Method Article
פרוטוקול זה דן חי דיסקציה של תסיסנית הזחלים לצורך הדמיה התנועה של שלפוחית GFP axonal מתויג על הפסים microtubule.
הבהרת המנגנונים של תחבורה axonal הוכיח להיות חשוב מאוד בקביעת כיצד פגמים הובלה למרחקים ארוכים להשפיע על מחלות נוירולוגיות שונות. פגמים בתהליך זה חיוני יכול להיות השפעות מזיקות על ההתפתחות העצבית ואת תפקוד. פיתחנו פרוטוקול לנתיחה אשר נועד לחשוף את
1. הכנה של ריאגנטים
2. הכנה Dissection
3. אוסף של הזחלים
4. דיסקציה חיים של זחלים
5. הדמיה חיה של הזחלים גזור
6. נציג תוצאות
איור 1:. תמונה מייצגת מראה שלפוחית axonal רבים על מסלולים רבים בתוך axonal עצב סגמנטלי הזחל הערה כתמים של ה-GFP, המייצג הצטברויות axonal.
איור 2: תמונת מראה נציג מסלול axonal יחיד עם שלפוחית axonal רבים בתוך עצב סגמנטלי הזחל.
בתחום ההדמיה vivo התחבורה שלפוחית סינפטית בתוך העצבים תסיסנית הזחל סגמנטלי הוא כלי רב עוצמה ללימוד מנגנוני בתחבורה axonal. השתמשנו בעבר בפרוטוקול זה על מנת להעריך את הדינמיקה בתוך התחבורה עצבים הזחל להביע מורחבת חוזר polyQ להבהיר כיצד התפשטות חוזרת להשפיע על הדינמיקה של שלפוחית התחבורה 3. שימוש בפרוטוקול זה מהירות התנועה שלפוחית ניתן לקבוע על ידי המרת הזרמים וידאו רשם גלים. שימוש בגנטיקה, תחבורה GFP שלפוחית ניתן דמיינו בתוך האקסון בודד או בתוך כמה אקסונים באמצעות מנהל התקן ספציפי GAL4 לנהוג ביטוי של GFP. בנוסף הדינמיקה התחבורה יכול גם להיות שנצפתה הזחלים נושאת מוטציות של גנים ספציפיים. יתר על כן two שלפוחית מתוייגים עם גרסאות ה-GFP שונים (CFP או RFP) ניתן דמיינו בו זמנית.
SG נתמכת על ידי קרנות מאוניברסיטת המדינה של ניו יורק ב באפלו ומ ג'ון ר Oishei קרן.
ח"כ נתמך על ידי פרס תלמיד מחקר על ידי CURCA ב UB.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
1 Pair Micro Dissection Scissors | Fine Science Tools | Spring scissors – 6mm blade. 0.125 mm tip diameter | |
2 Pair Forceps | Fisher Scientific | Fisherbrand Dissecting Micro-Adson serrated tip forceps | |
Box of Dissection Pins | Fine Science Tools | Minutien Pins 0.1mm diameter |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved