צדדיים, p &lt;0.01; איור 5) 14. התוצאות אישרו הקמת hypofunction הרוק-induced קרינה בחיות. <html> ge = &quot;1&quot;&gt; <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/53785/53785fig1.jpg" /> איור 1. בניית פלטפורמה אישית ו-פיזור לחי. חוט נוקשה 4 מ&quot;מ היתה מכופפת מלבן 3-צדדית (11 ס&quot;מ גובה X 13 ס&quot;מ רוחב) כמוצג, והבר רוחבי היה מורכן במרכז. קצות חוט היו כפופות לתוך לולאות, וברגים הועברו דרכם כדי לחזק את מערך ללוח פלסטיק (25 ס&quot;מ אורך x 15 ס&quot;מ רוחב x 0.8 ס&quot;מ עומק). בורג מרכזי הוכנס אחורי סנטימטר 5 הרכבת התיל. הוא שימש כדי לעגן את הגומייה כי פתחה את הלסת התחתונה הבלעה:. מנהג בנוי הלחי-מפזר עשוי מכופף חוט עבה הפנויה 1 מ&quot;מ &quot;U לעצב&quot; עם קצוות מתרחבים. וצינור פלסטיק הועברו על קצות החוט כדי למנוע נזק רירית buccal. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53785/53785fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <html> : לשמור-together.within-page = &quot;1&quot;&gt; <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/53785/53785fig2.jpg" /> איור 2. Cannulation של עכברוש submandibular בלוטת טרמינל צינוריות. הלשון היא העלתה לרומם את רצפת הפה, ואת cannulae פוליאתילן הוחדרו לתוך פתחי צינור submandibular הממוקם על רצפת הפה. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53785/53785fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a> <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/53785/53785fig3.jpg" /> איור 3. עירוי של פתרון Hematoxylin ב בלוטת submandibular כדי לאשר את הטכניקה. מכתים בלוטה מעיד על הממשל המוצלח של הפתרון בבלוטת submandibular. שים לב בלוטת sublingual בפינה השמאלית העליונה אינה מוכתמת. בלוטת שליטה הלא חדורים מוצגת בצד השמאל.e.com/files/ftp_upload/53785/53785fig3large.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו. <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/53785/53785fig4.jpg" /> איור 4. מיקום של בעלי חיים עבור הקרנה. החיה הוא הניח פרקדן על שולחן מאיץ ליניארי, וראש שכותרתו חזרה להאריך את הצוואר. רוחב החריץ collimated היה 3 ס&quot;מ. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53785/53785fig4large.jpg" target="_blank">נא ללחוץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 5" src="/files/ftp_upload/53785/53785fig5.jpg" /> אפקט איור 5. של קרינה מופרד על תפקוד בלוטת submandibular. מלוח הוחדר בבלוטות submandibular לפני הקרינה. הצוואר של החיה היה מוקרן שברים של 2.5 Gy / יום במשך 8 ימים. את DATהמוצגים הם ממוצע ± SEM של קצב זרימת הרוק submandibular מגורה 8 שבועות לאחר השלמת תוכנית קרינה. הדמות לשכפל באישור זכויות יוצרים מטיפול האדם ג&#39;ין, מרי אן ליברט, מו&quot;ל Inc. 15. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53785/53785fig5large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Retroductal Submandibular Gland Instillation and Localized Fractionated Irradiation in a Rat Model of Salivary Hypofunction at JoVE.com

Retroductal Submandibular Gland Instillation and Localized Fractionated Irradiation in a Rat Model of Salivary Hypofunction

Salivary gland hypofunction, a major adverse effect of head and neck radiotherapy diminishes a patient's quality of life. The demonstration of efficacy of new therapies in animal models is a prerequisite before clinical transition. This protocol describes retroductal administration and local irradiation of rat submandibular glands.

Retroductal submandibular בלוטת החדרה ונקודות מופרדות הקרנה במודל עכברים של הרוק hypofunction

Normal tissues that lie within the portals of radiation are inadvertently damaged. Salivary glands are often injured during head and neck radiotherapy. ...

retroductal-submandibular-gland-instillation-localized-fractionated

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

11.3K Views.  Louisiana State University Health Sciences Center. Salivary gland hypofunction, a major adverse effect of head and neck radiotherapy diminishes a patient's quality of life. The demonstration of efficacy of new therapies in animal models is a prerequisite before clinical transition. This protocol describes retroductal administration and local irradiation of rat submandibular glands.

Video: Retroductal Submandibular Gland Instillation and Localized Fractionated Irradiation in a Rat Model of Salivary Hypofunction

Cannulation of the Mouse Submandibular Salivary Gland via the Wharton's Duct

Severe salivary gland hypofunction is frequently found in patients with Sj&ouml;gren's syndrome and those who receiving therapeutic 
irradiation in their head and neck regions for cancer treatment. Both groups of patients experience symptoms such as xerostomia (dry mouth), dysphagia 
(impaired chewing and swallowing), severe dental caries, altered taste, oro-pharyngeal infections (candidiasis), mucositis, pain and discomfort.
One innovative approach of regenerative medicine for the treatment of salivary gland hypo-function is speculated in RS Redman, E Mezey 
et al. 2009: stem cells can be directly deposited by cannulation into the gland as a potent method in reviving the functions of the impaired organ. Presumably, 
the migrated foreign stem cells will differentiate into glandular cells to function as part of the host salivary gland. Also, this cannulation technique is an 
expedient and effective delivery method for clinical gene transfer application.
Here we illustrate the steps involved in performing the cannulation procedure on the mouse submandibular salivary gland via the Wharton's duct 
(Fig 1). C3H mice (Charles River, Montreal, QC, Canada) are used for this experiment, which have been kept under clean conventional conditions at 
the McGill University animal resource center. All experiments have been approved by the University Animal Care Committee and were in accordance with the 
guidelines of the Canadian Council on Animal Care.
For this experiment, a trypan blue solution is infused into the gland through the opening of the Wharton's duct using a 
insulin syringe with a 29-gauge needle encased inside a polyethylene tube. Subsequently, the mouse is dissected to show that the infusions migrated 
into the gland successfully.

A protocol for the cannulation of the mouse submandibular salivary gland via the Wharton's duct is described. For this experiment, the trypan blue solution is used as a dyer to demonstrate how this technique effectively delivers infusions into the targeted gland, and to suggest the reliability of this new approach as a potential clinical drug/cell therapy for the regeneration of salivary glands.

Cannulation של בלוטת הרוק באמצעות עכבר Submandibular Duct של וורטון

Severe salivary gland hypofunction is frequently found in patients with Sj&ouml;gren's syndrome and those who receiving therapeutic 
irradiation in their ...

A Model of Chronic Nutrient Infusion in the Rat

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to affect the function of several organs and tissues and to contribute to the development of the many complications associated with obesity and the metabolic syndrome, including type 2 diabetes. To study the mechanisms by which excessive levels of glucose and fatty acids affect the pancreatic beta-cell and the secretion of insulin, we have established a chronic nutrient infusion model in the rat. The procedure consists of catheterizing the right jugular vein and left carotid artery under general anesthesia; allowing a 7-day recuperation period; connecting the catheters to the pumps using a swivel and counterweight system that enables the animal to move freely in the cage; and infusing glucose and/or Intralipid (a soybean oil emulsion which generates a mixture of approximately 80% unsaturated/20% saturated fatty acids when infused with heparin) for 72 hr. This model offers several advantages, including the possibility to finely modulate the target levels of circulating glucose and fatty acids; the option to co-infuse pharmacological compounds; and the relatively short time frame as opposed to dietary models. It can be used to examine the mechanisms of nutrient-induced dysfunction in a variety of organs and to test the effectiveness of drugs in this context.

A protocol for chronic infusions of glucose and Intralipid in rats is described. This model can be used to study the impact of nutrient excess on organ function and physiological parameters.

דגם של עירוי מזין כרוני בחולדה

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to  affect the function of several organs and tissues and to contribute to the  ...

Collecting Saliva and Measuring Salivary Cortisol and Alpha-amylase in Frail Community Residing Older Adults via Family Caregivers

Salivary measures have emerged in bio-behavioral research that are easy-to-collect, minimally invasive, and relatively inexpensive biologic markers of stress. This article we present the steps for collection and analysis of two salivary assays in research with frail, community residing older adults-salivary cortisol and salivary alpha amylase. The field of salivary bioscience is rapidly advancing and the purpose of this presentation is to provide an update on the developments for investigators interested in integrating these measures into research on aging. Strategies are presented for instructing family caregivers in collecting saliva in the home, and for conducting laboratory analyses of salivary analytes that have demonstrated feasibility, high compliance, and yield quality specimens. The protocol for sample collection includes: (1) consistent use of collection materials; (2) standardized methods that promote adherence and minimize subject burden; and (3) procedures for controlling certain confounding agents. We also provide strategies for laboratory analyses include: (1) saliva handling and processing; (2) salivary cortisol and salivary alpha amylase assay procedures; and (3) analytic considerations.

We demonstrate: (1) procedures for collection of salivary samples in cognitive impaired older adults by family caregivers in the home setting, (2) procedures for measuring stress activity via salivary cortisol and alpha amylase, and (3) representative profiles. Protocols that allow researchers to study stress-linked processes advance our understanding of biological sensitivity and susceptibility.

Salivary measures have emerged in bio-behavioral research  that are easy-to-collect, minimally invasive, and relatively inexpensive  biologic markers of ...

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoma is a disease of the central nervous system affecting retinal ganglion cells (RGCs). RGC axons making up the optic nerve carry visual input to the brain for visual perception. Damage to RGCs and their axons leads to vision loss and/or blindness. Although the specific cause of glaucoma is unknown, the primary risk factor for the disease is an elevated intraocular pressure. Glaucoma-inducing procedures in animal models are a valuable tool to researchers studying the mechanism of RGC death. Such information can lead to the development of effective neuroprotective treatments that could aid in the prevention of vision loss. The protocol in this paper describes a method of inducing glaucoma - like conditions in an in vivo rat model where 50 &#181;l of 2 M hypertonic saline is injected into the episcleral venous plexus. Blanching of the vessels indicates successful injection. This procedure causes loss of RGCs to simulate glaucoma. One month following injection, animals are sacrificed and eyes are removed. Next, the cornea, lens, and vitreous are removed to make an eyecup. The retina is then peeled from the back of the eye and pinned onto sylgard dishes using cactus needles. At this point, neurons in the retina can be stained for analysis. Results from this lab show that approximately 25% of RGCs are lost within one month of the procedure when compared to internal controls. This procedure allows for quantitative analysis of retinal ganglion cell death in an in vivo rat glaucoma model.

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoma is characterized by damage to retinal ganglion cells. Inducing glaucoma in animal models can provide insight into the study of this disease. Here, we outline a procedure that induces loss of RGCs in an in vivo rat model and demonstrates the preparation of whole-mount retinas for analysis.

גלאוקומה וישכנע נוהל בבית<em&gt; In vivo</em&gt; מודל עכברוש ואת כל הר רשתית הכנה

Glaucoma is a disease of the central nervous system affecting retinal ganglion cells (RGCs). RGC axons making up the optic nerve carry visual input to the ...

Murine Salivary Functional Assessment via Pilocarpine Stimulation Following Fractionated Radiation

Hyposalivation is commonly observed in the autoimmune reaction of Sj&#246;gren's syndrome or following radiation injury to the major salivary glands. In these cases, questions remain regarding disease pathogenesis and effective interventions. An optimized technique that allows functional assessment of the salivary glands is invaluable for investigating exocrine gland biology, dysfunction, and therapeutics. Here, we present a step by step approach to performing pilocarpine stimulated saliva secretion, including tracheostomy and the dissection of the three major murine salivary glands. We also detail the appropriate murine head and neck anatomy accessed during these techniques. This approach is scalable, allowing for multiple mice to be processed simultaneously, thus improving the efficiency of the work flow. We aim to improve the reproducibility of these methods, each of which has further applications within the field. In addition to saliva collection, we discuss metrics for quantifying and normalizing functional capacity of these tissues. Representative data are included from submandibular glands with depressed salivary gland function 2 weeks following fractionated radiation (4 doses of 6.85 Gy).

We present a detailed approach to performing saliva collection, including murine tracheostomy and the isolation of three major salivary glands.

מאתר הערכה תפקודית הרוק באמצעות בעקבות גירוי פילוקרפין Fractionated קרינה

Hyposalivation is commonly observed in the autoimmune reaction of Sj&#246;gren's syndrome or following radiation injury to the major salivary glands. In ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

Contractility איזומטרי מדידה של עורק מצע המעי העליון העכבר באמצעות חוט Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

A Pleural Effusion Model in Rats by Intratracheal Instillation of Polyacrylate/Nanosilica

Pleural effusion is a prevalent clinical finding of many pulmonary diseases. Having a useful animal pleural effusion model is very important to study these pulmonary diseases. Previous pleural effusion models paid more attention to biological factors rather than nanoparticles in the environment. Here, we introduce a model to make pleural effusion in rats by intratracheal instillation of polyacrylate/nanosilica, and a method of nanoparticle isolation in the pleural effusion. By intratracheal instillation of polyacrylate/nanosilica with concentrations of 3.125, 6.25 and 12.5 mg/kg&#8729;mL, the pleural effusion in rats presented on day 3, peaked at days 7-10 in 6.25 and 12.5 mg/kg&#8729;mL groups, then slowly decreased and disappeared on day 14. When the concentration of polyacrylate/nanosilica increased, the pleural effusion is produced more and faster. This pleural fluid was detected by ultrasound examination or CT chest scanning and confirmed by dissection of rats. Silica nanoparticles were observed in the rats' pleural effusion by transmission electron microscope. These results showed that the exposure to polyacrylate/nanosilica leads to the induction of pleural effusion, which was consistent with our previous report in humans. Additionally, this model is beneficial for the further study of nanotoxicology and the pleural effusion diseases.

Here, we present a protocol to construct a pleural effusion model in rats by intratracheal instillation of polyacrylate/nanosilica.

מודל תפליט פלאורלי בחולדות על ידי החדרה Intratracheal של Polyacrylate/Nanosilica

Pleural effusion is a prevalent clinical finding of many pulmonary diseases. Having a useful animal pleural effusion model is very important to study ...

Radiation Treatment of Organotypic Cultures from Submandibular and Parotid Salivary Glands Models Key In Vivo Characteristics

Hyposalivation and xerostomia create chronic oral complications that decrease the quality of life in head and neck cancer patients who are treated with radiotherapy. Experimental approaches to understanding mechanisms of salivary gland dysfunction and restoration have focused on in vivo models, which are handicapped by an inability to systematically screen therapeutic candidates and efficiencies in transfection capability to manipulate specific genes. The purpose of this salivary gland organotypic culture protocol is to evaluate maximal time of culture viability and characterize cellular changes following ex vivo radiation treatment. We utilized immunofluorescent staining and confocal microscopy to determine when specific cell populations and markers are present during a 30-day culture period. In addition, cellular markers previously reported in in vivo radiation models are evaluated in cultures that are irradiated ex vivo. Moving forward, this method is an attractive platform for rapid ex vivo assessment of murine and human salivary gland tissue responses to therapeutic agents that improve salivary function.

Using three-dimensional organotypic cultures to visualize morphology and functional markers of salivary glands may provide novel insights into the mechanisms of tissue damage following radiation. Described here is a protocol to section, culture, irradiate, stain, and image 50&#8211;90 &#956;m thick salivary gland sections prior to and following exposure to ionizing radiation.

הטיפול בקרינה של תרבויות אורגנוטימית מתוך הלסת התחתונה ובלוטות הרוק פרודה מודלים מפתח Vivo מאפיינים

Hyposalivation and xerostomia create chronic oral complications that decrease the quality of life in head and neck cancer patients who are treated with ...

Acupuncture in a Rat Model of Asthma

A high platform can fix rats without restriction and completely expose the acupoints on the back during acupuncture manipulation. This article describes methods for the fabrication of the high platform, establishes a rat model of asthma and measures changes in respiratory function using a noninvasive and real-time whole-body plethysmography (WBP) system.

דיקור במודל עכברוש של אסטמה

A high platform can fix rats without restriction and completely expose the acupoints on the back during acupuncture manipulation. This article describes ...

Retinal Pathophysiological Evaluation in a Rat Model

A posterior segment eye disease like diabetic retinopathy alters the physiology of the retina. Diabetic retinopathy is characterized by a retinal detachment, breakdown of the blood-retinal barrier (BRB), and retinal angiogenesis. An in vivo rat model is a valuable experimental tool to examine the changes in the structure and function of the retina. We propose three different experimental techniques in the rat model to identify morphological changes of retinal cells, retinal vasculature, and compromised BRB. Retinal histology is used to study the morphology of various retinal cells. Also, quantitative measurement is performed by retinal cell count and thickness measurement of different retinal layers. A BRB breakdown assay is used to determine the leakage of extraocular proteins from the plasma to vitreous tissue due to the breakdown of BRB. Fluorescence angiography is used to study angiogenesis and leakage of blood vessels by visualizing retinal vasculature using FITC-dextran dye.

Diabetic retinopathy is one of the leading causes of blindness. Histology, blood-retinal barrier breakdown assay, and fluorescence angiography are valuable techniques to understand the pathophysiology of the retina, which could further enhance the efficient drug screening against diabetic retinopathy.