Method Article
يوصف الموجات فوق الصوتية عبر الموجات فوق الصوتية بأنها وسيلة فعالة وغير الباضعة لتقييم الحالة الإنجابية في الغزلان مونتجاك ريفز. ويمكن استخدام هذه الطرق لتحقيق التشخيص المبكر للحمل وتقييم قابلية الجنين للحياة. وتشمل التطبيقات المستقبلية لهذه التقنية تقدير عمر الحمل وآثار مرض الأم على نمو الجنين.
ريفز 'muntjac الغزلان (Muntiacus ريفسي) هي نوع صغير من عنق الرحم الأصلي إلى جنوب شرق آسيا، ويجري حاليا التحقيق كنموذج محتمل لانتقال مرض البريون ومسببات الأمراض. ويعتبر الانتقال الرأسي مجالا مهما بين الباحثين الذين يدرسون الأمراض المعدية، بما في ذلك مرض البريون، وتتطلب هذه التحقيقات أساليب فعالة لتقييم آثار العدوى النفاسية على الأداء الإنجابي. الفحص Ultrasonographic هو أداة راسخة لتشخيص الحمل وتقييم صحة الجنين في العديد من أنواعالحيوانات 1-7، بما في ذلك العديد من أنواع cervids المستزرعة8-19، ولكن لم يتم وصف هذه التقنية في الغزلان مونتجاك ريفز. هنا نحن نصف تطبيق الموجات فوق الصوتية عبر الموجات فوق الصوتية للكشف عن الحمل في muntjac لا وتقييم نمو الجنين والتنمية طوال فترة الحمل. باستخدام هذا الإجراء ، تم تحديد الحيوانات الحامل في وقت مبكر من 35 يوما بعد الاقتران دو باك وهذا كان وسيلة فعالة لمراقبة الحمل بأمان على فترات منتظمة. وستشمل الأهداف المستقبلية لهذا العمل وضع مراجع طبيعية لقياس الجنين لتقدير عمر الحمل، وتحديد حساسية وخصوصية تقنية تشخيص الحمل في مراحل مختلفة من الحمل، وتحديد الاختلافات في نمو الجنين ونموه في ظل ظروف تجريبية مختلفة.
الفحص Ultrasonographic هو وسيلة موصوفة جيدا لتشخيص الحمل فيالماشية 1، الأغنام2،3، الماعز4، الخيول5،الحيوانات الرفيقة 6،7، وغيرها من أنواع الحيوانات المنزلية. وقد تم تحديد طريقة التصوير هذه أيضا كأداة قيمة للكشف عن الحمل وتقدير عمر الجنين في عدة أنواع من عنق الرحم الأسير، بما في ذلك الغزلان البور8-11،الغزلان الحمراء12-16،هوكايدو سيكا الغزلان17،والرنة18،19. في كثير من الحالات، أنتجت التصوير فوق السونوغرافيا معدلات دقة أعلى من الآليات الأخرى للكشف عن الحمل، مثل البروجسترون المصل أو تحليل البروتين الجليكوبروتين المرتبط بالحمل9,18. وعلاوة على ذلك، يمكن أن يوفر التصور فائقسونوغرافية من الجهاز التناسلي معلومات إضافية بشأن صلاحية الجنين، والعمر الحملي، وتحديد تشوهات النمو التي لولا ذلك سيكون من الصعب تقييمها. وتقترح فائدة التصوير فوق السونوغرافيا لتقييم الحالة الإنجابية أن هذه المنهجية ينبغي تكييفها مع الأنواع الأخرى التي تستخدم فيها برامج التربية النشطة.
ريفز 'muntjac الغزلان (Muntiacus ريفسي) هي نوع صغير من عنق الرحم الأصلي إلى جنوب شرق آسيا20. في حين أن الدورة الإنجابية لهذه الحيوانات ليست مميزة بشكل جيد في أراضيها الأصلية ، فقد حسنت دراسات المجموعات الوحشية في أجزاء من جنوب إنجلترا فهم أنماطتكاثرها 20. على عكس معظم cervids ، يبدو أن muntjac ريفز تولد على مدار السنة ، مع عدم وجود قمم التملق الموسميةواضحة 20-22. أنثى muntjac عادة ما تلد fawn واحد بعد فترة الحمل 210 يوما، وأدخل موثوق بها استروس ما بعد الولادة في غضون 24 ساعة20-22. هل هذا لا تصور خلال هذه الفترة بعد الولادة سوف يعود إلى estrus ما يقرب من 24-25 يوما في وقت لاحق20. في الحالات الأسيرة ، يتم تحقيق الإنجاب عادة عن طريق السكن مع ذكر واحد أو أكثر سليم. وينتج عن هذا النظام معدلات حمل مرضية ويتطلب مهارات تقنية قليلة للموظفين، ولكن من الصعب تحديد تواريخ التكاثر الدقيقة، إن لم يكن من المستحيل.
وتستخدم عادة Muntjac في الدراسات الجينية الخلوية بسبب مجموعة واسعة من أعداد الكروموسومات ديبلويد وارتفاع معدل تنويع karyotypic بين الأنواع المختلفة23. ويجري حاليا أيضا دراسة هذه الحيوانات كنموذج لمسببات الأمراض المعدية للأمراض البريونية وانتقالها، مع إيلاء اهتمام خاص لدراسة الانتقال الرأسي لمرض الهزال المزمن في عنق الرحم. وتشير أهمية المونتجاك في عدد من التطبيقات البحثية المختلفة إلى ضرورة إنشاء تكنولوجيات إنجابية محسنة لاستكمال إجراءات التحقيق الحالية. وعلى وجه التحديد، يمكن للآليات غير الباضعة لتقييم فترة الحمل أن توضح الاختلافات الحرجة في الأداء الإنجابي ونمو الجنين ونموه في ظل ظروف تجريبية مختلفة. وعلاوة على ذلك، فإن وضع مراجع لقياس الجنين في الوقت الحقيقي يمكن أن يكون ذا قيمة في تقدير عمر الحمل في الحالات التي لا يمكن فيها تحديد تواريخ التكاثر. وقد وصفت الدراسات السابقة آليات لاستخدام قياسات الجنين، مثل طول التاج الردف (CRL)، وعمق الصدر (CD)، وطول الرأس (HL) لتقدير المرحلة التقريبية من الحمل في أنواع عنق الرحم11-14، 16،17. بالإضافة إلى ذلك، وضعت بعض هذه الدراسات أيضا مبادئ توجيهية تصف متى يمكن تحديد معالم تنموية محددة، مثل تمعدن الهيكل العظمي أو نبضات قلب الجنين،8-19. في حين أن هذه البيانات قد تكون مفيدة للمساعدة في توجيه تحليل الموجات فوق الصوتية الإنجابية في muntjac، فإن معظم أنواع عنق الرحم الأخرى التي تمت دراستها لديها حجم جسم أكبر بكثير وفترات حمل أطول، مما يقلل من القيمة الانتقالية لهذه الدراسات لتطبيقات muntjac.
يصف البروتوكول المبين هنا التصوير فوق السونوغرافيا عبر اليبدوية للأنثى مونتجاك لأغراض تشخيص الحمل ورصده. ويمكن أن ييسر التنفيذ الناجح لهذا البروتوكول الكشف المبكر عن الحمل وتقييم نمو الجنين ونموه. هذه التقنية لها تطبيقات قيمة في إجراء الدراسات التي تحقق في التكاثر، في تطوير الرحم، أو الانتقال الرأسي للأمراض المعدية في نموذج عنق الرحم الصغيرة، ويمكن أيضا أن تكون مفيدة لأغراض سريرية في عمليات التربية الأسير.
1. إعداد الإجراءات
وقد تم استعراض جميع الإجراءات الحيوانية الموصوفة والموافقة عليها من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها في جامعة ولاية كولورادو، وهي جمعية لتقييم واعتماد رعاية الحيوانات المختبرية (AAALAC)، مؤسسة معتمدة Intl.
2. فحص الموجات فوق الصوتية التناسلية عبر البدوة
3. الحصول على قياسات الجنين
ملاحظة:يمكن تقدير العمر الحملي في العديد من أنواع الحيوانات المنزلية باستخدام نطاقات مرجعية ثابتة لقياسات الجنين التي تم الحصول عليها من الفحص بالموجات فوق الصوتية. وتشمل القياسات الأكثر استخداما طول التاج الردف على التوالي (SCRL)، وعمق الصدر (CD)، وطول الرأس (HL)17. وفي حين أنه لم يتم بعد جمع بيانات كافية لوضع مبادئ توجيهية موثوقة لعمر الحمل في غزال مونتجاك ريفز، يمكن جمع القياسات من أجل البدء في وضع هذه المراجع. وقد تبين أن معدل ضربات قلب الجنين (FHR) في أنواع أخرى من عنق الرحم والمجترة يزداد خطيا مع تقدم الحمل إلى نقطة معينة (عادة حوالي اليوم 60 من الحمل) ، وفي ذلك الوقت يبدأ معدل ضربات القلب في الانخفاض17. يمكن استخدام FHR لتقدير عمر الحمل بالتزامن مع ملاحظات الموجات فوق الصوتية الأخرى ، ومع ذلك فهو أكثر شيوعا كمقياس لحياة الجنين17،24. وقد تم حساب FHR في muntjac ريفز في وقت مبكر من 35 يوما بعد التزاوج لوحظ.
4. الاستنتاجات الإجرائية والاسترداد
باستخدام البروتوكول الموصوف هنا ، يمكن تشخيص الحمل ورصده في غزال مونتجاك في ريف باستخدام تقنيات طفيفة التوغل. وكانت أقرب نقطة زمنية يمكن أن يكتشفها المؤلفون عن الحمل هي حوالي 35 يوما بعد سلوك التزاوج الملاحظ.
في المراحل المبكرة من الحمل، تم تشخيص الحمل من خلال تصور رحم مملوء بالسوائل تم تحديده كمساحة أنشوائية في البطن المسد. داخل الرحم ، ظهر الجنين النامي كبنية مفرطة التشوة ، بويضة مع ميزات قليلة يمكن التعرف عليها (الشكل 1). ومع تقدم الحمل، أصبحت هياكل الجنين واضحة ويمكن إجراء تشخيص قاطع بعد ملاحظة تمعدن الهيكل العظمي ونبض قلب الجنين(الشكلان 2 و3).
يمكن الحصول على قياسات الجنين واستخدامها لوضع مبادئ توجيهية مرجعية لتقدير عمر الحمل في الحالات التي لا يعرف فيها تاريخ تكاثر دقيق، على الرغم من أننا لم نطور هذا النظام بالكامل بعد في المونتجاك. طول التاج المستقيم (SCRL) وHL وCD هي قياسات الجنين القياسية التي تستخدم عادة لتقدير عمر الجنين في العديد من الأنواع17، وتم الحصول على هذه القياسات من الصور بالموجات فوق الصوتية لحمل muntjac باستخدام البروتوكول الموصوف هنا. ويمكن الحصول على كل ثلاثة من هذه القياسات من نفس الصورة القوس وضعه بشكل صحيح(الشكلين 2 و 3)،ولكن يمكن استخدام صور منفصلة إذا كان الجنين بأكمله غير قادر على التقاطها في عرض القوس واحد. وفي المستقبل، يمكن استخدام هذه التقنيات أيضا لتحديد الاختلافات في النمو والتطور التي لوحظت في ظل ظروف تجريبية مختلفة ولتحديد قابلية الجنين للحياة.
الشكل 1 - الأرقام 1- الأرقام 1 صورة بالموجات فوق الصوتية تظهر الحمل المبكر في الغزلان muntjac ريفز. وقد تم إيواء دو في هذه الدراسة مع muntjac الذكور سليمة لمدة 46 يوما، ولكن لا يعرف تاريخ تربية بالضبط. لا يمكن تمييز ملامح الجنين في هذه المرحلة من الحمل.
الشكل 2 - الأرقام 2- الأرقام التي تم صورة بالموجات فوق الصوتية لنفس الحمل الموضحة في الشكل 1، بعد 91 يوما من إدخال الزى الزخرفة إلى الباك. (CD - عمق الصدر، HL - طول الرأس، P - المشيمة، SCRL - طول التاج الردف على التوالي).
الشكل 3 - الأرقام 3- الأرقام التي يمكن أن صورة بالموجات فوق الصوتية للحمل الثاني تظهر تحديد المواقع المناسبة للحصول على قياسات الجنين. الصورة التي اتخذت 91 يوما بعد إدخال دو إلى باك. (CD - عمق الصدر، HL - طول الرأس، P - المشيمة، SCRL - طول التاج الردف على التوالي).
يصف هذا البروتوكول تطبيق التصوير فوق السونوغرافيا عبر البدوية لتشخيص الحمل في غزال مونتجاك ريفز. بما يتفق مع دراسات الموجات فوق الصوتية الأخرى ، والمعدات المناسبة والكفاءة التقنية أمر حتمي لإجراء فحص إنجابي ناجح للجوه muntjac. ستساعد المراجعة الدقيقة لتشريح الثدييات الأساسي ، والمبادئ الفيزيائية للموجات فوق الصوتية التشخيصية ، والمظهر التجاوزي النموذجي لأحشاء البطن في الحد من التشخيصات الخاطئة. وعلاوة على ذلك، فإن اختيار محولات مناسبة والإلمام بالأجهزة وضوابط الماسح الضوئي أمر بالغ الأهمية للحصول على صور عالية الجودة وتفسير دقيق.
بالنسبة للعديد من الأقمار الدقيقة عديمي الخبرة ، فإن القطع الأثرية التصويرية هي سبب شائع لضعف دقة الصورة والتقييم غير الدقيق للهياكل. يتردد صداها في واجهة الجلد محول هي واحدة من القطع الأثرية الأكثر شيوعا واجه في الموجات فوق الصوتية البطن البيطرية، ويمكن أن تخفض بشكل كبير عن طريق القضاء على وجود الغاز بين السطحين. إزالة الشعر الكافية والتطبيق السخي من هلام الصوتية على الجلد ينبغي أن تكون كافية للحد من تأثير هذه القطعة الأثرية. ويمكن الاطلاع على مناقشات القطع الأثرية التصوير الأخرى في نصوص مختلفة من التصوير فوق السونوغرافيا البشرية والبيطرية، وبالتالي لن تناقش بمزيد من التفصيل هنا؛ ومع ذلك ، فإن المعرفة العامة لهذه الظواهر تسمح للسونوغرافي الفائق للسيطرة عليها بشكل أكثر فعالية24.
إذا كان إجراء فحص الإنجاب، ينبغي أن يكون مفهوما أن الرحم قد يكون من الصعب تصور في طبيعي، غير الأم. في الحمل المبكر ، قد يصبح تجويف الرحم قابلا للتحديد كمساح نقص التشوه إلى الأنشوجة كما يتشكل الكيس الحملي. في هذه المرحلة في المونتجاك، يمكن العثور على الرحم عادة عن طريق المسح الضوئي على مستوى الغدد الثديية أو caudal قليلا لها. قبل تمعدن الهيكل العظمي أو ظهور نبضات قلب الجنين ، قد يكون الحمل مشخصا بشكل خاطئ في وجود حالات إنجابية أخرى تسبب تراكم السوائل في الرحم ، والتي قد تشمل أمراضا مثل pyometra أو hydrometra أو mucometra. يجب إجراء التشخيص بالموجات فوق الصوتية بالتزامن مع تقييم سريري كامل للحيوان قبل التخدير لهذا الإجراء. في وقت مبكر من الحمل ، سيظهر المفهوم كبنية كروية إلى بيضاوية ، مفرطة التشوة داخل الكيس السلوي. ولا تتميز نقاط زمنية تنموية محددة بشكل جيد في هذا النوع؛ ومع ذلك، يبدو أن تمعدن الهيكل العظمي وحركة قلب الجنين يمكن اكتشافها باستمرار في حوالي 8 أسابيع بعد التزاوج.
في ظل الظروف المثالية، يمكن أن تكون الموجات فوق الصوتية عبر الموجات فوق الصوتية أداة مفيدة بشكل لا يصدق لتقييم الهياكل الإنجابية في العديد من الأنواع، بما في ذلك مونتجاك ريفز. ومع ذلك، تعتمد قيمة هذه التقنية بشكل كبير على القدرات المحددة للمرافق السكنية للحيوانات. على عكس الآليات الأكثر سلبية للكشف عن الحمل ، مثل الملاحظة البصرية لسلوك التزاوج وانتفاخ البطن اللاحق للصامي ، تتطلب الموجات فوق الصوتية ضبط النفس البدني و / أو الكيميائي للحيوان لفترة من الوقت تستمر من 5-10 دقائق أو أكثر. في العديد من المرافق، وهذا غير ممكن أو عملي، وضرورة الفحص ينبغي النظر فيها على أساس الأهداف المحددة للدراسة. بالإضافة إلى ذلك ، قد تشير بعض الحالات الفسيولوجية أو المرضية إلى أن التصوير فوق السونوغرافيا بطلان في بعض الحيوانات بسبب الآثار الضارة المحتملة للضائقة المتعلقة بالالتقاط والتخدير. من المهم تقييم مدى ملاءمة كل لفحص الموجات فوق الصوتية قبل بدء الدراسة ، ويجب استشارة الطبيب البيطري في مراحل التخطيط لهذه المشاريع.
الممارسات الحالية للكشف عن الحمل في مونتجاك ريفز وغيرها من أنواع الحياة البرية عادة ما تكون سلبية في الطبيعة (مراقبة سلوك التزاوج وانتفاخ البطن في لا). يمكن قياس البروجسترون المصل أو مستويات البروتين السكري المرتبطة بالحمل لتأكيد التشخيص18,25، ولكن نتائج هذه المقايسات لا توفر أي معلومات بشأن مرحلة الحمل أو صلاحية الجنين. الموجات فوق الصوتية يقدم الاستفادة من السماح في الوقت الحقيقي تقييم الحالة الإنجابية بدقة مماثلة أو أكبر من أن من هرمون المصل المقايسات18، مع الحفاظ على الحد الأدنى من الغازية والضيق للحيوانات. في العمليات التي يكون فيها تاريخ التكاثر صعبا أو مستحيلا تحديده ، قد توفر الموجات فوق الصوتية آلية أكثر دقة لتقدير مرحلة الحمل من المقايسات الهرمونية ، حتى في غياب جداول الحمل المنشورة. وعلاوة على ذلك، يبدو أن التقييد البدني والكيميائي لفحص الموجات فوق الصوتية يسبب الحد الأدنى من الضيق ل muntjac صحية ويوفر فرصة مثالية لإجراء فحص بدني شامل وجمع عينات إضافية (الدم والبول، وما إلى ذلك)لتقييم الصحة العامة.
وقد تم تحديد تقدير العمر الحملي من خلال القياسات فائقة السونوغرافيا في العديد من الأنواع، بما في ذلكالماشية 1،الأغنام2،3،الماعز4،والخيول5،وقد وصفت في عدد محدود من أنواع عنق الرحم وكذلك8-19. في غياب تواريخ التكاثر الدقيقة أو جداول الحمل المعمول بها ، لا يمكن تقدير عمر الجنين من muntjac ريفز فقط تقريبا على أساس معايير نمو الجنين المبينة لأنواع أخرى. هدف محدد من العمل الموصوف هنا هو وضع مبادئ توجيهية أكثر رسمية لشيخوخة الجنين في هذا النوع. مع وجود بيانات معيارية كافية، ستشمل التطبيقات المستقبلية للتصوير فوق السونوغرافيا في هذه المستعمرة تحديد التشوهات في نمو الجنين في وجود متغيرات تجريبية مختلفة وتقييم قابلية الجنين للحياة. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن تحديد حساسية وخصوصية الموجات فوق الصوتية عبر الموجات فوق الصوتية ومقارنتها بالآليات الأخرى المستخدمة بشكل شائع للكشف عن الحمل في أنواع عنق الرحم.
وليس لدى صاحبي البلاغ ما يكشفان عنه.
ويود المؤلفان أن يشكرا جانيت هايز - كلوج وكيلي أندرسون على إدارة مستعمرة مونتجاك، والدكتور آلان يونغ على تعريفنا على مونتجاك والسيد كليف تيدفورد من شركة سيرفيد سوليوشنز على توفير بذور مونتجاك لهذا المشروع. تم دعم هذا العمل من قبل منحة المعاهد القومية للصحة R01AI093634.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Iowa | NADA 135-780 | |
Azaperone tartrate (0.035 mg/kg) | ZooPharm | ||
Medetomidine HCl (0.04 mg/kg) | ZooPharm | ||
Ultrasound contact gel | Medline, Mundelein, Illinois | MDS092005 | |
Atipamezole hydrochloride (Antisedan) (0.25 mg/kg) | Orion Corporation, Espoo, Finland | NADA 141-033 | |
V-trough (optional) | N/A | N/A | Animal may be supported in dorsal recumbency on a standard examination table or other surface without the use of a V-trough |
Electrical clippers or razor blades for hair removal | Oster, McMinnville, Tennessee | 78005-140 | |
Ultrasound system: Ibex Pro portable ultrasound | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | Ibex Pro | |
5-10 MHz transducer: CL3.8 5-2.5 MHz 60 mm curved linear array | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | 290420 | |
3 ml syringes | Covidien | 1.18E+09 | |
22 G needles | Covidien | 8.88E+09 |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved