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복부 초음파는 리브스의 문턱 사슴에서 생식 상태를 평가하기위한 효과적이고 비침습적 인 수단으로 설명됩니다. 이 방법은 초기 임신 진단을 달성하고 태아 생존가능성을 평가하기 위하여 이용될 수 있습니다. 이 기술의 미래 응용 프로그램은 임신 연령의 추정과 태아 발달에 모성 질환의 효과를 포함한다.
리브스의 문작사슴(문티쿠스 리브시)은동남아시아가 원산지인 작은 자궁경부종으로, 현재 프리온 질환 전염 및 병증의 잠재적 모델로 조사되고 있다. 수직 전염은 프리온 질병을 포함하여 전염병을 공부하는 연구자들 사이에서 관심의 지역이고, 이 조사는 생식 성과에 대한 모계 감염의 효력을 평가하기 위한 능률적인 방법이 필요합니다. 초음파 검사는 임신을 진단하고 많은 동물 종1-7에서태아 건강을 평가하기위한 잘 확립 된 도구입니다, 농장 cervids의 여러 종을 포함8-19,그러나이 기술은 리브스의 문턱 사슴에 설명되지 않았습니다. 여기서 우리는 문턱에서 임신을 검출하고 임신 기간 내내 태아 성장 및 발달을 평가하기 위하여 복부 초음파의 적용을 기술합니다. 이 절차를 사용하여, 임신 한 동물은 doe-buck 페어링 후 35 일 일찍 확인되었으며 이것은 정기적으로 임신을 안전하게 모니터링하는 효과적인 수단이었습니다. 이 작업의 미래 목표는 임신 연령의 추정을 위한 일반적인 태아 측정 참조를 설치하고, 임신의 각종 단계에서 임신을 진단하기 위한 기술의 감도 그리고 특이성을 결정하고, 다른 실험 조건하에서 태아 성장 및 발달에 있는 변이를 확인하는 것을 포함할 것입니다.
초음파 검사는 가축1,양2,3,염소4,말5,동반 동물6,7및 기타 국내 동물 종에서 임신 진단의 잘 설명 된 방법입니다. 이 영상 양면은 또한 사슴8-11,붉은 사슴12-16,홋카이도 시카 사슴17,순록18,19을포함하여 포로 자궁 어장의 여러 종에서 임신 검출 및 태아 연령 추정을위한 귀중한 도구로 확인되었습니다. 많은 경우에, 초음파는 혈청 프로게스테론 또는 임신 관련 당단백질 분석9,18과같은 임신 검출의 그밖 기계장치 보다는 더 높은 정확도 비율을 생성했습니다. 더욱이, 생식 기관의 초소지질 시각화는 태아 생존가능성, 임신 연령 및 그렇지 않으면 평가하기 어려운 발달 이상 식별에 관한 추가 정보를 제공할 수 있다. 생식 상태를 평가하기위한 초음파 학의 유용성은이 방법론이 활성 번식 프로그램이 사용되는 다른 종에 적응해야한다는 것을 시사한다.
리브스의 문작 사슴(문티쿠스 리브시)은동남 아시아20에원산지 작은 자궁 경작 종이다. 이 동물의 생식 주기는 그들의 모국어에서 잘 특징적이지 않지만, 남부 잉글랜드의 부분에서 야생 인구의 연구 결과는 그들의 번식패턴20의이해를 향상했습니다. 대부분의 의식과는 달리, 리브스의 문턱은 일년 내내 번식하는 것처럼 보이며,20-22의명백한 계절 의 새끼 봉우리가 없습니다. 여성 문턱은 일반적으로 210 일 임신 기간 다음 하나의 새끼 사슴을 낳고, 안정적으로 24 시간20-22이내에 산후 estrus를 입력합니다. 이 산후 기간 동안 임신하지 않는 것은 약 24-25 일 후20에스트러스로 돌아갑니다. 포로 상황에서, 재생은 일반적으로 하나 이상의 그대로 남성과 주택에 의해 달성된다. 이 시스템은 만족스러운 개념비율을 생성하고 인력에 대한 기술적 기술이 거의 필요하지 하지만 정확한 번식 날짜는 불가능하지는 않더라도 결정하기가 어렵습니다.
문턱은 다른 종 들 중 karyotypic 다양화의 넓은 범위와 높은 비율 때문에 세포 유전학 연구에서 일반적으로 사용된다 23. 이 동물은 또한 현재 prion 질병 병인및 전송의 모형으로 조사되고 있습니다, 특히 관심은 자궁 지에서 만성 낭비 질병 (CWD)의 수직 전송의 연구 결과에 두어. 여러 가지 연구 응용 분야에서 문턱의 중요성은 현재의 조사 절차를 보완하기 위해 개선 된 생식 기술을 확립해야한다는 것을 시사합니다. 특히, 임신 기간을 평가하는 비침습적 메커니즘은 잠재적으로 다른 실험 조건하에서 생식 성능과 태아 의 성장 및 개발에 중요한 변이를 해명 할 수 있습니다. 또한, 실시간 태아 측정 참조의 개발은 번식 날짜를 결정할 수 없는 상황에서 임신 연령을 추정하는 데 잠재적으로 유용할 것입니다. 이전 연구는 크라운 럼프 길이 (CRL), 가슴 깊이 (CD), 및 머리 길이 (HL)와 같은 태아 측정을 사용하여 자궁 경부 종11-14, 16,17에서임신의 대략적인 단계를 추정하기 위한 메커니즘을 설명했습니다. 또한, 이러한 연구 중 일부는 또한 골격 광물화 또는 태아 심장 박동과 같은 특정 발달 이정표가8-19로식별 될 수 있을 때를 설명하는 지침을 수립했습니다. 이 데이터는 muntjac에 있는 생식 초음파 분석을 인도하는 것을 돕기 위하여 유용할 지도 모르지만, 연구된 그밖 cervid 종의 대부분은 문턱 응용을 위한 이 연구 결과의 번역 가치를 감소시키는 훨씬 더 큰 바디 규모 및 더 긴 임신 기간을 가지고 있습니다.
여기에 설명된 프로토콜은 임신을 진단하고 감시하기 위한 목적으로 여성 muntjac의 복부 초음파 를 설명합니다. 이 프로토콜의 성공적인 실행은 태아 성장 및 발달의 조기 임신 탐지 그리고 평가를 촉진할 수 있습니다. 이 기술은 작은 자궁 에서 생식, 자궁 발달 또는 전염병의 수직 전염을 조사하는 연구의 수행에 귀중한 응용 프로그램을 가지고 있으며 포로 사육 수술에서 임상 목적을 위해 유용 할 수 있습니다.
1. 절차적 준비
설명된 모든 동물 절차는 콜로라도 주립 대학의 기관 동물 관리 및 사용 위원회, 실험실 동물 관리 (AAALAC), Intl. 공인 기관의 평가 및 인가 협회에 의해 검토되고 승인되었습니다.
2. 복부 생식 초음파 검사
3. 태아 측정 받기
참고: 국내 동물 종의 임신 연령은 초음파 검사에서 얻은 태아 측정을 위한 확립된 기준 범위를 사용하여 추정될 수 있습니다. 가장 일반적으로 사용되는 측정에는 직선 크라운 럼프 길이(SCRL), 가슴 깊이(CD), 헤드 길이(HL)17이 포함됩니다. 리브스의 문턱 사슴에서 신뢰할 수 있는 임신 연령 지침을 개발하기 위해 아직 충분한 데이터가 수집되지는 않았지만, 이러한 참조를 확립하기 위해 측정을 수집할 수 있습니다. 태아 심박수(FHR)는 임신이 특정 지점(일반적으로 임신 60일 전후)으로 진행됨에 따라 선형적으로 증가하는 수증명 및 반추제의 다른 종에서 나타났으며, 이 때 심박수는17개감소하기 시작한다. FHR은 다른 초음파 관찰과 함께 임신 연령을 추정하는 데 사용될 수 있지만 태아 생존가능성17,24의척도로 더 일반적으로 사용된다. FHR은 35일 이내에 리브스의 문턱에서 관찰된 짝짓기로 계산되었습니다.
4. 절차적 결론 과 회복
여기에 설명된 프로토콜을 사용하여, 임신은 최소 침습 기술로 리브의 문턱 사슴에서 진단되고 감시될 수 있습니다. 저자에 의해 임신이 검출될 수 있던 초기 시간 점은 관찰된 짝짓기 행동 후에 대략 35 일이었습니다.
임신의 초기 단계에서, 임신은 caudal 복부에 있는 무반향 공간으로 확인된 액체 채워진 자궁을 시각화하여 진단되었습니다. 자궁 내에서, 개발 배아는 몇 식별 가능한 기능을 가진 고반향, 불결한 구조로 나타났다(도 1). 임신이 진행됨에 따라, 태아 구조가 명백해졌고 골격 광물화 및 태아 심장 박동의 관찰에 따라 결정적인 진단을 내릴 수 있었습니다(그림 2 및 3).
태아 측정은 아직 muntjac에서이 시스템을 완전히 개발하지 는 않았지만 정확한 사육 날짜가 알려지지 않은 경우 임신 연령을 추정하기위한 기준 지침을 수립하고 사용할 수 있습니다. 직선 크라운-럼프 길이(SCRL), HL 및 CD는 일반적으로 많은 종17에서태아 나이를 추정하는 데 사용되는 표준 태아 측정이며, 이러한 측정은 여기에 설명된 프로토콜을 사용하여 문턱 임신의 초음파 심상으로부터 얻어졌다. 이러한 세 가지 측정은 모두 동일한 위치 적 처상이미지(그림 2 및 3)에서얻을 수 있지만, 전체 태아가 단일 처상 뷰에서 캡처할 수 없는 경우 별도의 사진을 사용할 수 있습니다. 미래에, 이 기술은 또한 다른 실험 조건하에서 관찰된 성장 및 발달에 있는 변이를 확인하고 태아 생존성을 결정하기 위하여 이용될 수 있습니다.
그림 1. 리브스의 문턱 사슴에서 임신 초기를 보여주는 초음파 이미지. 이 연구에서 doe는 46 일 동안 그대로 남성 muntjac로 보관되었지만 정확한 번식 날짜는 알려져 있지 않습니다. 태아 특징은 임신의이 단계에서 구별 할 수 없습니다.
그림 2. 도 1, 91일 만에 묘사된 동일한 임신의 초음파 영상. (CD - 가슴 깊이, HL - 머리 길이, P - 태반, SCRL - 스트레이트 크라운 럼프 길이).
그림 3. 태아 측정을 얻기위한 적절한 위치를 보여주는 두 번째 임신의 초음파 이미지. 이미지는 벅에 도의 도입 후 91 일 촬영. (CD - 가슴 깊이, HL - 머리 길이, P - 태반, SCRL - 스트레이트 크라운 럼프 길이).
이 프로토콜은 리브스의 문턱 사슴에서 임신 진단을 위한 복부 초음파 의 적용을 설명합니다. 다른 초음파 연구와 일치, 적절한 장비 및 기술 능력은 문턱 doe의 성공적인 생식 검사에 필수적이다. 기본적인 포유류 해부학, 진단 초음파의 물리적 원리 및 복부 내장의 전형적인 초음파 출현에 대한 신중한 검토는 잘못된 진단의 감소에 도움이 될 것입니다. 또한, 적절한 트랜스듀서를 선택할 수 있으며 계측 및 스캐너 제어에 대한 친숙함은 고품질 이미지와 정확한 해석을 얻는 데 매우 중요합니다.
많은 경험이 없는 초음파 학자에게 이미징 아티팩트는 이미지 해상도가 좋지 않고 구조에 대한 부정확한 평가의 일반적인 원인입니다. 피부 트랜스듀서 인터페이스에서의 잔향은 수의복부 초음파에서 가장 자주 발생하는 유물 중 하나이며 두 표면 사이의 가스의 존재를 제거하여 크게 감소 될 수 있습니다. 피부에 적절한 제모와 어쿠스틱 젤을 넉넉하게 바르면 이 유물의 영향을 최소화하기에 충분해야 합니다. 다른 이미징 유물에 대한 논의는 인간 및 수의학 초음파의 다양한 텍스트에서 찾을 수 있으며, 따라서 여기에서 더 자세히 논의되지 않을 것입니다. 그러나, 이러한 현상의 일반적인 지식은 초음파 학자가 더 효과적으로 그들을 제어 할 수있습니다 24.
생식 검사를 수행하는 경우 자궁이 정상, 임신하지 않은 동물에서 시각화하기 어려울 수 있음을 이해해야합니다. 임신 초기에 자궁의 루멘은 임신 낭 형태로 무반향 공간에 대한 위선으로 식별 될 수 있습니다. 문턱의이 단계에서, 자궁은 일반적으로 유방 땀샘의 수준에서 스캔하여 발견 될 수있다, 또는 약간 caudal. 골격 광물화 또는 태아 심장 박동의 출현 이전에, 임신은 pyometra, 하이드로메트라, 또는 mucometra와 같은 병리학을 포함할 수 있는 자궁에 축적하는 액체를 일으키는 원인이 되는 그밖 생식 조건의 존재에서 잘못 진단될 수 있습니다. 초음파 진단은 절차에 대한 진정 전에 동물의 완전한 임상 평가와 함께 이루어져야합니다. 초기 임신에서, 개념은 양수 낭 내에서, 초초 구조가 없는 구형으로 나타납니다. 특정 발달 시점은 이 종에서 잘 특징적이지 않습니다. 그러나 골격 미네랄화와 태아 심장 운동은 결합 후 약 8주 후에 일관되게 검출될 것으로 보입니다.
이상적인 조건에서, 복부 초음파는 리브스의 문턱을 포함하여 많은 종에 있는 생식 구조물의 평가를 위한 믿을 수 없을만큼 유용한 공구일 수 있습니다. 그러나 이 기술의 가치는 동물의 주거 시설의 특정 능력에 크게 좌우됩니다. 임신 검출의 더 수동적인 기계장치와는 달리, 짝짓기 행동의 시각적 관찰 및 doe의 후속 복부 팽팽하게 와 같이, 초음파는 5-10 분 이상 지속되는 기간 동안 동물의 물리적 및/ 또는 화학적 구속이 필요합니다. 많은 시설에서, 이것은 가능하거나 실용적이지 않으며, 시험의 필요성은 연구의 특정 목표에 근거하여 고려되어야 합니다. 또한, 특정 생리학적 또는 병리학 적 상태는 초음파가 포획 및 퇴적과 관련된 조난의 잠재적으로 해로운 영향으로 인해 특정 동물에서 금기된다는 것을 제안 할 수 있습니다. 연구를 개시하기 전에 초음파 검사를 위한 각 동물의 적합성을 평가하는 것이 중요하며, 수의사는 이 프로젝트의 계획 단계에서 상담되어야 합니다.
리브스의 문턱과 다른 야생 동물 종에서 임신 탐지를 위한 현재 사례는 일반적으로 자연에서 수동적입니다 (짝짓기 행동과 복부 의 소동에 대한 관찰). 혈청 프로게스테론 또는 임신 관련 당단백질 수준은 진단18,25를확인하기 위해 측정될 수 있지만, 이러한 분석의 결과는 임신 또는 태아 생존의 단계에 관한 어떠한 정보도 제공하지 않는다. 초음파는 동물에 대한 최소한의 침략과 고통을 유지하면서 혈청 호르몬작용18과유사하거나 더 큰 정확도로 생식 상태의 실시간 평가를 허용하는 이점을 제공합니다. 사육 날짜가 결정하기 어렵거나 불가능한 작업에서 초음파는 게시 된 임신 테이블이없는 경우에도 호르몬 검사보다 임신 단계를 추정하는 보다 정확한 메커니즘을 제공 할 수 있습니다. 더욱이, 초음파 검사를 위한 신체적, 화학적 구속은 건강한 문턱에 최소한의 고통을 야기하고 철저한 신체 검사를 수행하고 일반적인 건강 평가를 위해 추가 샘플(혈액, 소변 등)을수집할 수 있는 이상적인 기회를 제공하는 것으로 보입니다.
초음파 측정을 통한 임신 연령 추정은 가축1,양2,3,염소4,말5등 많은 종에 설치되어 있으며,8-19종뿐만아니라 제한된 수의 자궁경부종으로 기술되고 있다. 정확한 번식 날짜 또는 확립 된 임신 테이블의 부재에서, 리브스의 문작의 태아 나이는 대략 다른 종에 대해 설명 된 태아 개발 매개 변수에 따라 추정 될 수있다. 여기에 설명 된 작업의 특정 목표는이 종에서 태아 노화에 대한 보다 공식적인 지침을 수립하는 것입니다. 충분한 규범적 데이터를 통해, 이 식민지에 있는 초음파학의 미래 응용은 다른 실험 변수의 존재에 있는 태아 발달에 있는 이상을 확인하고 태아 생존가능성을 평가하는 것을 포함할 것입니다. 또한, 복부 초음파의 민감도 및 특이성은 자궁 경부 종에서 임신을 검출하기 위한 다른 일반적으로 사용되는 메커니즘과 비교할 수 있습니다.
저자는 공개 할 것이 없습니다.
저자는 이 프로젝트에 대한 종자 문턱을 제공한 지넷 헤이즈-클루그와 켈리 앤더슨, 앨런 영 박사에게 우리를 소개해 준 것에 대해 감사드립니다. 이 작품은 NIH 보조금 R01AI093634에 의해 지원되었다.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Iowa | NADA 135-780 | |
Azaperone tartrate (0.035 mg/kg) | ZooPharm | ||
Medetomidine HCl (0.04 mg/kg) | ZooPharm | ||
Ultrasound contact gel | Medline, Mundelein, Illinois | MDS092005 | |
Atipamezole hydrochloride (Antisedan) (0.25 mg/kg) | Orion Corporation, Espoo, Finland | NADA 141-033 | |
V-trough (optional) | N/A | N/A | Animal may be supported in dorsal recumbency on a standard examination table or other surface without the use of a V-trough |
Electrical clippers or razor blades for hair removal | Oster, McMinnville, Tennessee | 78005-140 | |
Ultrasound system: Ibex Pro portable ultrasound | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | Ibex Pro | |
5-10 MHz transducer: CL3.8 5-2.5 MHz 60 mm curved linear array | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | 290420 | |
3 ml syringes | Covidien | 1.18E+09 | |
22 G needles | Covidien | 8.88E+09 |
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