These experiments were funded by the NIH grant #RAI093634A. We express immense gratitude to Jenny Powers, DVM, PhD, for her assistance in muntjac milking.

1.. Fare Süt Sağım Protokol Bu protokol açıklanan yöntemler IACUC tarafından onaylanmıştır. Offspring gelen Barajı&#39;nın 1. Ayırma <ol><li> Sağılan edilecek baraj seçin. 8-12 gün toplama 21 gün için herhangi bir zaman noktası sonrası doğum kadar mümkün olan maksimal süt toplama-olsa sağlamak için doğumu yayınlamak 4 veya daha fazla yavru bir çöp ile bir baraj seçin. </li><li> Sağımdan önce onu çöp en az 2 saat mesafede baraj ayırın. Not: Belirli bir zaman diliminde birden fazla baraj süt için tek arzusu Should, yeterli yiyecek ve su kaynağı ile aynı kafeste ayrı baraj evine kabul edilebilir. </li></ol> Oksitosin, Anestezi ve Göz Lubricant 2. İdaresi <ol><li> Intraperitoneal oksitosin 2 IU / kg (IP) yönetmek. Oksitosin süt salgılanmasını uyarmak üzere emziren kadınlar arasında meme bezleri üzerinde etki eden bir hormondur. Oksitosin fr elde edilebilirom bir veteriner. </li><li> 5-10 mg / kg xylazine IP ile birlikte 80-100 mg / kg ketamin içeren bir anestezik karışımı uygulayın. Örneğin, bir 10 ml stok anestezi Karışım yaklaşık 30 g ağırlığındaki fareler için önceden hazırlanmış olabilir ve 0.1 ml ketamin hidroklorid ve 8.9 ml 2 H, O, ve 1.0 ml ketamin içerir. 0.25 ml toplam anestezik süt toplanması için yeterli zaman vermek gerektiğini, hangi yaklaşık 20-30 dakika boyunca bu büyüklükte bir fare uyutacak. Notlar: hayvan başarıyla anestezi olduğunu belirlemek için, hafifçe bir katı bir yüzey üzerine midesine onu yerleştirmek; o ayakları hareketli ya da o tamamen anestezi ise onu ayağa teşebbüs edilmemelidir. Tamamen özgün doz ile anestezi edilmelerinden bir fare durumunda, araştırmacı bir verebilme ¼ veya anestetik karışım fare elde etmiş, fare ve / veya sedasyon seviyesinin boyutuna bağlı olarak orijinal dozun ½ . Ancak, bu i olabiliranesteziye bir advers reaksiyon şansı şekilde arttırın ve aynı zamanda fare daha derin anestezi uygulandı ve / veya daha uzun bir süre boyunca anestezi olması ile sonuçlanabilir. Not: Birden fazla baraj sağma ise, oksitosin ve ketamin ve ksilazin oksitosin için ve sedasyon kez kısa yarılanma ömrü nedeniyle anestezi enjeksiyonları sersemleme için gereklidir. </li><li> Her gözün köşesine göz yağlayıcı küçük bir miktar uygulayın ve anestezi altında iken kurumasını fare gözleri önlemek için yayıldı. </li></ol> 3.. Süt Toplama Manuel (R1 olarak anılacaktır) süt ve bir araştırmacı süt (R2) toplamak için ifade ederken anestezi fare tutmak için bir araştırmacı: süt toplama en kolay iki araştırmacı ile yapılır. Fare zarar vermemek için, düz bir yüzeye sabitlenmiştir, bu yöntem, aynı zamanda, tek bir kişi ile yapılabilir. <ol><li> R2, bir P-200 Pip, steril alkol hazırlık yastıkları ile donatılmış olmalıdırEtman, her bir fare için temiz bir pipet ucu ve bir 1.5 mi Eppendorf tüpüne ya da 1.2 ml cryovial olarak süt, (Malzemelerin bkz. Tablo) tutmak için bir kap. </li><li> Oksitosin etkisi başlar gibi, süt boşaltma (Şekil 1A bakınız) fare meme alanında görünür hale gelecektir. R1: Steril alkol hazırlık takımını açınız ve yavaşça önce sağıma alanını temizlemek için fare meme alanını silin. Elle süt görünür bir boncuk emziğin dibinde oluşmaya başlar kadar hafifçe yukarıya doğru bir hareketle meme doku masajı ve sıkmak için başparmak ve işaret parmağı ile meme başı süt ifade. </li><li> Pipet havayı serbest bırakmak ve süt toplama hazırlamak için ilk durağı P-200 pipetman pistonu basın. </li><li> Süt damla üstündeki pipet yerleştirin, yavaşça yavaşça pistonu basıncı tahliye ederek pipet içine süt çekin. (Bkz: meme başı ya da deriye çok yakın ucu koymak için özenŞekil 1B). Bu tüm yol pipet ucunun üstüne süt çeker ve zor tutma kabı içine, genellikle yapışkan bir süt çıkarmak için yapacak şekilde tamamen pistonu serbest bırakmak için gerekli değildir. </li><li> (Şekil 1C bakınız) ilk durağı geçen pistonu için başparmak ile kabın içine süt boşaltınız. Herhangi bir sıvı kaybolur, böylece küçük hacimli atılmasını kolaylaştırmak için, borunun karşı tarafı pipet basın. </li><li> Herhangi emzikleri atlamak için değil şekilde elle saat yönünde ya da saat yönünün tersine ya hareket, her emzik süt sağmaya devam. Bu geri gelmek ve diğerinden daha fazla süt üretmesi gerektiğini sürekli aynı emzik süt ifade etmek kabul edilebilir ve kullanışlı hem de. </li></ol> Barajı 4. Anestezi iptali <ol><li> Çoğu durumda, bu baraj sağım işlemi sırasında uyanmaya başlar başlamak için yaygındır. Bu durumda değilse, bir cag olarak baraj koyune dolaylı, ısıtmalı dolaşan battaniye gibi bir ısı kaynağı, altında o uyanmak başlayana kadar. Not: baraj, uyanmak o onu kendi kafesine hakkında yürümek mümkün olduğu kadar onun aktivite yakın gözlem tutmaya başlar gibi. </li><li> Baraj mücadele olmadan kafes hakkında hareketli sonra, onun çöp ile kendi orijinal kafesin içine onu geri yerleştirin. Hiçbir kötü etkisi süt toplama sonra beslemek için pups &#39;yeteneğine göre not edilmiştir. </li></ol> 2.. Munçağı Sağım Protokol Bu protokol açıklanan yöntemler IACUC tarafından onaylanmıştır. Offspring gelen Doe 1. Ayırma <ol><li> Sağılan gereken parayı seçin. Reeves &#39;munçağı geyik genellikle bir geyik yavrusu 2 doğurur. Kolostrum 8 gerekli besinlerin erişmek için kahverengi fırsatı izin DOE birthing gün sonra süt. Not: kahverengi genellikle gizler ve proc sırasında yeniden gelmezedure; anne-çocuk çiftinin ayrılması gerekli değildir. </li></ol> Oksitosin, Anestezi ve Göz Lubricant 2. İdaresi <ol><li> Kas içi Oksitosin 10 IU / kg (IM) yönetmek. Oksitosin süt salmayı teşvik etmek emziren kadınlarda meme bezleri üzerinde hareket eden bir hormondur. Oksitosin bir veteriner elde edilebilir. </li><li> BAM Anestezik IM 11 Yönetici butorfanol 0.45 mg / kg, azaperone 0.25 mg / kg, medetomadine 0.07 mg / kg ihtiva etmektedir. BAM anestezik karışımı bir doz tam süt toplanması için yeterli zaman sağlar, yaklaşık 20-30 dakika, bir munçağı uyutacak. Anestezi için başka bir seçenek, yaklaşık 10-15 dakika boyunca, bir sakinleştirici munçağı doyurmaya 1-2 mg / kg, en midazolam olan. Bu süt toplama için yeterli zaman sağlar iken BAM ve hayvan kısa sürenin sonunda kaçmaya teşebbüs olabilir daha, bu anestezi daha hızlı metabolize edilir. Not: ağrı Minimal yanıt, Mücadele olmadan MJ tutmak için R1 yeteneği takip kulakları dokunmadan üzerine küçük refleksleri, hayvan başarıyla anestezi olduğunu gösterir. Not: tamamen özgün doz ile anestezi edilmelerinden bir Muntjac durumunda, araştırmacı bir verebilme ¼ veya önceden olmuştur sedasyon hayvan ve / veya seviyesi boyutuna bağlı olarak anestezi karışımın orijinal dozun ½ elde etti. Ancak, bu anesteziye ters tepki şansını artırabilir ve aynı zamanda munçağı daha derin anestezi ve / veya daha uzun bir süre için anestezi olmak neden olabilir. </li><li> Anestezi altında iken kurumasını munçağı gözleri önlemek için her gözün ve yayılma köşesine yağlayıcı küçük bir miktar uygulayın. </li></ol> 3.. Süt Toplama Süt toplama en kolay iki araştırmacı ile yapılır; in anestezi munçağı tutmak için bir araştırmacıkucak manuel (R1 olarak anılacaktır) süt ve bir rahat ve güvenli pozisyonda munçağı kafasını tutmak ve süt (R2) toplamak için ikinci bir araştırmacı ifade ederken. <ol><li> Kullanılan anestezik bağlı olarak, sağım onlar (midazolam kaynaklı) ya da 2) bir yatak ücretsiz Hol temizlik korumak için (BAM-işlem sırasında uyanmak gerekir onlar için güvenli bir yer sağlamak için onların kalem ya 1) yapılmalıdır ) neden oldu. </li><li> R1 ve R2, süt tutmak için etanol ile ıslatılmış gazlı bez ve çok sayıda 15 ml konik polipropilen tüpleri ile donatılmış olmalıdır. </li><li> Oksitosin etkisi başlar gibi, süt boşaltma munçağı adlı meme alanında görünür hale gelecektir. R1: eldivenli el ve parmak, hem de tüm meme ve etanol-ıslatılmış gazlı bez ile hayvanın her bir emzik sterilize. R2: solunum kolaylığı sağlayan ve işkembe yetersizliğini önlemek için güvenli ve rahat bir konumda munçağı kafasını tutun. Toplama tüpü cl tutun<html> emzik için OSE potansiyel kontaminasyonu önlemek için dokunmadan sağıldığı. </li><li> Meme süt ile tıkanmış kadar hafifçe yukarıya doğru bir hareketle meme dokusu sıkmak için başparmak ve işaret parmağı ile bir emzik süt ifade ve yavaşça bakınız Şekil 2 (emzik dışında ve R2 tutan tüp içine sütü rulo .) </li><li> Not: R2 hiç süt az israf olacak, böylece toplama tüpü yerleştirilmiş olması için önemlidir bu yüzden süt, bir dere içinde çıkar. </li><li> Munçağı adlı meme kadran ayrılmıştır. R1: Süt artık kolayca akar kadar her çeyrekte süt sağma işlemine devam. Süt bir emzik ifade edilemezse, ilk dönmeden önce diğer tüm başlıkları sağmaya. Bu geri gelmek ve diğerinden daha fazla süt üretmesi gerektiğini sürekli aynı emzik süt ifade etmek kabul edilebilir ve kullanışlı hem de. </li></ol> Doe 4. Anestezi iptali t &quot;&gt; Bu. Çoğu durumda, doe tüm süt ifade edilmiştir önce kaçmayı dener sağım işlemi sırasında uyanmaya başlar midazolam kaynaklı zevki için yaygındır. Minor emniyet sütü artırmak amacıyla kullanılır verim, ancak araştırmacılar ve geyik hem de güvenlik ve konfor aynı derecede önemlidir. <ol><li> BAM hızlı iptali için / mg medetomadine deri altına 2.5 mg atipamezol yönetmek doe anestezi. Not: anestezik iki tip ile, o tökezleyerek veya düşmeden kendi başına yürümek mümkün olduğu kadar geyik yakın gözlem korumak için gerekli olduğunu ve aspirasyon korku veya boğulma olmadan yemek ve içmek mümkündür. Hiçbir kötü etkisi süt toplama sonra hemşire buzağının yeteneğine göre not edilmiştir. </li></ol>

<ol>
	<li>Dueling, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Muntiacus reevesi. Animal Diversity Web. , (2004).</li><li>Pei, K., Taber, R., O'Gara, B., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Breeding+cycle+of+the+Formosan+Reeves+muntjac+(Muntiacus+reevesi+micrurus)+in+northern+Taiwan,+Republic+of+China.">Breeding cycle of the Formosan Reeves muntjac (Muntiacus reevesi micrurus) in northern Taiwan, Republic of China.</a> Mammalia. 59 (2), 223-228 (1995).</li><li>Browning, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transmission+of+prions+from+mule+deer+and+elk+with+chronic+wasting+disease+to+transgenic+mice+expressing+cervid+PrP.">Transmission of prions from mule deer and elk with chronic wasting disease to transgenic mice expressing cervid PrP.</a> J. Virol. 78 (23), 13345-13350 (2004).</li><li>Van de perre, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transfer+of+antibody+via+mother's+milk.">Transfer of antibody via mother's milk.</a> Vaccine. 21 (24), 3374-3376 (2003).</li><li>Maden, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetically+modified+mice+produce+human+milk+protein.">Genetically modified mice produce human milk protein.</a> BioNews. , (2009).</li><li>Rodgers, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Practical+aspects+of+milk+collection+in+the+rat.">Practical aspects of milk collection in the rat.</a> Lab. Anim. 29 (4), 450-455 (1995).</li><li>Depeters, E. J., Hovey, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+collecting+milk+from+mice.">Methods for collecting milk from mice.</a> J. Mammary Gland Biol. Neoplasia. 14 (4), 397-400 (2009).</li><li>Knight, C. H., Maltz, E., Docherty, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Milk+yield+and+composition+in+mice:+effects+of+litter+size+and+lactation.">Milk yield and composition in mice: effects of litter size and lactation.</a> 84 (1), 127-133 (1986).</li><li>Hedrich, H. J., Bullock, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+laboratory+mouse.">The laboratory mouse.</a> , 735-736 (2004).</li><li>Nishimori, K., Young, L. J., Guo, Q., Wang, Z., Insel, T. R., Matzuk, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxytocin+is+required+for+nursing+but+is+not+essential+for+parturition+or+reproductive+behavior.">Oxytocin is required for nursing but is not essential for parturition or reproductive behavior.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 93 (21), 11699-11704 (1996).</li><li>Miller, B. F., Osborn, D. A., Lance, W. R., Howze, M. M., Warren, R. J., Miller, K. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Butorphanol-azaperone-medetomidine+for+immobilization+of+captive+white-tailed+deer.">Butorphanol-azaperone-medetomidine for immobilization of captive white-tailed deer.</a> 45 (2), 457-467 (2009).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Fare 1 dahil olmak üzere bir fare süt toplama dikkate alınması gereken çeşitli faktörler,) toplanması için ayrılan süreyi, oksitosin 2) doz, 3) baraj şu anda hemşirelik ve 4) miktarı kaç yavrular vardır toplama sırasında doğumdan bu yana geçen zaman. Kurallar olarak önceki çalışmaları kullanarak, süt verimi için koşulları optimize etmek için yola çıktı. Önceki araştırmalar, doğrudan çöp boyutu 8 ile süt verimi korelasyon vardır. Ne yazık ki, çöp büyüklüğü kontrol edilemez bir değişkendir. Ancak, sağım sonrası doğumun zamanı kontrol edilebilir. Laboratuvar Fare maksimum süt salgılanması göre 8-10 gün sonrası doğum 9. altındadır. Deneyimlerimiz bu ifadeye yaraşır olduğunu. Oksitosin süt üretimi yazılan bir yeri doldurulamaz bir rol oynadığı gösterilmiştirdoğum 10. 0.1 IU / kg 9 4 IU / kg 6 arasında değişen dozlarda oksitosin kemirgenler 6,7,9 sütün toplanması için rapor edilmiştir. Biz önerilen en düşük doz, 0.1 IU / kg 9 verilerek bizim çalışma başladı. Bu doz kullanarak, fare ile üretilen süt miktarı ölçmek veya toplamak için çok küçüktü. 2 IU / kg 6,7 için oksitosin dozu artırılması üzerine, süt verimi yaklaşık 120 ul oldukça yüksek oldu. Biz optimum süt toplama ulaşmak için oksitosin en düşük doz kullanmak istedim, çünkü biz 2 IU / kg &#39;dan daha yüksek dozlar uygulamak vermedi. Süt verimi de koleksiyon için ayrılan süreyi bağlıdır. Bu, 3 saat içinde minimum materyal hazırlama ve toplanması için baraj ve 1 saat ayrılmalıdır için yavrular için en uygun toplama-2 st için gerekli olduğunu tespit ettik. Tek oturumda birkaç barajlardan süt toplama için gerekli genel zaman düşecektirHer baraj süt toplamak için yavrular, kurulum malzemeleri 30 dakika ve 20-30 dk ayırmak için özel bir süt hacmi, yani, 2 saat hasat. Onların yavruların geri konmadan önce uyanık kadar her baraj izlenmesi gerekir. Biz bilinci yerine kadar fare Sağılan olabilir çünkü sağım için kenara daha fazla zaman, daha yüksek süt verimi yol açtığını kaydetti. Örneklerini süt verimini etkileyeceğini hayvan modelleri ile ortaya çıkar. Bir ortak sorunu defalarca yetiştirilen ve büyük ibrelerin var, ya da ilk çöp hemşirelik olan barajlarda edilmiş eski barajların sütünde kan veya eksüda varlığıdır. Bu meydana gelirse, biz o emzik süt toplama durdurulması öneririz. Bu anda pipet ipuçları geçiş ve herhangi bir akıntı veya kan atmak için tavsiye edilir. Bu yöntemi yürüten Araştırmacılar ayrıca, hayvan modelleri kullanılarak sık sık olduğu gibi, sonuç (Şekil değişir, farkında olmalı3). Süt daha az uygun bir miktar, bir oturum içinde toplanmaktadır, bu, daha sonra (örneğin 24-48 saat) de prosedürü tekrar yerine süt serbest zorlamak için deneysel koşullar değiştirmek için tercih edilir. Munçağı Reeves &#39;munçağı barajlardan toplanan sütün hacmi kullanılan anestezik bağlı idi. Seçim bizim ilk anestezik midazolam oldu. R1 sakin bir eğilim vardı ve munçağı sakin tutsaydı munçağı uyandırmak-istiyorsunuz önce hem de güvenliğini ve konforunu midazolam zaman-yani kısa dönemler için desteğini sağlamak için yeterli sedasyon, R2, verimi artırmak için sağım üzerinde sürebilir hayvan ve işleyici büyük önemi vardı ve biz ya da tatlıya hissettim eğer biz sağım çaba terk etti. Biz, yüksek dozlar tekrarlanan maruz sonra gerekli olacağını munçağı geyik hızla midazolam toleranslı hale keşfetti ve<html> süt toplama haftada iki kez giderek zorlaştırır. Bir bina hoşgörü ile birleştiğinde midazolam sıkıntısı, alternatif bir anestezik araştırma götürdü. Butorfanol, Azaperone ve Medetomadine (BAM) içindeki bir karışımı, etkili bir şekilde beyaz bir kuyruk geyik 11 hareketsizleştirilmesi için kullanılır. Bizim ellerde, BAM kokteyl tekrar kullanımdan sonra daha az ilaç toleransı ile, güvenli bir şekilde süt kabul ciltlik toplanmasını sağlamak için yeterli anestezi sağlanır ve anestezik etkilerini tersine daha iyi kontrolü ile. Bazı munçağı barajlar hassas memelerinden zarar ve / veya ilk kez anne oldu. Bu munçağı sağım işlemi sırasında emzikleri üzerinde morarma geliştirilen ve süt akış yavaşladı ya da devam eden oturumu durdurma bize sormadan, tamamen durdu. Bu meydana gelirse, bir biberon rahatsızlık veya morarma önlemek amacıyla daha nazik sağım tekniği kullanmak gerekir. e_content &quot;&gt; Süt üretimi) Düşük süt hasadın 1 neden olabilir. çeşitli vesilelerle balmumu ve zayıflamak için ortaya fawns hemen önce koleksiyonlarına veya 2) süt üretiminde bir düşüş nedeniyle açık kahverengi sütten doğal sürecine emzirdi sahip. Küçük hayvan modellerinde süt büyükçe bir hacim elde etmek için çalışırken bir süreç olabileceği gibi, bizim iş gerçekten fare ve munçağı modeller için de bir olasılık olduğunu göstermektedir; Geniş beceri ne de derin cepler, sadece azim gerektiren ne.

Hayvan modelleri in vitro analizi ile elde edilemez hastalığı patolojisi içgörü sağlayabilir. En etkili sonuçlar elde etmek için, yakından hastalığın ve ilgili türler ile ilgili bir hayvan modeli kullanmak önemlidir. Örneğin, Reeves &#39;muntjac (Muntiacus reevesi), cervid prion proteini (CerTgPrP) 3 eksprese eden bir küçük Asya geyik 1,2, ve transjenik farenin cervid türleri için yararlı hayvan modelleridir. Her iki tür de yıl boyunca üreme izin polyestrous ve bu nedenle gebelikle ilgili dokular ve sıvılar için tutarlı bir kaynak cervid biyolojide belirli mekanizmaları incelemek için. Süt çalışmalar insanlarda daha hayvan modellerinde gerçekleştirilebilir daha basit (ve pahalı olmayan) olan uygulamaların geniş bir dizi vardır. Araştırmacılar 1) bulaşıcı hastalık bulaşma potansiyel bir kaynağı olarak süt ve kolostrum araştırmak olabilir, develo yavrular anneden aktarılan 2) immünglobülinlerpasif bağışıklık 4 ve 3) laktoferrinin pment, araştırmacılar şu anda çalışıyorsunuz pasif bağışıklık yer anne sütünde bulunan bir protein ticari 5 üretirler. Küçük hayvanlardan süt önemli bir miktarı toplamak zor bir görev olarak kanıtlamak olabilir. Rogers daha sonra farelerde kullanılan sıçanlarda 6, süt toplamak için bir yaklaşım önerdi. DePeters Hovey ve daha sonra bir vakum kaynağına bağlı bir sağma birimi (yapımını gerektiren süt toplama, bir Pasteur pipetine bağlı bir lastik pipet ampul tarafından üretilen bir el ile oluşturulan vakum kullanılarak bir ve ikinci için iki yöntem önerilen bu fare süt 7 hasat bir musluk) olarak. Burada fareler ve sadece hazır laboratuvar ekipmanı ve temel teknik beceri gerektirir Reeves &#39;munçağı geyik, hem süt toplamak için basit, düşük maliyetli bir yöntem öneriyoruz. Bizim yöntem çeşitli süt, yeterli miktarda veriruygulamaları.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1009">
	<tbody>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:360px;">Materials-Mouse</td>
			<td style="width:297px;"></td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:116px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Name of Material/Reagent</td>
			<td>Vendor</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ketamine (KetaVed 100 mg/mL) (dose: 80-100 mg/kg)</td>
			<td>MWI/Vedco</td>
			<td>011075</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Xylazine (TranquiVed 100 mg/ml) (dose:5-10 mg/kg)</td>
			<td>MWI/Vedco</td>
			<td>NADA 139236</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Eye lubricant</td>
			<td>MWI/Apexa</td>
			<td>701013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Oxytocin (2 IU/kg)</td>
			<td>Vet One</td>
			<td>501013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;">Materials- Muntjac</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Name of Material/Reagent</td>
			<td>Vendor</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Midazolam (1-2 mg/kg)</td>
			<td>Amerisource Bergen Drug Corp</td>
			<td>924326</td>
			<td>optional: researcher can either use Midazolam on its own or BAM combination as an anesthetic</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg)</td>
			<td>Fort Dodge Animal Health</td>
			<td>NADA 135-780</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Azaperone tartrate (0.25 mg/kg)</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Medetomadine HCl (0.07 mg/kg)</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Antipamezol hydrochloride (Antisedan) (dose: 0.25 mg/kg)</td>
			<td>Orion Corporation</td>
			<td>NADA 141-033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Oxytocin (10 IU/kg)</td>
			<td>Vet One</td>
			<td>501013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;">Equipment- Mouse</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Name of Equipment</td>
			<td>Vendor</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">P-200 Pipetman</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F123601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">200 &#956;L pipette tips</td>
			<td>Light Labs</td>
			<td>B-2004-SH</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">1 ml syringes</td>
			<td>MWI</td>
			<td>005427</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">27 gauge needles</td>
			<td>MWI</td>
			<td>002031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;">Equipment- Muntjac</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Name of Equipment</td>
			<td>Vendor</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">15 ml conical tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>21008-918</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">22 gauge needles</td>
			<td>MWI</td>
			<td>873</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3 ml luer lock syringes</td>
			<td>MWI</td>
			<td>001377</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

milk collection methods for mice and reeves' muntjac deer

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native host. Milk collection from animals allows scientists the opportunity to study many aspects of reproduction including vertical transmission, passive immunity, mammary gland biology, and lactation. Obtaining adequate volumes of milk for these studies is a challenging task, especially from small animal models. Here we illustrate an inexpensive and facile method for milk collection in mice and Reeves&#8217; muntjac deer that does not require specialized equipment or extensive training. This particular method requires two researchers: one to express the milk and to stabilize the animal, and one to collect the milk in an appropriate container from either a Muntjac or mouse model. The mouse model also requires the use of a P-200 pipetman and corresponding pipette tips. While this method is low cost and relatively easy to perform, researchers should be advised that anesthetizing the animal is required for optimal milk collection.

Fare Deneylerde, biz birkaç değişkenlere bağlı bir laboratuvar faresi süt yaklaşık 100-400 ul toplamak mümkün olduğunu tespit ettik. Bu değişkenler) toplanması için ayrılan süreyi, 2) oksitosin dozu, 1 içerir 3) baraj şu anda bakım ve zaman sonrası doğumun 4) miktarı kaç yavrular. Çalışmalarımız barajlar, en az 2 saat boyunca yavrularına ayrılır, en yüksek verimi elde edildiğini göstermiştir ve bir saat için en az 45 dakika sağma için, fare başına bir kenara ayrılmaktadır. En fazla süt miktarlar 8-12 gün oksitosin 2 IU / kg ile doğumun sonra toplanmıştır. Bizim sonuçlar DKBKS olumlu süt verimi 9 (bkz. Şekil 3) ile korelasyon diğer çalışmalar ile uyumlu çoğunlukla. Munçağı Her ne kadar süt har miktarıMuntjac gelen giydirilmiş günden güne, biz kullanılan anestezi ve / veya zaman sonrası doğuma bağlı olarak, 30 ml süt / baraj / oturuma 5 toplamak mümkün değişken oldu. Munçağı geyik polyestrous vardır; süt (bkz. Tablo 1) 2 yıl boyunca çeşitli zaman noktalarında toplanabilir. BAM kaynaklı doe tam süt tanıma izin verecek şekilde, anestetik etkinin daha uzun bir süre (20-30 dakika) sürekli iken, midazolam kaynaklı doe, küçük hacimli koleksiyonları (tipik olarak 5-30 mi) izin kadar az 10 dakika boyunca anestezi altında kalmıştır (15-130 mi). Süt toplama süt artık Doe tarafından yeterli miktarda üretildiği zaman kesildi, ve karşılık gelen yavru geyik çoğunlukla saman yem bir diyet besleniyor ediliyordu. <img alt="Şekil 1" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/51007/51007fig1highres.jpg" width="600" /> Şekil 1.. (A) baraj217; s emzikler oksitosin enjeksiyonu üzerine sütü ile tıkalı olması (B) süt Koleksiyonu P-200 Pipetman kullanarak bir anestezi baraj cryovial 1.2 ml süt (C) İtici... <img alt="Şekil 2," fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51007/51007fig2highres.jpg" width="400" /> Şekil 2.. Munçağı süt 15 ml konik tüp içine alınır. <img alt="Şekil 3," fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51007/51007fig3highres.jpg" width="400" /> Şekil 3.. Yaklaşık süt verimi çöp büyüklüğüne göre fareler toplanan ve yavruların yaş. <img alt="Tablo 1" fo:content-width="3in" src="/files/ftp_upload/51007/51007table1.jpg" width="300" /> Tablo 1. Süt collection başlangıç ​​ve Reeves &#39;munçağı barajlar emzikli bitiş tarihleri.

Watch this Scientific Journal Video about Milk Collection Methods for Mice and Reeves' Muntjac Deer at JoVE.com

Milk Collection Methods for Mice and Reeves' Muntjac Deer

Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves&#8217; muntjac deer.

Fareler ve Reeves &#39;munçağı Deer için Süt Toplama Yöntemleri

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native ...

milk-collection-methods-for-mice-and-reeves-muntjac-deer

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Biology

19.7K Görüntüleme.  Colorado State University. Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves’ muntjac deer. 

Video: Milk Collection Methods for Mice and Reeves' Muntjac Deer

Gibberella zeae Ascospore Production and Collection for Microarray Experiments.

Fusarium graminearum Schwabe (teleomorph Gibberella zeae) is a plant pathogen causing scab disease on wheat and barley that reduces crop yield and grain quality. F. graminearum also causes stalk and ear rots of maize and is a producer of mycotoxins such as the trichothecenes that contaminate grain and are harmful to humans and livestock (Goswami and Kistler, 2004).

The fungus produces two types of spores. Ascospores, the propagules resulting from sexual reproduction, are the main source of primary infection.  These spores are forcibly discharged from mature perithecia and dispersed by wind (Francl et al 1999). Secondary infections are mainly caused by macroconidia which are produced by asexual means on the plant surface. To study the developmental processes of ascospores in this fungus, a procedure for their collection in large quantity under sterile conditions was required. Our protocol was filmed in order to generate the highest level of information for understanding and reproducibility; crucial aspects when full genome gene expression profiles are generated and interpreted. In particular, the variability of ascospore germination and biological activity are dependent on the prior manipulation of the material. The use of video for documenting every step in ascospore production is proposed in order to increase standardization, complying with the increasingly stringent requirements for microarray analysis. The procedure requires only standard laboratory equipment. Steps are shown to prevent contamination and favor time synchronization of ascospores.

To study the developmental processes of ascospores in Gibberella zeae, a procedure for collection under sterile conditions is filmed in order to generate the highest level of information for protocol description. This should facilitate the reproducibility of the experiment, a crucial aspect when full genome expression profile tests are implemented.

Gibberella zeae Ascospore Üretim ve Tahsilat Mikroarray deneyler için.

Fusarium graminearum Schwabe (teleomorph Gibberella zeae) is a plant pathogen causing scab disease on wheat and barley that reduces crop yield and grain ...

Biyoloji

Seawater Sampling and Collection

This video documents methods for collecting coastal marine water samples and processing them for various downstream applications including biomass concentration, nucleic acid purification, cell abundance, nutrient and trace gas analyses. For today's demonstration samples were collected from the deck of the HMS John Strickland operating in Saanich Inlet. An A-frame derrick, with a multi-purpose winch and cable system, is used in combination with Niskin or Go-Flo water sampling bottles. Conductivity, Temperature, and Depth (CTD) sensors are also used to sample the underlying water mass. To minimize outgassing, trace gas samples are collected first.  Then, nutrients, water chemistry, and cell counts are determined. Finally, waters are collected for biomass filtration. The set-up and collection time for a single cast is ~1.5 hours at a maximum depth of 215 meters. Therefore, a total of 6 hours is generally needed to complete the collection series described here.

This video documents methods for collecting coastal marine water samples and processing them for various downstream applications including biomass concentration, nucleic acid purification, cell abundance, nutrient and trace gas analyses.

Deniz suyu Örnekleme ve Tahsilat

This video documents methods for collecting coastal marine water samples and processing them for various downstream applications including biomass ...

Diagnostic Necropsy and Selected Tissue and Sample Collection in Rats and Mice

There are multiple sample types that may be collected from a euthanized animal in order to help diagnose or discover infectious agents in an animal colony. Proper collection of tissues for further histological processing can impact the quality of testing results. This article describes the conduct of a basic gross examination including identification of heart, liver, lungs, kidneys, and spleen, as well as how to collect those organs. Additionally four of the more difficult tissue/sample collection techniques are demonstrated. Lung collection and perfusion can be particularly challenging as the tissue needs to be properly inflated with a fixative in order for inside of the tissue to fix properly and to enable thorough histologic evaluation. This article demonstrates the step by step technique to remove the lung and inflate it with fixative in order to achieve optimal fixation of the tissue within 24 hours. Brain collection can be similarly challenging as the tissue is soft and easily damaged. This article demonstrates the step by step technique to expose and remove the brain from the skull with minimal damage to the tissue. The mesenteric lymph node is a good sample type in which to detect many common infectious agents as enteric viruses persist longer in the lymph node than they are shed in feces. This article demonstrates the step by step procedure for locating and aseptically removing the mesenteric lymph node. Finally, identification of infectious agents of the respiratory tract may be performed by bacterial culture or PCR testing of nasal and/or bronchial fluid aspirates taken at necropsy. This procedure describes obtaining and preparing the respiratory aspirate sample for bacterial culture and PCR testing.

This article describes the procedures for conducting a basic postmortem examination of a mouse or rat, and the collection of basic organs, as well as more challenging sample types from for histological, microbiological, and PCR evaluation.

Tanı Otopsi ve Sıçanlar ve Fareler Seçilmiş Doku ve Örnek Toplama

There are multiple sample types that may be collected from a euthanized animal in order to help diagnose or discover infectious agents in an animal ...

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has since been used extensively as a model organism 1. C. elegans possesses key attributes such as simplicity, transparency and short life cycle that have made it a suitable experimental system for fundamental biological studies for many years 2. Discoveries in this nematode have broad implications because many cellular and molecular processes that control animal development are evolutionary conserved 3.
C. elegans life cycle goes through an embryonic stage and four larval stages before animals reach adulthood. Development can take 2 to 4 days depending on the temperature. In each of the stages several characteristic traits can be observed. The knowledge of its complete cell lineage 4,5 together with the deep annotation of its genome turn this nematode into a great model in fields as diverse as the neurobiology 6, aging 7,8, stem cell biology 9 and germ line biology 10. 
An additional feature that makes C. elegans an attractive model to work with is the possibility of obtaining populations of worms synchronized at a specific stage through a relatively easy protocol. The ease of maintaining and propagating this nematode added to the possibility of synchronization provide a powerful tool to obtain large amounts of worms, which can be used for a wide variety of small or high-throughput experiments such as RNAi screens, microarrays, massive sequencing, immunoblot or in situ hybridization, among others. 
Because of its transparency, C. elegans structures can be distinguished under the microscope using Differential Interference Contrast microscopy, also known as Nomarski microscopy. The use of a fluorescent DNA binder, DAPI (4',6-diamidino-2-phenylindole), for instance, can lead to the specific identification and localization of individual cells, as well as subcellular structures/defects associated to them.

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

The easiness of maintaining and propagating the nematode C. elegans make it a nice model organism to work with. The possibility of synchronizing worms allows the work with a significant amount of subjects at the same developmental stage, what facilitates the study of one particular process in many animals.

Temel<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; Yöntem: Senkronizasyon ve Gözlem

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

Methods for Skin Wounding and Assays for Wound Responses in C. elegans

The C. elegans epidermis and cuticle form a simple yet sophisticated skin layer that can repair localized damage resulting from wounding. Studies of wound responses and repair in this model have illuminated our understanding of the cytoskeletal and genomic responses to tissue damage. The two most commonly used methods to wound the C. elegans adult skin are pricks with microinjection needles, and local laser irradiation. Needle wounding locally disrupts the cuticle, epidermis, and associated extracellular matrix, and may also damage internal tissues. Laser irradiation results in more localized damage. Wounding triggers a succession of readily assayed responses including elevated epidermal Ca2+ (seconds-minutes), formation and closure of an actin-containing ring at the wound site (1-2 hr), elevated transcription of antimicrobial peptide genes (2-24 hr), and scar formation. Essentially all wild type adult animals survive wounding, whereas mutants defective in wound repair or other responses show decreased survival. Detailed protocols for needle and laser wounding, and assays for quantitation and visualization of wound responses and repair processes (Ca dynamics, actin dynamics, antimicrobial peptide induction, and survival) are presented.

Methods for Skin Wounding and Assays for Wound Responses in C. elegans

The adult C. elegans skin is a tractable model for studies of epithelial wound responses, including wound closure, scar formation, and innate immunity.

Içinde Yara Yanıtları Cilt yaralayarak Yöntemleri ve Testler<em&gt; ° C. elegans</em

The C. elegans epidermis and cuticle form a simple yet sophisticated skin layer that can repair localized damage resulting from wounding. Studies of wound ...

Repeated Blood Collection for Blood Tests in Adult Zebrafish

Repeated blood collection is one of the most common techniques performed on laboratory animals. However, a non-lethal protocol for blood collection from zebrafish has not been established. The previous methods for blood collection from zebrafish are lethal, such as lateral incision, decapitation and tail ablation. Thus we have developed a novel &#8220;repeated&#8221; blood collection method, and present here a detailed protocol outlining this procedure. This method is minimally invasive and results in a very low mortality rate (2.3%) for zebrafish, thus enabling repeated blood sampling from the same individual. The maximum volume of blood sampling is dependent on body weight of the fish. The volume for repeated blood sampling at intervals should be&#160;&#8804;0.4% of body weight every week or &#8804;1% every 2 weeks, which were evaluated by measurements of blood hemoglobin. Additionally, hemoglobin, fasting blood glucose, plasma triacylglycerol (TG) and total cholesterol levels in male and female adult zebrafish were measured. We also applied this method to investigate the dysregulation of glucose metabolism in diet-induced obesity. This blood collection method will allow many applications, including glucose and lipid metabolism and hematological studies, which will increase the use of zebrafish as a human disease model organism.

Repeated blood sampling is necessary and important in animal research. We developed a novel, non-lethal and reliable method for repeated blood collection from adult zebrafish, and applied this method to the study of blood biochemistry, including glucose metabolism.

Yetişkin Zebra balığı Kan Testleri için Tekrarlanan Kan Alma

Repeated blood collection is one of the most common techniques performed on laboratory animals. However, a non-lethal protocol for blood collection from ...

Milk Collection in the Rat Using Capillary Tubes and Estimation of Milk Fat Content by Creamatocrit

Milk, as the sole source of nutrition for the newborn mammal, provides the necessary nutrients and energy for offspring growth and development. It also contains a vast number of bioactive compounds that greatly affect the development of the neonate. The analysis of milk components will help elucidate key factors that link maternal metabolism and health with offspring growth and development. The laboratory rat represents a popular model organism for maternal studies, and rat milk can be used to examine the effect of various maternal physiological, nutritional, and pharmacological interventions on milk components, which may then impact offspring health. Here a simple method of manually collecting milk from the lactating rat that can be performed by a single investigator, does not require specialized vacuum or suction equipment, and provides sufficient milk for subsequent downstream analysis is described. A method for estimating the fat content of milk by measuring the percentage of cream within the milk sample, known as the creamatocrit, is also presented. These methods can ultimately be used to increase insight into maternal-child health and to elucidate maternal factors that are involved in proper growth and development of offspring.

Milk is a primary source of nutrition for the neonate. Analysis of milk components may provide insight into maternal factors that affect offspring health. This protocol describes a manual method of collecting milk samples from the lactating rat, which can then be used for further downstream analysis.

Kılcal Tüpler ve Creamatocrit Süt Yağ İçeriğinin Tahmin kullanarak Rat Süt Toplama

Milk, as the sole source of nutrition for the newborn mammal, provides the necessary nutrients and energy for offspring growth and development. It also ...

Methods for the Isolation, Culture, and Functional Characterization of Sinoatrial Node Myocytes from Adult Mice

Sinoatrial node myocytes (SAMs) act as the natural pacemakers of the heart, initiating each heart beat by generating spontaneous action potentials (APs). These pacemaker APs reflect the coordinated activity of numerous membrane currents and intracellular calcium cycling. However the precise mechanisms that drive spontaneous pacemaker activity in SAMs remain elusive. Acutely isolated SAMs are an essential preparation for experiments to dissect the molecular basis of cardiac pacemaking. However, the indistinct anatomy, complex microdissection, and finicky enzymatic digestion conditions have prevented widespread use of acutely isolated SAMs. In addition, methods were not available until recently to permit longer-term culture of SAMs for protein expression studies. Here we provide a step-by-step protocol and video demonstration for the isolation of SAMs from adult mice. A method is also demonstrated for maintaining adult mouse SAMs in vitro and for expression of exogenous proteins via adenoviral infection. Acutely isolated and cultured SAMs prepared via these methods are suitable for a variety of electrophysiological and imaging studies.

Methods are demonstrated for the isolation of sinoatrial node myocytes (SAMs) from adult mice for patch clamp electrophysiology or imaging studies. Isolated cells can be used directly or can be maintained in culture to permit expression of proteins of interest, such as genetically encoded reporters.

Yetişkin fareler ile Sinoatriyal Düğüm miyositlerin İzolasyonu, Kültür ve Fonksiyonel Karakterizasyonu Yöntemleri

Sinoatrial node myocytes (SAMs) act as the natural pacemakers of the heart, initiating each heart beat by generating spontaneous action potentials (APs). ...

Determination of Sialic Acids in Liver and Milk Samples of Wild-type and CMAH Knock-out Mice.

CMAH (cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acid hydroxylase) is responsible for the oxidation of cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acids in mammals. However, humans cannot oxidize cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acid to cytidine monophosphate-N-glycolylneuraminic acid due to a primary exon deletion of the CMAH gene. To understand the effects and implications of the lack of CMAH activity in more detail, a Cmah knock-out model in mice is of keen interest in basic and applied research. The analysis method to determine the phenotype of this mouse model is herein described in detail, and is based on the detection of both N-acetylneuraminic acid and N-glycolylenuraminic acid in the liver and milk of wild-type and Cmah knock-out mice. Endogenous sialic acids are released and derivatized with o-phenylenediamine to generate fluorogenic derivatives, which can be subsequently analyzed by HPLC. The presented protocol can be also applied for the analysis of milk and tissue samples from various other origins, and may be of use to investigate the nutritional and health effects of N-glycolylneuraminic acid.

Determination of Sialic Acids in Liver and Milk Samples of Wild-type and CMAH Knock-out Mice.

We describe a HPLC-based method for the determination of N-acetylneuraminic acid and N-glycolylenuraminic acid in mouse liver and milk.

Karaciğer ve Süt örneklerinde vahşi tipli ve sialik asitler tayini ve<em&gt; CMAH</em&gt; Knock-out Fare.

CMAH (cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acid hydroxylase) is responsible for the oxidation of cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acids in ...

Gamete Collection and In Vitro Fertilization of Astyanax mexicanus

Astyanax mexicanus is emerging as a model organism for a variety of research fields in biological science. Part of the recent success of this teleost fish species is that it possesses interfertile cave and river-dwelling populations. This enables the genetic mapping of heritable traits that were fixed during adaptation to the different environments of these populations. While this species can be maintained and bred in the lab, it is challenging to both obtain embryos during the daytime and create hybrid embryos between strains. In vitro fertilization (IVF) has been used with a variety of different model organisms to successfully and repeatedly breed animals in the lab. In this protocol, we show how, by acclimatizing A. mexicanus to different light cycles coupled with changes in water temperature, we can shift breeding cycles to a chosen time of the day. Subsequently, we show how to identify suitable parental fish, collect healthy gametes from males and females, and produce viable offspring using IVF. This enables related procedures such as the injection of genetic constructs or developmental analysis to occur during normal working hours. Furthermore, this technique can be used to create hybrids between the cave and surface-dwelling populations, and thereby enable the study of the genetic basis of phenotypic adaptations to different environments.

Gamete Collection and In Vitro Fertilization of Astyanax mexicanus

In vitro fertilization is a commonly used technique with a variety of model organisms to maintain lab populations and produce synchronized embryos for downstream applications. Here, we present a protocol that implements this technique for different populations of the Mexican tetra fish, Astyanax mexicanus.

Gamete koleksiyonu ve Astyanax mexicanus In vitro fertilizasyon

Astyanax mexicanus is emerging as a model organism for a variety of research fields in biological science. Part of the recent success of this teleost fish ...