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このプロトコルではのライブ解剖について説明ショウジョウバエ幼虫。
軸索輸送のメカニズムを解明することは、長距離輸送の欠陥は、異なる神経疾患をどのように影響するかを決定する上で非常に重要であることが示された。この本質的なプロセスの欠陥は、ニューロンの機能と発達に有害な影響を持つことができます。我々は、公開するように設計されている解剖のプロトコルを開発している
1。試薬の調製
2。解剖のための準備
3。幼虫のコレクション
4。幼虫のライブ解剖
5。解剖幼虫のライブイメージング
6。代表的な結果
図1:。幼虫の分節神経内に多くの軸索のトラックに多くの軸索小胞を示す代表的な画像は、軸索の蓄積を表す、GFPの塊を注意してください。
図2:幼虫の分節神経内の多くの軸索小胞を持つ単一の軸索のトラックを示す代表的な画像。
ショウジョウバエ幼虫の分節神経内シナプス小胞輸送のin vivoイメージングで軸索輸送のメカニズムを研究するための強力なツールです。我々は以前、反復配列の拡張は、小胞輸送3のダイナミクスにどのように影響するかを解明するために、拡張polyQリピートを発現している幼虫の神経内輸送のダイナミクスを評価するためにこのプロトコルを使用している。このプロトコルを使用して小胞の動きの速度はカイモグラフにビデオストリームを変換することによって決定することができます。遺伝学を用いて、GFPの小胞輸送は、GFPの発現を駆動するために特定のGAL4ドライバーを使用して、単一の軸索内、または複数の軸索内で可視化することができる。さらに、輸送のダイナミクスは、特定の遺伝子の変異を持つ幼虫に観察することができます。別のGFP変異体(CFPまたはRFP)でタグ付けさらに二小胞を同時に可視化することができる。
SGは、ニューヨーク州立大学バッファロー校からとJohn R. Oishei財団からの資金によってサポートされています。
MKはUBでCURCAによって学生研究賞によってサポートされていました。
Name | Company | Catalog Number | Comments |
1 Pair Micro Dissection Scissors | Fine Science Tools | Spring scissors – 6mm blade. 0.125 mm tip diameter | |
2 Pair Forceps | Fisher Scientific | Fisherbrand Dissecting Micro-Adson serrated tip forceps | |
Box of Dissection Pins | Fine Science Tools | Minutien Pins 0.1mm diameter |
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