Method Article
이 프로토콜은의 라이브 절개를 설명 Drosophila 애벌레.
axonal 수송의 메커니즘을 Elucidating하면 장거리 수송의 결함은 다른 신경 질환에 미치는 영향에 대해 결정에서 매우 중요하다고 표시했습니다. 이 필수 과정에서 결함의 연결 기능 및 개발에 해로운 영향을 미칠 수 있습니다. 우리는을 폭로하기 위해 설계되었습니다 해부 프로토콜을 개발했습니다
1. 시약의 준비
2. 해부를위한 준비
3. 애벌레 수집
4. 애벌레의 라이브 해부
5. 해부 애벌레의 라이브 영상
6. 대표 결과
그림 1 :. 애벌레 segmental 신경 내에 많은 axonal 트랙에 많은 axonal vesicles을 보여주는 대표 이미지 axonal 쌓일 대표, GFP의 모양을 확인합니다.
그림 2 : 애벌레 segmental 신경 내에 많은 axonal vesicles로 단일 axonal 트랙을 보여주는 대표 이미지.
Drosophila 애벌레 segmental 신경 사이 시냅스 소포 수송의 생체내 이미징에서 axonal 교통의 메커니즘을 연구를위한 강력한 도구입니다. 우리는 이전 반복의 확장은 소포 수송 3 역학에 미치는 영향 명료하게하다 확대 polyQ 반복을 표현 애벌레 신경 내에 전송 역학을 평가하기 위해이 프로토콜을 사용하고 있습니다. 이 프로토콜을 사용하는 것은 소포 운동의 속도는 kymograph에 비디오 스트림을 변환하여 결정하실 수 있습니다. 유전학 사용하여 GFP의 소포 운송은 GFP의 표현을 드라이브에 특정 GAL4 드라이버를 사용하여 단일 축삭 내에서 또는 여러 axons 이내 시각하실 수 있습니다. 또한 교통의 역학은 또한 특정 유전자에 대한 변이를 들고 유충에서 볼 수 있습니다. 또한 다른 GFP 변종 (CFP 또는 RFP)로 태그가이 vesicles 동시에 시각하실 수 있습니다.
SG는 버팔로의 뉴욕 주립 대학에서와 존 R. Oishei 재단 기금에 의해 지원됩니다.
MK는 UB의 CURCA하여 학생 연구 수상에 의해 지원되었다.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
1 Pair Micro Dissection Scissors | Fine Science Tools | Spring scissors – 6mm blade. 0.125 mm tip diameter | |
2 Pair Forceps | Fisher Scientific | Fisherbrand Dissecting Micro-Adson serrated tip forceps | |
Box of Dissection Pins | Fine Science Tools | Minutien Pins 0.1mm diameter |
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